利用孕妇血浆中的胎儿DNA进行β-地中海贫血的产前诊断

目的利用孕妇血浆中游离胎儿DNA(cffDNA)对广东省最常见17种β地中海贫血的突变基因进行扩增,探讨非创引个伤常性物见产,对位前c点诊ffD和断Nβ9A-个地进少中行见海二位贫次点血P突C的R变可,反的行向共性斑。17点方种杂法β地交贫技①基术羊因检水;测途②β径抽地:取中抽孕海取妇贫孕外血妇周的羊血突水,变共柱基9分例因离,。采法结用提果反取向及9例斑凝孕点胶妇杂回中交收有技纯5术化例检D经N测羊A中,水设国检计人测群3对证8实胎儿有父系的β地贫基因,有2例孕妇外周血中检测到胎儿(父系)β地贫基因,与羊水检测相符。结论利用cffDNA进行β-地中海贫血的检测方法可行,但由于母源性DNA背景的污染,以及胎儿DNA因含量而导致检出率低,希望进一步改进该技术后有望可用于β-地中海贫血的诊断。     

β-地中海贫血的早期产前诊断

利用人珠蛋白基因簇内限制性内切酶息点的多态性为遗传标志,通过家系分析,成功地完成了四例β-地中海贫血的早期产前诊断。三例利用连锁多态性进行诊断,一为β-地贫纯合子,建议终止妊娠后,用胎儿血的血红蛋白肽链分析证实了这一诊断。一为正常或β-地贫杂合子,排除了β-地贫纯合子。另一例为β-地贫杂合子。第四例经分析与特异等位基因相连锁的DNA多态性证实为β-地贫杂合子。以上三例均建议继续妊娠。     

我国首次产前诊断β-地中海贫血获得成功

最近,上海市儿童医院医学遗传研究室和上海市长宁区妇产科医院、广西柳州市妇幼保健院协作,成功地为一位广西柳州市的孕妇进行了β- 地中海贫血的产前诊断。这是我国首次完成的β- 地中海贫血产前基因诊断。     

孕妇外周血胎儿游离DNA应用于β地中海贫血产前诊断

目的：探讨孕妇外周血胎儿游离DNA在β地中海贫血产前诊断中的应用情况。方法选取2011年3月～2013年3月到妇产科进行产前诊断的妊娠妇女中选取28例作为研究对象,并对妊娠妇女采取常规的基因诊断以及胎儿游离DNA检测。结果穿刺诊断结果显示,正常例数为9例,杂合子例数为12例,双重杂合子例数为7例;胎儿游离DNA检测结果显示,IVS-Ⅱ-654突变基因的携带者共有11例,检测结果为阴性的例数共有16例,实验失败的有1例。结论在产前诊断中应用胎儿游离DNA检测β地中海贫血是可行的,然而母源性的游离DNA会对检测结果有所影响。     

α-地中海贫血的产前诊断

应用限制性内切酶酶谱和快速微量DNA分子杂交技术,对7例有Hb Bart's水肿胎儿危险和1例有Hb H病胎儿危险的孕妇进行产前基因诊断,诊断结果5例胎儿正常,3例为Hb Bart's水肿胎儿,与分娩及引产结果完全符合。     

α-地中海贫血早期产前诊断

目的：探索α－地中海贫血早期产前诊断的方法；方法：利用聚合酶链反应技术对8例高危妊娠者采用绒毛取样进行缺失型α－地中海贫血的早期产前诊断；结果：检测出胎儿水肿综合症2例，杂合子4例．正常胚胎2例，其中3例孕中期行羊水检查，证实了绒毛诊断的准确性；结论：绒毛取样是诊断缺失型α－地中海的一种安全可靠的孕早期产前诊断方法。     

中国人β-珠蛋白基因簇多态性、单体型研究及β-地中海贫血的早期产前诊断

β-地中海贫血(简称β-地贫)是一组多种类型、分布广泛的遗传性溶血性贫血,以β-珠蛋白链的合成缺陷为特征。我国华南、西南地区相当常见。对该病目前尚无满意的治疗方法,重型β-地贫患儿往往在幼年死亡,即使获得充分治疗,也不易活过青春期,因此从基因水平研究β-地贫并进行产前诊断,控制重型患儿的出生是一项积极有效的措施。β-地贫病人的基因,主要是由于点突变所致,多半不涉及限制酶的识别序列,故不能用限制酶切图谱的方法直接检测。目前多利用β-珠蛋白基因簇限制酶切位点多态性与β-地贫基因间的连锁分析间接地进行诊断。     

α-地中海贫血的产前诊断:水肿胎儿综合征复合β-地中海贫血的一种突变

本文利用PCP体外基因放大新技术成功地对1例单卵双胎的水肿胎儿综合征进行了产前诊断,同时确定了此双胎复合β地中海贫血的1种突变——β41/42(—4bp),此种病例国内外属首次报道,甚为罕见。     

β地中海贫血基因突变类型的研究及产前诊断

目的开展β地中海贫血的基因分析及产前基因诊断。方法应用PCR-RDB技术,完成了54例β地贫患者及双亲共216条染色体的基因突变类型及频率数据。并进行8个家庭的8例β地贫高风险胎儿的产前诊断。结果 8例被检胎儿中4例为一种突变类型的杂合子,2例为双重杂合子,2例为正常胎儿。有6例出生后基因分析验证结果与产前诊断完全一致。结论显示,进行产前诊断能较准确地控制重型β地贫患儿出生,对实行优生具有重要意义。     

β地中海贫血基因突变类型的研究及产前诊断

目的 开展β地中海贫血的基因分析及产前基因诊断。方法应用PCR—RDB技术，完成了54例β地贫患者及双亲共216条染色体的基因突变类型及频率数据。并进行8个家庭的8例β地贫高风险胎儿的产前诊断。结果 8例被检胎儿中4例为一种突变类型的杂合子，2例为双重杂合子，2例为正常胎儿。有6例出生后基因分析验证结果与产前诊断完全一致。结论显示，进行产前诊断能较准确地控制重型β地贫患儿出生，对实行优生具有重要意义。     

β-地中海贫血的产前诊断——Ⅰ.用β-珠蛋白基因簇单体型分析进行产前基因诊断

广西柳州一名孕妇曾生育过2例重型β-地中海贫血患儿,已先后死亡,因此要求进行β-地中海贫血的产前诊断。本文应用 DNA 限制酶酶谱技术,通过对这个家系各成员的β-珠蛋白基因簇单体型分析,鉴定出携带β-地中海贫血基因的染色体的单体型,诊断出胎儿患重型β-地中海贫血,即胎儿细胞携带两个β-地中海贫血基因,其中一个是从曾外祖母,通过祖母、父亲传下来,另一个是从外祖母通过母亲传给胎儿。这是国内对β-地中海贫血产前诊断的首例报道。     

β-地中海贫血动物模型研究进展

β-地中海贫血是一种临床常见的由于β-珠蛋白基因重要功能区域的突变引起遗传性溶血性贫血疾病. 首先在地中海沿岸地区发现,并在遭受疟疾感染的国家高度流行,但随着人类居民的相互迁移已导致世界许多地区出现这种疾病[1]. β-地中海贫血是由于在β-珠蛋白基因重要功能区域有超过200种不同突变造成的[2]. 这些突变大部分是点突变,其会引起成熟mRNA的水平减少或者导致无功能的mRNA产生,如无义突变和移码突变等. β-地中海贫血患者都呈现β链血红蛋白的生成缺陷,但其表型却各有不同,表现可以从症状缺乏到严重贫血的各种临床症状.一个良好的β-地中海贫血动物模型对于其治疗研究可以提供很好的中介,为学者及临床医生在探讨各类型β-地中海贫血治疗时能够找到更好的针对性试验体,减少直接在患者身上做实验的痛苦与难度,寻求更为有效和经济的治疗手段,以提高疗效水平,特别对于在探讨一些基因治疗时产生的疗效及不良反应进行监测. 而β-地中海贫血的类型有多种,本文就目前β-地中海贫血疾病动物模型及进展进行综述,追踪与人β-地中海贫血表现更为相近的模型,同时为研究人员开展建立新的 β-地中海贫血模型提供参考及改进.     

β-地中海贫血的产前诊断——Ⅱ.产前基因诊断结果的验证

对一例产前诊断为重型β-地中海贫血的胎儿作了人流手术。通过对流产胎儿的血液学和血红蛋白检查,珠蛋白链合成测定和胎儿 DNA 分析,证实产前基因诊断正确。     

基于寡核苷酸芯片的β-地中海贫血DNA甲基化的研究

目的 通过寡核苷酸芯片寻找和分析β-地中海贫血DNA甲基化相关的基因位点,进一步探讨产前筛查及诊断β-地中海贫血的新方法.方法 利用含有人30 178个DNA甲基化探针的寡核苷酸芯片,对2例β地中海贫血患儿脐血与2例正常脐血分别配对检测差异基因DNA甲基化情况,并用甲基化特异PCR(methylation-specific PCR,MSP)和荧光定量PCR(RT-PCR)验证芯片结果.采用非监督聚类(hierarchical clustering)等方法发现统计学意义上差异表达的基因.结果 两组芯片结果显示,差异基因共209条(ratio≥2.0,ratio≤0.5);其中上调基因共113条,下调基因共96条.验证结果显示,DNA甲基化相关基因成红细胞增多型白血病致病因子(erythroblastie leukemia viral,v-erb-a)与正常血样比较呈高甲基化状态.结论 利用DNA甲基化芯片及甲基化特异PCR技术检测并验证出成红细胞增多型白血病致病因子(v-erb-a)在地中海贫血中呈高甲基化.     

β-地中海贫血的基因治疗研究

地中海贫血是最常见的单基因遗传病,它是由于珠蛋白肽链合成量之间不平衡导致,所以纠正珠蛋白肽链失衡成为地中海贫血治疗研究的关键。临床常采用输血并配合除铁剂,脾摘除,造血干/祖细胞移植等方法治疗地中海贫血,尽管同种异基因移植和姑息治疗已经取得了显著的进步,由于很多因素的限制,大部分患者依然受到死亡的威胁。本文对地中海贫血基因治疗的研究进展做一综述。     

β-地中海贫血的治疗进展

β 地中海贫血 (β 地贫 )是一种遗传性溶血性贫血 ,在我国东南沿海和西南地区发病率较高。重型β 地贫的治疗目前仍有较大困难 ,严重威胁儿童的健康和影响我国人口素质。因此 ,加强对 β 地贫的研究 ,提高防治水平 ,减少其对儿童健康的威胁 ,具有重要意义。下面就 β 地贫的治疗进展作一介绍。1　红细胞输注和去铁治疗在目前 ,本疗法仍是最基本治疗方法。近 2 0多年来国内外广泛采用高、中量输血配合铁螯合剂 ,已使患者的生存质量明显提高 ,能活到成年并达到正常人的生活能力。因此 ,对无机会进行造血干细胞移植患者仍不失为有效的治疗方法…     

用等位基因特异性PCR进行β-地中海贫血产前基因诊断

目的:对两对有重型β-地中海贫血患儿家族史的夫妇进行产前基因诊断。方法:应用等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)技术检测两对夫妇及其高风险胎儿的5种β-地中海贫血突变类型:CD41-42(-CTTT)缺失突变、IVSII654(C→T)突变、CD17(A→T)无义突变、TATA盒nt-28(A→G)突变和CD71-72(+A)移码突变。结果:家系1的父亲为TATA盒nt-28(A→G)/N杂合子,母亲为CD41-42(-CTTT)/N杂合子,胎儿正常;家系2的父亲为CD41-42(-CTTT)/N杂合子,母亲为CD71-72(+A)/N杂合子,胎儿为CD41-42(-CTTT)/CD71-72(+A)双重杂合子;上述2例胎儿出生及引产后的基因分析验证结果与产前基因诊断完全一致。结论:等位基因特异性PCR能准确地对β-地中海贫血高风险胎儿进行产前基因诊断,对预防重型β-地中海贫血患儿的出生具有重要意义。     

用等位基因特异性PCR进行β-地中海贫血产前基因诊断

目的:对两对有重型β-地中海贫血患儿家族史的夫妇进行产前基因诊断.方法:应用等位基因特异性聚合酶链反应(PCR)技术检测两对夫妇及其高风险胎儿的5种β-地中海贫血突变类型:CD41-42(-CTTT)缺失突变、IVSⅡ654(C→T)突变、CD17(A→T)无义突变、TATA盒nt-28(A→G)突变和CD71-72( A)移码突变.结果:家系1的父亲为TATA盒nt-28(A→G)/N杂合子,母亲为CD41-42(-CTTT)/N杂合子,胎儿正常;家系2的父亲为CD41-42(-CTTT)/N杂合子,母亲为CD71-72( A)/N杂合子,胎儿为CD41-42(一CTTT)/CD71-72( A)双重杂合子;上述2例胎儿出生及引产后的基因分析验证结果与产前基因诊断完全一致.结论:等位基因特异性PCR能准确地对β-地中海贫血高风险胎儿进行产前基因诊断,对预防重型β-地中海贫血患儿的出生具有重要意义.     

α-地中海贫血产前诊断技术——Ⅱ.快速微量DNA分子杂交

用限制性内切酶酶谱分析产前诊断Hb Bart's水肿胎儿,方法准确可靠,但需要活力高和纯度高的内切酶,以及比度高的~(32)P—dNTP,目前在国内使用尚有一定局限性。为此,我们建立快速、微量DNA分子杂交技术,并用于Bart's水肿胎儿的产前诊断。原理