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1.
TthDNA聚合酶在丙型肝炎病毒RNA检测中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
用TthDNA聚合酶行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增丙型肝炎病毒(HVC)5′端非编码序列,对262例肝炎患者血清进行HCVRNA测定,结果HCVRNA阳性者53例,阳性率20.2%,凡阳性者用酶联免疫吸附法测其抗HCVIgG,其中30例测到抗HCV,阳性重叠率56%(30/53);HCV RNA阳性中的15例同时用成髓细胞瘤病毒酶行传统逆转录-套式聚合酶链反应检测对照,14例阳性,符合率 相似文献
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巨细胞病毒即刻早期基因mRNA检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
目的建立快速简便的逆转录聚合酶链反应(RTPCR)方法检测人巨细胞病毒(HCMV)即刻早期(IE)基因mRNA。方法设计合成跨越HCMVIE基因内含子区的一对引物,分别用RTPCR和PCR技术扩增HCMVmRNA和DNA,用Southern杂交鉴定阳性产物。结果HCMVIE基因mRNA表达在感染后6小时即可出现,并持续到感染后至少96小时,RTPCR检测的最低敏感性为100fg总RNA,其他病毒和细胞RNA不能被扩增。结论RTPCR技术检测HCMVmRNA敏感、特异,有望应用于临床作为HCMV活动性感染的早期诊断方法 相似文献
3.
一步反转录PCR法从组织及细胞中扩增HEK5 总被引:2,自引:0,他引:2
聚合酶链反应(PCR)技术诞生后不久即用于RNA的扩增[1]。这种方法需要首先将RNA逆转录(RT)为cDNA链后再进行常规PCR扩增,程序较繁琐,且需逆转录酶及RNA酶抑制剂等成本较高试剂。有研究表明Taq聚合酶及TthDNA聚合酶有逆转录功能,且... 相似文献
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采用逆转录套式聚合酶链反应(RT-nested PCR)和ELISA方法检测血清HCV RNA、抗-HCV,采用鼠单克隆抗体PAP方法检测肝组织内HCV-NS3抗原。结果发现被检测的45例丙型肝炎患者随着病情加重和病程延长,血清抗-HCV和HCV RNA及肝组织HCV-NS3抗原阳性率逐步增高;某些患者抗-HCV和HCV RNA阳性结果不一致;血清HCV RNA阳性肝组织HCV-NS3阳性率明显同 相似文献
6.
HCV基因型与HCV感染者ALT的关系 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨丙型肝炎病毒(HCV)与HCV感染者血清丙氨酸转氨酶(ALT)的关系,本文应用HCVNS5区逆转录-套式聚合酶链反应(RT-PCR)对79例抗-HCV阳性者进行HCVRNA检测,同时用限制性内功酶法对HCV进行基因分型。检出HCVRNA阳性者69例,其中HCVⅡ型30例,Ⅲ型27例,Ⅱ/Ⅲ混合型12例,HCV不同的基因型在ALT正常组和异常组中的分布有显著性差异(P<0.01),Ⅱ型和Ⅱ/Ⅲ混合型主要分布于ALT异常组中,Ⅲ型主要分布于ALT正常组中。提示Ⅱ型和Ⅱ/Ⅲ混合型很可能是导致ALT异常的主要型别,应引起足够重视。 相似文献
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应用聚合酶链反应(PCR)检测了37例非肝炎相关再生障碍性贫血(NHAA)和18例肝炎相关再生障碍性贫血(AHH)血清中的乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)、丙型肝炎病毒RNA(HCV RNA)。结果显示:NHAA的HBV DNA检出率为13.5%(5/37),HAA为22.2%(4/18),两比较P>0.05。NHAA的HCV RNA检出率为2.7%(1/37),HAA为38.9%(7/18 相似文献
9.
逆转录PCR检测急性白血病患者血清中丙型肝炎病毒的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用逆转录多聚酶链反应和酶联免疫吸附试验方法检测18例经多次输血并有肝功能改变的急性白血病患者血清中丙型肝炎毒基因和抗丙型肝炎病毒抗体。HCV RNA阳性率77.8;抗-HCV阳性66.1%;单项或两项阳性者16例,联合判定HCV感染率88.9%。RT PCR检出HCV RNA时间早于抗-HCV阳转时间,而且敏感性高于后者,是一种早期,灵敏及特异的HCV感染诊断方法。 相似文献
10.
庚型肝炎病毒不同基因区的聚合酶链反应扩增 总被引:1,自引:0,他引:1
分别在庚型肝炎病毒(HGV)基因5′端非编码区(5′-UTR)、非结构(NS)3及区非结构(NS)5区设计套式引物,建立逆转录套式聚合酶链反应(RT-nested PCR)检测血清HGV RNA。在299份不同血汪标本中HGV RNA阳性者41例,基于5′-UTR、NS3区及NS5区引物PCR的阳性率分别为87.8%、80.5%和97.6%。本研究结果表明根据中国株HGV基因NS5区部分序列设计引 相似文献