三白草抗单纯疱疹病毒作用及机制

目的:病毒复制需要宿主细胞参与,包括信号通路的激活,本研究以病毒复制所需信号通路为靶点,寻找抑制单纯疱疹病毒(HSV-2)感染的有效药物。方法:观察HSV-2感染引起的Vero细胞病变效应(CPE),用MTT法检测细胞活性,评价三白草水提物冻干粉抗病毒能力;以免疫印迹法检查HeLa细胞中三白草水提物对HSV-2病毒诱导的信号通路的作用。结果:三白草水提物可以明显抑制HSV-2感染引起的CPE和病毒复制所需的NF-κB通路的活化。水提物(冻干粉)在0.10,0.03,0.01,0.003 g.L-1时对HSV-2平均抑制率分别为(70.68±3.39)%,(61.74±2.13)%,(39.31±1.10)%,(18.54±3.44)%;IC50为(0.023±0.004)g.L-1,而阳性对照阿昔洛韦100%抑制浓度为0.001 g.L-1(5.0×10-6mol.L-1);最佳药物添加时间为感染前2 h至感染后6 h之间。免疫印迹试验发现三白草水提物可以明显抑制HSV-2诱导的NF-κB核转移。结论:三白草水提物可以抑制HSV-2病毒复制,其机制与抑制病毒复制所需的NF-κB通路活化有关。     

大黄素对LPS诱导的心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响及机制

目的探讨大黄素对脂多糖(LPS)诱导的心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响及分子机制。方法培养心肌细胞H9c2,以1μg/mL的LPS诱导心肌细胞建立炎症反应模型,实验分为正常对照组、LPS诱导组、LPS+低剂量大黄素组(5μmol/L)、LPS+中剂量大黄素组(10μmol/L)和LPS+高剂量大黄素组(20μmol/L)。采用噻唑蓝比色法(MTT)检测细胞相对存活率;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF?α)、白细胞介素1β(IL?1β)I和白细胞介素6(IL?6)水平;流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞中核因子?κB(NF?κB)P65、NF?κB抑制蛋白(IκB?α)表达。在LPS+低剂量大黄素组中添加NF?κB激动剂佛波酯(PMA),观察其对心肌细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。结果与正常对照组比较,LPS诱导组心肌细胞相对存活率降低,TNF?α、IL?1β和IL?6水平增多,凋亡率升高,NF?κB P65表达上调,IκB?α表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05);低、中、高剂量大黄素均可逆转LPS诱导心肌细胞以上指标,且三剂量组间差异有统计学意义(P<0.05)。而PMA能够逆转大黄素的作用。结论大黄素能够抑制LPS诱导的心肌细胞炎症反应和细胞凋亡,该作用机制与大黄素抑制NF?κB信号通路的激活有关。     

The inhibitory effects of naringin on the growth of periodontal pathogens in vitro

Naringin is a flavonoid that is commonly found in grapefruits. The objective of this study was to evaluate the effects of naringin on the growth of periodontal pathogens such as A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis in vitro. For comparison, the effects of naringin on several oral microbes were also studied. Different concentrations of naringin solution were added to calibrated suspensions of A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis. All the suspensions were incubated for 3, 6 and 24 h in an anaerobic chamber at 37 degrees C. At each time point, selected dilutions from each culture broth were plated on blood agar plates. Colonies recovered on blood agar were visually counted on days 3 and 5, respectively. A. actinomycetemcomitans showed a significant decrease (p < 0.05) in viable counts after 3 h when naringin was added at baseline. P. gingivalis also showed a marked growth reduction in the presence of naringin, and no colony forming units could be observed after 24 h. Naringin also had an inhibitory effect against all bacteria and yeasts tested. The results suggest that naringin possesses significant antimicrobial properties on periodontal pathogens in vitro. It also has an inhibitory effect on some common oral microorganisms in low concentrations.     

姜黄色素对阿霉素肾病大鼠转录因子活性的影响

目的探讨肾病综合征(NS)大鼠肾皮质组织转录因子核因子-κB(NF-κB)、活化蛋白-1(AP-1)DNA结合活性变化及姜黄色素(CC)对其活性的影响。方法应用凝胶电泳迁移率法(EMSA)和同位素放射自显影等方法,检测阿霉素肾病大鼠模型形成过程的不同时间点NF-κB、AP-1 DNA结合活性、血液生化指标和尿蛋白量,并观察CC治疗后上述指标的变化。结果大鼠经尾静脉注射阿霉素后7 d,24 h尿蛋白排泄量开始升高,21 d出现大量蛋白尿、低蛋白血症、高血脂症。注射阿霉素后第7天肾皮质组织中NF-κB活性开始升高,第28天达高峰,明显高于正常对照组(P<0.01);AP-1活性于第14天明显升高,第28天达高峰,明显高于正常对照组(P<0.01),但CC对NF-κB活性及24 h尿蛋白排泄量无影响。结论阿霉素肾病大鼠肾皮质中NF-κB、AP-1 DNA结合活性异常升高;CC能够抑制AP-1活性,但不能抑制NF-κB活性及减少尿蛋白排泄量。     

Terminalia chebula extract acts as a potential NF-κB inhibitor in human lymphoblastic T cells

Terminalia chebula (TC) is native to southern Asia to southwestern China and is used in traditional medicine for the treatment of human ailments including malignant tumors and diabetes. This plant also has antibacterial and immunomodulatory properties. Nuclear factor kappa-light chain-enhancer of activated B cells (NF-κB) is responsible for the expression of numerous genes involved in cell survival, proliferation, angiogenesis, inflammation, invasion and metastasis, among other processes. This study aims to assess the NF-κB inhibitory effect of TC extract in human lymphoblastic T (Jurkat) cells. The effects of TC extract were investigated using the FRET-based Gene Blazer technique in transfected Jurkat-NF-κB-RE-bla cells. The concentration of TC extract required for NF-κB inhibition was determined by a cell proliferation assay. Treatment with TC extract (50 μg/mL) inhibited NF-κB activity and protected against IκBα degradation and strongly suppressed IκBα phosphorylation in Jurkat-NF-κB-RE-bla cells. This treatment might be crucial for inhibiting NF-κB translocation and activation. In addition, the TC extract downregulated certain NF-κB regulated genes, including IL-8 and MCP-1, in Jurkat-NF-κB-RE-bla cells. Moreover, gallic acid was identified from the TC extract demonstrating its ability to inhibit NF-κB activity in Jurkat-NF-κB-RE-bla cells. Further studies to identify the role of gallic acid in NF-κB inhibition may uncover the crucial antiinflammatory and antitumor properties of the TC extract.     

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎小鼠胃黏膜组织NF-κB和IκBα表达的影响

目的探讨灭幽汤对幽门螺杆菌(H.pylori)感染小鼠胃黏膜组织核转录因子-κB(NF-κB)和核转录因子-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响及其作用机制。方法采用H.pylori菌液灌胃法造模,将造模成功的小鼠按体重分为模型组、灭幽汤组、三九胃泰组、丽珠胃三联组,除模型组每日予生理盐水外,其余组分别予灭幽汤、三九胃泰、丽珠胃三联给药。采用免疫组化法观察胃黏膜组织NF-κB和IκBα蛋白的表达情况。HE染色观察小鼠胃黏膜的病理组织改变。结果正常对照组胃黏膜细胞胞浆有少量NF-κB蛋白表达,胞核内无表达,而模型组NF-κB主要位于细胞核内。与模型组比较,灭幽汤组明显抑制胃组织细胞内NF-κB的核移位,灭幽汤组IκBα的磷酸化程度较模型组明显降低(P0.05)。结论灭幽汤可能通过对降低IκBα的磷酸化程度,抑制NF-κB蛋白表达,发挥其治疗作用。     

芪黄明目胶囊对糖尿病小鼠视网膜黏附分子的作用及其机制

目的 观察芪黄明目胶囊对糖尿病小鼠视网膜黏附分子的作用并探讨其机制.方法 KK/Upj-Ay小鼠随机分为模型组,芪黄明目高、中、低剂量组,另设C57B L/6小鼠对照组.灌胃给药3个月,观察一般情况,测定空腹血糖(FBG);光镜及电镜观察视网膜形态学变化;Real Time PCR (qPCR)和Western blot法测定视网膜细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、E-选择素(E-selectin)和核因子-κB(NF-κB)表达.结果 芪黄明目能不同程度改善模型小鼠症状,降低FBG;改善视网膜病理损伤;降低视网膜ICAM-l、VCAM-1、E-selectin和NF-κB mRNA和蛋白的表达.结论 芪黄明目降低糖尿病小鼠视网膜黏附分子ICAM-1、VCAM-1、E-selectin的表达与下调NF-κB有关.     

金雀异黄素对脂多糖诱导RAW264.7细胞分泌功能的影响

目的：研究金雀异黄素对脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞RAW264.7分泌功能的影响,探讨金雀异黄素抗炎作用及其机制,为临床应用提供理论基础。方法：用脂多糖诱导巨噬细胞株Raw264.7建立体外细胞炎症模型,金雀异黄素与巨噬细胞株Raw264.7温孵1h后,加入100ng·mL-1脂多糖以诱导巨噬细胞的活化,采用Griess试剂检测细胞培养液中NO的含量,通过双抗体夹心酶联分析法和细胞转染技术观察不同浓度金雀异黄素对脂多糖刺激巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10含量及对核转录因子NF-κB和AP-1表达的影响。结果：金雀异黄素（4～111μmolL-1）能明显抑制脂多糖刺激巨噬细胞生成一氧化氮产生（P〈0.05）;显著抑制脂多糖诱导巨噬细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10（P〈0.01）,并能抑制核转录因子NF-κB和AP-1的表达。结论：本实验证明了金雀异黄素有抗炎作用,其能显著降低脂多糖诱导巨噬细胞分泌NO及细胞因子TNF-α、IL-6和IL-10的释放,通过抑制这些炎症因子的释放来达到抗炎作用,金雀异黄素抑制核转录因子NF-κB和AP-1的表达来实现的。     

导痰汤通过NF-κB信号通路抑制人脐静脉内皮细胞ICAM-1表达的研究

目的:研究导痰汤能否通过对核因子-κB(NF-κB)信号通路的调节而干预ICAM-1的表达,以揭示导痰汤治疗动脉粥样硬化的机制。方法:通过PCR和Western blot等方法,观察导痰汤对肿瘤坏因子-α(TNF-α)刺激脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养内皮细胞细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和NF-κB表达的影响。结果:TNF-α诱导组ICAM-1和NF-κB显著高于空白对照组和导痰汤对照组(P<0.01);使用导痰汤含药血清或吡咯烷二硫氧基甲酸(PDTC)处理后,ICAM-1和NF-κB p65表达显著下降(P<0.05,P<0.01);NF-κB活性与ICAM-1 mRNA水平呈显著正相关(r=0.716,P<0.01)。结论:导痰汤可以调节NF-κB信号通路,从而有效抑制TNF-α刺激所致的脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达。     

大黄上清液联合母乳对Caco-2炎症细胞核转录因子表达的影响

目的 探讨大黄上清液及母乳对坏死性小肠结肠炎（NEC）炎症细胞的分子保护机制.方法 通过运用炎症因子TNF-α诱导NEC肠道炎症细胞模型,分别加入常规培养液（A组）、1％的大黄上清液（B组）、1％的乳清（C组）、1％大黄上清液加1％乳清（D组）,采用免疫细胞化学测定各组NF-κB P65蛋白表达量及RT-PCR检测法测定各组NF-κB P65蛋白下游产物IL-1β mRNA的相对表达量.结果 与A组比较,B、C、D组均可下调NF-κB P65蛋白表达,下调程度D组最大,C组次之,B组最小.与A组比较,B、C、D组均可抑制IL-1β mRNA表达（均P＜0.01）;D组较B组效果明显（P＜0.01）;D组较C组作用强,差异有显著统计学意义（P＜0.05）,C较B组作用强,但差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 大黄上清液及乳清可抑制Caco-2炎症细胞核转录因子NF-κB P65蛋白及其下游产物IL-1β mRNA的表达,此机制可能为大黄及母乳防治NEC的作用机制之一.     

冬凌草甲素对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制研究

目的探讨冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性的拮抗作用及其机制。方法通过大剂量冲击法,诱导制备耐紫杉醇的人卵巢癌HO-8910PM细胞株(HO-8910PM/PIX),用不同浓度冬凌草甲素处理HO-8910PM/PIX细胞;或在冬凌草甲素作用HO-8910PM/PIX细胞前以NF-κB激活剂TPA进行预处理。给药后,细胞经DAPI染色,荧光显微镜下观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡情况;Western blotting检测卵巢癌细胞中NF-κB蛋白的表达。建立裸鼠卵巢癌皮下移植瘤模型。接种后8周,观察冬凌草甲素对裸鼠皮下移植瘤生长的影响;免疫组织化学法检测肿瘤组织中NF-κB的阳性表达。结果与对照组相比,冬凌草甲素呈浓度相关性抑制卵巢癌HO-8910PM/PIX细胞增殖,显著诱导细胞凋亡,而TPA可显著削弱冬凌草甲素诱导细胞凋亡的作用。与HO-8910PM细胞相比,NF-κB在HO-8910PM/PIX细胞中表达显著上调,冬凌草甲素可抑制HO-8910PM/PIX细胞中NF-κB的表达。冬凌草甲素可显著抑制裸鼠卵巢癌皮下移植瘤生长,明显减弱移植瘤组织中NF-κB的阳性表达。结论冬凌草甲素体内外对卵巢癌细胞紫杉醇耐药性具有拮抗作用,该作用可能通过抑制NF-κB的表达而实现。     

中药复方对糖尿病大鼠血管内皮核因子和单核细胞趋化蛋白-1mRNA表达的影响

目的探讨中药复方糖脉平对2型糖尿病大鼠血管内皮核因子(NF-κB)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA表达的影响。方法将大剂量链脲佐菌素腹腔注射(STZ 60 mg/kg)造模成功的Wistar大鼠随机分为模型组、糖脉平组、二甲双胍组、玉泉丸组,每2周称1次体质量并剪尾测血糖,第6周处死取主动脉标本,采用免疫组化SAB法测定NF-κB及半定量RT-PCR法检测MCP-1 mRNA表达情况。结果造模后,大鼠血糖及NF-κB和MCP-1 mRNA的表达明显增高,经治疗后,糖脉平组及二甲双胍组NF-κB和MCP-1 mRNA的表达明显降低,与模型组比较有显著性差异(P均<0.01)。结论糖脉平能减少糖尿病大鼠NF-κB和MCP-1 mRNA的表达,减轻血管内皮局部炎症反应,阻断和降低动脉硬化的形成。     

安胃丸对慢性胃炎大鼠血清炎性因子及胃黏膜核因子-κB表达的影响

目的:研究安胃丸对慢性胃炎大鼠血清炎性细胞因子及胃黏膜核因子-κB p65 mRNA(NF-κB p65 mRNA)表达的影响.方法:采用ig60％乙醇,20 mmol·L -去氧胆酸钠ig,0.05％氨水自由饮用,12周复制大鼠慢性胃炎模型,将造模成功大鼠分为模型组、安胃丸低、中、高组.安胃丸低、中、高组分别以3.06,6.12,12.24 g·kg-1·d-1 ig给药,连续给药30 d,末次给药后禁食16h取血,运用ELISA法检测给药后大鼠血清白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量变化,用原位杂交法检测大鼠胃黏膜核因子-κB p65 mRNA的表达情况.结果:安胃丸组胃黏膜上皮细胞排列整齐,腺体无萎缩现象;安胃丸组大鼠血清IL-4和IL-2水平分别高于、低于模型组,TNF-α水平较模型组显著降低,高、中剂量组大鼠胃窦黏膜NF-κB p65 mRNA的表达低于模型组,接近正常对照组.结论:安胃丸具有保护胃黏膜、减轻黏膜炎症反应的作用,其作用可能与抑制NF-κB p65 mRNA表达,减少炎性因子产生及调节机体免疫功能,维持体液免疫和细胞免疫平衡状态有关.     

糖尿病大鼠肾脏核因子-κB的表达及活血化瘀重剂的干预研究

目的探讨糖尿病肾病与核因子-κB活性表达的关系并探讨活血化瘀重剂对NF-κB活性表达的影响以及对糖尿病肾病的防治作用。方法雄性SD大鼠70只随机分成对照组10只,糖尿病1月、3月、6月组以及活血化瘀重剂干预3月、6月组各12只。分别留取肾脏标本,部分标本观测肾脏病理改变;部分标本采用免疫组化法测定核因子-κB水平。结果肾脏病理结果显示:与正常对照组相比,糖尿病3月、6月组肾脏病理改变逐步加重;免疫组化法分析结果显示核因子-κB表达在糖尿病各组均明显增强(P均0.05),干预组较糖尿病各组核因子-κB表达和病理改变均有明显改善。结论糖尿病肾病早期就出现肾脏核因子-κB活化,且随着肾脏组织病理学改变而持续活化。活血化瘀重剂有效抑制了核因子-κB的活化,从而达到肾脏保护的目的。     

茯苓多糖提取物调控CYP2E1及NF-κB炎症通路改善小鼠酒精性肝病

建立酒精性肝病(alcoholic liver disease,ALD)模型,研究茯苓多糖(Poria cocos polysaccharides,PCP)提取物对ALD小鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)及核因子κB(NF-κB)炎症信号通路的影响,探讨其对ALD的保护作用及机制。60只SPF级雄性C57BL/6N小鼠随机分为对照组、模型组、阳性药组(联苯双酯200 mg·kg^-1)、茯苓多糖低剂量组(50 mg·kg^-1)、茯苓多糖高剂量组(200 mg·kg^-1),建立Gao-binge模型并给药。观察肝脏形态及病理学变化,计算脏器指数,检测各组小鼠血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平,试剂盒分别测定小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量,ELISA法检测白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,免疫荧光染色观察巨噬细胞激活情况,Western blot分析主要代谢酶CYP2E1及Toll样受体4(TLR4)、磷酸化核因子κB p65(p-NF-κB p65)、核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白的表达。与模型组相比,PCP给药组可显著改善肝组织病理损伤情况。免疫荧光结果显示,与模型组相比,给药组肝组织炎性巨噬细胞数量减少,并且各给药剂量组ALT、AST、MDA、IL-6、TNF-α的含量显著降低(P<0.05),SOD活性显著升高(P<0.01)。茯苓多糖提取物对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其机制可能是调控代谢酶CYP2E1的表达和抑制TLR4/NF-κB炎症信号通路,减轻氧化应激和炎症损伤,抑制ALD的发展。     

解毒化瘀方对白血病K562/A02细胞耐药逆转作用及NF-κB信号表达的影响

目的:探讨解毒化瘀方中药血清对白血病K562/A02耐药细胞耐药逆转作用及NF-κB信号表达的影响。方法:采用MTT法检测解毒化瘀方中药血清对K562/A02细胞毒作用,流式细胞仪检测解毒化瘀方中药血清对K562/A02细胞内化疗药物浓度的影响,用Western blot法检测解毒化瘀方中药血清对NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα的表达的影响。结果:解毒化瘀方中药血清对K562/A02细胞生长抑制作用呈浓度依赖性,能够增加K562/A02细胞内化疗药物的浓度,下调K562/A02细胞NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα表达,从而降低NF-κB信号。结论:解毒化瘀方中药血清能够逆转K562/A02细胞耐药,其耐药逆转机制可能与下调K562/A02细胞NF-κB信号表达有关。     

川芎嗪对肝星状细胞TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体mRNA与NF-κB表达的影响

目的：探讨中药单体川芎嗪（TMP）对肝星状细胞（HSC）核因子-κB（NF-κB）、转化生长因子-β1（TGF-β1）及其Ⅰ、Ⅱ型受体表达的影响。方法：体外培养人肝星状细胞,免疫细胞化学法检测HSC中NF-κB表达以及核迁移情况,RT-PCR法检测HSC中TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体mRNA表达。结果：TMP组NF-κB表达量较少并且主要位于细胞质,很少发生核迁移。RT—PCR显示,与阴性对照组相比,TMP组TGF-β1 mRNA相对表达量均有显著性差异（P〈0．01）;TMP200mg／L、800mg／L组TβRⅠ mRNA相对表达量降低,其差异有显著性（P〈0．05或P〈0．01）;TMP200mg／L、800mg／L组TβRⅡ mRNA相对表达量均有显著性差异（P〈0．01）。结论：川芎嗪可降低HSC中NF-κB表达并抑制其核转移,降低TGF-β1及其Ⅰ、Ⅱ型受体mRNA表达,表明川芎嗪可抑制HSC活化,这可能与阻断NF-κB信号通路、阻断TGF-β／Smad通路的信号传导有关。     

蒿芩清胆汤及其拆方对湿热型流感病毒性肺炎及NF-κB水平的作用研究

目的:通过观察蒿芩清胆汤及其拆方对湿热型流感病毒性肺炎及NF-κB的干预作用,以期探讨其治疗机制。方法:通过气候仓、肥甘饮食加流感病毒滴鼻感染造模成功后,蒿芩清胆汤及其拆方组以相应中药干预,比较各组肺指数、光镜下病变程度半定量、肺组织NF-κB mRNA表达水平。结果:蒿芩清胆汤及其拆方均能不同程度降低肺指数、肺部病理改变及NF-κB mRNA表达水平,其中全方效果最佳。结论:蒿芩清胆汤具有抗湿热型流感病毒性肺炎的作用,其机制可能与抑制NF-κB活化从而减少其下游炎性细胞因子分泌,截断"炎症瀑布"效应有关。     

黄连解毒汤对大鼠心肌缺血再灌注损伤核因子NF-κB信号转导通路的影响

目的观察黄连解毒汤对在体大鼠急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法将56只SD大鼠随机等分为7组:假手术组、缺血再灌注组、溶剂(1%CMC-Na)对照组、复方丹参组及黄连解毒汤(HLJDT)低、中、高剂量组,连续给药7 d,末次给药24 h后,复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型(开胸结扎左冠状动脉前降支30 min,再灌注40 min)。免疫印迹法检查心肌NF-κB的活性,并检测各组大鼠心肌核因子IκB诱导激酶(NIK)、IκB激酶β(IKKβ)、核转录因子抑制蛋白(IκBα)的表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组NF-κB活性显著增加,NIK、IKKβ水平明显增高,IκBα的表达明显降低。与溶剂对照组比较,HLJDT中高剂量组与复方丹参组的NF-κB活性显著降低,NIK、IKKβ水平明显降低,IκBα的表达明显增加。结论黄连解毒汤对大鼠心肌缺血再灌注有保护作用,其作用机制与抑制NIK、IKKβ水平的表达,减少IκBα蛋白的磷酸化降解,从而抑制NF-κB的过度活化有关。