细胞外组蛋白在炎症反应中的作用机制

背景 组蛋白是真核生物染色质的基本结构蛋白.组织损伤、细胞坏死时被释放到细胞外成为细胞外组蛋白.新近研究发现细胞外组蛋白作为一种危险信号分子或炎性介质,在启动和加重炎症损伤中有重要的作用. 目的 回顾近年来国内外关于细胞外组蛋白的研究,为细胞外组蛋白在创伤后炎症反应中作用机制的研究提供参考. 内容 阐述了组蛋白的结构、生物学功能和细胞外组蛋白的来源,并且从脓毒血症、肝损伤、肺损伤、肾疾病以及抗组蛋白治疗等多方面探讨细胞外组蛋白在创伤后炎症反应的作用和可能机制. 趋向 对其深入研究将为脓毒血症等炎性疾病的治疗提供新的作用靶点和理论依据.     

雷公藤甲素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡及机制的研究

近年研究表明,雷公藤甲素具有较强的抗肿瘤活性,但对其诱导人胰腺癌细胞凋亡及其机制的研究较少.本研究小组应用雷公藤甲素干预人胰腺癌PAC-1细胞,探讨诱导胰腺癌细胞的凋亡及其可能的机制.     

雷公藤甲素对PAN致足细胞损伤中自噬作用的影响

目的:通过观察雷公藤甲素对氨基核苷嘌呤霉素(puromycin amino nucleotide,PAN)损伤足细胞的m TOR通路及自噬水平的影响,探讨雷公藤甲素(triptolide,TP)对m TOR-自噬通路的影响及其保护足细胞的可能机制。方法:体外培养的小鼠足细胞系(MPC5)为研究对象,PAN分别不同时间(0 h、1 h、3 h、4 h、6 h、24 h)刺激小鼠足细胞,检测p-m TOR、Beclin1、synaptopodin表达含量的变化,成功构建PAN致足细胞损伤模型。后将足细胞随机分为以下4组:(1)对照组(Con组);(2)PAN组(PAN组,PNA 50μg/ml);(3)雷帕霉素(rapamycin,Rap)组(Rap组,PNA 50μg/ml+RAP 200 ng/ml);(4)PAN+TP组(TP组,PNA 50μg/ml+TP 10 ng/ml)。各组培养时间均为4 h;采用western blot检测足细胞p-m TOR、p-Akt、p-ULK1、LC3、Beclin-1、Synaptopodin蛋白表达量。结果:PAN处理不同的时间梯度,与Con组相比,PAN处理4 h后,诱导p-m TOR的表达、减少Beclin1、synaptopodin表达(P0.05),成功建立PAN作用致体外足细胞损伤模型。与PAN组比较,雷公藤甲素可使p-m TOR、p-ULK1及p-Akt的表达明显上调(P0.05),而LC3、Beclin1及Synaptopodin的表达明显下降(P0.05)。结论:实验表明足细胞损伤可能与足细胞内自噬水平的变化有关,PAN刺激可能呈时间依赖性通过m TOR通路降低足细胞自噬水平,诱导足细胞损伤;雷公藤甲素可能通过作用m TOR通路调节足细胞自噬水平,从而对足细胞起保护作用。     

MiR-30c-2-3p对足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素干预作用研究

目的:探讨miR-30c-2-3p对小鼠足细胞Nephrin、Podocin保护作用及雷公藤甲素(TP)干预作用。方法:采用嘌呤霉素(PAN)致小鼠足细胞损伤的体外模型,将足细胞分成5组:空白组、转染阴性质粒组(阴性质粒组)、转染阴性质粒+PAN组(阴性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN组(阳性质粒+PAN组)、转染miR-30c-2-3p+PAN+TP组(阳性质粒+PAN+TP组)。瞬时转染miR-30c-2-3p mimics,质粒终浓度均为50 nmol/L,转染6 h后进行药物干预,PAN干预浓度均为45 mg/L,TP干预浓度均为1 ng/ml,药物干预时间均为48 h。CCK-8法检测足细胞活力;实时荧光定量PCR检测细胞中miR-30c-2-3p表达;Western Blot检测足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达。结果:(1)阴性质粒+PAN组足细胞活力明显低于空白组及阴性质粒组(P0.01),阳性质粒+PAN组较阴性质粒+PAN组足细胞活力提高(P0.05),使用TP干预后其活力进一步提高(P0.05)。(2)与空白组、阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组miR-30c-2-3p表达减少,差异有统计学意义(P0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组、阳性质粒+PAN+TP组miR-30c-2-3p表达均增加(P0.05);但与阳性质粒+PAN组相比,雷公藤甲素干预组未见统计学意义(P0.05)。(3)与空白组及阴性质粒组比较,阴性质粒+PAN组Nephrin、Podocin两者表达均减少,差异有统计学意义(P0.01);与阴性质粒+PAN组相比,阳性质粒+PAN组Nephrin、Podocin蛋白表达增加(P0.05);在使用了TP干预后两者表达进一步增加(P0.05)。结论:PAN能降低足细胞活力,降低miR-30c-2-3p表达,而增加其表达可以上调足细胞活力以及Nephrin、Podocin的表达。TP可以减轻PAN诱导的足细胞损伤以及Nephrin、Podocin的表达下降,但其作用机制似乎与miR-30c-2-3p无关。     

一氧化氮在炎症反应中的作用

一氧化氮（ＮＯ）在炎症反应中具有重要作用。在正常情况下内皮源性ＮＯ具有抑制炎症反应的机作用，病理情况下诱导型ＮＯ合成酶合成大量的ＮＯ则有细胞毒作用，中重炎症反应。了解ＮＯ在炎症中的作用对多种疾病的预防和治疗具有指导意义。     

雷公藤甲素干预足细胞 snail1、nephrin 表达的研究

目的：通过观察高糖刺激对小鼠足细胞 snail1、nephrin 表达的影响及雷公藤甲素（triptolide,TP）的干预作用,探讨 TP 保护足细胞的分子机制。方法：以体外培养的小鼠永生化足细胞为研究对象,将其分为正常糖组、高糖组、甘露醇组、TP 干预组,培养时间为48 h。采用荧光定量 PCR 法和 western blot 分别检测各组足细胞 snail1、nephrin mRNA 和蛋白的表达量。结果：与正常糖组相比,高糖刺激可以上调足细胞 snail1表达、下调 nephrin 表达;与高糖组相比,TP 干预组 snail1表达减少,而 nephrin 表达增加。结论：TP 可以减轻高糖引起的 snail 表达上调和 nephrin 表达下调,这可能是雷公藤甲素发挥足细胞保护作用的重要分子机制。     

雷公藤甲素抑制阿霉素肾病大鼠足细胞凋亡的机制研究

目的:观察雷公藤甲素对阿霉素肾病(ADRN)大鼠足细胞凋亡的影响并初步其可能机制。方法:将45只Wistar大鼠随机分为对照组(N)、模型组(ADR)及治疗组(T)。其中ADR组和T组给予一次性尾静脉注射阿霉素6.5 mg/kg构建ADRN模型大鼠,T组给予雷公藤甲素(200μg·kg~(-1)·d~(-1))干预8周。于2、4、6、8周分别检测24 h尿蛋白定量,观察各组大鼠的生化指标及肾组织学改变,TUNEL法测足细胞凋亡,WT-1免疫组织化学染色检测肾小球足细胞数,RT-PCR检测Synaptopodin、p53、Notch1 mRNA表达变化,western印迹测定Synaptopodin、Notch1、Hes1的蛋白表达。结果:(1)ADR组各时间点24 h尿蛋白定量、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)胱抑素C(Cys C)均高于N组,而足细胞计数显著降低,肾小球系膜区增宽,且系膜细胞增生,T组Scr、Cys C低于ADR组(P0.05),足细胞数明显增加(P0.05),同时病理改变较其减轻。(2)8周末时ADR组Synaptopodin mRNA和蛋白表达降低,p53 mRNA表达升高,足细胞体积肿胀增大,凋亡足细胞数目比N组明显增多(P0.05);与ADR组相比,T组Synaptopodin mRNA和蛋白表达增加,p53 mRNA表达下降,凋亡足细胞数目较ADR组明显减少(P0.05)。(3)ADR组Notch1 mRNA和蛋白的表达以及Hes1蛋白的表达均高于N组(P0.05),T组Notch1mRNA和蛋白的表达及Hes 1蛋白的表达低于ADR组(P0.05)。结论:雷公藤甲素可抑制ADRN的足细胞凋亡,其保护足细胞的作用可能与降低Notch信号通路的表达有关。     

脾功能亢进与炎症细胞反应

脾脏是机体最大的外周免疫器官,具有强大的抗感染和抗肿瘤等功能[1-2]。脾脏外科的发展经历了切脾术和保脾术2个阶段。切脾术是脾脏外科发展的初级阶段,保睥术是脾脏外科发展的成熟阶段。通过长期临床实践,脾损伤实施保脾术已被外科医师所共识,血液病实施保脾术仅被外科医师所尝试,对门静脉高压巨脾“切”与“保”一直存存争议[3]。     

雷公藤多甙对糖尿病肾病患者微炎症反应的影响

目的探讨雷公藤多甙对糖尿病肾病患者微炎症反应的影响。方法将58例糖尿病肾病患者随机分为普通治疗组（DN组）和雷公藤多甙治疗组（TL组）,共治疗3个月。Ficoll法分离外周血单个核细胞（PBMC）并于体外培养,观察雷公藤多甙对培养的PBMC的作用。用放射免疫法测定患者血清和PBMC上清液肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）的浓度,EMSA测定PBMC核因子-κKB（NF-κB）的活性。选择20名性别、年龄匹配的健康者作为对照组（NO组）。结果①与NO组治疗前相比,DN组和TL组治疗前血自蛋白降低,24h尿蛋白定量升高,血TNF-α和IL-1升高（P〈0．05）。②治疗后,与DN组相比,TL组患者血白蛋白升高,24h尿蛋白定量降低,血TNF-α和IL-1降低（P〈0．05）。③与NO组治疗前相比,DN组和TL组治疗前PBMC基础分泌TNF-α和IL-1增加,PBMC NF-κB活性升高（P〈0．05）。雷公藤多甙处理后,PBMC分泌TNF-α和IL-1明显减少,NF-κB活性降低（P〈0．05）。结论雷公藤多甙通过抑制PBMC活性及循环微炎症反应发挥治疗糖尿病肾病作用。     

雷公藤甲素增强三阴性乳腺癌细胞对顺铂敏感性的实验研究

目的:探讨雷公藤甲素是否可增强三阴性乳腺癌(TNBC)对顺铂的敏感性及其作用机制。方法 :MTT实验检测雷公藤甲素、顺铂、雷公藤甲素联合顺铂对TNBC细胞增殖的影响;细胞周期实验检测雷公藤甲对TNBC细胞周期的影响;Western blot实验检测雷公藤甲素对PARP1、XRCC1和RAD51蛋白的影响。结果:雷公藤甲素可抑制TNBC细胞的增殖,并呈剂量依赖性;MDA-MB-231细胞的IC50值为(36.37±3.4)nmol/L,BT549细胞的IC50值为(52.78±4.2)nmol/L;雷公藤甲素可将TNBC细胞周期阻滞于S期;30 nmol/L的雷公藤甲素可明显减弱PARP1、XRCC1和RAD51蛋白的表达,抑制RCC1/PARP1信号通路传导;雷公藤甲素可增强顺铂对TNBC的敏感性。结论:雷公藤甲素通过抑制RCC1/PARP1信号通路的传导,阻止顺铂引起的DNA损伤修复,增强TNBC细胞对顺铂的敏感性。     

不饱和脂肪酸在抗炎症反应中的作用

目的探讨不饱和脂肪酸（ＵＦＡｓ）在炎症反应中的预防作用。方法应用大鼠盲肠结扎穿孔法制作炎症反应模型,研究ＵＦＡｓ对动物细胞膜的影响。结果ＵＦＡｓ明显降低炎症动物磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）的活力（Ｐ＜０．０５）,恢复膜磷脂（ＰＬ）成分和花生四烯酸（ＡＡ）含量（Ｐ＜０．０１）,降低膜脂相变温度（Ｔ）,增加膜脂流动性（Ｐ＜０．０１）。ＵＦＡｓ减少炎症动物血浆及细胞培养液中的炎性介质（Ｐ＜０．０１）,减轻自由基对细胞膜的损伤（Ｐ＜０．０５）。结论术前给炎症大鼠口服鱼油能减轻动物的炎症反应,表明ＵＦＡｓ对炎症反应有预防作用。     

树突状细胞体内回输对烫伤小鼠过度炎症反应的调控作用

目的:观察树突状细胞(DCs)与调节性树突状细胞(CD11clowCD45RBhigh DCs)体内回输对烫伤所致腹腔炎症反应的影响.方法:采用15%体表面积Ⅲ度烫伤[(99.0±0.5℃)沸水中8 s]小鼠模型.伤后即刻腹腔注射林格液(1 ml/只)抗休克治疗(烫伤组,n=21)或者腹腔注射加入自小鼠脾脏分离纯化而得...     

PC-PLC调节炎症反应及细胞生理过程的分子机制研究进展

磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C(PC-PLC)是存在于多种细胞中的一种磷脂酶,能催化激活下游信号分子,参与细胞信号转导,调节细胞增殖、分化和凋亡过程,并在细胞免疫和炎症的发生与维持过程中发挥关键作用。进一步的深入研究将推动PC-PLC在基础研究和临床应用上的发展。     

雷公藤甲素对IgA肾病患者外周血单个核细胞炎性反应及凋亡的影响

目的 探讨IgA肾病(IgAN)患者外周血单个核细胞（PBMC）炎性因子分泌及自身凋亡状态,以及雷公藤甲素(TP) 对其调节的相关机制。 方法 取IgAN患者（n=29）及健康人（n=16）外周血,分别通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和硝酸还原酶法（Griess法）检测血浆肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）和一氧化氮(NO)表达情况。体外培养IgAN患者PBMC,以不同浓度TP刺激PMBC,四唑盐比色间接法（MTT）检测TP对细胞生长的抑制效应。根据MTT结果,分别分为IgAN患者PBMC组、植物血球凝集素（PHA,10 mg/L,促细胞分裂原）模型组和PHA（10 mg/L）+TP（12.5 μg/L、25 μg/L）处理组。ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6的分泌情况;Griess法检测上清液中NO含量;流式细胞仪分析细胞凋亡率;RT-PCR法、Western印迹法检测PBMC中B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱天冬蛋白酶（caspase）-9、caspase-3基因和蛋白表达变化。 结果 IgAN患者血浆TNF-α[（131.57±50.61） ng/L比（30.24±18.93） ng/L,P < 0.01],IL-6[（76.36±25.21） ng/L比（35.08±16.59） ng/L,P < 0.01]和NO[（46.36±12.93） μmol/L比（26.61±10.87） μmol/L,P < 0.01]均显著高于健康人,PBMC凋亡率亦显著高于健康人[（16.88±5.66）%比（8.67±3.87）%,P < 0.01]。TP可抑制IgAN患者PBMC分泌 TNF-α、IL-6 和NO,诱导其凋亡;也可抑制Bcl-2表达,增加Bax、caspase-9、caspase-3表达。 结论 IgAN患者体内PBMC处于高度活化状态,并且凋亡率增高。TP能有效抑制IgAN患者PBMC的炎性活化状态,并可能通过线粒体途径改变Bcl-2蛋白家族抗凋亡因子和促凋亡因子平衡而诱导IgAN患者PBMC凋亡。     

Toll样受体在介导免疫及炎症反应中的作用

Toll样受体是近年发现的在天然免疫及炎症反应中起重要作用的一类跨膜受体,对Toll样受体的认识主要源自 对TLR2和TLR4在介导内毒素LPS信号转导中作用的研究。本文就Toll和Toll样受体的结构、成员、信号通路及其在免疫及 炎症反应中的作用作一综述。     

Toll样受体在介导免疫及炎症反应中的作用

Toll样受体是近年发现的在天然免疫及炎症反应中起重要作用的一类跨膜受体，对Toll样受体的认识主要源自对TLR2和TLR4在介导内毒素LPS信号转导中作用的研究。本文就Toll和Toll样受体的结构、成员、信号通路及其在免疫及炎症反应中的作用作一综述。     

HSF-1 抑制HMGB1 所致炎症反应的作用及机制

目的：探讨热休克转录因子1（HSF-1）抑制高迁移率族蛋白1（HMGB1）引起炎症反应的作用及机制。 方法：RAW264.7细胞分别转染含HSF-1的质粒（HSF-1过表达组）和空白质粒（阴性对照组）后,以无处理的RAW264.7细胞作为空白对照组,用Western blot法检测各组细胞HSF-1蛋白的表达;将以上3组细胞分别用HMGB1（1 μg/mL）刺激后,用ELISA法测定TNF-α水平、Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族（MAPK）通路和NF-κB通路相关蛋白的表达、非放射性凝胶阻滞（EMSA）检测NF-κB与DNA结合活性。 结果：Western blot结果显示,HSF-1过表达组HSF-1蛋白表达量较阴性对照组与空白对照组明显升高（均P<0.05）,而后两组间HSF-1蛋白表达量无统计学差异（P>0.05）;HMGB1作用4 h,HSF-1过表达组TNF-α水平较阴性对照组与空白对照组明显降低（均P<0.05）,而后两组间无统计学差异（P>0.05）;HMGB1作用不同时间后,各组细胞MAPK通路相关蛋白p-ERK、p-JNK、p-p38以及NF-κB通路相关蛋白p-IKα-B的表达均无统计学差异（均P>0.05）;EMSA结果显示,HMGB1作用1 h后,HSF-1过表达组NF-κB灰度值明显低于阴性对照组与空白对照组（均P<0.05）,而后两组间无统计学差异（P>0.05）。 结论：HSF-1过表达可以减少HMGB1引起的TNF-α表达,其分子机制与MAPK通路的活化无关,但与NF-κB和DNA的结合能力有关。     

炎症反应在前列腺癌骨转移中的作用研究进展

骨转移是前列腺癌晚期最常见的并发症,而炎症反应在前列腺癌骨转移的发生、发展中扮演着重要的角色,广泛参与骨转移肿瘤微环境的形成和肿瘤细胞的侵袭、转移过程;通过对其作用机制的研究,有望寻找到预防和治疗前列腺癌骨转移的新的药物靶点。本文就骨细胞、肿瘤相关巨噬细胞、肿瘤相关成纤维细胞、趋化因子和趋化因子受体、炎性细胞因子在前列腺癌骨转移过程中的作用及机制的研究进展进行综述。     

炎症反应在主动脉瘤发病中作用的研究进展

主动脉瘤( aortic aneurysm,AA)是指由于主动脉壁降解,血管壁对高管腔内压力抵抗力进行性下降[1],最终导致血管腔直径扩张,超出正常的50％.AA的发生与多种因素有关.临床发现其发生常伴随血管腔内血栓形成、病原微生物感染、自身免疫反应以及动脉粥样硬化等疾病.这些疾病都可通过炎症反应导致AA的发生并起着关键的作用,但其确切发病机制目前仍存在争议.现就炎症反应在AA发病中作用的研究进展综述如下.