DMD/BMD视网膜电图研究进展

近年来研究发现大部分DMD/BMD患者有ERG异常。其异常主要表现为暗适应ERGb波波幅降低,潜伏期延长,b/a波波幅比≤1;暗适应ERG振荡电位潜伏期延长,亮适应ERG振荡电位第二小波消失或衰减等。并发现DMD/BMD患者的ERG改变与其基因型有一定的相关关系。本文综述了近年来对DMD/BMD患者的ERG研究进展,并讨论了DMD/BMD患者ERG异常的机制,提出了研究DMD/BMD患者ERG的意义。     

迪谢内/贝克肌营养不良患者视网膜眼电图改变特征

目的 研究迪谢内／贝克肌营养不良（ＤＭＤ／ＢＭＤ）患者视网膜眼电图（ＥＲＧ）的改变特征,探讨ＥＲＧ对ＤＭＤ／ＢＭＤ的诊断价值及ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ在视网膜信号传导上的作用。方法 对２２例临床确诊的ＤＭＤ／ＢＭＤ患者进行详细的眼科检查和ＥＲＧ检测,采用ＥＲＧ国际测量标准记录结果。结果 全部患者眼科检查无明显异常。２２例患者中１６例（７２．７％）出现异常ＥＲＧ改变;其中１５例为暗适应蓝光ｂ波波幅下降或（和）消失（Ｐ〈０．００１）。１３例暗适应白光ｂ波波幅下降或（和）替伏期延长（Ｐ〈０．００１）。１２例ｂ／ａ波波幅比≤（Ｐ〈０．００１）。１６例振荡电位ＯＰｓ１～４波波幅下降。结论 ＥＲＧ可作为ＤＭＤ／ＢＭＤ诊断和症状的一项有价值的检查。ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ及同源蛋白在视网膜电信号的传导上起着重要作用。     

DMD/BMD基因诊断及其临床分析(附33例报告)

目的:研究Duchenne/Becker型肌营养不良症(DMD/BMD)患者致病基因外显子缺失的分布特点及其与临床表现的关系。方法:利用9对引物以多重PCR技术对33例DMD/BMD患者进行致病基因诊断。结果:9对引物外显子缺失总检出率为45.5％,主要分布在中央缺失热区和5′端缺失热区,其中以45、48号外显子缺失最多见。且缺失片段长度各异。结论:(1)该病病情轻重可能与基因缺失的外显子数量及片段大小不呈平行关系,而与某些外显子缺失有关。(2)致病基因的表达也受到个体差异的影响,呈高度的遗传异质性。     

定量PCR法对缺失型DMD家系携带者诊断价值的研究

目的探讨紫外凝胶分析系统定量PCR方法对缺失型杜(氏)/贝(氏)进行性肌营养不良(DMD/BMD)携带者的诊断价值。方法采用紫外凝胶分析系统定量检测16个缺失型DMD/BMD家系中的19名女性亲属和15名健康对照的二重PCR产物,并计算计量系数DQ值。结果定量PCR方法将9名女性确定为携带者。结论定量PCR方法是一种准确、快速、简便的DMD携带者诊断方法。     

眼震电图对神经系统疾病的诊断价值

眼震电图对前庭神经系统的末梢、中枢病变的定位较敏感,尤其对脑血管病、脱髓鞘疾病及变性病的亚临床症状期,可在MRI、CT 尚未见异常时即有改变,且其异常改变可随某些疾病的转归而变化,故可用于多种神经系统疾病的早期诊断,疗效观察,推测预后,具有重要价值。本文综述了眼震电图对神经系统疾病的临床应用。     

应用多重PCR检测DMD/BMD患者的基因缺失

目的:了解Duchenne型肌营养不良(DMD)/Becker型肌营养不良(BMD)患者基因缺失的分布规律,并探讨检测技术。方法:应用18对引物多重聚合酶链反应(mPCR)分两组对40例DMD/BMD患者和5例健康者进行Dys-trophin基因缺失检测分析。结果:27例(67.5%)存在外显子缺失,13例(32.5%)未检测到缺失;16例缺失片段集中于44～52号外显子,6例集中于2～20号外显子,5例在以上两个区域均有缺失;45、48、51号外显子缺失频率最高。结论:基因缺失为主要突变类型,缺失片段主要分布于44～52、2～20号外显子两个缺失热区;mPCR具有临床应用价值。     

定量PCR对缺失型DMD基因携带者诊断价值的探讨

定量ＰＣＲ对缺失型ＤＭＤ基因携带者诊断价值的探讨李洵桦刘焯霖梁秀龄Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型肌营养不良症（ＤＭＤ）是一种Ｘ连锁隐性遗传的神经肌肉疾病，目前，尚缺乏有效的治疗方法，故ＤＭＤ基因携带者的检出仍是防止患病婴儿出生的主要方法之一。本研究根据缺失型ＤＭ...     

免疫荧光检测对肌营养不良症临床诊断的价值

目的探讨免疫荧光检测对Duchenne型、Becker型和肢带型肌营养不良症(DMD、BMD和LG-MD)临床诊断的价值。方法对25例肌营养不良症患者(DMD 10例,BMD 4例,LGMD 11例)的骨骼肌冰冻切片标本应用免疫荧光法检测抗肌萎缩蛋白(Dys)中央棒状区(Dys1)、C-末端(Dys2)、N-末端(Dys3)单克隆抗体及α、-β、-γ-肌聚糖蛋白(SG)多克隆抗体在肌膜的表达。结果10例DMD患者Dys染色均为阴性,4例BMD患者呈弱阳性;11例LGMD患者的SG染色中,分别有1例α-SG阴性及1例β-SG阴性。结论Dys免疫荧光检测对DMD/BMD的临床诊断具有特异性价值,是临床诊断的可靠方法之一;SG检测对LGMD的临床诊断还需进一步完善。     

假肥大型肌营养不良基因突变检测方法的应用比较

目的比较假肥大型肌营养不良基因突变各种检测方法的优缺点,为不同条件下选择最佳的检测方案提供借鉴。方法分别应用18对引物多重PCR和5×4DNA微阵列对30例假肥大型肌营养不良患者进行dystrophin基因(缺失)检测分析,并结合文献中的方法进行应用比较。结果 30例假肥大型肌营养不良患者中有21例至少存在一个外显子片段缺失,占总例数的70%;9例未被检测到缺失,点30%。末检测到全部缺失的患者。PCR、DNA微阵列检测结果一致。结论对于假肥大型肌营养不良患者及携带者可选择MLPA检测缺失和重复突变,对于阴性者再利用PCR联合DHPLC结合测序检测点突变。经济方案是先选择18对引物定量PCR或DNA微阵列检测常见外显子缺失和重复突变,对于阴性者再用MLPA检测其它外显子缺失和重复突变。对于可疑胎儿产前诊断行MLPA或PCR-STR连锁分析。     

DNA微阵列技术检测Duchenne型/Becker型肌营养不良患者的临床应用研究

目的 研究检测Duchenne型肌营养不良(：DMD)／Becker型肌营养不良(BMD)患者基因缺失的可行技术。方法 应用分子克隆的方法扩增DMD基因18个常见易缺失外显子片段，以此作为探针制备出简易DNA微阵列，对30例DMD／BMD患者和5例健康对照的基因进行检测分析。部分结果与PCR的方法作了比较。结果 应用简易：DNA微阵列检测出21例DMD／BMD患者具有不同程度的外显子缺失，10例经PCR检测得到了完全验证。结论 DNA微阵列技术检测：DMD／BMD患者简便、准确、灵敏，可在临床诊断中应用。     

Duchenne和Becker型肌营养不良症的电镜观察

目的 本研究通过观察Duchenne和Becker型肌营养不良症(DMD／BMD)患者超微病理的特征，从亚细胞水平上探讨其病因和发病机制。方法 应用电子显微镜，采用超薄切片和冷冻蚀刻技术观察9例DMD／BMD患者超微结构的改变。结果 (1)DMD／BMD透射电镜发现：“Z”线模糊不清，宽窄不一，间距变窄，肌原纤维明带增宽，肌原纤维过度收缩。血管内皮细胞肿胀，毛细血管闭塞，闭塞的毛细血管内皮细胞中可见大量饮液泡；肌原纤维粗细不等，肌浆网明显扩张，肌浆网侵入肌原纤维间，呈虫食样，肌浆网中可见浓缩的包涵物。肌丝排列紊乱，肌浆网管扩张，肌丝间网聚集；线粒体中间段大空泡，肌丝间网较明显，糖原颗粒聚积。(2)DMD骨骼肌冷冻蚀刻电镜图像示：肌原纤维间存在同心圆状排列的板层体；粗细肌丝排列紊乱，正常的六角形点阵结构消失。结论 (1)DMD／BMD超微结构改变表现为肌纤维的坏死和细胞膜的破坏。(2)肌纤维内毛细血管闭塞，血管内皮细胞肿胀，间质毛细血管血流瘀滞。表明DMD／BMD可能还存在血液循环障碍，有待进一步证实。     

Dystrophin abnormalities in Duchenne and Becker dystrophy carriers: correlation with cytoskeletal proteins and myosins

Characterization with a panel of six antibodies revealed abnormal dystrophin expression in 6 of 20 Duchenne muscular dystrophy (DMD) carriers examined, and in 5 of 12 Becker muscular dystrophy (BMD) carriers examined. The immunocytochemistry of muscle fibres was normal with five of the antibodies in two BMD carriers, but some muscle fibres were negative to the antibody directed against a portion of the dystrophin rod domain. Mosaicism was detected with all six antibodies in the other three BMD (but in only a small number of fibres) and in all DMD carrier muscles. Spectrin, vinculin and talin were immunolocalized in the same muscle specimens in order to assess membrane cytoskeletal integrity and to correlate their expression with that of dystrophin. These proteins, including vinculin, which was previously reported to be reduced in DMD patient muscles, were normally present on the surface of all dystrophin-deficient fibres. Muscle fibre types were characterized using monoclonal antibodies against fetal myosin and adult fast and adult slow myosin heavy chains. In both the DMD and BMD carriers, a significant reduction in type 2B fibres, as well as an increase in type 2C and fetal myosin-containing fibres was found — as has also been reported in DMD patients. Altered dystrophin expression was observed more frequently in type 2 than type 1 fibres. Dystrophin deficiency was found in a high percentage of type 2C fibres as well as in all fibres expressing fetal myosin; this suggests that dystrophin-deficient fibres are more susceptible to degeneration, leading to regeneration.     

Asymptomatic Becker muscular dystrophy in a family with a multiexon deletion

We report a Becker muscular dystrophy (BMD) family with one 5‐year‐old affected patient and a 69‐year‐old asymptomatic grandfather. Dystrophin gene multiplex polymerase chain reaction and multiplex ligation‐dependant probe amplification analysis showed that both males carried an in‐frame deletion of exons 45–55. Segregation analysis revealed two additional asymptomatic boys in this family. Our finding supports previous predictions that exons 45–55 are the optimal multiexon skipping target in antisense gene therapy to transform the severe Duchenne muscular dystrophy into the milder BMD, or even asymptomatic, phenotype. Muscle Nerve, 2008     

肌营养不良蛋白在假肥大肌营养不良症肌组织中的表达研究

目的检测假肥大肌营养不良症肌组织中肌营养不良蛋白（ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ）的表达。方法用针对ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ棒状区第１５～１８重复区域的多克隆抗血清Ａｎｔｉ５～７，对２２例Ｄｕｃｈｅｎｎｅ型（ＤＭＤ）和４例Ｂｅｃｋｅｒ型肌营养不良症（ＢＭＤ）患者及１１例无神经肌肉疾病的急诊外伤患者（作为对照）的肌组织进行免疫组化分析。结果在对照组肌细胞中ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ存在着可达检测水平的表达，并特异地定位于肌细胞膜上。１９例ＤＭＤ没有可达检测水平的ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达，３例ＤＭＤ存在着ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ表达。４例ＢＭＤ肌细胞膜上则呈现出斑片状、不连续ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ弱阳性表达。结论ｄｙｓ－ｔｒｏｐｈｉｎ的缺乏是造成ＤＭＤ／ＢＭＤ表型的基本生化因素，此方法为临床上对ＤＭＤ／ＢＭＤ患者作出确诊提供了直接的特异生化测试指标。     

免疫组织化学dystrophin染色诊断Duchenne型肌营养不良症的研究

目的 探讨Duchenne型肌营养不良症(DMD)肌萎缩蛋白(dystrophin)表达规律和临床意义.方法 收集我院7例DMD患者作为试验组,7例非DMD患者为对照组.使用抗dystrophin杆状结构域单抗、免疫组织化学染色,观察肌膜dystrophin表达.结果 7例DMD患者肌细胞膜dystrophin阴性,7例非DMD患者dystrophin染色阳性.结论 证实DMD患者肌细胞膜dystrophin表达阴性,揭示dystrophin缺失是其发病机制,可以作为确诊DMD手段,对临床诊断DMD有实际意义.     

The use of monoclonal antibodies in diagnostic tests for Becker and Duchenne muscular dystrophy

Monoclonal antibodies recognizing different epitopes of dystrophin have now been widely applied in diagnostic tests for Duchenne and Becker muscular dystrophy (BMD). The preservation of the C-terminus in BMD patients necessitates the routine use of one antibody raised against this region. Additional antibodies against deletion-prone regions of dystrophin further increase the diagnostic power of the tests. We describe two cases which illustrate that the combined use of different antibodies is necessary to avoid misdiagnoses of BMD at the protein level.