雪旺细胞在大鼠脱细胞异体神经基膜管中迁移的研究

目的研究大鼠自体雪旺细胞在脱细胞异体神经基膜管中的迁移情况。方法取SD大鼠坐骨神经20mm,用化学萃取法制备脱细胞神经,行大体观察、HE、抗层黏蛋白（Anti-laminin）染色。另取32只雌性SD大鼠,体重250～300g,切取自体坐骨神经2mm,置于分别长10mm的两段大鼠异体脱细胞坐骨神经基膜管之间,形成22mm长的基膜管-自体神经嵌合体,与同样长度的单纯脱细胞神经基膜管埋入肌间隙中,于5、10、15和20d取材,行HE、S-100免疫组织化学染色。结果制备的脱细胞神经基膜管外观呈半透明;HE染色示基膜管内未见细胞核存在,基膜管部分不连续;Anti-laminin染色示基膜管深褐色。基膜管-自体神经嵌合体于术后各时间点HE染色均可见细胞存在,第15天开始可见S-100阳性雪旺细胞;单纯神经基膜管在各时间点HE染色中均可见细胞存在,未见S-100阳性雪旺细胞。结论大鼠坐骨神经的自体雪旺细胞可迁移至两侧异体脱细胞神经基膜管远端,为嵌合自体神经的异体脱细胞神经基膜管修复长段周围神经缺损提供了理论依据。     

人脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管修复大鼠坐骨神经缺损

目的 探讨诱导后的脐带间充质干细胞作为组织工程种子细胞修复大鼠坐骨神经缺损的可行性.方法 从正常足月新生儿脐带中分离培养间充质干细胞并诱导分化为神经样细胞,与去细胞神经基膜管共培养以构建组织工程神经;用30只健康成年雄性SD大鼠建立坐骨神经缺损(10 mm)的动物模型并随机分成3组:A组为脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管组,B组为单纯去细胞神经基膜管组,C组为自体神经桥接组.术后10周通过神经电生理检测、组织学观察等评测效果.结果 在局部观察和肌肉测量、神经电生理检测、组织学观察等方面,脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管组(A组)神经再生及肢体功能情况良好,效果接近于自体神经桥接组(C组),明显优于单纯去细胞神经基膜管组(B组).结论 脐带间充质干细胞复合去细胞神经基膜管构建的组织工程神经可有效促进大鼠坐骨神经缺损(10 mm)的修复.     

异种神经基膜管桥接周围神经缺损的初步研究

目的探索经化学萃取的去细胞神经基膜管支架用于异种移植桥接周围神经缺损的可行性.方法 SD大鼠 30只,随机分为5组,分别制作预溃变2周(溃变支架桥接组)和新鲜的兔胫神经进行化学萃取,形成去细胞神经基膜管支架(异体支架桥接组),兔新鲜胫神经束(异种神经移植组);切取自体神经15 mm原位移植(自体神经移植组),修复大鼠坐骨神经长15mm 的缺损.坐骨神经切断后不作移植修复,为对照组.术后6个月行坐骨神经功能指数(SFI)测定和疼痛试验,用美蓝染色、免疫组织化学、透射电镜等方法对吻合口、移植体中央和远侧神经段的再生神经纤维进行形态学观察,并对再生有髓纤维的数量、直径及髓鞘厚度等进行量化分析.结果术后3个月,仅有溃变支架桥接组、支架桥接组和自体神经移植组动物患肢行走逐渐恢复.6个月时,针刺患足可引起背部肌肉收缩和下肢屈曲反应;术后6个月行SFI检测,溃变支架桥接组为-36.2%±9.7%,支架桥接组为-30.7%±6.8 %,自体神经移植组为-33.9%±11.3%,各组间比较无统计学意义(P>0.05).组织学观察见溃变支架桥接组与支架桥接组移植体中央横切面再生神经呈微束状分布.透射电镜观察见再生神经纤维具有正常的形态和结构.图像分析结果显示溃变支架桥接组再生有髓纤维的数量和直径均达到自体神经移植组的水平(P>0.05);但溃变支架桥接组再生纤维的髓鞘厚度明显小于自体神经移植组(P<0.05).结论用化学方法萃取的兔神经基膜管支架能移植于大鼠,成功桥接周围神经缺损,为应用动物神经修复人体周围神经缺损提供了实验依据.     

去细胞异体神经基膜管桥接神经缺损的实验研究

目的 探索修复周围神经缺损的新的有效替代材料。方法 将异体的预变性神经和正常神经经溶血卵磷脂裂解液处理后,得到一种没有细胞及细胞碎片的、空的神经基膜管,将其用来修复大鼠15mm坐骨神经缺损,通过一般观察、肌萎缩测量、电生理检测、连续切片组织学观察和计算机图像为评价神经再生。结果 化学抽提的预变性神经和正常神经桥接物组均获得了密集的神经再生和良好的神经功能恢复,其中前者效果更为优越。结论 这种材料极有可能成为自体神经的替代材料应用于临床较短的神经缺损的修复。     

肌基膜管结合神经生长因子修复脊髓缺损的实验研究

本实验应用肌基膜结合神经生长因子（ＮＧＦ）移植修复脊髓缺损。３０只大白鼠，于下胸段切断脊髓组织，造成５ｍｍ的脊髓缺损，分别进行：（１）１２只自体肌基膜管移植修复脊髓缺损；（２）１２只自体肌基膜管浸泡ＮＧＦ液移植；（３）６只脊髓切除后不作处理为对照组，术后１０～１２周分别取脊髓标本进行组织学评价，结果表明，肌基膜管结合ＮＧＦ移植组明显地好于单纯肌基膜管移植组，前者移植物与脊髓连接紧密，移植物中有较多     

去细胞异种神经复合神经生长因子修复神经缺损的实验研究

目的 应用含有神经生长因子(NGF)的去细胞异种神经基膜管作为神经移植替代物桥接大鼠坐骨神经缺损,观察其对神经再生的作用.方法 选用Wistar大鼠45只,随机分为3组,每组15只,于术制成右后肢坐骨神经长10 mm的神经缺损,取兔胫神经制成去细胞神经基膜管,电镜及HE染色观察神经基膜管超微结构,流式细胞仪检测去细胞前后神经主要组织相容性抗原Ⅱ(MHC Ⅱ)的变化情况.A组以含有NGF的去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,B组单纯采用去细胞异种神经基膜管桥接神经缺损,C组采用自体神经移植修复神经缺损.术后1个月行神经电生理检测即胫后肌群运动诱发电位,用HE染色、免疫组化染色、透射电镜等方法对移植体远端吻个口再生神经纤维进行形态学观察,并对再生有髓神经纤维的数量、密度、直径及雪旺细胞的密度进行量化分析.结果 移植前新鲜神经组MHC-Ⅱ检测值为72.14±19.88,去细胞组MHC-Ⅱ检测值为4.19±3.11,两组比较差异有统计学意义(t=3.817,P＜0.05);透射电镜观察显示为胶原性管道,无细胞成分.术后4周,处死前行运动诱发电位检测,神经传导速度A组为(21.16±2.31)m/s,B组为(13.37±1.89)m/s,C组为(21.43±2.18)m/s,A组与 C组比较差异无统计学意义(P＞0.05),A组与 B组比较差异有统计学意义(P＜0.05).组织学观察见3组移植体远端吻合口横切面再生神经纤维呈微束状,透射电镜观察再生神经纤维具有正常的形态和结构.A、C组再生神纤纤维数量及直径均优于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经化学萃取的去细胞兔胫神经基膜管能够移植于大鼠,成功修复大鼠坐骨神经缺损,而且复合NGF的去细胞基膜管在神经修复质量上优于单纯的去细胞神经基膜管,更加接近自体神经移植的效果.     

骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损的实验研究

作者设计用骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损，试图克服单纯骨骼肌修复神经缺损中缺乏雪旺氏细胞的不足．选实验用大白鼠４０只．随机分成Ａ、Ｂ两组，每组２０只．造成坐骨神经缺损２ｃｍ，分别用骨骼肌包埋自体神经片段及单纯骨骼肌桥接．经２个月大体观察、镜下观察及电生理测定，证实骨骼肌包埋自体神经片段修复周围神经缺损所再生的神经纤维在直径、髓鞘厚度、数量及运动神经传导速度等方面均优于单纯骨骼肌桥接．     

含有血运雪旺氏细胞的鞘膜管桥接神经缺损的实验研究

长段、粗大周围神经缺损的修复,由于自体神经移植供区来源困难,迫切需要一种理想的非神经移植材料。最理想的模型应是带血管自体神经移植,其中基底膜管具有促轴突生长并有生长导向作用,成活的雪旺氏细胞分泌促神经再生物质。近年来报道,将无血运雪旺氏细胞植入非神经桥接体中取得一定效果。自1987年3月始我们采用含有血运雪旺氏细胞的鞘膜管桥接兔坐骨神经缺损实验研究,结果同自体神经移植,目前未     

异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损的功能评价

[目的]评价异种化学去细胞神经移植修复大鼠坐骨神经缺损后神经功能恢复,从而为临床应用去细胞异种神经移植修复神经缺损提供更为充分的理论依据.[方法]雄性Wistar大鼠15只,致左侧坐骨神经1 cm缺损,以等粗兔化学去细胞神经移植修复.每2周测定坐骨神经指数,移植后4个月动物麻醉后暴露移植段神经,刺激近侧神经干、于同侧胫后肌群记录运动诱发电位,之后取移植段神经切片后行HE组织化学及NF-160免疫组织化学染色. [结果]去细胞异种神经移植物未被宿主排斥,大量神经纤维长入移植物,神经电生理及坐骨神经指数显示宿主坐骨神经功能有部分恢复.[结论]去细胞异种神经移植可以作为修复周围神经缺损的一种有效方法.     

碱性成纤维细胞生长因子对组织工程化外周神经的影响

目的　研究碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和肝素与乳兔许旺细胞、去细胞基膜管、构成的复合型组织工程化外周神经桥接体修复兔正中神经缺损的效果。　方法　新西兰兔 48只 ,建立左侧上臂正中神经 3 0mm缺损模型 ,随机分为 4组 ,分别用去细胞基膜管种植许旺细胞并复合bFGF及肝素 (Hep)的桥接体 (A组 )、去细胞基膜管种植许旺细胞的桥接体 (B组 )、去细胞基膜管复合bFGF及Hep桥接体 (C组 )、自体神经 (D组 )修复神经缺损 ,于术后 1、3个月分别进行大体观察 ,Masson三色染色光镜观察神经再生、神经内胶原纤维形成及血管形成 ,3个月检测各组桥接体运动神经传导速度 ,并行透射电镜检查 ,称量指浅屈肌肌肉湿重 ,观察神经功能恢复。　结果　去细胞基膜管种植许旺细胞并复合bFGF及Hep的桥接体组 (A组 )神经再生及功能指标 (再生有髓神经纤维密度、平均髓鞘厚度、有髓纤维直径、运动神经传导速度、肌肉湿重恢复率 )与自体神经移植 (D组 )比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。　结论　bFGF及肝素与许旺细胞、去细胞神经基膜管构成的复合型组织工程神经桥接体修复神经缺损能提高神经再生质量。     

面神经腮腺外分支的解剖学研究及其临床意义

目的 准确地描述面神经腮腺外段的分支,走行等情况,为颌面外科、头颈部整形与美容外科提供重要的形态学资料.方法 20具(40侧)新鲜成人头颈部标本,在手术显微镜下解剖观察并记录照相;利用上述形态学资料作为各种面神经损伤的诊断依据,指导相关手术的设计、分离和寻找面神经分支.结果 ①五组神经的分支数个体差异很大,平均颞支3.2支,颧支2.2支,颊支3.6支,下颌缘支1.3支,颈支恒为1支.②面神经急诊损伤探查缝合术12例,均成功.二级吻合前的损伤才具有神经缝合的条件,而二级(集中)吻合后的分支极其细小,探查、缝合基本不可能.③做面神经解剖术或者其他手术需辨清面神经各支时,颞中筋膜和咬肌筋膜是重要的标志.腮腺混合瘤切除面神经解剖术4例,跨面神经移植术2例,SMAS-颈阔肌除皱术千余例.这些手术中,发生明确的医源性面神经颧支损伤2例.结论 ①除颈支或单支的下颌缘支外,各组神经支可以被损伤或切断1～2支而不至于造成严重、永久的瘫痪;②在手术中,颞中筋膜与咬肌筋膜既是重要的保护结构,又是明确的辨别寻找标志.     

构建生物人工神经修复周围神经缺损的实验研究

目的：探讨生物人工神经对周围神经再生的作用。方法：用自体雪旺氏细胞、Ⅳ型胶原及可降解的聚乳酸导管构建生物人工神经，桥接10mm缺损的鼠坐骨神经，对照组行自体神经移植，术后8周，2组行大体观察、组织学检查及神经电生理检查。结果：实验组再生神经纤维数、再生轴突恢复率、运动神经传导速度及复合肌肉动作电位振幅均同对照组相近。结论：实验构建的生物人工神经能有效的促进周围神经再生。