移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

摘要：【目的】在大鼠肝脏缺血再灌注模型中,观察移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣ）对大鼠肝脏缺血再灌注损伤（ＨＩＲＩ）的影响。【方法】全骨髓培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,流式细胞学鉴定,慢病毒载体（ＬＶ３－ｓｈＴＳＧ－６）感染下调ＴＳＧ－６基因的表达;６０只ＳＤ雌性大鼠７０％肝脏缺血再灌注损伤模型的建立,随机分４组,ＰＢＳ组、ＢＭＳＣ组,ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组、ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组;各组大鼠分别于恢复灌注后３、６、２４ｈ取血检测血清中ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量,恢复灌注后６ｈ取中叶肝脏组织,ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测ＴＳＧ－６蛋白表达,切片ＨＥ染色后光镜观察肝组织显微结构。【结果】体外分离培养的ＢＭＳＣ状态稳定,增殖能力强,表达ＣＤ２９及ＣＤ４４,不表达ＣＤ３４及ＣＤ４５,慢病毒感染下调ＢＭＳＣ的ＴＳＧ－６基因表达效率达７３．９９％;大鼠肝脏７０％缺血再灌注损伤模型稳定,各时间点ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均高于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）;ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６含量均低于ＰＢＳ组（Ｐ＜０．０５）;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝脏ＴＳＧ－６蛋白表达低于ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组（Ｐ＜０．０５）,ＰＢＳ组未见ＴＳＧ－６蛋白表达;ＴＳＧ－６－ｓｈＲＮＡ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组重,与ＰＢＳ组无明显区别,ＢＭＳＣ组和ｓｈＲＮＡ－ＮＣ－ＢＭＳＣ组的肝组织损伤较ＰＢＳ组明显减轻。【结论】移植ＢＭＳＣ能改善肝缺血再灌注损伤,移植沉默ＴＳＧ－６基因的骨髓间充质干细胞削弱了其对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。     

BDNF在挤压伤脊髓背角表达的时相变化（摘要）

目的 :了解ＢＤＮＦ在挤压伤脊髓背角的表达变化 .方法 :用本室建立的成年ＳＤ大鼠 (Ｔ13 -Ｌ1)脊髓挤压伤模型 ,分别于术后 2 4ｈ ,7ｈ ,2 1ｈ处死动物并设正常对照组 ,取Ｌ3 节段脊髓制作 2 0 μｍ厚冰冻连续切片 ,用抗ＢＤＮＦ抗体按ＡＢＣ法行免疫组织化学染色 .观察挤压伤位点尾侧端 (Ｌ3 )背角ＢＤＮＦ免疫反应物的分布 ,记录其免疫反应强度 ,计数其免疫阳性神经元和胶质细胞数 .结果 :ＢＤＮＦ的阳性反应物主要分布于正常脊髓背角的神经元和胶质细胞 .术后 2 4ｈ ,ＢＤＮＦ的免疫反应强度较正常者明显增强并维持至 7ｈ (Ｐ <0 0 5 ) ,术后 2 1ｈ又进一步增强并高过术后 2 4ｈ者水平 (Ｐ<0 0 1) .ＢＤＮＦ的免疫阳性细胞数则从术后 2 4ｈ至 2 1ｈ进行性增加 (Ｐ <0 0 1) .结论 :脊髓挤压伤后早期 ,ＢＤＮＦ在损伤位点尾侧端背角的表达明显增加 ,提示ＢＤＮＦ在脊髓挤压伤的早期反应中可能起作用     

大鼠脑水肿模型脑含水量与伊文思蓝含量的相关分析

向左颈内动脉内注射百日咳菌液，造成Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）大鼠脑水肿模型，同法注射生理盐水和正常手术后处死作为对照。分别测定注菌（盐水）后１ｈ、４ｈ、２４ｈ及正常组脑含水量和甲酰胺法伊文思蓝Ｅｖａｎｓｂｌｕｅ（ＥＢ）含量，以确认脑水肿的存在和血脑屏障（ＢＢＢ）的损伤以及两者间的相互关系。结果显示注射百日咳菌液能引起脑水肿，脑含水量与ＥＢ含量在注菌４ｈ组呈密切相关（ｒ：０．８６２５）（左），Ｐ＜０．００２；０．８３５７（右），Ｐ＜０．００５）；注菌２４ｈ组ＥＢ含量明显低于注菌１ｈ和４ｈ组（Ｐ＜０．００１）。提示本模型早中期ＢＢＢ损伤和脑水肿形成均已明显，后期脑水肿依然严重，而ＥＢ含量明显降低可能与ＢＢＢ损伤的修复或ＥＢ本身的排泄有关。     

大鼠DBI及其合并SBI后第Ⅲ组mGluRs激动剂L-AP4神经保护作用

目的　探讨Ⅲ组mGluRs激动剂L AP4对弥漫性脑损伤 (diffusebraininjury ,DBI)及其合并二次脑损伤 (secondarybraininsult,SBI)后损伤脑组织的神经保护作用 .方法　在单纯DBI及合并SBI后 ,脑室注射L AP(10 0 μmol·L- 1 ,10 μL)或生理盐水 (10 μL) ,观察大鼠行为、脑组织含水量及皮层损伤神经元数变化 .结果　L AP4对DBI后大鼠死亡率、皮层损伤神经元数量及脑组织含水量无明显影响 (P >0 0 5 ) ;但可降低合并SBI组大鼠死亡率、减轻合并SBI后的脑水肿程度 ,减少神经元损伤数量 (P <0 0 5 ) .结论　L AP4对DBI合并SBI后损伤脑组织有一定的保护作用 .     

血清甲状腺激素浓度与肾病大鼠GHIGF轴紊乱及生长障碍的关系

目的 :探讨营养不良、肾病本身和糖皮质激素作为各自独立因素对大鼠血清甲状激素浓度的影响 ,阐明甲状腺激素浓度的改变与肾病 (ＮＳ)大鼠生长激素 胰岛素样生长因子 (ＧＨ ＩＧＦ)轴紊乱及生长障碍的关系。方法 :2 4只周龄相同体重相近的雄性ＳＤ大鼠被随机分成正常、食物对照、阿霉素 (5ｍｇ·ｋｇ- 1 )肾病 (肾病组 )和地塞米松 (1 8ｍｇ- 1 ·ｄ- 1 )治疗的阿霉素肾病 (治疗组 )四组。血清Ｔ3 /Ｔ4,ＧＨ ,ＩＧＦ Ｉ浓度采用放射免疫法检测 ,胰岛素样生长因子结合蛋白 (ＩＧＦＢＰｓ)浓度采用Ｗｅｓｔｅｒｎｌｉｇａｎｄｂｌｏｔ法检测 ,肝脏生长激素受体 (ＧＨＲ),ＩＧＦ Ｉ/ＩＧＦＢＰｓｍＲＮＡ表达分别采用放射受体分析和ＲＴ ＰＣＲ法检测。结果 :①除食物对照组大鼠血清Ｔ4呈增高趋势外 ,血清甲状腺激素 (Ｔ3 和Ｔ4)浓度按正常、食物对照、肾病和治疗组顺序逐一减低 ;②相关与分组分析均显示血清甲状腺激素浓度大鼠肝脏ＧＨＲ ,ＩＧＦ Ｉ/ＩＧＦ ＢＰ 3ｍＲＮＡ表达和血清ＴＧＦ Ｉ/ＩＧＦＢＰ 3浓度呈正相关 ,与血清ＩＧＦＢＰ 2浓度呈负相关 ;③血清甲状腺激素浓度与大鼠鼻 尾长度和体重均呈正相关 (均Ｐ <0 . 0 1 )。结论 :甲状腺激素减低可能是肾病综合征血清Ｉ     

BN3C对缺血性心肌损伤的保护作用

观察ＢＮ３Ｃ对缺血性心肌损伤的影响。方法：大鼠皮下注射大剂量异丙肾上腺素造成缺血性,心肌损伤模型;结果：ＢＮ３Ｃ可明显降低血中ＣＰＫ,ＦＦＡ及心肌组织中的ＭＤＡ,升高ＧＳＨ－Ｐｘ活性,并使ＥＣＧ抬高的Ｊ点下降;结论ＢＮ３Ｃ对ＩＳＯ诱发的大鼠缺血性心有肌损伤有明显的保护作用。     

Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响(摘要)

为了解不同的Ⅰ抗孵育时间对免疫组织化学实验结果的影响 ,用成年ＳＤ大鼠脊髓Ｌ5节段制作冰冻切片 (2 0 μｍ)并分为两组 ,分别按程序 1,2用ＮＧＦ抗体 (1∶30 0 0 )作免疫组织化学ＡＢＣ法染色 .程序 1:0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;3%Ｈ2 Ｏ2 ,室温 ,30ｍｉｎ ;0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;0 4 %ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 ,15ｍｉｎ ;2 %羊血清 ,37℃ ,30ｍｉｎ ;Ｉ抗兔抗ＮＧＦ ,(1:30 0 0 ) ,37℃ ,2ｈ ;0 0 5ｍｏｌ/ＬＰＢＳ (ｐＨ 7 2 ) ,5ｍｉｎ× 3;Ⅱ抗羊抗兔ＩｇＧ (1:2 0 0 ) ,37℃ ,1ｈ…     

大剂量硫酸镁对颅脑创伤后神经功能影响的实验研究

目的　了解创伤性脑损伤（ｔｒａｕｍａｔｉｃ ｂｒａｉｎ ｉｎｊｕｒｙ,ＴＢＩ） 后大剂量硫酸镁对伤后神经功能的保护作用。方法　ＳＤ 大鼠１０ 只随机分为损伤组及治疗组（伤后３０ｍｉｎ／ＭｇＳＯ４ ,６００ｍｇ／ｋｇ 皮下注射） 。采用Ｆｅｅｎｅｙ 自由落体撞击法造成ＴＢＩ模型,伤后１６８ｈ 处死。分别对损伤组及治疗组伤后１ 周内进行了神经功能预后评价。结果　治疗组较损伤组神经功能明显改善（Ｐ＜ ０．０１） 。结论　大剂量ＭｇＳＯ４ 对大鼠ＴＢＩ后神经功能具有显著保护作用,具有临床应用价值。     

4聚ADP核糖聚合酶与缺氧缺血性脑损伤

缺氧缺血性脑损伤是多种神经系统疾病的病理学基础 ,如 :新生儿缺氧缺血性脑病 ,脑梗塞等。近年来 ,对其发病机制进行了多方面的探讨 ,4聚ＡＤＰ核糖聚合酶 (ｐｏｌｙＡＤＰｒｉｂｏｓｅｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ,ＰＡＲＰ)作为ＤＮＡ损伤的重要组成部分 ,在缺氧缺血性脑损伤的分子研究中得到广泛关注 ,现对有关ＰＡＲＰ的研究作一综述。1　ＰＡＲＰ概述1 1　ＰＡＲＰ分子结构及功能　ＰＡＲＰ由三个主要的功能片段组成 :46ｋＤａ的ＤＮＡ结合域 (ｔｈｅＤＮＡｂｉｎｄｉｎｇｄｏｍａｉｎ ,ＤＢＤ) ,存在于氨基末端 ;5 4ｋＤａ的ＮＡＤ(ｎｉｃ…     

地塞米松预处理对缺氧缺血性新生大鼠脑组织单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

缺氧缺血前地塞米松预处理对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤具有保护作用。而发育脑组织中单核细胞趋化蛋白 1(ＭＣＰ 1)是代表小胶质细胞应答脑缺氧缺血性损伤的一个功能性重要的分子信号[1] 。本实验通过研究地塞米松预处理对缺氧缺血性新生大鼠脑组织中ＭＣＰ 1蛋白表达的影响 ,探讨地塞米松预处理对缺氧缺血性脑损伤保护作用的机制。1　材料和方法1 1　材料48只 7日龄ＳＤ大鼠 ,性别不拘 ,体重 0 .0 10～ 0 .0 15ｋｇ,购自江苏省实验动物中心。一抗为羊抗大鼠ＭＣＰ 1多克隆抗体 (购自ＳａｎｔａＣｒｕｚＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ,Ｉｎｃ)…     

不同种类的百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿模型的比较

目的：了解不同种类的百日咳菌液致大鼠感染性脑水肿（感脑）模型的差异，以寻找一种新的感脑模型。方法：ＳＤ大鼠随机分为生理盐水对照组（ＮＳ），粗制百日咳菌液组（ＰＢＲ）和精制百日液组（ＰＢＰ）。分别使用粗制百日咳菌液和精制百日咳菌液制作感脑模型后，检测脑组织含水量、伊文思蓝（ＥＢ）含量和钠钾离子含量。结果：ＰＢＲ组和ＰＢＰ组大鼠脑水含量、钠离子含量和ＥＢ含量较ＮＳ组明显增高，钾离子含量明显降低（Ｐ〈０     

MK—801治疗大鼠脑损伤的脑水肿的实验研究

目的：观察Ｎ－甲基－Ｄ－天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体拮抗剂ＭＫ－８０１对脑损伤后脑水肿的影响,并探讨其作用机理。方法：４５只ＳＤ大鼠,随机分为对照组、损伤组和治疗组,每组１５只。根据Ｍａｒｍａｒｏｕ’ｓ法,将大鼠制成加速性弥漫性脑损伤模型。采用干湿重法、Ｉｔｏ’ｓ法分别检测脑组织含水量和脑组织Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋、Ｃａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋含量。结果：①损伤组脑组织含水量、Ｎａ＾＋、Ｃａ＾＋含量显著高于对照     

一氧化氮对大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛时脑血流 …

目的：探讨一氧化氮（ＮＯ）对大鼠实验性蛛网膜十腔出血（ＳＡＨ）后脑血管痉挛（ＣＶＳ）时脑血流（ＣＢＦ）的作用。方法：将２４只大鼠随机分成４组（ｎ＝６）：Ａ组假手术＋盐水;Ｂ组假手术＋ＮＯＣ１２;Ｃ组ＳＡＨ＋盐水;Ｄ组ＳＡＨ＋ＮＯＣ１２。模型制成４８ｈ,通过Ｌａｓｅｒ－Ｄｏｐｐｌｅｒ血流仪观察ＮＯＣ１２（ＮＯ供体）持续静脉注射１ｈ内ＣＢＦ的变化。结果：Ａ组ＣＢＦ无变化,Ｂ、Ｄ组ＣＢＦ明显增加,且Ｂ级     

实验性头颅侧向旋转脑弥漫轴索损伤神经丝蛋白亚单位含？…

目的：探讨实验性头颅侧向旋转脑弥漫轴索损伤（ＤＡＩ）中神经丝（ＮＦ）蛋白亚单位含量变化。方法：ＳＤ大鼠２４只，等分类一个损伤组（伤后２，１２，２４ｈ）及一个对照组，对损伤组制作头颅侧向旋转脑ＤＡＩ模型，用Ｗｅｓｔａｅｎ迷技术才免疫活性定量测定，以检测全部损伤及对照组大鼠脑干组织ＮＦ蛋白亚单位ＮＦ６８的含量结果：脑干ＮＦ６８含量在伤后２ｈ倾向下降，１２ｈ显著减少，继续降低至２４ｈ；其降解产物ＮＦ５６     

高血压与高胰岛素血症的关系观察

本文对２４例非胰岛依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）合并高血压，２例ＮＩＤＤＭ未合并高血压患者，２６例高血夺病（ＥＨ）患者及２３例正常人进行空腹血糖（ＦＢＳ），血浆胰岛素（ＩＮＳ）及Ｃ肽（ＣＰ）水平测定，并推算胰岛素敏感指数（ＩＳＩ），结果显示，ＮＩＤＤＭ合并高血压组及ＥＨ组的ＩＮＳ和ＣＰ无题明显高于正常组及ＮＩＤＤＭ未合并高血压组，ＮＩＤＤＭ合并高血压组及ＥＨ组的ＩＳＩ均低于正常组，提示无论在ＥＨ，还是     

2型糖尿病患者血清铜兰蛋白的检测意义

目前 ,研究较多的Ｗｉｌｓｏｎ病、衰老机制和心血管内皮损伤等均与铜兰蛋白(Ｃｐ)有关。最近 ,又注意到Ｃｐ与糖尿病(ＤＭ)的关系及用尿中Ｃｐ水平早期诊疗糖尿病肾病 (ＤＮ)的问题。我们测定了 5 3例ＤＭ患者及 2 0例正常健康人血清表 1　 3组血清Ｃｐ ,ＢＵＮ ,Ｓｃｒ,及 β2 -ＭＧ水平 ｘ±ｓ组别例数Ｃｐ(ｍｇ/Ｌ)ＢＵＮ(ｍｍｏｌ/Ｌ)Ｓｃｒ(μｍｏｌ/Ｌ) β2 -ＭＧ(μｇ/Ｌ)对照组 2 0 2 80± 53 5 .3± 1 .896± 2 3 1 .9± 0 .8单组ＤＭ组 30 2 90± 695 .2± 2 .1 1 0 6± 31　 2 .5± 1 .3全并ＤＮ组 2 3 30 5± 71 9.6± 2 .8 …     

大鼠小肠缺血／再灌注休克中一氧化氮,内皮素检测及意义

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对大鼠小肠缺血／再灌注（Ｉ／Ｒ）的作用及内皮素的改变。方法：复制内脏血管阻塞（ＳＡＯ）性休克模型,用左旋精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）及硝基精氨酸甲脂（Ｌ－ＮＡＭＥ）处理动物模型后分别测定血浆中ＥＴｓ、ＭＤＡ、组织蛋白酶Ｄ（ＣＤ）、ＮＯ－２／ＮＯ－３含量。结果：Ｌ－Ａｒｇ减缓了大鼠Ｉ／Ｒ血压下降（Ｐ＜０．０１）,降低了血浆ＭＰＯ、ＬＤＨ、ＣＤ、ＭＤＡ的含量（Ｐ＜０．０１）及肠组织中伊文思蓝（ＥＢ）的含量（Ｐ＜０．０５）;Ｌ－ＮＡＭＥ与Ｌ－Ａｒｇ相反。ＭＰＯ与ＥＢ正相关（Ｐ＜０．０１）,ＮＯ－２／ＮＯ－３与ＥＴｓ负相关（Ｐ＜０．０５）。结论：ＮＯ对小肠Ｉ／Ｒ损伤有保护作用,ＥＴｓ参与ＳＡＯ休克过程。     

CLINICAL SIGNIFICANCE OF COMPLETE LEFT BUNDLE BRANCH BLOCK IN DILATED CARDIOMYOPATHY

ＣＬＩＮＩＣＡＬＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＣＯＭＰＬＥＴＥＬＥＦＴＢＵＮＤＬＥ　ＢＲＡＮＣＨＢＬＯＣＫＩＮＤＩＬＡＴＥＤＣＡＲＤＩＯＭＹＯＰＡＴＨＹＨｕａｎｇＸｉｕｈｕｉ（黄秀惠），ＳｈｅｎＷｅｉｆｅｎｇ（沈卫峰）ａｎｄＧｏｎｇＬａｎｓｈｃｎｇ（龚...     

大鼠弥漫性轴突损伤的超微结构研究

目前,弥漫性轴突损伤(ＤＡＩ)被认为是一种独立的脑损伤类型。电镜下可以分辨轴突损伤的不同阶段,但详细的电镜资料目前尚不全面。为此,我们观察了超微结构水平弥漫性轴突损伤的形态变化,以确定损伤程度和阶段,并探讨其机制,为临床诊治提供参考。一、材料与方法成年ＳＤ大鼠18只,体重250～350ｇ。分为损伤后1、3、6、24、72ｈ组和正常对照组(每组3只)。用一种旋转损伤装置诱发大鼠ＤＡＩ。将大鼠头沿冠状面逆时针旋转90度,时间5ｍｓ,角速度444Ｇｙ/ｓ,角加速度145×105Ｇｙ/ｓ。对照组不实施旋转。观察大鼠伤后的临床反应。损伤组在上述5个…     

胰岛素样生长因子及其结合蛋白水平在儿童肾病综合征中的变化

目的：了解胰岛素样生长因子（ＩＧＦⅠ）及其结合蛋白（ＩＧＦＢＰｓ）水平在儿童肾病综合征（ＮＳ）中的变化。方法：用免疫放射法和放射免疫法对２０名ＮＳ患儿,即ＮＳ活动期组（ＮＳＡ组,ｎ＝１１）和ＮＳ缓解期组（ＲＥ组,ｎ＝９）进行了血清ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ水平测定;并以同年龄组正常儿童（ＮＣ组,ｎ＝１０）作对照。结果：与ＮＣ组比较,ＮＳＡ组血清ＩＧＦⅠ、ＩＧＦＢＰ３明显下降（Ｐ＜００１）,ＩＧＦＢＰ１和ＩＧＦＢＰ２均明显升高（Ｐ＜００１）;ＲＥ组的血清ＩＧＦⅠ及ＩＧＦＢＰ１、ＩＧＦＢＰ２和ＩＧＦＢＰ３均可恢复正常;ＮＳＡ组血清ＩＧＦＢＰ３与白蛋白存在明显相关关系（ｒ＝０７６,Ｐ＜００１）。结论：ＮＳ活动期存在着ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ的异常改变,但缓解期可完全恢复正常;ＩＧＦⅠ和ＩＧＦＢＰｓ的异常改变可能与ＮＳ患儿生长障碍有关