CCK-8法与Alamar blue法对RKO细胞株增殖活力测试条件的对比分析

目的 以RKO细胞株为增殖活力测试的研究对象,比较CCK-8法与Alamar blue法在检测中波长、孵育时间、细胞密度等方面的差异性.方法 取体外培养对数生长期的RKO细胞株,分别比较两者在不同检测波长(380、430、480、530、580、630 nm)、不同孵育时间(1、2、3、4、5、6 h)、不同细胞密度(2×104、5×103、1.25×103 CUF·mL-1)下所测的光密度值(OD值),并比较两者在相同条件下同一标本重复检测时的平衡性.结果 ALamar blue法在不同细胞密度中的最佳检测波长皆为580 nm,而CCK-8法的最佳检测波长会随着细胞密度的变化而有所改变;1～6 h时,CCK-8法适合的孵育时间在1h以后Alamar blue为2h以后,且CCK-8法的灵敏度、平衡性都强于Alamar blue法.结论 CCK-8法在细胞增殖活力检测中的灵敏性、平衡性、快捷性等都略强于ALamar blue法.     

用四噻唑蓝比色法测定氯化镉的细胞毒性

用四噻唑蓝比色法测定氯化镉的细胞毒性吕中明１张伟亻告２杨永年３宋玲３１．江苏省卫生防疫站毒理研究室（南京２１０００９）２．江苏省实验动物中心细胞室３．南京医科大学卫生毒理研究室１９８３年由Ｍｏｓｍａｎｎ提出的四噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法，是根据活细胞的线...     

MTT法和XTT-PMS法测定细胞毒性的探讨

目的:探讨细胞毒性的评价方法.方法:分别采用MTT,XTT-PMS比色法和传统的血球计数法比较医用高分子材料的浸提液对小鼠成纤维细胞(L-929)相对增殖率的影响.结果:采用3种测定方法测定此类医用高分子材料,均呈现出高的细胞相对增殖率,其细胞毒性为1级,即无细胞毒性.结论:在常规细胞毒性测试法的基础上采用MTT和XTT-PMS比色分析法,能更快捷准确地测定细胞的增殖反应,XTT-PMS与MTT相比较,其灵敏度更高,操作更简便.     

盐酸多巴酚丁胺注射液细胞毒性研究

目的：比较不同来源盐酸多巴酚丁胺注射液体外细胞毒性的差别,为遴选优质药品、保障用药安全提供科学依据.方法：将不同来源国产盐酸多巴酚丁胺注射液原液以及稀释液,与L929细胞接触培养,通过倒置相差显微镜观察其形态,采用MTT法量化细胞毒性,计算相对增值率和IC50值,进行细胞毒性评价.并将国产盐酸多巴酚丁胺注射液与进口制剂进行比较.结果：8个厂家生产的盐酸多巴酚丁胺注射液原液及进口产品的细胞毒性分级均为4级.不同企业生产的盐酸多巴酚丁胺注射液的IC50值差异较大.盐酸多巴酚丁胺注射液C和F的IC50值较小,说明这两个企业产品的细胞毒性较其他样品大.进口盐酸多巴酚丁胺注射液的IC50值为99.9 mg·L-1,较其他样品高,说明其细胞毒性较其他样品低.进口盐酸多巴酚丁胺注射液中仅添加亚硫酸氢钠一种辅料,国产盐酸多巴酚丁胺注射液中添加的辅料主要为依地酸二钠、亚硫酸氢钠、盐酸半胱氨酸等.按各辅料在国产盐酸多巴酚丁酸注射液中的浓度测其细胞毒性,依地酸二钠、盐酸半胱氨酸和亚硫酸氢钠的细胞毒性分级均为3级.将依地酸二钠的浓度稀释为0.03 mg·ml-时,其细胞毒性分级为1级,无细胞毒性.将盐酸半胱氨酸稀释到0.11 mg·ml-1时,其细胞毒性分级为1级,基本无细胞毒性.结论：不同厂家生产的盐酸多巴酚丁胺注射液由于生产条件不同、处方不同等原因,这些产品的细胞毒性存在较大的差别.与进口制剂比较,国产制剂中添加的辅料浓度较大,可适当降低其浓度,以减少药物制剂的细胞毒性,从而提高药品的安全性.     

常用抗癌药物对肺癌的体外敏感性研究

目的 :研究常用抗癌药物对肺癌的体外敏感性。方法 :采用四氮甲唑蓝 (MTT)法检测45例人肺癌新鲜标本对15种临床常用化疗药物的敏感性。结果 :肺癌对卡铂、威猛、吡柔比星、顺铂、博来霉素、甲氨蝶呤、羟基喜树碱较敏感 ;不同个体对同一药物的敏感性不同。结论 :化疗药物的敏感性检测对临床选择化疗药物具有重要的参考价值 ,MTT法为临床肿瘤化疗的药物敏感性检测提供了简便、快速的实验方法。     

四甲基氮唑蓝比色法预测胃癌细胞药物敏感性的探讨

目的通过对比胃癌患者单药与联合用药体外敏感性,为临床筛选对胃癌相对敏感的化疗药物提供参考依据。方法采用临床常用的19种化疗方案对30例胃癌的新鲜标本进行四甲基氮唑蓝比色法体外敏感性测定。结果不同个体对化疗药物的敏感性差异较大,联合用药比单个药物的平均抑制率高。结论胃癌化疗联合用药敏感性大。四甲基氮唑蓝比色法是一种简便而快速的肿瘤体外药物敏感实验方法,可为胃癌临床个体化化疗方案的选择提供参考。     

利用原代培养细胞进行药物短期毒性筛选方法的建立

新药开发注重 2个方面 :药效和毒性。一般的策略是先利用高通量筛选的手段对侯选药物进行药效筛选 ,再对有一定药效的侯选药物进行毒性测定。而利用体外培养的细胞进行初步的毒性筛选是目前发展趋势。为此 ,我们建立了利用原代培养的大鼠肝肾细胞进行药物毒性筛选的方法 ,对 5种参考药物用噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率。1　材料与方法1 1　动物及仪器试剂　雄性SD大鼠 ,体重 15 0～ 2 5 0g ,由大连医科大学实验动物中心提供。SK6 0 1型酶标仪系日本Seikagaku公司产品 ;胶原铺被的 10cm平皿和胶原铺被的 96孔培养板购自日本IWAKI公司 ;…     

细胞毒性死亡机制

细胞毒性死亡机制彭双清军事医学科学院毒物药物研究所（北京１００８５０）各种毒物可通过不同的作用机制引起细胞损伤，其终极结果是靶细胞的死亡。引起细胞死亡的因素很多，但不外乎是内在因素和外在因素。周围环境因素可以是物理的、化学的，还可以是生物的。化学毒物...     

甲氨基阿维菌素的毒性试验

甲氨基阿维菌素是阿维菌素经过化学改造后得到的产物,对鳞翅目害虫的经效比阿维菌素显著提高且毒性较低,是一种新型的生物农药,可制成杀虫剂广泛用于田间和农业生产。由北京北农天风农药有限公司提供。我们对该药进行了急性经口、经皮毒性试验、皮肤及眼粘膜刺激试验,致突变试验、亚慢性经口毒试验及致畸试验。     

煤尘细胞毒性的研究进展

流行病学调查资料表明,不同煤矿,即使煤尘浓度相近,其煤工尘肺发生率可明显不同。因此,近10年来,世界各国日渐开始采用细胞培养技术研究煤尘的体外细胞毒性,以期揭示煤工尘肺的发病规律。 煤尘细胞毒性与其化学成分的关系 1.与煤尘的含碳量、灰分和石英含量的关系 体外试验表明,煤尘的细胞毒性显著低于石英,但比惰性粉尘二氧化钦为高,其毒性与水泥、滑石、高岭土和碳尘相近。     

贫铀的细胞毒性

由于贫铀在军事上的应用,并在战争中的广泛使用,贫铀的毒性越来越受到人们的重视。业已证实,进入体内的贫铀,其化学毒性的短期影响是肾损伤,而贫铀的内照射和化学毒性的长期健康危害是致癌。本文从贫铀诱发细胞的DNA损伤,细胞超微结构改变,细胞氧化损伤,以及信号转导等方面描述贫铀的细胞毒性。     

Z24的毒性研究

Z2 4是我所正在开发的一种抗肿瘤新药 ,是基于BCL 2蛋白三维空间结构 ,通过计算机辅助设计的癌相关蛋白拮抗剂 ,具有良好的抗肿瘤活性 ,还具有较好的药代动力学特征 ,有可能成为一种具有全新机制和良好市场前景的新型抗癌药[1] 。Z2 4的毒性毒理学资料在国内外尚未见报道。现采用Ames试验、噻唑蓝(MTT)比色试验以及小鼠急性毒性试验对Z2 4的毒性特点进行了初步研究。1　材料与方法1 1　受试物　 1 (1′ 哌啶亚甲基 ) 3 (2′ 吡咯甲烯基 ) 2 吲哚酮甲磺酸盐 ,代号 :Z2 4。由军事医学科学院毒物药物研究所合成 ,专利号 :CN136 5 972…     

宁国透闪石的细胞毒性研究

透闪石是属门石类的一种石棉,常作为混杂物存在于温石棉中。单独的透闪石矿体在全世界均为稀有,因而对其危害研究报道较少。宁国石棉矿是国内唯一专门开采透闪石石棉的矿山,其产品全部在国内加工、销售、使用,有相当人群接触透闪石粉尘。 据报道,石棉可引起不同种属动物体外的肺和腹腔巨噬细胞释放乳酸脱氨酶(LDH)、酸性磷酸酶     

噻唑蓝比色法判断铬细胞毒性及增殖毒性

噻唑蓝比色法判断铬细胞毒性及增殖毒性贾光刘世杰赵修南１周树森（北京医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室，北京１０００８３；１军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）细胞的癌变或恶性变的过程中，一个最主要的特点就是细胞生产，增殖失控．Ｃｒ（Ⅵ）及...     

纳米四氧化三铁、碳纳米管对A549细胞的毒性研究

随着纳米科技的迅速发展,各种形式的纳米材料已经通过各种不同的途径进入人们的生活,由于这些材料具有独特的理化性质,对人体健康及环境将带来潜在的影响,目前已经引起全世界的广泛关注.     

高通量细胞毒性筛选的研究进展

在药物发现过程中有必要进行毒性试验，随着被发现的先导化合物数量增多，面临着把毒性试验放在药物发现哪一阶段的问题，为节省时间和经费，毒性试验应尽早进行，但现有经典的毒性检测方法不适用于高通量筛选的需要，本文介绍现有毒性检测方法的缺陷以及高通量毒性筛选的技术进展。     

石棉纤维间接作用的细胞毒性及遗传毒性

目的 探讨石棉纤维与培养的人肺泡上皮细胞间接作用（纤维不与细胞直接接触）后的细胞毒性和遗传毒性，以及活性氧在其中的作用。方法 用固体作用物与培养细胞隔开的TRANSWELL培养板，观察由国际抗癌团体（UICC）提供标准温石棉对人肺泡上皮（A549）细胞间接作用及直接作用不同时间后的细胞毒性和遗传毒性。同时，在染毒过程中分别加入活性氧清除剂[过氧化氢酶（CAT）细胞间接作用及直接作用不同时间后的细胞毒性和遗传毒性。同时，在染毒过程中分别加入活性氧清除剂[过氧化氢酶（CAT），超氧化物歧化酶（SOD），甘露醇（Mannitol)]，以观察活性氧在石棉间接作用引起的细胞毒性及遗传毒性中的影响。结果 UICC温石棉纤维直接与A549细胞接触，作用24h,在40μg/ml时可引起细胞存活率明显下降，而石棉纤维间接与细胞作用24h，则在80μg/ml时才引起细胞存活率的明显下降，在石棉直接作用时，3种抗氧化剂均可部分抑制石棉导致的细胞存活率下降，但均未抑制到对照组水平；而在石棉间接作用时，3种抗氧化剂均可完全抑制石棉纤维导致的细胞存活率下降，UICC温石棉纤维直接与A549细胞接触，作用24h，在10μg/ml时即可明显引起细胞DNA链断裂，而石棉纤维间接与细胞作用24h，即使在80μg/ml时也未能引起细胞DNA链断裂程度的明显增加。而当较高浓度的温石棉与A549细胞间接作用3h，均可引起细胞DNA链断裂的明显增加，3种抗氧化剂均可明显抑制石棉纤维导致的细胞DNA链断裂，其中，甘露醇和SOD可完全抑制石棉的这种损伤作用。结论 石棉纤维在不与细胞直接接触时也可通过其表面产生的活性氧造成靶细胞损伤和遗传物质的损伤，该研究结果可为对石棉采取表面改性以降低石棉纤维的毒性提供理论依据。     

无细胞百日咳疫苗特异性毒性检测方法现状及展望

 百日咳毒素是百日咳杆菌重要的保护性抗原,经化学方法脱毒成为百日咳类毒素后制成的无细胞百日咳疫苗（acellular pertussis vaccine,APV）具有残余毒性和毒性逆转的可能性,所以建立特异性毒性检测方法对于保证APV的安全性是十分必要的。此文就国内外APV特异性毒性检测方法的现状做一综述,并结合近几年国外研究的毒性检测新方法进行展望。     

用人角质细胞评价4种化妆品的细胞毒性

传统的化妆品安全性评价是在试验动物上进行的,但近年来随动物保护运动的加强,动物福利的理念逐渐被引入到国际贸易领域中,化妆品的毒性试验或过敏性试验逐渐向非动物方面转移[1].