颅内动脉瘤组织超微结构及MMP-9表达相关调控机制的研究

目的 探讨颅内动脉瘤组织超微结构及MMP-9过度表达的相关调控机制.方法 观察颅内动脉瘤标本和正常脑血管的血管壁细胞外基质的形态学变化,检测脑血管壁组织内的CD68、MMP-gmRNA表达水平及c-Jun免疫活性,进行相关统计学分析.结果 电镜下见颅内动脉瘤血管壁的内皮细胞、平滑肌细胞凋亡和细胞外基质(ECM)破坏,CD68在颅内动脉瘤组织内14.60±1.72/高倍视野,正常脑血管壁内未见CD68阳性表达(P<0.01);c-Jun免疫活性在颅内动脉瘤组织内为1.92±051,正常脑血管壁内为0.17±0.41(P<0.01);动脉瘤组织中MMP-9mRNA的表达是正常对照的10.06倍(P<0.01);CD68和MMP-9mRNA之间呈显著正相关(r<,1>=0.931);颅内动脉瘤组织内c-Jun和MMP-9mRNA之间呈显著正相关(r<,2>=0.818).结论 颅内动脉瘤瘤壁组织中阳性表达的CD68可能通过激活c-Jun进而诱导MMP-9的大量表达破坏ECM参与颅内动脉瘤的发病机制.     

颅内动脉瘤的MMP-9及超微结构研究

目的探讨基质金属蛋白酶9（MMP-9）对脑血管壁细胞外基质（ECM）破坏在颅内动脉瘤发病机制中的作用。方法对15例颅内动脉瘤标本和6例非脑血管病病人的正常脑血管．应用实时荧光定量PCR检测脑血管壁组织内MMP-9 mRNA的基因表达水平，并通过电镜观察颅内动脉瘤病人血管壁细胞及ECM的形态学变化。结果动脉瘤壁组织中MMP-9mRNA的表达是正常脑血管的10．06倍（P〈0．01）。电镜下见动脉瘤壁内皮细胞损伤，中层平滑肌细胞数目明显减少并呈凋亡状态．ECM严重破坏：而正常脑血管壁细胞及基质纤维清晰可见，结构完整。结论颅内动脉瘤壁组织中MMP-9的基因表达水平显著升高，并可能通过破坏ECM和诱导平滑肌凋亡参与颅内动脉瘤的发病机制。     

精神分裂症患者致炎性细胞因子和酪氨酸羟化酶mRNA表达水平的研究

目的探讨精神分裂症的外周神经免疫机制及其与临床症状的关系。方法检测精神分裂症患者致炎性细胞因子白介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF—α）以及酪氨酸羟化酶（TH）的mRNA表达水平，采用逆转录-聚合酶链反应及半定量检测技术，分别检测39例精神分裂症患者（患者组）、25例同胞（同胞组）及30名正常对照（对照组）外周血单个核细胞（PBMC）IL-1β、TNF-α及TH基因表达水平，同时应用阳性和阴性症状量表（PANSS）评定精神分裂症患者临床症状。结果患者组、同胞组及对照组IL-1β的mRNA表达水平分别为1．52±1．01、1．52±1．09和0．74±0．38；TNF—α的mRNA表达水平分别为1．18±0．99、1．01±0．87和0．70±0．29；TH的mRNA表达水平分别为0．55±0．33、0．61±0．32和0．28±0．20。患者组和同胞组的IL-1β、TNF—α、TH的mRNA表达水平均明显高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。患者组IL-1β（r=0．420）、TNF—α（r=0．430）的mRNA表达水平与PANSS的-般病理症状分呈正相关（P〈0．01）。同胞组与对照组合并统计，IL-1β与TNF-α的mRNA表达水平呈正相关（r=0．847，P〈0．01）；IL-1β与TH的mRNA表达水平呈正相关（r=0．666，P〈0．01）。患者组仅IL-1β与TNF—α的mRNA表达水平呈正相关（r=0．942，P〈0．01）。结论精神分裂症患者PBMC细胞TH、IL-1β和TNF—α的mRNA表达水平高于正常，且与精神分裂症的-般病理症状显著相关。     

PD-ECGF、HGF在胶质瘤中的表达及与肿瘤血管生成的关系

目的 探讨胶质瘤组织中血小板源性内皮细胞生长因子（PD—ECGF）、肝细胞生长因子（HGF）的表达及与肿瘤血管形成的关系。方法 用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）测定了30例胶质瘤和6例正常脑组织的PD-ECGF mRNA水平，用NIH Image软件量化分析目标PCR条带的面积与吸光度；采用原位杂交法检测HGF mRNA的表达；用免疫组化法检测CD34的表达，计算微血管密度（MVD）．并结合临床和病理资料进行分析。结果 胶质瘤组织中PD—ECGF基因呈过度表达．高级别（Ⅲ～Ⅳ级）胶质瘤组织中PD—ECGF mRNA的平均表达水平（0．73±0．18）显著高于低级别（Ⅰ～Ⅱ级）胶质瘤（0．47±0．33）及正常脑组织（0．11±0．17），三组比较差异有显著性（P=0．000）；生存时间≥2年组中PD—ECGF mRNA的表达水平（0．47±0．29）低于生存时间〈2年组（0．81±0．11），差异有显著性（P=0．001）。HGF mRNA在正常脑组织均未见表达，在低级别和高级别胶质瘤组织中阳性率分别为35．7％和75．0％，差异有显著性（P=0．030）；生存时间≥2年组中HGF mRNA的阳性表达率（27．8％）低于生存时间〈2年组（83．3％），差异有显著性（P=0．003）。MVD在正常脑组织、低级别和高级别胶质瘤组织中分别为（8±4）个、（20±7）个和（29±6）个，差异有显著性（P=0．000）；MVD和PD—ECGF mRNA、HGF mRNA之间存在显著正相关（r1=0．390，P1=0．033；r2=0．514，P2=0．004），PD-ECGF mRNA和HGF mRNA之间存在显著正相关（r=0．370．P=0．044）。结论 胶质瘤中MVD比正常脑组织显著增高，显示了胶质瘤丰富血供的肿瘤血管生成特征。PD—ECGF、HGF在胶质瘤中的表达显著增强，在肿瘤血管生成中起着重要作用，能共同调节胶质瘤的血管形成．可用于判断胶质瘤的生物学行为．并对判断预后有指导意义。     

锂对慢性铝暴露大鼠学习记忆功能的影响及其机制

目的 探讨锂对慢性铝暴露大鼠学习记忆功能以及脑内淀粉样B蛋白前体（APP）代谢的影响。方法 将24只慢性铝暴露大鼠随机分为锂治疗组和非治疗组，每组12只；另取12只非铝暴露大鼠为正常组。锂治疗组给予氯化锂溶液（200mg·kg^-1·d^-1）灌胃，非治疗组以等量氯化钠溶液灌胃，正常组大鼠不进行干预。6周后Morris水迷宫测试，比较三组大鼠的学习记忆功能；分别采用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组大鼠脑组织内淀粉样B蛋白（AB）和APP含量。结果 （1）锂治疗组大鼠定向航行实验潜伏期[（15．4±8．7）s]短于非治疗组[（26．8±11．2）s；F=-3．8，P〈0．05]，空间搜索中随机式所占比例（11．1％）低于非治疗组（20．7％；P〈0．05），站台停留时间[（47±7）s]和穿台次数[（12．6±2．2）次]多于非治疗组[（35±7）s和（7．9±2．6）次；P〈0．05]；（2）正常组大鼠脑内APP的含量（1．0±0．3）低于其他两组[锂治疗组为（1．8±0．4），非治疗组为（1．8±0．5）；P〈0．01]。非治疗组脑内海马、皮层AB反应阳性数目多于其他两组（P〈0．01）。结论 锂可以改善慢性铝暴露大鼠学习记忆功能，可能是通过抑制B分泌酶裂解途径而影响APP的代谢，减少AB的产生。     

慢性束缚应激对大鼠行为及前额叶皮质细胞外信号调节激酶磷酸化的影响

目的 探讨慢性束缚应激模型大鼠的行为及前额叶皮质中磷酸化细胞外信号调节激酶（ERK1／2）表达的变化。方法 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组和束缚应激组，每组8只。将束缚应激组大鼠放入特制的束缚器中限制其活动，6k／d，连续21d。比较应激前后大鼠旷场行为和Morris水迷宫行为学的改变，用蛋白免疫印迹技术和免疫组织化学方法观察应激后大鼠前额叶皮质P—ERK1／2表达的变化，并与正常对照组比较。结果 （1）行为学改变：应激后，束缚应激组大鼠的水平活动度[（4265±864）mm]少于正常对照组[（8562±502）mm]，中央停留时间[（39．1±4．3）s]长于正常对照组[（24．6±1．6）s]，均P〈0．01；束缚应激组大鼠在Morris水迷宫实验的目标象限活动时间[（57．2±1．7）s]和穿越站台次数[（2．0±0．8）次]均少于正常对照组[分别为（70．7±3．6）s和（6．2±1．0）次；均P〈0．01]。（2）p-ERK1／2蛋白水平：应激后束缚应激组吸光度（A）值[（0．767±0．006）]低于正常对照组[（0．813±0．015）；P〈0．05]。（3）p-ERK1／2阳性细胞数：应激后束缚应激组[（76±5）个]少于正常对照组[（110±14）个；P〈0．05]，且树突染色浅淡。结论 慢性心理应激明显影响动物的活动度和记忆能力；前额叶皮质中p-ERK1／2表达的减少，提示ERK信号转导通路可能参与了应激发生的机制。     

人星形细胞瘤TGF—α表达与血管形成的研究

目的探讨TCF-α在人脑星形细胞瘤中表达，研究其在肿瘤血管形成中的作用。方法用SP免疫组化法检测50例人脑星形细胞瘤标本中TCF-α蛋白表达；用抗CD34相关抗原单克隆抗体免疫组化染色显示肿瘤组织微血管，并以微血管密度（miemvessel density，MVD）测定肿瘤血管生成。结果实验组50例人脑星形细胞瘤TGF-α表达总阳性率64％（32／50）；总MVD38.88±19．13，显著高于正常脑组织组9．30±3．74（P〈0．01）。随着人脑星形细胞瘤级别增高，MVD数值呈现增高趋势。TGF-α与MVD呈显著线性正相关性（r=0．869，P〈0．01））。结论TGF-α在人脑星形细胞瘤中高表达，可能参与人脑星形细胞瘤的血管形成．     

氟西汀对慢性应激大鼠海马S100B和糖基化代谢终产物受体表达的影响

目的 探讨氟西汀对慢性应激大鼠海马S100B和晚期糖基化代谢终产物受体（RAGE）含量的影响。方法 将雄性sD大鼠4J0只随机分为正常对照组（以下简称对照组）、抑郁组、氟西汀（10mg·kg^-1，腹腔注射）＋抑郁组（F＋抑郁组）、氟西汀（10mg·kg^-1，腹腔注射）＋对照组（F＋对照组），每组各10只。采用21d不可预见性中等强度应激造成大鼠抑郁模型，于应激前及应激第22天观察大鼠行为（体质量、24h饮用1％蔗糖溶液量、旷场实验）；以Western blotting和激光共聚焦显微镜测定药物对各组大鼠海马S100B及RAGE表达水平的影响。结果 （1）在应激第22天，抑郁组大鼠体质量、蔗糖溶液消耗量、直立次数均低于对照组（P〈0．05），水平运动格子数低于对照组（P〈0．01），粪便颗粒数多于对照组（P〈0．05）；F＋抑郁组体质量、蔗糖溶液消耗量、水平运动格子数、直立次数均高于抑郁组（P〈0．05）。（2）抑郁组大鼠海马S100B[荧光强度18±5，吸光度（A）值3．24土0．45]、RAGE（荧光强度16±5，A值2．89±0．24）水平较对照组S100B（荧光强度25±7，A值5．28±0．48）、RAGE（荧光强度24±6，A值5．68±0．29）明显降低（P〈0．05），F＋对照组S100B（荧光强度31±5，A值7．34±0．29）、RAGE（荧光强度30±4，A值7．43±0．32）表达水平高于对照组（P〈0．05），而F＋抑郁组S100B（荧光强度23±3，A值5．00±0．34）、RAGE（荧光强度22±4，A值4．93±0．54）表达水平明显高于抑郁组（P〈0．05）。结论 慢性应激下调大鼠S100B，RAGE蛋白表达水平，而氟西汀上调S100B，RAGE的表达水平。     

SH3GL2在无病灶性难治性癫痈患者脑组织中的表达

目的：分析无病灶性难治性癫痂患者脑组织中SH3GL2 mRNA与蛋白的表达水平，探讨可能的发病机制。方法：运用逆转录-聚合酶链式反应（RT—PCR）和Western blot分别检测10例无病灶性难治性癫痫患者及10例对照组脑组织SH3GL2mRNA及蛋白的表达。结果：RT—PCR检测显示，无病灶性难治性癫痂患者脑组织SH3GL2 mRNA表达的相对水平为（102．23&#177;54．68），对照组为（44．59&#177;17．12），两者差异有显著统计学意义（P〈0．01）；Western blot分析表明，无病灶性难治性癫痫患者脑组织的SH3GL2蛋白表达相对水平（229．54&#177;89．82）高于对照组（143．88&#177;59．69），两者差异也有显著统计学意义（P〈0．05）。结论：SH3GL2 mRNA与蛋白表达水平在无病灶性难治性癫痂患者脑组织中明显增强，提示表达于中枢神经系统的SH3GL2可能在人类难治性癫痫的发病机制中起了一定作用。     

应激对大鼠空间学习记忆的影响及与蛋白激酶活力的关系

目的探讨不同时段的应激对大鼠海马依赖性空间学习记忆的影响及与海马蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）和钙-钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）活力的关系。方法将60只雄性SD大鼠随机分为对照组、应激1次组、应激1周组、应激2周组和应激4周组，每组动物12只，其中应激模型为强迫大鼠游泳。应用Morris水迷宫（MWM）测试大鼠的空间学习记忆情况，采用同位素法检测蛋白激酶的活力。结果（1）MWM实验，应激1周组在第7和第8个实验中逃避潜伏期（EL）分别为（9．8±2．8）s和（9．8±4．6）s，少于其他4组（P〈0．01）；其他10个实验各组的EL相互比较，差异无统计学意义（P〉0．05）；记忆保留实验中，应激4周组的EL长于对照组（P〈0．05）；应激1周组大鼠60s内穿越原平台位置的次数[（3．24-1．2）次]多于对照组[（1．8±0．5）次；P〈0．05]。（2）应激1周组大鼠PKA和PKC活力[分别为（6．42±0．27）×10^-2和（4．71±0．37）×10^-2]高于对照组[分别为（5．53±0．49）×10^-2和（1．48±0．27）×10^-2；P〈0．01]；应激2周组和应激4周组PKA[分别为（4．88±0．23）×10^-2和（3．92±0．22）×10^-2]和PKC[分别为（0．57±0．03）×10^-2和（0．69±0．02）×10^-2]活力则低于对照组（P〈0．01）。各应激组海马CaMKⅡ的活力均明显低于对照组（P〈0．01）。结论慢性应激损害大鼠海马依赖性空间长时记忆，抑制大鼠海马PKA、PKC和CaMKⅡ的活力；短时间的重复应激选择性提高大鼠海马依赖性空间短时记忆，提高PKA和PKC活力。应激导致记忆改变可能与蛋白激酶活力变化有关。     

蛛网膜下腔出血大鼠脑干组织叉头框蛋白的表达及尼莫地平的影响

目的 研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B[protein Kinase B,PKB(AKT)]、叉头框蛋白[forkhead box(FOXO),FKHR]在大鼠蛛网膜下腔出血脑血管痉挛动物模型中早期(1d)的表达、活化情况及应用尼莫地平的影响.方法 将Wistar大鼠分为假手术组(对照组)、SAH模型组、SAH后给尼莫地平治疗组(治疗组).经颅多普勒超声(TCD)检测大鼠基底动脉的最大血流速度(Maximum velocity of Basilar artery blood flow,Vmba).脑干组织进行免疫组化染色.结果 SAH模型组与对照组相比基底动脉血流加快(P＜0.05).治疗组比SAH模型组基底动脉血流速度慢(P＜0.05).在对照组AKT、P-AKT(磷酸化-AKT)、FKHR、P-FKHR(磷酸化-FKHR)均可见阳性细胞表达.在SAH模型组:AKT表达增多,但与对照组比较差异无显著性(P＞0.05);P-AKT表达减少,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05).在治疗组AKT、P-AKT表达较对照组和SAH模型组均增加,差异具有显著性(P＜0.05).在SAH模型组FKHR表达增加,P-FKHR表达减少,与对照组比较差异有显著性(P＜0.05);在治疗组FKHR表达较对照组和SAH模型组均减少,P-FKHR表达较对照组和SAH模型组均增加,差异具有显著性(P＜0.05).结论 PKB/AKT介导的磷酸化能够诱导FOXO蛋白从细胞核到细胞质的重新定位,诱导FOXO蛋白的活性发生改变,并参与了大鼠SAH后早期(1d)CVS的形成.尼莫地平具有缓解SAH后早期(1d)CVS的作用.     

Impact of age on the facial expression of pain

OBJECTIVE: Old age has traditionally been viewed as being associated with a decline in emotional expressivity. Interestingly, empirical evidence based on analyses of facial expressions contradicts this traditionally view and points to absence of (or only very slight) age-related changes in emotional expressivity. However, this research on emotional expressivity in older persons has neglected one important emotionally colored state-expression of pain. In order to close this gap, we aimed to investigate the influence of age on the facial expression of pain. METHODS: Forty young (mean age, 24.1 years) and 61 elderly (mean age, 72.3 years) subjects were investigated for their facial (Facial Action Coding System) and subjective responses to noxious mechanical and electrical stimuli of various intensities. RESULTS: Young and elderly subjects did not differ with respect to the frequency of facial responses during noxious mechanical and electrical stimulations. Moreover, age had no significant impact on the pain specificity of these facial responses. Furthermore, we found no significant age differences in self-report ratings of pressure and electrical pain, thus indicating that both age groups experienced comparable amounts of pain intensities. CONCLUSION: These findings suggest that the facial expression of pain, like facial expressions of other affective states, remains unchanged in older persons. Consequently, elderly individuals seem to communicate pain through their facial expression as validly as younger individuals do.     

慢性脑缺血大鼠OXR的表达变化及天智颗粒干预的实验研究

目的研究慢性脑缺血病程中食欲素受体(Orexin receptor,OXR)的表达水平及天智颗粒的干预对其表达水平的影响。方法通过结扎双侧颈总动脉建立脑缺血大鼠模型,水迷宫法进行行为学评价,免疫组化法测定OXR的表达水平。结果缺血15 d时大鼠的学习记忆能力明显减退,1月、2月模型组较15d模型组好转。缺血15 d时OXR表达水平明显增高,1月时OXR的表达水平较15 d时明显下降,2月时OXR的表达水平再次增高。治疗组与其模型组相比,学习记忆能力均明显好转;治疗15 d OXR的表达水平较模型组明显下降,治疗2月OXR的表达水平较模型组明显升高。结论 Orexin系统可通过某种途径对慢性脑缺血起双向调控作用,而天智颗粒可通过orexin系统治疗脑缺血。     

巴曲酶对P-选择素表达的影响

目的动态观察巴曲酶对大鼠脑缺血/再灌注局灶血管表面P-选择素表达变化的影响.方法以ABC法显示使用巴曲酶后局灶血管表面P-选择素的阳性表达情况.结果使用巴曲酶可以使缺血/再灌注脑组织血管表面第24 h和第4 d时P-选择素的表达明显降低.结论巴曲酶可以降低血管表面P-选择素的表达, 对缺血脑细胞有保护作用.     

肌营养不良蛋白表达对肌营养不良症的诊断意义

目的：探讨肌营养不良蛋白在肌营养不良症患者肌组织中表达的意义。方法：运用免疫组化法对12例Duchenne型肌营养不良症（DMD）患者及5例Becker型肌营养不良症（BMD）患者的肌组织中肌营养不良蛋白的表达进行分析。并用6例非神经肌肉疾病患者的肌组织作为对照。结果：对照组6例肌组织标本中均可见肌营养不良蛋白表达,其阳性染色勾画出肌细胞的边界,胸及胞浆呈阴性。在DMD中有10例（83．33％）肌细胞膜肌营养不良蛋白不表达。BMD中3例（60）可见沿肌细胞膜分的不连续斑片状弱阳性染色。结论：肌营养不良蛋白的缺失或异常表达,是DMD／BMD型较为特异的改变。运用免疫组化法检测患者肌组织中肌营养不良蛋白的表达,可为DMD／BMD型的病理诊断提供特异指标。     

Current concepts on the expression of neurotrophins in the greater omentum

Abstract

The omentum has been utilized in Neurosurgery since the late 1960s. Its overwhelming effects on fibroblast and peripheral nerve growths were soon noticed. However, there was no direct evidence of production of any of the growth factors by the omentum, although substances were shown to be present in the omentum. Three animals were used in the study.After removal of the omentum in one, the8 tissue was submitted to PCR for BDNF, NT3/4 and NT5. Water was the negative control utilized. There was marked expression of all neurotrophins in the omentum, indicating local production of all those substances. The omentum has, for the first time, demonstrated to produce and not only accumulate neurotrophins. Utilization of this concept may permit transplant or transposition of parts of the omentum into the central nervous system for the management of multiple diseases, including vascular dementia, strokes, Alzheimer's disease or Moya-Moya disease.     

Current concepts on the expression of neurotrophins in the greater omentum

The omentum has been utilized in Neurosurgery since the late 1960s. Its overwhelming effects on fibroblast and peripheral nerve growths were soon noticed. However, there was no direct evidence of production of any of the growth factors by the omentum, although substances were shown to be present in the omentum. Three animals were used in the study. After removal of the omentum in one, the tissue was submitted to PCR for BDNF, NT3/4 and NT5. Water was the negative control utilized. There was marked expression of all neurotrophins in the omentum, indicating local production of all those substances. The omentum has, for the first time, demonstrated to produce and not only accumulate neurotrophins. Utilization of this concept may permit transplant or transposition of parts of the omentum into the central nervous system for the management of multiple diseases, including vascular dementia, strokes, Alzheimer's disease or Moya-Moya disease.