人乳头瘤病毒高通量分型检测研究进展

人乳头瘤病毒的存在与多种皮肤粘膜的良、恶性增生特别是泌尿生殖系癌的发生发展密切相关 ,其各型序列与其生物学行为存在着高度相关性 ,因此人乳头瘤病毒及其分型的高通量检测对判断感染者预后、指导治疗具重要临床价值。近年 ,在各套通用引物系统基础上的高通量分型检测技术得到较大的发展 ,有望进入临床检测。     

人乳头瘤病毒高通量分型检测研究进展

人乳头瘤病毒的存在与多种皮肤粘膜的良、恶性增生特别是泌尿生殖系癌的发生发展密切相关，其各型序列与其生物学行为存在着高度相关性，因此人乳头瘤病毒及其分型的高通量检测对判断感染者预后、指导治疗具重要临床价值。近年，在各套通用引物系统基础上的高通量分型检测技术得到较大的发展，有望进入临床检测。     

人乳头瘤病毒核酸检测试剂盒评价

目的评价人乳头瘤病毒(HPV)核酸检测剂盒的性能。方法用HPV基因分型参考品作为标准品,按照抽验方案的要求对抽样的HPV核酸检测试剂盒[聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法]的准确度、特异度和检测限进行评价。结果准确度和检测限的结果均符合企业产品注册标准的要求,而特异度结果中存在着HPV型别交叉反应现象。结论医疗器械监督抽验工作应将国产和进口医疗器械产品的抽验工作均纳入体系,持续监测产品的性能。     

人乳头瘤病毒分型检测应用于宫颈癌筛查研究进展

宫颈癌是女性常见恶性肿瘤之一,发病率仅次于乳腺癌,在发展中国家,宫颈癌发病率位于女性恶性肿瘤之首.据调查,全世界每年约有50万人罹患宫颈癌,30万患者死亡,其中80%发生在发展中国家[1];中国每年新发病例约10万,占世界宫颈癌新发病例的四分之一,近年来有年轻化趋势[2].     

环介导等温扩增对人乳头瘤病毒可视化分型检测

目的 应用环介导等温扩增(LAMP)可视化检测人乳头瘤病毒(HPV)16、18、52、58亚型,探索LAMP技术在基层或现场的使用前景.方法 首先,收集临床疑似HPV感染患者的宫颈脱落细胞标本.然后分别根据HPV16、18、52、58亚型E6、E7区域设计LAMP引物并优化反应体系,通过扩增不同亚型的模板验证这引物的特...     

分子杂交技术在人乳头瘤病毒分型检测中的应用

目的 了解人乳头瘤病毒（HPV）型别（低危型：HPV6／11／42／43／44，高危型：HPV16／18，31，33，35，39/45/51/52/53/56/58/59/66/68/73/83/MM4）的感染和分布情况．为HPV感染的诊断和相关疾病的防治提供依据。方法 利用核酸扩增和分子杂交技术检测606例临床送检样本23种HPV型别．对检测结果进行统计分析。结果 HPV阳性检出率为21．8％，其中单一型别感染率为17．5％，两型混合感染者2．8％。三型混合感染者1．50k。HPV型别分布情况为：HPV16型21．2％、HPV11型18．8％、HPV33型12．1％、HPV58型11．5％、HPV18型9．7％、HPV6型7．9％．其余型别为18．8％。结论 本法对HPV进行基因分型。可同时检测23种HPV型别，并检出具体的感染型别，为HPV感染诊断和宫颈癌防治提供重要依据。     

上海市普陀区人乳头瘤病毒分型检测及感染情况分析

目的：探讨上海普陀区妇女宫颈人乳头瘤病毒（HPV）感染亚型及其分布情况。方法采用聚合酶链反应（PCR）体外扩增和反向斑点杂交-基因芯片技术,检测2012年1月至2013年4月连续收集的共659例在本院门诊就诊妇女的宫颈脱落细胞标本。结果659例临床标本中共检出HPV感染340例,总检出率为51.6%。21种亚型中共检出20种亚型,其中HPV43低危亚型没有检出。感染率居前5位的基因型分别是16型为15.2%、CP8304型为10.2%、6型为8.9%、52型为8.9%、58型为8.4%。单一亚型感染比率为68%,多重感染为32%。20岁以下年龄组、20~29岁、30~39岁、40~49岁、50岁及以上年龄组HPV检出率分别为53.3%,60.7%,48.6%,36.6%及57.8%。高危亚型人群中,HPV主要检出亚型为16型、CP8304型、6型、52型及58型。结论29岁及以下年龄组检出高阳性率说明HPV感染有年轻化的倾向,其中16型、52型、58型等高危型HPV感染是本地区宫颈癌发病的主要原因。     

人乳头瘤病毒分型检测在宫颈疾病筛查中的应用

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)型别检测在宫颈疾病筛查中的意义。方法 选取该院687例妇科就诊患者,对其进行HPV-DNA基因分型检测荧光实时定量PCR(FQ-PCR)检测;选取同期于该院进行妇科体检的389例健康体检妇女,对其进行HPV-DNA定量检测(FQ-PCR),检测结果大于5.0×102 IU/mL者再进行HPV-DNA基因分型检测。结果 687例患者中,HPV阳性者共164例,占23.9%;其中,单一感染者占74.3%,复合型别感染者占25.6%;复合型别感染中可见二重至四重感染,其中以二重感染最为多见。常见的型别为HPV16、52、58、35高危型。389例健康体检妇女中HPV阳性者共29例,占7.5%;其中单一感染占79.3%,复合型别感染者占20.7%,复合型别感染中可见二至三重感染,其中以二重感染最为多见。常见的型别为HPV、52、58、16、18高危型。结论 HPV感染是引起宫颈癌的主要原因,进行HPV检测和分型有助于宫颈癌的筛查和预防。     

分子杂交技术在人乳头瘤病毒分型检测中的应用

目的了解人乳头瘤病毒(HPV)型别(低危型:HPV 6/11/42/43/44,高危型:HPV 16/18/31/33/35/39/45/51/52/53/56/58/59/66/68/73/83(MM4)的感染和分布情况,为HPV感染的诊断和相关疾病的防治提供依据.方法利用核酸扩增和分子杂交技术检测606例临床送检样本23种HPV型别,对检测结果进行统计分析.结果HPV阳性检出率为21.8%,其中单一型别感染率为17.5%,两型混合感染者2.8%,三型混合感染者1.5%.HPV型别分布情况为:HPV 16型21.2%、HPV11型18.8%、HPV33型12.1%、HPV58型11.5%、HPV18型9.7%、HPV6型7.9%,其余型别为18.8%.结论本法对HPV进行基因分型,可同时检测23种HPV型别,并检出具体的感染型别,为HPV感染诊断和宫颈癌防治提供重要依据.     

人乳头瘤病毒线性杂交分型技术的建立及评价

目的建立人乳头瘤病毒（Humanpa pillomavirus,HPV）线性探针反向杂交（line probe assay,LiPA）基因分型技术,通过基因测序技术对LiPA分型检测的效果进行评价。方法利用基因工具软件比对HPVL1基因,设计HPV型别的基因探针,手工将探针点样于条形尼龙膜上,再进行LiPA杂交分型。LiPA检测的样本结果与H1）v基因测序的结果进行比较,以评价IjPA检测的效果。结果74例利用LiPA成功地作出了基因分型,其中单独一型HPV感染为40例,涉及13种不同基因型HPV,最常见的型别为HPV16,占单独感染的37．5％（15／40）;另34例为不同型别HPV混合感染,二、三重感染占主导地位,同时也检测出其它多重感染。6例HPV阳性的标本应用LiPA未能作出基因分型,DNA序列分析显示这6例分别为HPV83、84、53、59感染,这几种型别不包括在LiPA所标记的探针内。ⅡPA检测与基因测序结果分型的符合率高达90．9％（20／22）,可以检测常见的高危型和导致性传播疾病的HPV型别,结果可通过肉眼直接判读。结论HPVLiPA分型技术具有较高的敏感性和特异性,与基因测序的结果符合率高,具有临床推广使用潜力。     

外阴尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒分型研究

目的了解外阴尖锐湿疣（CA）患者人乳头状瘤病毒（HPV）感染情况及基因型特点。方法应用导流杂交基因芯片技术对64例外阴CA患者病损组织或宫颈脱落细胞进行21种HPV基因分型检测。结果64例患者中HPV感染率为73．44％,其中单一型感染率为46．88％,以HPV11型、6型为主;多重感染率为26．56％,其中含高危型的感染率为21．88％。共检出14个亚型,感染率最高为HPV11（37．5％）,其次为HPV6（26．56％）和HPV16（14．06％）,其余各型别感染率为1．56％-9．38％,低危型感染率高于高危型,但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论南宁地区外阴CA患者HPV感染以单-6、11型为主,高危型感染率较高,且表现为多重感染。     

MALDI-TOF MS检测人乳头瘤病毒18种基因型的性能评价研究

目的采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测系统检测18种高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV),建立MALDI-TOF MS检测系统的性能评价方案。方法对MALDI-TOF MS检测系统进行性能评价,验证其准确度、精密度、检测下限和抗交叉反应能力是否符合要求。初筛选取深圳市罗湖区人民医院的347份宫颈脱落细胞标本,分别采用MALDI-TOF MS、之江和Cobas48003种检测系统对HR-HPV进行检测,比较检测结果的一致性。以Cobas4800为参考标准,对MALDI-TOF MS和之江HR-HPV检测系统的灵敏度和特异度进行评价。结果MALDI-TOF MS检测系统与Sanger测序法检测结果的符合率为100.00%,结果完全一致;18种HPV型别检测下限为102~103 copy/mL,批内和批间精密度均为100.00%。多种相近生殖道病原微生物之间均无交叉反应。MALDI-TOF MS、之江和Cobas4800检测系统3种检测方法总符合率为92.51%,MALDI-TOF MS与之江检测系统检测结果的一致性高达96.83%。以Cobas4800检测系统为参考方法,MALDI-TOF MS检测系统的灵敏度和特异度均高于之江检测系统。结论MALDI-TOF MS检测系统对18种HR-HPV检测性能良好,可满足临床和科研中HPV核酸通量检测的需求。     

人乳头瘤病毒分型检测对宫颈病变患者的诊断价值

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)分型检测在宫颈病变患者诊断中的价值。方法:选择2013年8月—2015年1月在徐汇大华医院门诊行宫颈癌筛查的妇女,年龄均大于25岁,行宫颈液基薄层细胞学检测(TCT)、核酸扩增荧光PCR检测HPV。患者分为两组:HPV 01(16、35、52、53、58),HPV 02(18、31、33、45、56),共计182例。所有患者进行阴道镜下异常转化区定位活检、病理检查,其中15例行宫颈环形电切术(LEEP),取其病变较严重者为最终病理诊断。结果:以病变程度≥CINⅡ为病理学阳性,以病变程度≤CINⅠ为病理学阴性,HPV用于筛查≥CINⅡ病变的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为:93.33%、84.43%、35%、99.3%。HPV 01组阳性25例,HPV 02组阳性15例,阴性组142例。15例宫颈上皮内瘤变≥CINⅡ病变的患者中,TCT检测阳性率为53.33%(8/15),HPV阳性率为93.33%(14/15)。结论:对于宫颈病变≥CINⅡ风险更高的患者,TCT联合HPV检测有利于提高其临床检出率。     

基因芯片对尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的检测和基因分型

目的研究尖锐湿疣患者皮损HPV感染的基因型分布状况。方法采用基因芯片检测和分型方法,对该市175例尖锐湿疣患者的皮损组织进行HPV检测和分型。结果 175例尖锐湿疣组织标本中HPV阳性为167例,总阳性检出率为95.4%。各HPV炎型检出率最高依次为HPV11、6、16型。56例患者存在多重感染,占感染总数的32.0%。结论 HPV11、6、16型感染是尖锐湿疣发病的主要基因型,且HPV感染趋于多重化。     

人乳头瘤病毒核酸检测方法进展

自1974年德国科学家Harald zur Hausen等提出人乳头瘤病毒(Human papilloma virus,HPV)可能与子宫颈癌发病有关以来,国内外学者对HPV及其与疾病的关系做了大量研究.     

高通量人乳头瘤病毒分型基因诊断方法的研究

目的 建立一种可靠、简便经济、快速、高通量的人乳头瘤病毒(HPV)分型检测新方法，并推向临床应用。方法 以各型HPV通用引物行聚合酶链反应(PCR)扩增127例患者的尖锐湿疣组织和宫颈刮片，将荧光偏振检测技术与模板指导的末端延伸反应(TDI—FP)结合，应用探针杂交延伸反应对临床样本扩增产物进行HPV分型：HPV6，11，16，18，31，33，35，58检测，并以DNA序列测定结果为参照。结果 在78例患者的尖锐湿疣组织块中HPV检出率100％，其中两型混合感染14例，占18％，三型混合感染5例，占7％，三型以上混合感染1例。49例患者的宫颈刮片HPV检出率为77％，其中两型混合感染6例，占感染者的17％，三型混合感染3例，占感染者的8％，三型以上混合感染1例。但DNA序列测定方法仅能检出单独一型感染，未检出多重混合感染，两法对单一型检出符合率100％。结论 本研究初步建立了通用、特异、便捷，无需标记探针，可自动化高通量用于临床的人乳头瘤病春分型基因诊断方法。     

人乳头瘤病毒PCR

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人乳头瘤病毒基因型检测方法的研究进展

人乳头瘤病毒(HPV)的不同基因型有不同的致病性,基因型的检测和分型对了解病情、指导治疗和判断预后有重要价值。第2代杂交捕获法(HCⅡ)是目前惟一通过FDA批准的可在临床使用的检测方法,但由于其存在不能分型以及其他不足之处而要求发展更好的分型检测方法。现就人乳头瘤病毒的基因型分型方法的研究进展情况作一综述。     

人乳头瘤病毒实验室检测方法的研究进展

正人乳头瘤病毒(HPV)与宫颈疾病的关系最初于1983年由德国病毒学家Harald zur Hausen提出,现今无数研究已证实HPV感染与宫颈癌及癌前病变密切相关,是全球范围内最常见的一种性传播病毒感染[1]。至今已鉴定出200多种HPV型别,不同的型别存在致病差异性,根据HPV与宫颈癌的关系将其分为高危型HPV(hrHPV)和低危型(lrHPV)[2]。其中lrHPV主要导致湿疣类病变,而hrHPV的持续感染是引起宫颈癌及癌前病变的必要条件,将宫颈癌风险提高250倍,其检测率在宫颈癌中达到99.7%。HPV感染的型别及流行性因年龄、种族、社会经济地位和地理位置的差异而不尽相同[3-4]。     

人乳头瘤病毒整合检测方法的建立

目的 研究受感染宫颈上皮细胞中人乳头瘤病毒整合的检测方法与应用。方法 构建串联单拷贝基因重组质粒,用于对经反向斑点杂交法基因检测为16型人乳头瘤病毒感染的宫颈脱落细胞样本进行病毒的早基因分析,通过串联单拷贝基因标准化方法,对采用荧光定量PCR技术分析得到的样本中HBB、病毒早基因E2与E6的检测数据分析,计算HPV病毒整合参数与平均病毒拷贝数,推断E2基因完整性及病毒整合发生、病毒拷贝数与已知的病变进程的相关性。结果 构建的重组质粒可有效用于标准化同批次荧光定量PCR检测E2基因、E6基因和HBB基因的数据。37例16型人乳头瘤病毒阳性宫颈细胞样本中,15例样本结果为E2基因已破坏,包括10例高度病变组样本及5例正常组样本。不同组E2基因完整性差异有统计学意义(P<0.05)。E2基因被破坏的样本平均病毒拷贝数比E2基因完整样本显著减少(P<0.05)。结论 本研究建立的串联单拷贝基因标准化法用于检测16型HPV感染的宫颈细胞样本中病毒整合导致的E2基因破坏有效可行。