甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤后环氧化酶-2表达的影响

目的：观察甲基强的松龙（MP）对正常及损伤脊髓组织中环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法：216只Sprague-Dawlev大鼠．随机分为正常大鼠生理盐水处理组、正常大鼠MP处理组、生理盐水预处理脊髓损伤组、MP预处理脊髓损伤组、生理盐水治疗脊髓损伤组、MP治疗脊髓损伤组6组，每组又分为处理后2h、4h、8h、16h、24h、48h6个时间点；采用改良Allen’s打击法制作脊髓损伤动物模型，应用免疫组织化学染色的方法观察脊髓中COX-2蛋白表达的变化。结果：正常脊髓MP处理组16h后COX-2免疫组化染色程度明显降低，48h后仅灰质后角内有个别较小直径神经元显示微弱阳性染色；脊髓损伤后MP治疗组4h开始出现COX-2染色程度增高，并在损伤后48h达到最强程度的染色。但染色程度比生理盐水治疗组最强染色程度弱；MP预处理脊髓损伤组8h开始出现COX-2免疫组化染色程度的增高，并一直持续到损伤后48h，损伤后48h组染色程度比生理盐水预处理组最强染色程度弱、比脊髓损伤后MP治疗组染色程度弱。结论：MP能显著抑制正常和损伤脊髓组织中COX-2蛋白的表达，延迟其在损伤脊髓中的表达高峰时间，但不影响COX-2表达在空间上的分布。MP预处理比MP治疗能更显著地抑制损伤脊髓组织中COX-2蛋白的表达。     

不同时间应用甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤的作用

目的:观察不同时间应用甲基强的松龙(methylprednisolone,MP)对大鼠急性脊髓损伤的作用,为临床应用MP保护脊髓功能选择用药时间提供理论指导.方法:216只成年SD大鼠,体重190～240g,随机分为假手术组(A组)、脊髓损伤组(B组)、MP治疗组(C组)和MP防治组(D组),每组54只.A组不损伤脊髓.B、C、D组采用改良AUen's法建立脊髓损伤(T8～T9水平)模型,D组术前0.5h静脉注射MP(30mg/kg),C组术后1h静脉注射MP(30mg/kg),C、D组术后6、12、18、24h静脉注射MP(每次31.05mg/kg),A、B组相同时间点予生理盐水0.5ml静脉注射.各组术后24、48、72h采用后肢功能评分障碍率(n=6)及斜板障碍率(n=6)进行脊髓功能评价.B、C、D组术后8、24、48、72h取出损伤段脊髓,A组相同时间点取出相应部位脊髓,切片行光镜(n=6)和电镜(n=6)检查,结果:A、B组组内各时间点后肢功能评分障碍率均无显著性差别(P>0.05),C、D组随时间延长逐渐减小(P<0.05);A组各时间点斜板障碍率及B、D组组内48h和72h比较无显著性差异(P>0.05),而B组、D组组内24h分别与48h、72h比较以及C组组内各时间点比较均有显著性差异(P<0.05);B、C、D组各时间点后肢功能评分障碍率及斜板障碍率均高于A组(P<0.05);24h、48h时C组与B组差异无显著性(P>0.05),而72h时及D组各时间点两者均低于B组(P<0.05);D组72h时斜板障碍率与C组差异无显著性(P>0.05),而72h时后肢功能评分障碍率及24h、48h时两者均低于C组(P<0.05):A组脊髓灰白质交界清楚,神经元丰富,形念清晰;B组损伤脊髓多处出血、坏死,神经元减少,残留细胞内结构模糊,髓鞘板层结构紊乱,并逐渐加重:C组较B组损伤轻,残留细胞内结构稍模糊,24h后逐渐好转;D组较B、C组损伤轻,出血少,细胞器轻度肿胀,24h后肿胀长基本消退.结论:MP能减轻大鼠急性脊髓损伤后的继发性损伤程度,术前半小时开始预防应用MP较单纯术后应用效果更好.     

大剂量甲基强的松龙冲击疗法治疗急性脊髓损伤

Youg[1](1982)应用大剂量甲基强的松龙(Methyl-prednisolone)静脉内注射治疗实验性动物急性脊髓损伤发现,该药可改善损伤后脊髓血流和微血管灌注。Hall[2]用大剂量可的松动物实验性治疗得出类似结果。Bracken等[3]在近期病人随机对比研究中证明,在急性脊髓损伤8h内给予大剂量甲基强的松龙可使神经功能得到改善,但随访时间短。国内尚未见有关报道。本院从1989年1月～1991年12月,3年间共应用大剂量甲基强的松龙治疗伤后48h内入院的急性脊髓不全损伤20例,收到较好效果。本文着重分析给药时间与疗效的关系。1临床资料 本组20例,男15例,女5例;…     

甲基强的松龙对脊髓损伤后伤段脊髓线粒体功能的影响

目的：探讨脊髓损伤后伤段脊髓线粒体呼吸功能和线粒体内游离钙的变化和早期使用甲基强的松龙（MP）对其的影响。方法：54只SD大鼠，随机分组为假手术组（对照组）、脊髓损伤组（SCI组，采用Allen’s打击法造成大鼠脊髓损伤模型）和脊髓损伤后应用MP治疗组（MP组），每组又分为处理后6h、12h、24h三个时间相，每个时间相6只。在各时间相处死动物后提取伤段脊髓线粒体，测定线粒体呼吸Ⅲ态（R3）、呼吸Ⅳ态（R4）、呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P／0）和线粒体内游离Ca^2＋浓度。结果：SCI组在伤后6h、12h和24hR3、RCR和P／0显著低于对照组，R4和线粒体内游离Ca^2＋浓度显著高于对照组。差异有显著性（P〈0．01）；伤后6h和12h MP组R3、RCR和P／0高于SCI组，R4和线粒体内游离Ca^2＋浓度低于SCI组，差异有显著性（P〈0．01）；MP组R3、R4和RCR在6h和12h时与对照组之间无显著性差异，24h时R3、RCR和P／0低于正常对照组，有显著性差异（P〈0．05）。结论：脊髓损伤后伤段脊髓线粒体呼吸功能和线粒体内游离Ca^2＋浓度明显受到影响，线粒体内膜通透性增加，线粒体氧化磷酸化的偶联程度明显受到抑制。早期使用甲基强的松龙可明显改善线粒体的呼吸功能，抑制Ca^2＋内流，保护伤段脊髓线粒体的稳定性。     

甲基强的松龙与神经节苷脂治疗大鼠急性脊髓损伤

目的探讨早期联合应用大剂量甲基强的松龙(MP)及神经节苷脂(GM1)对大鼠急性脊髓损伤的治疗效果.方法改良Allen's打击法致伤36只大鼠T10～T12脊髓建立急性脊髓损伤模型,随机分为对照组、MP治疗组(应用大剂量MP)及MP+GM1治疗组(早期联合应用大剂量MP及GM1),观察大鼠肢体功能恢复、运动神经元数目及截面积以及胆碱脂酶活性变化,TUNEL标记检测凋亡神经元细胞,比较各组间差别.结果治疗组大鼠神经元细胞结构退变较对照组轻,BBB评分、运动神经元数目及截面积以及胆碱脂酶(CHE)活性较对照组明显提高,尤以MP+GM1组更明显,脊髓凋亡神经元数对照组较实验组明显增多(P＜0.05).结论甲基强的松龙及神经节苷脂对急性脊髓损伤大鼠的脊髓功能具有保护作用,二者联合应用具有协同作用.     

甲基强的松龙对急性脊髓损伤治疗的药理作用

甲基强的松龙对急性脊髓损伤治疗的药理作用郝定均，周晓渝，袁福镛近年来，大量动物实验和临床研究证明，大剂量甲基强的松龙（ｍｅｔｈｙｌｐｒｅｄｎｉｓｏｌｏｎｅ，ＭＰＳ）可阻止外伤后脊髓的变性及坏死。一组双盲法研究的结果表明，伤后８ｈ内的脊髓损伤患者，２４...     

大剂量甲基强的松龙对大鼠损伤脊髓中神经生长因子的影响

神经生长因子是神经系统最重要的生物活性分子之一，其作用广泛，效应细胞多达十余种。用新和素－生物素化酶联免疫吸附测定术检测大鼠正常脊髓、损伤脊髓以及大剂量甲基强的松龙治疗的损伤脊髓中神经生长因子的变化。     

大剂量维生素C与小剂量甲基强的松龙联合治疗大鼠急性脊髓损伤初步研究

目的:研究大剂量维生素C(VitC) 小剂量甲基强的松龙(MP)对大鼠急性脊髓损伤(SCI)的疗效。方法:SD成年大鼠64只,采用Allen法(7g×4cm)在T11造成急性SCI动物模型。动物随机分为:MP治疗组(A组)﹑VitC 1/2MP治疗组(B组)﹑VitC治疗组(C组)﹑对照组(D组)。伤后48h行脊髓形态学检查(HE染色 Olsiwski氏小体染色)、测定脊髓含水量,伤后2周进行行为学检查(斜板实验 Gale评分)。结果:B组SCI后48h脊髓坏死及出血范围明显轻于D组,伤后2周行为学指标优于D组(P<0.05),与A﹑C组相似(P>0.05);伤后48h脊髓含水量明显低于A组﹑C组﹑D组,神经元残存Olsiwski氏小体数量明显高于A组﹑C组及D组(P<0.05)。结论:大鼠急性SCI后早期使用大剂量VitC 小剂量MP具有治疗作用,效果优于单独应用大剂量MP或VitC治疗。     

大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤预防保护作用的研究

目的：探讨大剂量甲基强的松龙对急性脊髓损伤大鼠神经功能的预防保护作用。方法：采用Allen‘s重物打击模型，大鼠随机分为对照组、脊髓损伤组、预防使用大剂量甲基强的松龙组。在脊髓损伤后24h和72h对大鼠进行神经功能评分(Tarlov评分)，对损伤部位脊髓行病理形态学、超微结构及神经细胞凋亡观察结果：与脊髓损伤组相比，预防使用大剂量甲基强的松龙组大鼠损伤脊髓的病理形态及超微结构改善：Tarlov评分明显提高；神经细胞凋亡明显减少。结论：预先使用大剂量甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤有预防性保护作用。     

硫氧还蛋白对大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A表达的影响

目的 观察经硬膜外注入硫氧还蛋白(Trx)对大鼠急性脊髓损伤(ASCI)后脊髓组织中Nogo-A表达的影响,探讨其对脊髓损伤的保护作用.方法 成年Wister大鼠56只,分为假手术组(A组,n=8)、损伤对照组(B组,n=24)和Trx治疗组(C组,n=24).B、c组用改良Allen's法以30 g/cm致伤大鼠T8脊髓制作损伤模型,同时在蛛网膜下腔置管,C组术后即刻和随后每天1次按0.75mg/kg从硬膜下导管推入硫氧还蛋白,B组在相同时问点给予等量生理盐水;A组打开椎板后蛛网膜下腔置管,不损伤脊髓,不给药.在术后3、7、14 d分别对其进行后肢运动功能BBB评分(n=8),评分完毕即处死动物,取受损节段脊髓组织行免疫组织化学观察脊髓组织中Nogo-A阳性细胞的表达,同时计数阳性细胞.结果 各时间点B组大鼠BBB评分均显著低于A组(P<0.01),伤后7、14 d时C组评分显著高于B组(P<0.05或0.01).B组在术后7与14日Nogo-A表达均显著高于A组(P<0.01);C组在伤后7、14 d的表达量显著低于B组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 大鼠急性脊髓损伤后Nogo-A显著升高,Trx能明显抑制Nogo-A的表达,可能促进轴突的再生.     

大鼠脊髓损伤后神经生长抑制因子Nogo-A的表达

目的研究神经生长抑制因子Nogo—A在大鼠脊髓损伤组织中不同时间点的表达情况．探讨Nogo—A基因在脊髓损伤时对神经再生的作用．方法建立急性脊髓损伤模型,采用原位杂交技术结合免疫组化技术检测。结果原位杂交法显示：Nogo-A mRNA在脊髓损伤后1d表达下降,3d升高,7d表达最高.免疫组化显示：Nogo—A含量在脊髓损伤后1d表达下降,3d开始上升,7d表达最高.结论Nogo-A在脊髓损伤后1d表达不明显,而后随时间的延长表达逐渐增加．表明脊髓损伤后Nogo-A表达先降低后升高．可能是造成成年哺乳动物损伤后神经再生障碍的重要原因之一.     

高压氧预处理对老龄大鼠全脑缺血再灌注损伤时脑皮质Nogo mRNA、Nogo-A及NgR蛋白表达的影响

目的 研究高压氧预处理对老龄大鼠全脑缺血再灌注损伤时Nogo mRNA、Nogo-A及NgR蛋白表达的影响,探讨其改善认知功能的可能机制.方法 雄性SD大鼠42只,月龄14月,随机分为4组:对照组(C组,n=6)、高压氧组(H组,n=12)、脑缺血再灌注损伤组(I/R组,n=12)和高压氧预处理组(HOP组,n=12).H组和HOP组每天置于高压氧舱内1h,氧压为0.2 MPa,连续5 d,最后1次高压氧处理后24 h时I/R组和HOP组采用改良Pulsinelli四血管闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,全脑缺血10 min.再灌注24 h时H组、I/R组和HOP组随机取6只大鼠断头取脑,分离大脑皮质,采用实时荧光定量PCR法检测Nogo mRNA的表达水平,Western blot法检测Nogo-A及NgR蛋白的表达水平.余大鼠自由喂养5 d后采用Morris水迷宫实验测定认知功能.结果 与C组比较,I/R组和HOP组认知功能降低,Nogo mRNA及Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05);与I/R组比较,H组和HOP组认知功能提高,Nogo mRNA及Nogo-A蛋白表达下调(P＜0.05).各组NgR蛋白表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 高压氧预处理通过抑制脑皮质Nogo mRNA及Nogo-A蛋白表达上调,改善老龄大鼠全脑缺血再灌注损伤时的认知功能.     

Silicone rubber microangiography of injured acute spinal cord after treatment with methylprednisolone and vitamin E in rats

STUDY DESIGN: An experimental study of changes in the microvasculature of the injured spinal cord that occur with methylprednisolone and vitamin E treatment. OBJECTIVE: To determine the effect of treatment with the methylprednisolone and vitamin E on the microvasculature of the traumatized spinal cord. SUMMARY OF BACKGROUND DATA: Silicon rubber microangiography provided an excellent three-dimensional method for defining the distribution of vasculature in untreated and treated rats after injury. Therefore, silicone rubber microangiography was helpful for elucidating the pathophysiology of posttraumatic ischemia and hemorrhages in the spinal cord. METHODS: In this study, 30 adult rats underwent laminectomy between C7 and T2 followed by extradural spinal cord clipping to produce the compression injury. A control group of 10 rats was left untreated, and 10 rats were treated with methylprednisolone (30 mg/kg bolus and 5.4 mg per hour for 24 hours). Another 10 rats were treated with methylprednisolone and vitamin E (100 U/kg per day). The animals were killed 4, 24, or 48 hours after injury. Silicon rubber microangiography was performed after injury to assess the vasculature of rats' spinal cord. Spinal cord injury causes rapid elevation of noradrenalin, adrenaline, and dopamine. Venous blood samples were taken from all animals before the silicone rubber microangiography was performed. RESULTS: The compression of the spinal cord followed by postinjury treatment with the methylprednisolone and combination methylprednisolone and vitamin E resulted in a ischemic area smaller than that in the untreated group. Adrenaline, noradrenalin, and dopamine levels were less than those in the untreated group. CONCLUSIONS: Findings showed that the addition of vitamin E to the methylprednisolone treatment made no difference in the extent of the ischemic area as compared with methylprednisolone treatment given alone. However, the statistical analysis did not show a significant difference between the treated and untreated groups.     

神经病理性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化

目的 评价神经病理性痛大鼠背根神经节和脊髓背角Nogo-A蛋白表达的变化.方法 健康成年雄性SD大鼠72只,体重250～300 g,采用随机数字表法,将大鼠随机分为3组(n=24):对照组(C组)、假手术组(S组)和神经病理性痛组(NP组).C组不做任何处理,NP组采用结扎并剪断胫神经和腓总神经的方法制备大鼠神经病理性痛模型,S组仅切皮暴露坐骨神经但不结扎和剪断神经.于结扎后1、7、14、21 d时采用yon Frey丝测定大鼠机械痛阈.于各时点随机取6只大鼠处死后取损伤侧L5背根神经节和L4,5脊髓,采用免疫荧光标记法测定Nogo-A蛋白的表达(n=3),采用Westernblot法测定Nogo-A蛋白的表达(n=3).结果 与C组和S组比较,NP组大鼠结扎后7、14、21 d时机械痛阈降低,结扎后7、14 d时背根神经节Nogo-A蛋白表达下调,结扎后14、21 d时脊髓背角Nogo-A蛋白表达上调(P＜0.05).结论 背根神经节及脊髓背角Nogo-A蛋白可能在外周神经损伤诱发大鼠神经病理性痛过程中发挥重要作用.

Abstract：

Objective To investigate the changes in the expression of Nogo-A protein in the dorsal root ganglion (DRG) and spinal dorsal horn in a rat model of neuropathic pain (NP) .Methods Seventy-two male SD rats weighing 250-300 g were randomly divided into 3 groups ( n = 24 each) : control group (group C) , sham operation group (group S) and NP group. NP was induced by ligation and severance of tibial and common fibular nerves according to the technique described by Isabelle et al. The mechanical withdrawal threshold (MWT) to von Frey filament stimulation was measured at 1, 7, 14 and 21 days after ligation. Six rats in each group were randomly selected at each time point and sacrificed (3 for determination of Nogo-A protein expression by immunofluorescence, 3 for determination of Nogo-A protein expression by Western blot) . The L5 DRG and L4,5 segment of spinal cord on the injured side were removed for determination of Nogo-A protein expression by immunofluorescence and Western blot. Results Compared with the groups C and S, MWT was significantly decreased at 7, 14 and 21 days after ligation, the expression of Nogo-A protein in the DRG was down-regulated at 7 and 14 days after ligation and the expression of Nogo-A protein in the spinal dorsal horn was up-regulated at 14 and 21 days after ligation ( P ＜0.05) .Conclusion The Nogo-A protein in the DRG and spinal dorsal horn may play an important role in peripheral nerve injury-induced NP in rats.