IL-1β对体外培养MRC-5细胞增殖、表型转化的影响

目的 探讨外源性白介素-1β(IL-1β)对体外培养的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)表型转化的影响.方法 体外培养人胚肺成纤维细胞(MRC-5),以不同浓度IL-1 β(0、0.1、1、5、10ng/ml)刺激48h和同一浓度(10ng/ml) IL-1β刺激不同时间(0、24、48、72h);采用CCK-8法检测细胞增殖情况,半定量反转录聚合酶链式反应法(RT-PC R)、Western blot检测细胞表型转化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白水平.结果 IL-1β以浓度和时间依赖性方式调节MRC-5细胞α-SMA mRNA和蛋白表达.结论 IL-1β可能通过促进肺成纤维细胞增殖和肺成纤维细胞-肌成纤维细胞的细胞表型转化,促进气道炎症后的重塑进程.     

β-1,4-半乳糖基转移酶-I在大鼠骨性关节炎模型中滑膜组织表达的意义

背景：观察β-1,4-半乳糖基转移酶-I（β-1,4-GalT-I）在手术诱导的大鼠骨性关节炎模型中的表达情况及细胞定位,并探讨其在OA病理过程中可能的生物学作用。 方法：健康成年SD大鼠90只随机分为三组：OA模型组（40只）、假手术组（40只）和正常组（10只）。采取前交叉韧带切断加内侧半月板前1/3切除法破坏SD大鼠右膝关节稳定性以建立大鼠OA模型。于术后1、2、4、6、10周取实验动物右膝关节的滑膜与软骨组织,并分离获取成纤维样滑膜细胞进行培养,利用real-time PCR检测软骨、滑膜组织及TNF-α刺激成纤维样滑膜细胞后β-1,4-GalT-I在mRNA水平的表达变化;运用Western-blotting和免疫组化检测β-1,4-GalT-I在蛋白水平的表达情况;利用免疫荧光双标法检测β-1,4-GalT-I与巨嗜细胞样滑膜细胞、成纤维细胞样滑膜细胞、中性粒细胞及TNF-α的定位情况;运用ELISA检测成纤维样滑膜细胞在脂多糖及脂多糖联合β-1,4-GalT-I抗体等刺激下TNF-α的表达情况。 结果：β-1,4-GalT-I mRNA在OA组大鼠的滑膜组织中表现出上调趋势,于术后2w、4w达到高峰;在蛋白水平,β-1,4-GalT-I在OA术后4w组的滑膜组织中达到高峰。但是,β-1,4-GalT-I在软骨组织中的表达未检测到明显差异。在OA滑膜炎症过程中,β-1,4-GalT-I主要表达于巨嗜细胞样滑膜细胞、成纤维细胞样滑膜细胞和中性粒细胞,并且β-1,4-GalT-I与TNF-α共定位。在体外细胞培养中,成纤维样滑膜细胞中β-1,4-GalT-I的表达与TNF-α刺激呈浓度和时间依赖性。此外,β-1,4-GalT-I抗体可减弱脂多糖刺激成纤维样滑膜细胞产生TNF-α的能力。 结论：β-1,4-GalT-I可能参与了OA的滑膜炎症反应,并在这一过程中发挥重要作用。 [关键词] β-1,4-半乳糖基转移酶-I;骨性关节炎;滑膜炎症;肿瘤坏死因子α;大鼠     

雷公藤单体T4对IL-1刺激引起的类风湿患者关节滑膜成纤维细胞增殖和产生IL-6的影响

目的　探讨雷公藤单体 T4对经 IL- 1刺激的体外培养的类风湿关节炎 (RA)患者的关节滑膜成纤维细胞增殖和产生 IL- 6的影响。方法　关节滑膜组织来自行关节置换术或滑膜切除术的类风湿患者。滑膜组织经体外消化使细胞分散后 ,传代培养。以培养 3代后的滑膜成纤维细胞为对象 ,先给予 IL- 1刺激 ,再加入雷公藤 T4单体。结果　 T4可抑制由 IL- 1刺激的滑膜成纤维增殖 ,但不影响 IL- 6的产生。结论　 T4的上述作用可能是其治疗RA的机制之一 ,本研究结果为 T4早日应用于临床治疗 RA提供了一定的理论依据     

HIF-1α及 VEGF 在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达及意义

目的研究类风湿性关节炎（RA）患者滑膜细胞在体外常氧和缺氧培养条件下缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的差异性及意义。方法对RA患者及骨关节炎（OA）患者的关节滑膜细胞在体外常氧和缺氧条件下分别进行培养,根据培养条件分为常氧组、缺氧6h组及缺氧12h组;采用免疫印迹法分别检测各组成纤维样滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达情况。结果与常氧组相比,缺氧6h及12h的RA和OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均显著增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。同时RA和OA患者缺氧12h组滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达高于缺氧6h组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。RA和OA患者3组滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均呈正相关（均P＜0.05）。常氧组RA与OA患者滑膜细胞的HIF-1α及VEGF的表达均无统计学差异（均P＞0.05）;而缺氧6h和12h组中RA滑膜细胞HIF-1α及VEGF的表达均高于OA滑膜细胞,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结论在缺氧条件下RA患者滑膜细胞HIF-1α及VEGF表达显著升高且密切相关,可能缺氧-HIF-1α-VEGF这一信号途径在RA的发生、发展中起着重要作用。     

巨噬细胞炎性蛋白-1α在RA和OA患者滑液的水平及意义

目的 研究类风湿关节炎（RA）患者和骨关节炎（OA）患者滑液（SF）及外周血（PB）中巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）的表达水平,探讨其在RA发病中的意义.方法 利用梯度密度离心法从RA患者SF、PB和OA患者SF中分离嗜中性核粒细胞、单核细胞,应用双抗夹心酶联免疫吸附（ELISA）法测定RA患者SF、PB及OA患者SF中MIP-1α水平,并与血沉、C-反应蛋白和SF中单核细胞数进行相关分析.结果 RA患者SF嗜中性核粒细胞MIP-1 α水平明显高于PB和OA患者SF中的水平,且与RA疾病活动性、血沉、C-反应蛋白和滑液中单核细胞数有明显相关关系.加入肿瘤坏死因子（TNF）-α经24 h培养后RA患者滑液中嗜中性核粒细胞MIP-1α表达明显增加.结论 滑液中嗜中性核粒细胞MIP-1α表达可诱导RA患者关节局部和系统性炎症,作为C-C趋化因子MIP-1α可促进单核细胞由外周血进入关节滑膜及组织,导致血管翳形成、关节破坏、变形.     

凝血酶敏感激素蛋白酶4/5在骨性关节炎滑膜中的表达及意义

目的 研究凝血酶敏感激素蛋白酶4/5 ( ADAMTS4/5)在骨性关节炎( OA)滑膜组织及滑膜细胞中的表达及意义. 方法 取6例正常者滑膜组织和6 例OA患者滑膜组织,Western blot法检测标本中ADAMTS4/5 的表达,离体培养正常者滑膜细胞. 白介素-1β( IL-1β)刺激正常滑膜细胞,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达量;IL-1RA( IL-1β阻滞剂)抑制IL-1β后,测定滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达量.结果 ADAMTS4/5 在OA患者滑膜组织中表达较正常者滑膜组织均显著增加;IL-1β刺激滑膜细胞后,ADAMTS4/5升高,IL-1RA可明显降低IL-1β诱导的滑膜细胞中ADAMTS4/5的表达. 结论 IL-1β可以按照剂量依赖方式正向调节ADAMTS4/5的表达;ADAMTS4/5 和IL-1β在OA病变机制中发挥重要的作用.     

类风湿关节炎患者滑液NK-22细胞对成纤维样滑膜细胞增殖的影响及其机制研究

目的探讨类风湿关节炎患者滑液NK-22细胞对成纤维样滑膜细胞增殖的影响及其可能机制。方法采用流式细胞术检测20例RA患者及20例健康对照外周血(peripheral blood,PB)、10例RA患者滑液(synovial fluid,SF)中NK-22细胞(NKp44+CCR6+NK细胞)比例。流式细胞术分选滑液NK-22细胞,鉴定细胞纯度;体外悬浮培养2周,佛波酯(PMA()20ng/ml)和ionomycin(0.5μmol/L)刺激后NK-22细胞培养上清液分别作用于成纤维样滑膜细胞(fibroblastlike synoviocytes,FLS)24 h、48 h、72 h、96 h,MTT法检测成纤维样滑膜细胞增殖情况。ELISA检测NK-22细胞培养上清中IL-22、T0.N05F)-;αR浓A度患。者结滑果液①NKR-A22患细者胞外比周例血为N4K.5-62%2细,明胞显比高例于为自0身.9外56周%,血明比显例高1于.31健5%康(对P<照0.外05)周。血②N流K式-22分细选胞2比×1例04个0.0N0K3%-2(2P细<胞,细胞纯度>90%。③PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清作用于成纤维样滑膜细胞24 h、48 h、72 h、96 h可明显刺激成纤维样滑膜细胞增殖(P<0.05)。④PMA和ionomycin刺激后NK-22细胞培养上清中IL-22、TNF-α浓度分别为941.82 pg/ml和368.10 pg/ml。结论类风湿关节炎患者关节液NK-22细胞可明显刺激成纤维样滑膜细胞增殖,其可能机制与NK-22细胞能分泌白介素-22(IL-22)、肿瘤坏死因子(TNF-α)有关。     

三氧化二砷对成纤维细胞分泌巨噬细胞炎症蛋白1α mRNA表达的影响

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对3T3成纤维细胞分泌巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α)mRNA表达的影响.方法 体外培养NIH3T3成纤维细胞,用含As2O3浓度分别为0+μmol/L(DMEM对照组)、2μmol/L和4μmol/L的DMEM培养液分别作用于成纤维细胞,24h和48h后MTT法观察细胞生长抑制情况;As2O3各组作用细胞24h后原位杂交方法检测MIP-1αmRNA表达的水平.结果 As2O3可显著抑制NIH3T3成纤维细胞增殖,且呈剂量-效应关系(P＜0.01).DMEM对照组及2 μmol/L和4μmol/L As2O3组均可检测到MIP-1α mRNA的表达.其中2μmol/L和4μmol/L As2O3组MIP-1α mRNA表达较DMEM对照组减弱(P＜0.01),呈剂量-效应关系(P＜0.01).结论 As2O3以剂量依赖方式抑制NIH3T3成纤维细胞增殖和MIP-1α mRNA的表达.     

外泌体通过HMGB1抑制骨关节炎软骨细胞凋亡和炎症

目的 探讨滑膜成纤维细胞(synovial fibroblast, SF)来源的外泌体中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖、凋亡以及炎症反应的影响。方法 对获得HMGB1沉默稳转滑膜的成纤维细胞(滑膜成纤维细胞组)和ExoQuick-TC试剂盒处理后细胞(Exo组)提取上清液，用Western blotting检测两组HMGB1、CD63及CD81蛋白的表达。将软骨细胞HC-A分为空白对照组、IL-1β组(100 pg/ml IL-1β预刺激)和IL-1β+Exo组(100 pg/ml IL-1β预刺激+50μg/ml滑膜成纤维细胞来源的外泌体),并使用实时定量PCR方法检测IL-6、TNF-α、MMP-1、MMP-13和COL2A1的mRNA水平。随后将IL-1β处理的软骨细胞分为IL-1β组、IL-1β+Exo组、IL-1β+Exo+NC-siRNA组和IL-1β+Exo+HMGB1-siRNA组。IL-1β+Exo+NC-siRNA组和IL-1β+Exo+HMGB1-siRNA组IL-1β处理的软骨细胞分别加入转染NC-siRNA或HMGB1-siRN...     

丹参诱导类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞中Fas/FasL的表达

目的 观察丹参对类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者成纤维样滑膜细胞中Fas/FasL mRNA表达的影响.方法 RA患者关节滑液经原代培养,获取成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs),分别用终浓度为0、0.2 mg/ml和0.4 mg/ml的丹参作用24 h后,提取总RNA并逆转录成cDNA保存.随机选取正常人外周血,通过分离单个核细胞提取总RNA并逆转录成cDNA保存作为阳性对照.分别采用RT-PCR和SYBR Green适时荧光定量PCR方法检测Fas/FasL mRNA的表达.结果 RT-PCR结果显示,FasL只在外周血标本上有表达,而在各浓度处理的RA FLSs没有检测到;Fas无论在外周血还是不同浓度处理的RA FLSs上均有表达.定量PCR结果显示,Fas的表达量随丹参浓度增加而增加,并且在丹参浓度为0.4 mg/ml时具有统计学差异(P<0.05).Fas mRNA的表达与相应浓度下RA FLSs的凋亡率存在相关性(r=0.998,P<0.05).结论 丹参可体外诱导RA患者成纤维样滑膜细胞Fas mRNA表达上调;未检测到FasL mRNA在RA患者FLSs中的表达.Fas mRNA的上调可能与丹参诱导RA FLSs凋亡有关.     

人参皂苷Rg1对高糖培养的心肌成纤维细胞Wnt信号通路的影响

目的 建立体外高糖培养心肌成纤维细胞(CFs)的方法,观察人参皂苷Rg1对高浓度葡萄糖培养的心肌成纤维细胞增殖和蛋白分泌及Wnt信号通路的影响.方法 采用体外高糖诱导心肌成纤维细胞增殖模型,应用MTT法检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞增殖周期;ELISA法观察细胞Ⅰ型、Ⅲ型胶原及肿瘤生长因子β1(TGF-β1)蛋白的分泌;Western blot法检测β-catenin、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(P-GSK-3β)的蛋白表达水平以观察人参皂苷Rg1对于心肌成纤维细胞Wnt信号通路的影响.结果 人参皂苷Rg1可以抑制细胞增殖(P＜0.05);降低Ⅰ型、Ⅲ型胶原分泌(P＜0.05);减少TGF-β1的合成(P＜0.01);在分子水平上可以抑制β-catenin的表达(P＜0.05),上调P-GSK-3β的表达(P＜0.05).结论 人参皂苷Rg1能抑制心肌成纤维细胞的增殖,减少高糖培养心肌成纤维细胞胶原和TGF-β1的分泌,抑制Wnt信号通路的异常表达,具有潜在的抗心肌纤维化作用.     

阿魏酸哌嗪对TGF-β1诱导肾成纤维细胞表型活化的影响

目的 观察阿魏酸哌嗪对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾成纤维细胞表型活化的影响,探讨其抗肾间质纤维化的可能机制.方法 体外培养正常大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F),利用MTT观察阿魏酸哌嗪对TGF-β1诱导细胞活力的影响;免疫细胞化学法观察阿魏酸哌嗪对TGF-β1诱导细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、结缔组织生长因子(CTGF)蛋白表达的影响;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(real time RT-PCR)检测阿魏酸哌嗪对TGF-β1诱导细胞α-SMA及CTGF mRNA表达的作用,双抗体夹心ABC-ELISA法检测阿魏酸哌嗪对TGF-β1诱导细胞上清Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响.结果 TGF-β1可以显著增加大鼠肾脏成纤维细胞活力,上调细胞α-SMA、CTGF蛋白和mRNA的表达以及Col Ⅰ、FN的表达.与TGF-β1刺激组相比,阿魏酸哌嗪能部分抑制TGF-β1诱导的细胞活力增加、α-SMA、CTGF的表达和细胞外基质(ECM)的合成.结论 阿魏酸哌嗪可以在一定程度上拮抗TGF-β1诱导的肾纤维化效应.     

阿托伐他汀对转化生长因子β1诱导的大鼠肺肌成纤维细胞分化的影响

目的以转化生长因子β(1TGF-β1)诱导肌成纤维细胞的分化作为切入点,观察经阿托伐他汀干预后肌成纤维细胞的标志性产物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及细胞增殖情况的改变,探讨他汀类药物抑制肺纤维化的机制。方法气管内注入博莱霉素复制大鼠肺纤维化模型,分离培养博莱霉素实验组和生理盐水对照组大鼠的肺成纤维细胞,分别分为空白对照亚组、TGF-β1诱导亚组和不同剂量阿托伐他汀阻断亚组。用倒置纤维镜观察细胞的形态结构,MTT计数法观察细胞的增殖情况,免疫组化染色法半定量观察α-SMA的表达情况。结果阿托伐他汀对TGF-β1诱导α-SMA具有明显的抑制作用。阿托伐他汀能够抑制TGF-β1诱导的大鼠肺肌成纤维细胞的增殖。结论阿托伐他汀能够抑制TGF-β1诱导的肌成纤维细胞的分化,主要表现在细胞形态、细胞增殖情况及α-SMA等指标的改变上。     

TRAIL及其受体在类风湿关节炎中研究新进展

肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)可最大范围地诱导肿瘤细胞的凋亡,对正常细胞毒性很小。类风湿关节炎(RA)的病理特征为滑膜细胞的增殖与炎性细胞的浸润,RA滑膜成纤维细胞(RASF)的凋亡缺陷是其重要发病机制之一,RASF具有肿瘤细胞增生的特性,此特性也可解释为凋亡水平降低,使滑膜细胞数量增加。目前越来越多的研究表明TRAIL参与RA的发病过程:TRAIL与其死亡受体结合后可诱导RA患者关节成纤维滑膜细胞的凋亡。     

水溶性乌梢蛇总蛋白对成纤维样滑膜细胞分泌白介素-1β、α-肿瘤坏死因子和白介素-10的影响

目的 观察水溶性乌梢蛇总蛋白对类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞分泌IL-1β、TNF-α和IL-10的影响,以探讨治疗RA的可能机制.方法 用常规方法提取水溶性乌梢蛇总蛋白,取RA患者滑膜组织进行成纤维样滑膜细胞培养;选择对数生长期的细胞进行实验,实验分五组,分别加入昆明山海棠(200μg/ml,阳性对照组)、水溶性乌梢蛇总蛋白(50、150、450μg/ml)DMEM溶液,及加入等体积的DMEM溶液(空白对照组)进行细胞培养,72小后采用ELISA方法测定培养液上清中IL-1β、TNF-α和IL-10的水平,RT-PCR检测滑膜细胞IL-1β、TNA-α和IL-10的mRNA表达.结果 水溶性乌梢蛇总蛋白150 μg/ml、450 μg/ml组和阳性对照组细胞培养液上清中TNF-α、IL-1β水平明显降低,mRNA表达减少,而IL-10水平升高,mRNA表达增加,与空白对照组差异具有统计学意义(P<0.05).结论 水溶性乌梢蛇总蛋白可能通过抑制成纤维样滑膜细胞TNF-α和IL-1β及促进IL-10分泌来减轻炎症反应.到达治疗RA的目的.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of soluble total proteins of Zaocys dhumnades on the expressions of interleukin-1β (IL-1β), tumor necrosis factor-α (TNF-α) and IL-10 in human fibroblast-like synoviocytes (FLS) cultured in vitro. Methods Primary cultured FLS isolated from the synovium of patients with rheumatoid arthritis (RA) were incubated in the presence of different concentrations (50, 150 and 450 μg/ml) of soluble total proteins of Zaocys dhumnades, with Tripterygium hypoglaucum Hutch (THH) and DMEM as the positive and negative controls, respectively. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and RT-PCR were used to detect the expressions of IL-1β, IL-10 and TNF-α in the FLS. Results The protein and mRNA levels of IL-1β and TNF-α in the supernatant of the FLS exposed to 150 and 450 μg/ml of the soluble total proteins of Zaocys dhumnades decreased, while IL-10 protein and mRNA increased significantly as compared with those in the negative control group (P<0.01). Conclusion The soluble total proteins of Zaocys dhumnades produce therapeutic effect on RA possibly by inhibiting IL-1β and TNF-α and promoting IL-10 expressions in the FLS.     

人类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞培养及生物学特性研究

目的 探讨人类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)的分离及生物学特性.方法 分别取4例RA患者膝关节滑膜组织、1例软骨瘤患者膝关节滑膜组织和1名健康人膝关节滑膜组织,采用组织块培养法培养FLS,使用相差显微镜观察细胞形态,流式细胞术(FCM)检测培养细胞的表面标志,酶联免疫吸附法定量检测RA第4代FLS细胞培养液上清液白细胞介素-1受体I型(IL-1RI)和白细胞介素1β(IL-1β)水平.结果 组织块培养法成功培养出FLS.RA患者FLS细胞4~7 d细胞数量明显增加,8~12 d细胞可以长满瓶底.第3代以后细胞均质性最好,3~7代细胞稳定且增殖活跃,8代以后增长缓慢并逐渐老化.软骨瘤患者和健康人滑膜组织培养7 d后才有散在单个FLS细胞爬出,大约16 d后FLS细胞可以长满瓶底.FCM分析RA第4代FLS CD90+细胞的百分率为99.04%,CD3+为2.73%,CD3-CD19+为0.29%,CD3-CD16+CD56+为2.81%,CD14+为5.89%,CD55+为54.17%.RA第4代FLS细胞培养上清液IL-1RI浓度为(158.63±20.32) pg /ml,IL-1β为(4.67±0.82) pg/ml. 结论 组织块培养法能有效分离RA患者FLS,FLS具有高水平表达CD90、IL-1RI和IL-1β的特性.     

Sonic hedgehog促进血管外膜成纤维细胞表型转化并发生增殖迁移

目的 研究sonic hedgehog(shh)在血管外膜成纤维细胞增殖、迁移、表型转化中的作用.方法 体外培养血管外膜成纤维细胞,免疫荧光、激光共聚焦显微成像、免疫印迹以及实时定量聚合酶链式反应检测蛋白和基因表达,Ki67、细胞生长曲线评价细胞增殖情况,划痕实验观察细胞迁移情况,α-肌动蛋白评价细胞表型转化情况.结果 shh在体外培养的血管外膜成纤维细胞中有表达,加入外源性的shh后(3.5μg/ml),Ki67~+的成纤维细胞增多,划痕区域的细胞覆盖率增大、成纤维细胞内出现α-肌动蛋白的表达;加入cyclopamine(40μmol/L)抑制内源性的shh信号通路后,Ki67~+的成纤维细胞减少,划痕区域的细胞覆盖率减小.结论 shh能够促进成纤维细胞增殖、迁移、向肌成纤维细胞转化.     

槲皮素对TNF-α诱导的乳鼠心肌成纤维细胞增殖及P38MAPK、HMGB1蛋白表达的影响

目的 研究槲皮素对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的心肌成纤维细胞增殖及P38MAPK、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响.方法 通过胰酶消化法和差速贴壁法获得纯化的心肌成纤维细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测心肌成纤维细胞的增殖,采用Western blot法测定P38MAPK、HMGB1蛋白的表达.结果 槲皮素对基础状态下的心肌成纤维细胞的增殖无影响,但对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞的增殖有抑制作用,且各组细胞的吸光度(A)值随槲皮素浓度的增加而减小(P＜0.05),各组细胞P38MAPK、HMGB1蛋白表达随槲皮素浓度的增加而减弱(P＜0.05).结论 槲皮素对TNF-α诱导的心肌成纤维细胞增殖有一定地抑制作用,其机制可能是通过P38 MAPK信号通路抑制HMGB1的表达,参与抑制心肌成纤维细胞的增殖.     

趋化因子与狼疮性肾炎和慢性肾炎的相关性研究

目的了解狼疮肾炎、慢性肾小球肾炎患者血、尿趋化因子含量的变化并探讨其在发病中的意义。方法用双抗体夹心ELISA方法检测20例狼疮性肾炎、20例慢性肾小球肾炎以及20例健康志愿者血清及尿液巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1β)、激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)的含量,分析狼疮肾炎和慢性肾小球肾炎间血、尿趋化因子水平的差异。结果与正常对照组比较,血清MIP-1α含量在狼疮肾炎和慢性肾小球肾炎患者中均显著升高(P<0.001,P=0.004),血清MIP-1β含量在慢性肾小球肾炎患者中显著升高(P=0.012),尿液MIP-1β含量狼疮肾炎组显著升高;血、尿间的MIP-1α、MIP-1β、RANTES含量无显著相关。结论MIP-1α、MIP-1β可能与狼疮肾炎、慢性肾小球肾炎发病有关,不同的趋化因子在不同肾炎中的作用可能不同。     

lncRNA CASC2通过调控miR-218-5p表达对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞炎症反应及迁移与侵袭的影响

目的 探讨长链非编码RNA肿瘤易感候选基因2(CASC2)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞炎症反应、迁移及侵袭的影响及其机制。方法 收集45例RA患者滑膜组织和18例健康对照者滑膜组织，采用qRT-PCR检测滑膜组织中CASC2和miR-218-5p的表达水平。ENCORI在线软件预测和双荧光素酶报告实验分析CASC2和miR-218-5p的靶向相互作用。将CASC2过表达质粒及miR-218-5p mimic转染至人RA滑膜成纤维细胞系MH7A中，qRT-PCR检测细胞中CASC2和miR-218-5p表达水平；CCK-8检测细胞的增殖水平；ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平；Transwell检测细胞迁移和侵袭能力；Western blot检测基质金属酶(MMP)-2和MMP-9蛋白表达水平。结果 RA患者滑膜组织中CASC2表达水平较健康对照者滑膜组织减少(P<0.05),而miR-218-5p表达水平则增加(P<0.05)。双荧光素酶报告实验结果显示，CASC2与miR-218...