重组溶瘤单纯疱疹病毒oHSV2 治疗结直肠癌的实验研究

  目的  评估重组溶瘤单纯疱疹病毒oHSV2在CT26结肠癌荷瘤小鼠中的抗肿瘤效果,初步探讨其治疗机制。  方法  构建CT26细胞荷瘤小鼠肿瘤模型。1）小鼠瘤内注射oHSV2,ELISA法测定血清中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macro-phage colony-stimulating factor,GM-CSF）浓度;2）荷瘤小鼠分为oHSV2组、5-氟尿嘧啶（5-FU）组（阳性对照组）、磷酸盐缓冲液（PBS）组（阴性对照组）。给药后,记录小鼠体质量、肿瘤体积、生存期及生活状态等变化,评估病毒抗肿瘤效果;3）流式细胞术定量检测肿瘤引流淋巴结（tumor-draining lymphnode,TDLN）内树突状细胞（dendritic cell,DC）及瘤体内CD4+T与CD8+T的比例。  结果  1）瘤内注射oHSV2后,血清中的GM-CSF浓度不断升高。首次给药后第8 天出现高峰（3150±327.1）pg/mL,后缓慢下降;2）相比PBS组,oHSV2和5-FU组均表现出显著的抗肿瘤效果,小鼠生存期显著延长（50 d vs. 36 d,P＜0.01;51 d vs. 36 d,P＜0.01）,但oHSV2治疗未引起小鼠体质量下降。治疗起始第28天,5-FU组平均体质量较PBS组有显著性差异（16.61 g vs. 22.07 g,P＜0.01）,oHSV2组与PBS组差异无统计学意义（P>0.05）,且小鼠病毒注射区皮肤无坏死、溃疡;3）流式分析结果显示相比PBS组,oHSV2治疗组的DC（6.49% vs. 3.73%,P＜0.01）,CD4+T（15% vs. 8.57%,P＜0.01）与CD8+T（8.19% vs. 5.15%,P＜0.01）比例升高。而5-FU组各细胞比例较PBS组明显降低（P＜0.05）。  结论  瘤内注射oHSV2有效抑制结直肠癌细胞生长,病毒治疗与化疗药物相比不伴有明显的毒副反应。病毒在荷瘤小鼠体内复制产生具有生物活性的GM-CSF,可增强抗肿瘤免疫。      

CpG ODN对卡铂治疗Lewis肺癌小鼠移植瘤的增敏效应

目的：探讨含胞嘧啶-磷酸盐-鸟嘌呤基序的寡脱氧核苷酸（cytosine-phosphate-guanine oligodeoxynucleotide,CpGODN）对卡铂治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠的化疗增敏作用。方法：在小鼠右前肢腋窝接种Lewis肺癌细胞,制备荷瘤小鼠模型,将32只荷瘤小鼠随机分为4组：对照组,不做任何处理;卡铂治疗组,第1~5天每天腹腔注射卡铂注射液0.32mg;CpG组,第1~5天每次腹腔注射CpGODN（1826）0.05mg;CpG＋卡铂组,每次卡铂注射前6h腹腔注射CpGODN（1826）。观察各组移植瘤生长速度和重量,HE染色法观察移植瘤组织病理变化,TUNEL法检测细胞凋亡。结果：成功建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型。各治疗组小鼠肿瘤体积都较对照组明显减小（P〈0.01）,其中CpG＋卡铂组移植瘤体积最小;卡铂组、CpG组、CpG＋卡铂组的抑瘤率分别为23.35%、21.47%、48.43%;HE染色法观察到各治疗组移植瘤的坏死均较对照组明显,其中CpG＋卡铂组最明显。TUNEL法检测对照组瘤组织细胞凋亡率为2.75%±0.89%,卡铂组为4.87%±1.13%,CpG组为7.63%±1.41%,CpG＋卡铂组为32.63%±4.66%,各治疗组瘤细胞凋亡率均明显高于对照组（P均〈0.01）,其中CpG＋卡铂组显著高于单独卡铂组和单独CpG组（P均〈0.01）。结论：CpGODN（1826）能明显提高Lewis肺癌移植瘤对卡铂治疗的化疗敏感性,促进肿瘤细胞凋亡。     

丹参注射液对lewis肺癌小鼠移植瘤生长转移及VEGF表达的影响

目的：观察不同浓度丹参注射液对lewis肺癌小鼠移植瘤生长转移及肿瘤血管内皮细胞生长因子表达的影响。方法：将荷lewis肺癌的C57BL小鼠,分别腹腔注射不同浓度的丹参注射液[（5,10,20,40,80）g/kg]、环磷酰胺（CTX）、生理盐水,检测小鼠的肺部转移灶数和移植瘤的体积、重量及血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果：丹参各剂量组对荷瘤小鼠瘤重均有抑制作用,在实验范围内无明显的剂量依赖关系,与生理盐水组比较,丹参各剂量组差异无显著性（P〉0.05）。CTX组对荷瘤小鼠瘤重抑制较明显,与生理盐水组比较,差异有显著性（P〈0.05）。丹参各剂量组对荷瘤小鼠肿瘤体积有不同程度的抑制,但无明显的剂量依赖关系,与生理盐水组比较,丹参各组差异无显著性（P〉0.05）。CTX组对荷瘤小鼠肿瘤体积抑制较明显,与生理盐水组比较,差异有显著性（P〈0.01）。丹参各剂量组的肺转移灶数目均低于生理盐水组,但差异无显著性（P〉0.05）,CTX组肺转移灶数目低于生理盐水组,差异有显著性（P〈0.01）。丹参各剂量组对荷瘤小鼠移植瘤VEGF的表达与生理盐水组比较,差异无显著性（P〉0.05）,CTX组移植瘤VEGF的表达与生理盐水组比较,差异无显著性（P〉0.05）。丹参各剂量组对荷瘤小鼠脾、胸腺指数的影响与生理盐水组比较,差异无显著性（P〉0.05）,CTX组脾、胸腺指数与生理盐水组比较,差异无显著性（P〉0.05）。结论：不同浓度的丹参注射液对荷瘤小鼠的瘤重、瘤体积及肺部转移灶无明显的抑制或促进作用,对肿瘤转移相关因子VEGF的表达无影响。     

bcl-2、IL-6、IL-6R反义寡脱氧核苷酸对小细胞肺癌细胞作用的比较

目的: 探讨一种新型抗ATPase F1α抗体,人血管抑制和肿瘤转移相关蛋白（human angiostatin interacting and tumor metastasis involving protein,HAITMIP）抗体MAb3D5AB1（简称GX）对A549肺腺癌小鼠移植瘤的抑制作用。 方法：在C57BL/6小鼠右前腋窝接种A549肺腺癌细胞,制备小鼠荷瘤模型,32只荷瘤小鼠随机分为对照组（无任何处理）及A、B、C治疗组（分别腹腔注射125、250、500 ng/ml GX）。观察各组移植瘤小鼠肿瘤体积、生长延迟时间（tumor growth delay, TGD）及小鼠生存期。免疫组织化学法检测瘤组织内微血管密度。TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡。结果：成功建立了荷A549肺癌小鼠模型,治疗组小鼠移植瘤的体积明显减小（P<0.05）、TGD随GX剂量增加而显著延长（P<0.01）、瘤组织内微血管密度明显减少（P<0.05）,TUNEL法检测发现各治疗组瘤细胞凋亡率均显著高于对照组（均P<0.01）。结论：GX可以抑制肿瘤新生血管生成,促进肿瘤细胞调亡,使A549肺腺癌小鼠移植瘤生长减慢,并延长小鼠生存期。     

声敏剂Sonoflora介导的声动力治疗小鼠S180肉瘤的实验研究

目的探讨声敏剂Sonoflora在S180肉瘤荷瘤小鼠肿瘤组织中的聚集情况及联合超声介导的声动力疗法（SDT）对S180肉瘤的杀伤作用。方法（1） S180肉瘤荷瘤小鼠腹腔注射10mg／kg的Sonoflora,分别于3、6、12、18、24、48、72h处死小鼠,利用共聚焦显微镜（LSCM）观察Sonoflora在肿瘤及正常肌肉组织中的聚集情况。（2） 荷瘤小鼠分别给予超声、Sonoflora及超声联合Sonoflora处理,以腹腔注射生理盐水作为空白对照组。每2天测量肿瘤体积大小,15天后剥离肿瘤组织,比较瘤体重量。 结果 腹腔给药18h后,Sonoflora在肿瘤和正常肌肉组织中的含量均达最高峰,且差异最明显,肿瘤组织中的荧光强度是正常肌肉组织的5.33倍,给药18h为最佳的超声辐射时间。单独使用超声照射（0.4、0.8、1.6W／cm²）或单独注射Sonoflora（10、20、40mg／kg）对小鼠 S180肉瘤无明显杀伤作用。Sonoflora（10mg／ml）联合超声0.4W／cm²（S1U1）、0.8W／cm²（S1U2）、1.6W／cm²（S1U3）组的瘤重（g）分别为2.30±0.40、0.94±0.44、0.88±0.28,分别较空白对照、单纯超声及单纯Sonoflora组显著减少,差异均有统计学意义（P＜0.05）。S1U1组的瘤重均低于S1U2、S1U3组,差异有统计学意义（P＜0.05）,而S1U2组与S1U3组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 Sonoflora具有肿瘤靶向聚集性,其联合超声介导的SDT对小鼠 S180肉瘤有明显杀伤作用。     

CpG对X线放射治疗Lewis肺癌小鼠移植瘤的增敏效应

目的: 探讨含胞嘧啶磷酸盐鸟嘌呤基序的寡脱氧核苷酸（cytosinephosphateguanine oligodeoxynucleotide，CpG ODN）对X线照射荷瘤小鼠Lewis肺癌的放疗增敏作用。方法: 在小鼠右前腋窝接种Lewis肺癌细胞，制备荷瘤小鼠模型，将32只荷瘤小鼠随机分为4组：对照组，无任何处理； X线照射组，3 Gy/次，第1、3、5、8、10、12天照射，总剂量18 Gy； CpG组，第1、3、5、8、10、12天注射，每次腹腔注射CpG ODN 0.05 mg；D组：CpG+X 线照射组,每次X线照射前6 h腹腔注射CpG ODN。观察各组移植瘤生长速度和各治疗组移植瘤生长延迟时间，HE染色法观察移植瘤组织病理变化，TUNEL法检测细胞凋亡。结果: 成功建立荷Lewis肺癌小鼠模型，经治疗后各组小鼠移植瘤体积都较对照组明显减小（P<0.01），CpG+X线照射组移植瘤体积最小；X线照射组移植瘤的生长延迟时间为2.1 d，CpG组为2.3 d，CpG+X线照射组为4.8 d，CpG ODN的放射增敏比为2.09。HE染色病理观察到各治疗组都较对照组移植瘤坏死明显，CpG+X线照射组最显著。TUNEL法检测对照组瘤组织细胞凋亡率为（2.75±0.89）%，X线照射组为（4.87±1.13）%，CpG组为（7.63±1.41）%，CpG+X线照射组为（32.63±4.66）%；各治疗组都明显高于对照组，CpG+X线照射组显著高于X线放射组和CpG组(P<0.01)。结论: CpG ODN能明显提高Lewis肺癌移植瘤对X线的放射敏感性，促进肿瘤细胞凋亡。     

瘤内注射戊二醛治疗小鼠移植性肿瘤的实验观察

目的：通过瘤内注射戊二醛（Glutar）治疗小鼠移植性肿瘤，探讨戊二醛抗瘤效应。方法：将32只小鼠随机平分为四组。接种H22小鼠肝癌细胞株。7天后依照分组移植瘤内注射2％戊二醛、无水乙醇、丝裂霉素。结果：给药7天移植瘤体积：戊二醛、乙醇、丝裂霉素组均小于对照组（P＜0．05）。戊二醛组值最小，病理见瘤细胞坏死。21天后小鼠生存：戊二醛组（5／8）高于对照组（2／8）。结论：戊二醛瘤内注射能够起到抑制肿瘤增长，延缓荷瘤鼠生存的作用。     

超声回声强度预测乳腺癌化疗敏感性的研究

目的:探讨乳腺癌患者新辅助化疗（neoadjuvant chemotherapy,NAC）期间通过超声评估化疗反应性的价值。方法:对60例原发性乳腺癌患者在4轮NAC前后进行超声检查,包括回声强度、肿瘤体积和超声弹性成像,并与穿刺活检病理评估的恶性耐药细胞（resistant malignant cell,RMC）百分比和组织学反应性进行比较。结果:60例患者的肿瘤病灶在NAC前均为低回声团块,在4轮NAC结束后,仅有11例为持续性低回声,有29例转为等回声,20例转为混合回声,等回声强度患者的RMC低于混合回声强度,混合回声强度患者的RMC低于低回声强度,差异均存在统计学意义（P＜0.05）。在第3轮NAC后,超声回声强度变化与RMC百分比降低具有明显的统计学相关性（P＜0.05）,回声强度变化对预测组织学显著反应（major histological response,MHR）的优势比达12.42（95%CI:4.07~21.22,P＜0.001）。同时,达到MHR患者（27例）在4轮NAC期间的肿瘤体积减少程度和肿瘤弹性应变减少程度均优于N-MNR患者（33例）（P＜0.05）。结论:乳腺癌在超声检查中呈现的回声强度、肿瘤体积、弹性应变与NAC反应性存在统计学相关性,肿瘤回声强度改变可以准确预测病理性反应,具有较高的预测价值。     

荷IL-12新城疫病毒治疗结肠癌的实验及其机制探讨

目的:探讨荷IL-12新城疫病毒rClone30-IL-12瘤内注射治疗结肠癌的作用效果及可能机制。方法:RT-PCR法鉴定病毒中IL-12;构建荷CT26细胞的结肠癌模型,将荷瘤小鼠随机分为rClone30-IL-12组、奥沙利铂（OXA）组、磷酸盐缓冲液（PBS）组;给药后隔天记录瘤体直径（mm）、小鼠质量（g）和日常生活状态等;解剖脾脏、瘤体并记录瘤体质量（g）;流式检测荷瘤小鼠脾脏NK细胞的表达情况。结果:病毒含IL-12基因;rClone30-IL-12组和OXA组荷瘤小鼠平均瘤体体积、瘤体质量相较于PBS组明显下降（P＜0.01、P＜0.01,P＜0.01、P＜0.05）;OXA组荷瘤小鼠平均质量相较于rClone30-IL-12组和PBS组明显下降（P＜0.01、P＜0.01）;rClone30-IL-12组荷瘤小鼠脾脏中NK细胞的比例显著高于PBS组和OXA组。结论:瘤内注射rClone30-IL-12可有效抑制结肠癌细胞的生长,其机制可能与新城疫病毒自身溶瘤作用及rClone30-IL-12释放活性IL-12刺激NK细胞的活化有关系;与化疗药物OXA相比,在相似临床效果的前提下,rClone30-IL-12的毒副反应更小。     

剂量与时间因素对重组人血管内皮抑素联合放疗抑制小鼠肝癌移植瘤协同作用的影响

目的 观察新型重组人血管内皮抑素（Endostar,恩度）联合放疗在不同时间、恩度给药剂量、放疗剂量条件下对小鼠肝癌移植瘤的抑瘤效果。方法 建立小鼠肝癌移植瘤模型。根据不同给药时间,分别将60只荷瘤小鼠按照给药剂量、是否联合放疗进行分组,每组10只;隔日测量肿瘤长径与短径;对比不同给药时间各分组的抑瘤效果。将小鼠随机分为6组,每组30只,处理方法同早给药方式分组,分析荷瘤小鼠的生存期。采用MTT法观察恩度浓度、射线剂量对协同作用的影响。采用Western blotting法检测不同给药方式各组中EGF、Flt 1蛋白的表达。采用免疫组化法检测荷瘤小鼠肿瘤微血管密度（MVD）、血管内皮生长因子（VEGF）、KDR的表达。采用电子显微镜观察细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期和凋亡率。结果 与对照组比较,单独应用恩度能够抑制小鼠移植瘤生长（P＜0.05）,恩度早给药方式优于晚给药方式（P＜0.05）。8 mg／kg 恩度+RT组出现协同作用,其抑瘤率为58.0％,优于其他各组（P＜0.05）。8 mg／kg 恩度+RT组小鼠的中位总生存期为55.6天,小鼠存活延长率为29.3％,优于其他各组（P＜0.05）。5 μg／ml 恩度与4 Gy射线联合作用于HUVECs,具有协同作用,增殖抑制率为59.20％,优于其他恩度 剂量组（P＜0.05）。200 μg／ml 恩度与4 Gy射线联合作用于HepG2细胞,具有协同作用,增殖抑制率为43.45％,优于其他恩度 剂量组（P＜0.05）。5 μg／ml 恩度与不同剂量射线作用于HUVECs以及200 μg／ml 恩度联合不同剂量射线作用于HepG2细胞,其增殖抑制率均优于相应的单用恩度或放疗（P＜0.05）。Western blotting 检测显示,早给药方式中8 mg／kg 恩度组和8 mg／kg 恩度+RT组的EGF表达量均低于晚给药方式（P＜0.05）,而两种给药方式之间Flt 1蛋白表达的差异均无统计学意义（P＞0.05）。恩度联合放疗能够有效减少荷瘤小鼠MVD,8 mg／kg 恩度+RT组的MVD为8.6±1.3,显著低于其他各组（P＜0.05）;8 mg／kg 恩度+RT组的VEGF和KDR表达水平均显著低于其他各组（P＜0.05）。电子显微镜显示,恩度联合放疗组的细胞呈现明显的凋亡改变。流式细胞术检测显示,8 mg／kg 恩度+RT组的肿瘤细胞生长分裂受阻于S期,细胞凋亡率显著高于其他各组（P＜0.05）。结论 恩度联合放疗的协同作用与给药时间、给药剂量、放疗剂量有关,恩度早给药方式的抑瘤效果优于晚给药。     

miR-490-3p逆转MCF-7／ADM细胞对阿霉素耐药性的影响

【摘 要】目的 探讨miR-490-3p在阿霉素（ADM）耐药乳腺癌细胞系MCF-7／ADM中的表达情况及其对MCF-7／ADM细胞增殖、凋亡和ADM耐药的影响。方法 以野生型人乳腺癌细胞系MCF-7及其耐药型细胞系MCF-7／ADM为研究对象,用实时荧光定量PCR（qPCR）比较两种细胞中miR-490-3p的表达水平,将miR-490-3p的过表达载体pcDNA1（+）miR-490-3p瞬时转染至MCF-7／ADM细胞（过表达组）后采用qPCR检测转染效果,同时设pcDNA3.1（-）空载体对照组和空白对照组;采用MTT法测定转染pcDNA3.1（+）miR-490-3p对各组MCF-7/ADM细胞增殖能力的影响,测定ADM对MCF-7／ADM细胞的增殖抑制率并计算半数抑制浓度（IC50）及逆转倍数以评价对ADM敏感性的变化;分别于瞬时转染48 h后用Annexin V／FITC流式细胞术检测各组MCF-7/ADM细胞的凋亡率,Western blotting检测耐药蛋白P-糖蛋白（P-gp）,乳腺癌耐药蛋白（BCRP）和多药耐药相关蛋白1（MRP1）的表达,荧光分光光度计检测胞内ADM药物浓度,流式细胞仪检测P-gp活性。结果 MCF-7／ADM细胞中miR-490-3p的表达水平为0.24±0.07,显著低于野生型MCF-7细胞的1.02±0.03（P＜0.05）;过表达组瞬时转染24～96 h的miR-490-3p水平持续升高,均高于空载体对照组和空白对照组（P＜0.05）;过表达组的增殖抑制率随转染时间的延长而增加,转染24、48、72和96 h的增殖抑制率依次为（17.52±1.87）％、（31.67±2.79）％、（45.09±1.88）％和（61.82±2.52）％,高于空载体对照组（P＜0.05）;ADM对过表达组的IC50值为（11.27±2.34）μg／ml,低于空白对照组的和空载体对照组（P＜0.05）,且过表达组相对于空白对照组和空载体对照组的逆转倍数分别为3.35倍和3.39倍;与其余两组相比,过表达组的MCF-7/ADM细胞早、晚期凋亡率和细胞内药物浓度均升高,P-gp、BCRP和MRP1表达及P-gp活性均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 上调miR-490-3p可逆转MCF-7／ADM细胞对ADM的耐药性,可能通过降低耐药蛋白表达及抑制P-gp活性有关,且升高其水平可抑制细胞增殖并诱导凋亡。     

阿司匹林联合曲妥珠单抗对HER-2阳性乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响#br# #br#

目的 探讨阿司匹林联合曲妥珠单抗对表皮生长因子受体2（HER 2）阳性乳腺癌SKBR 3细胞增殖和凋亡的影响。方法 将SKBR 3细胞分为对照组、阿司匹林组（5 mmol／L）、曲妥珠单抗组（30 μg／ml）和联合组（5 mmol／L 阿司匹林+30 μg／ml 曲妥珠单抗）,采用MTT法、流式细胞术分别观察不同药物处理对SKBR-3细胞增殖和凋亡的影响。结果 阿司匹林组SKBR 3细胞增殖率为（79.6±2.61）％,曲妥珠单抗组为（48.2±3.35）％,联合组为（21.5±1.66）％,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。阿司匹林、曲妥珠单抗联合作用指数（CI）为1.0,属于叠加作用。阿司匹林组SKBR 3细胞凋亡率为（273±347）％,曲妥珠单抗组为（35.3±2.80）％,联合组为（56.2±3.95）％,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 阿司匹林联合曲妥珠单抗能有效抑制HER-2阳性乳腺癌细胞的增殖,两药联合有可能成为HER 2阳性乳腺癌的临床治疗新模式。     

X射线调强放疗对乳腺癌保乳术后远期生存及免疫功能影响的临床观察

目的 分析X射线调强放疗对乳腺癌保乳术后远期生存及免疫功能的影响。方法 选择254例行保乳术的乳腺癌患者分为观察组（n=147）和对照组（n=147），两组术后均采取全乳腺照射50 Gy／25次。在瘤体补量上，对照组采用电子线放疗，观察组采用X射线调强放疗，处方剂量均为10～16 Gy／5～8次。比较两组靶区及心脏、患侧肺剂量学参数，毒副反应，5年无瘤生存率，5年生存率及放疗前后的T细胞亚群水平。结果 两组靶区V95％差异无统计学意义（P＞0.05）；观察组V105％为（11.26±2.59）％、V110％为（3.15±0.84）％、心脏照射剂量为（3.72±1.16）Gy、患侧肺照射剂量为（7.51±2.06）Gy，对照组分别为（43.15±3.59）％、（11.36±1.16）％、（8.54±1.92）Gy、（11.62±3.78）Gy，差异有统计学意义（P＜0.05）。两组急性皮肤反应、晚期皮肤反应、骨髓抑制、放射性肺炎及放射性食管炎发生率差异均无统计学意义（P＞0.05）。观察组5年无瘤生存率为98.55％，高于对照组的94.16％，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组5年生存率为95.65％，对照组为94.89％，差异无统计学意义（P＞0.05）。放疗后观察组CD+3、CD+4、CD+4／CD+8水平低于对照组，CD8水平高于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 乳腺癌保乳术后X射线调强放疗可获得更佳的无瘤生存，对免疫功能影响小，可能与瘤床靶区剂量分布均匀、减少心脏和患侧肺照射剂量有关，值得临床推广应用。     

BML-210对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂BML-210 对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法 采用0、5、10、20 μmol／L BML-210 处理U251细胞,活细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测不同浓度BML-210处理24、48、72和96 h的增殖抑制率,磷酯酰丝氨酸结合蛋白-异硫氢酸荧光素／碘化丙啶双染法（Annexin-FITC／PI）双染法检测不同浓度BML-210处理后的细胞凋亡率,流式细胞仪检测不同浓度BML-210处理48 h后的细胞周期分布情况,免疫印迹检测不同浓度BML-210处理48 h后凋亡相关基因（Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3）蛋白表达。结果 BML-210 可呈剂量和时间依赖的方式抑制U251细胞的增殖（P＜0.05）;除5 μmol／L组的晚期凋亡率外,BML-210处理组的早、晚期凋亡率均高于对照组（P＜0.05）,且BML-210处理组作用48 h后的凋亡率均高于24 h,组间差异均有统计学意义（P＜0.05）;与对照组比较,BML-210作用48 h后U251细胞的Bcl-2水平及S、G2／M期细胞比例降低,Bax和Cleaved caspase-3水平及G0／G1期细胞比例升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 BML-210 可抑制脑胶质瘤U251细胞的增殖并诱导其凋亡和细胞周期阻滞,对脑胶质瘤的辅助治疗有一定价值。     

人参皂苷Rg3、索拉非尼和奥沙利铂不同联合方式抗裸鼠肝癌移植瘤血管生成的作用研究

目的 观察人参皂苷Rg3、索拉非尼、奥沙利铂单药及联合对裸鼠人肝癌细胞移植瘤血管生成的作用并探讨其可能机制。 方法 以裸鼠人肝癌转移模型LCI-D20为观察对象,将60只荷瘤裸鼠随机分成8组,分别为人参皂苷Rg3组（A组）、奥沙利铂组（B组）、索拉非尼组（C组）、人参皂苷Rg3+索拉非尼组（D组）、人参皂苷Rg3+奥沙利铂组（E组）、奥沙利铂+索拉非尼组（F组）、人参皂苷Rg3+奥沙利铂+索拉非尼组（G组）和生理盐水对照组（H组）。肿瘤接种第11 d后开始给药,人参皂苷Rg3 5 mg／kg（1天1次）、奥沙利铂5 mg／kg（2天1次）,均用腹腔注射,索拉非尼30 mg／kg（1天1次）灌胃。给药14 d后处死裸鼠,剥离瘤体,检测各组瘤组织中微血管密度（MVD）,免疫组化染色和Western blotting检测各组瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）、缺氧诱导因子（HIF）-1α和VEGF受体（VEGFR）-2的表达。 结果 与H组比较,其余各组MVD均较低（P＜0.01）,VEGF蛋白阳性表达率均较低（P＜0.05）,HIF-1α蛋白阳性表达率均下降,但差异无统计学意义（P＞0.05）;A组、D组、E组的VEGFR-2蛋白阳性表达率显著低于H组（P＜0.05）。与H组比较,仅A组、B组、C组、D组、E组能显著下调瘤组织中VEGF、HIF-1α和VEGFR-2蛋白的表达（P＜0.05）。 结论 人参皂苷Rg3具有一定的抗血管生成作用,其机制可能与下调VEGF、HIF-1α、VEGFR-2及MVD的表达有关。人参皂苷Rg3分别与索拉非尼、奥沙利铂联合可以增强抗血管生成作用,但三药联合时抗血管生成作用反而减弱,提示可能存在其他抗肿瘤机制,值得进一步研究。     

甘氨双唑钠放疗增敏治疗乳腺癌脑转移的疗效分析

【摘 要】目的 观察甘氨双唑钠放疗增敏在乳腺癌脑转移患者治疗中的疗效和毒副反应。方法 36例乳腺癌脑转移患者中16例行甘氨双唑钠增敏放疗,20例行单纯放疗。放疗方案：DT40 Gy／20次或30 Gy／10次。放疗增敏组甘氨双唑钠800 mg／m2,每周3次。比较两组近期疗效、颅内中位无进展生存期（PFS）及毒副反应。结果 甘氨双唑钠放疗增敏组的有效率为87.5％,单纯放疗组为50.0％,差异有统计学意义（P＜0.05）。放疗增敏组颅内中位PFS为9.9个月,单纯放疗组为5.3个月,差异有统计学意义（P＜0.05）。两组毒副反应主要为脱发、头痛、恶心呕吐和白细胞减少,均为1～2级,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 甘氨双唑钠放疗增敏治疗乳腺癌脑转移具有较好的疗效,且不增加毒副反应。     

顺铂不同化疗模式对卵巢癌细胞SKOV3血管生成拟态能力的影响及其机制的探讨

目的 观察接受顺铂低剂量连续化疗（LDM）和最大可耐受剂量化疗（MTD）后卵巢上皮癌SKOV3细胞的血管生成拟态（VM）的形成能力,并探讨其可能机制。方法 建立卵巢癌SKOV3细胞裸鼠移植瘤模型,分别采用顺铂LDM和MTD模式对裸鼠移植瘤进行治疗,以未化疗小鼠作为对照组;化疗结束取移植瘤培养原代细胞。三维细胞培养观察比较LDM组、MTD组和对照组原代细胞形成VM的能力;MTT法和Transwell侵袭实验分别检测SKOV3移植瘤原代细胞的增殖和侵袭能力;Western blotting检测原代细胞中CD133和乙醛脱氢酶（ALDH1）的表达;收集经流式细胞荧光分选技术（FCAS）分选的CD133+ALDH1+和CD133-ALDH1-细胞行三维细胞培养观察并比较两组形成VM的能力。结果 MTD组和LDM组的抑瘤率分别为25.87％和51.52％。MTD组、对照组和LDM组形成VM的平均时间分别为6、9和12 h;48 h后MTD组、对照组和LDM组的VM密度分别为（29.60±9.55）个、（18.70±4.97）个和（11.20±2.60）个,差异有统计学意义（P＜0.05）。从第3天开始MTD组细胞增殖率显著高于对照组和LDM组（P＜0.05）。Transwell侵袭实验结果显示,MTD组细胞穿膜数为156.93±22.77,对照组为112.13±16.59,LDM组为87.33±19.58,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。MTD组CD133、ALDH1蛋白的相对表达量分别为0.402±0.034、0.418±0.020,对照组为0.338±0.046、0.325±0.011,LDM组为0.296±0.042、0.318±0.012,3组间差异有统计学意义（P均＜0.05）。以5×104个／ml接种CD133+ALDH1+细胞6 h左右形成VM,CD133-ALDH1-细胞48 h仍未形成VM;以1×105个／ml接种CD133-ALDH1-细胞24 h可形成少量VM。结论 较MTD模式而言,LDM模式可能通过减少高表达CD133+ALDH1+的细胞以影响肿瘤血供进而减少传统模式化疗后肿瘤的耐药和复发。     

柚皮苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡及迁移的影响

目的 探讨柚皮苷对卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡及迁移的影响。方法 采用1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理对数生长期的SKOV3细胞,并设不加柚皮苷处理的SKOV3细胞为对照组。采用MTT法检测不同浓度柚皮苷处理48 h及20 μmol／L柚皮苷处理12、24、36、48 h的增殖情况。收集不同浓度柚皮苷处理48 h的SKOV3细胞,Annexin V FITC／PI双染或PI单染流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期,Transwell法检测细胞穿膜数以评价迁移能力,Western blotting检测p Akt和PTEN的表达水平。结果 MTT检测发现,经1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理48 h,SKOV3细胞的增殖率降低,除1 μmol／L外,5～20 μmol／L柚皮苷处理SKOV3细胞的增殖率低于对照组（P＜0.05）;10、20 μmol／L处理48 h的增殖率分别为（6195±687）％和（50.58±6.09）％,差异无统计学意义（P＞0.05）;20 μmol／L柚皮苷处理12、24、36、48 h的增殖率依次为（83.93±5.54）％、（73.10±3.58）％、（61.95±5.01）％和（53.00±7.67）％,均低于对照组（P＜005）。与对照组相比,1～20 μmol／L柚皮苷处理48 h的G0／G1期细胞比例和凋亡率升高,S期细胞比例降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理48 h的细胞穿膜数依次为（61.83±6.77）个、（47.17±5.35）个、（32.17±5.95）个和（20.83±3.06）个,p Akt相对水平为0.545±0.050、0373±0035、0280±0054和0173±0034,PTEN相对水平为0.357±0.054、0.468±0.085、0.602±0.063和0.728±0.103,均优于对照组（P＜0.05）。结论 柚皮苷能显著抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖并促进其凋亡,降低侵袭能力,该过程可能与其抑制PTEN／Akt信号通路激活有关,为临床治疗卵巢癌提供可能线索。     

乳腺癌保乳术后同步推量放疗与常规放疗近期疗效的临床研究

目的 探讨早期乳腺癌保乳术后不同放疗方式的疗效及危及器官受照射体积。方法选取本院2012年6月至2012年12月接受保乳术的早期乳癌患者70例,其中35例行瘤床同步推量放疗（SIB组）,其余35例患者行常规放疗（CRT组）。观察两组患者的放疗反应（急性和晚期皮肤反应、骨髓抑制情况、咽部及消化道反应）,比较两组的美容效果、治疗时间及肿瘤的局部控制情况。应用三维治疗计划系统比较SIB与CRT计划下危及器官的受照射体积。结果 SIB组的急性和晚期皮肤反应的总发生率均高于CRT组,差异有统计学意义（P＜0.05）;SIB组的美容优良率为82.9％（29／35）,而CRT组的美容优良率为77.1％（27／35）,差异无统计学意义（P＞0.05）;SIB组的平均住院时间为（39.74±1.55）天,CRT组为（45.60±2.35）天,SIB组在放射治疗住院时间短于CRT组,差异有统计学意义（P＜0.05）;SIB组较CRT组降低了肺V20,差异有统计学意义（P＜0.05）。至随访截止日期,所有患者均生存,两组局部控制率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 SIB相比于CRT在早期乳腺癌保乳术后有相当的美容效果及局部控制率。SIB缩短治疗时间,降低了肺受到20 Gy剂量照射时的体积,可推广应用于乳腺癌保乳术后的患者。