接骨合剂在同种异体骨修复缺损过程中TGF-β表达的影响

目的通过检测具有活血补肾作用的接骨合剂对骨缺损修复过程中的转化生长因子(TGF-β)表达的影响,探讨接骨合剂对同种异体骨修复的作用。方法用新西兰大白兔,制成双侧桡骨骨缺损模型,用同种异体髂骨骨松质制成颗粒状植于骨缺损处,一组用接骨合剂(骨碎补、续断、自然铜土鳖虫)饲养,一组用普通饲料饲养,于手术后1、2、4、6、8周处死动物取材,标本进行HE及TGF-β免疫组化及原位杂交染色,光镜观察。结果在1周时TGF-β表达呈弱阳性,实验组4周时表达呈强阳性,2、6、8周时表达呈阳性,对照组除4周时表达呈阳性外,2、6、8周时表达呈弱阳性。结论接骨合剂对同种异体骨修复骨缺损有明显的促进和成骨作用。     

TGF-β对缺氧环境下HepG2细胞表达VEGF的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)和低氧(CoCl2)对肝癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养肝癌细胞系HepG2细胞,实验分为对照组、不同浓度TGF-β1和CoCl2的分别处理组、TGF-β1(100 pmol/L) CoCl2(200 μmol/L)组;用免疫细胞化学法检测VEGF蛋白表达;半定量RT-PCR技术检测细胞中VEGFmRNA相对表达量。结果各处理组VEGF蛋白表达均为阳性;TGF-β1或CoCl2组中VEGF mRNA相对表达量明显高于对照组(P<0.01),并且呈浓度依赖性;TGF-β1 CoCl2组中VEGFmRNA表达高于单因素刺激组(P<0.05)。结论TGF-β1能够刺激HepG2细胞表达VEGF,并且可以协同CoCl2增加VEGF的表达。     

大鼠胚胎胸椎发育中转化生长因子β1、骨形成蛋白2和Smad4的表达及意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形成蛋白2(BMP-2)和Smad4蛋白在大鼠胚胎发育不同时期胸椎的表达情况及意义。方法:用免疫组织化学SABC法与RT-PCR法检测第11~19日在大鼠胚胎胸椎TGF-β1、BMP-2和Smad4表达情况。结果:TGF-β1、BMP-2和Smad4在大鼠不同发育时期胸椎表达部位的变化情况较一致,在E11~E16的脊索细胞及随后的髓核细胞一直呈阳性表达,在E11、E12的生骨节细胞不表达或表达很少;在E13~E19的成软骨细胞及软骨细胞的表达随胚龄的增加而增多;在E14~E19的软骨膜有阳性表达,在骨膜细胞有微弱表达;在软骨基质及围索管始终呈阴性表达。其中TGF-β1和BMP-2在E11~E13·5的细胞外基质有阳性表达,而Smad4无表达。TGF-β1的表达丰度相对恒定;BMP-2与Smad4的表达丰度各有不同程度的变化。结论:TGF-β1、BMP-2和Smad4可能与其他细胞外基质分子共同调节生骨节细胞的迁移、黏附以及围索管和软骨基质的产生有关,促进软骨细胞增殖、分化、成熟与凋亡,并进一步诱导软骨细胞的骨化。     

TGF-β_1、BMP-7 mRNA在实验性肝纤维化中的表达及意义

目的:检测转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白-7(BMP-7)mRNA在实验性大鼠肝纤维化中的表达,并研究其与病程的关系。方法:采用复合因素建立肝纤维化动物模型,HE染色观察肝脏组织病理表现,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应技术(RealTimeRT-PCR)检测TGF-β1、BMP-7mRNA的表达水平,并分析两指标与病程的相关性。结果:肝纤维化动物TGF-β1mRNA明显高于正常对照组,而BMP-7mRNA水平明显低于正常对照组。随着病程的延长,TGF-β1mRNA表达水平呈明显上升趋势,而BMP-7mRNA则呈下降趋势。结论:肝纤维化的进程与TGF-β1mRNA水平升高和BMP-7mRNA表达下降有一定关系。     

仙灵骨葆胶囊对骨质疏松症大鼠BMP-2、BMP-4、TGF-β1和PKC蛋白表达影响

目的探讨仙灵骨葆胶囊对骨质疏松症大鼠骨形成蛋白-2(BMP-2)、骨形成蛋白-4(BMP-4)、转化生长因子β1(TGF-β1)和蛋白激酶C(PKC)蛋白表达影响。方法 40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、对照组和实验组,每组大鼠10只。假手术组给予等剂量生理盐水灌胃;模型组:给予等剂量生理盐水灌胃;对照组:给予盖天力牡蛎钙0.3 g/kg灌胃;实验组:给予仙灵骨葆胶囊0.4 g/kg灌胃。各组大鼠灌胃均为每日1次,连续灌胃8周。采用双能X线骨密度仪检测股骨和腰椎骨密度;采用ELISA法检测血清Ca和P含量;采用免疫组化法检测骨组织BMP-2、BMP-4、TGF-β1和PKC蛋白表达。结果除假手术组,其余各组大鼠均造模成功。模型组、对照组、实验组股骨和腰椎骨密度低于假手术组(P0.05);对照组、实验组股骨和腰椎骨密度高于模型组(P0.05);实验组股骨和腰椎骨密度高于对照组(P0.05)。模型组、对照组、实验组血清Ca和P含量低于假手术组(P0.05);对照组、实验组血清Ca和P含量高于模型组(P0.05);实验组血清Ca和P含量高于对照组(P0.05)。模型组、对照组、实验组BMP-2、BMP-4和PKC蛋白表达高于假手术组,而TGF-β1蛋白表达低于假手术组(P0.05);对照组、实验组BMP-2、BMP-4和PKC蛋白表达低于模型组,而TGF-β1蛋白表达高于假手术组(P0.05);实验组BMP-2、BMP-4和PKC蛋白表达低于对照组,而TGF-β1蛋白表达高于对照组(P0.05)。结论仙灵骨葆胶囊可增加骨质疏松症大鼠骨密度,认为可能与下调BMP-2、BMP-4和PKC蛋白表达及上调TGF-β1蛋白表达相关。     

不同浓度VEGF对AECII表达SP-B和TGF-β1的影响及意义

目的探讨血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）对肺泡II型细胞（type 2 alveolar epi-thelial cell,AECⅡ）表面活性蛋白-B（surfactant associated protein,SP-B）和转化生长因子-β1（transforming growth fac-tor beta-1,TGF-β1）表达的影响及意义。方法原代培养早产鼠AECII,采用real-time RT-PCR、细胞免疫染色等方法,观察VEGF对AECII SP-B及TGF-β1表达的影响。结果 Real-time PCR结果显示25ng/ml VEGF组与正常组相比SP-B mRNA表达水平明显上升（P〈0.05）。25ng/ml VEGF组与正常组相比TGF-β1 mRNA表达明显下降（P〈0.05）,其他各组与正常组相比无统计学差异（P〉0.05）。结论 VEGF在适宜浓度时有促进SP-B表达的作用,同时有抑制TGF-β1表达的作用,推测VEGF促进SP-B表达的作用与直接或间接抑制TGF-β1的表达有关。     

TGF-β和BMP在原发性开角型青光眼中的作用

眼压升高是原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma , POAG)发生和发展最主要的危险因素,是由小梁网途径的房水外流排出系统发生病变、房水流出阻力增加所致。 POAG 患者小梁网结构最显著的改变是小梁网近小管组织的纤维细胞外基质增多。现表明小梁网细胞外基质的数量和质量的变化是由多种信号通路相互作用调控其合成和降解的结果。来源于房水的转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)和转化生长因子-β2(transforming growth factor-β2, TGF-β2)可局部诱导小梁网细胞表达多种细胞外基质。骨形态发生蛋白-7(bone morphogenetic protein-7, BMP-7)和骨形态发生蛋白-4(bone morphogenetic protein-4, BMP-4)可有效地拮抗 TGF-β诱导的细胞外基质沉积。这种拮抗作用是通过 Smad7介导的。 Smad7是抑制 TGF-β2信号的一个关键分子。     

不同植骨材料在腰椎融合过程中的应用及转化生长因子β的表达

背景：骨形态发生蛋白单独应用于骨移植效果不佳。而转化生长因子β能明显增强其在体内的诱导成骨作用。 目的：观察自体骨及重组人骨形态发生蛋白2复合骨用于兔腰椎融合过程中转化生长因子β的基因表达。 方法：将新西兰大白兔60只随机分为自体骨组、复合骨组和异体骨组,分别于双侧L5-6横突间植入自体骨、重组人骨形态发生蛋白2复合骨及异体骨。植入后7,14,21,28,35 d取3组节段骨痂,应用实时荧光定量RT-PCR检测转化生长因子β的基因表达水平。 结果与结论：植入后28 d,复合骨组转化生长因子β达峰值,随后有所下降,但均高于自体骨组和异体骨组(P < 0.05)。结果证实,重组人骨形态发生蛋白2复合骨缓释重组人骨形态发生蛋白2,有效地促进了转化生长因子β的表达,明显增强了体内的诱导成骨效应。     

骨生长因子在骨修复中的研究进展

骨代谢和损伤后的修复过程高度复杂,涉及到多种生长因子间的相互作用。骨生长因子是指可以增加骨细胞生长活性,调节骨生长、分化以及重塑等多种生物学过程的因子,在骨修复过程中具有重要作用。目前,研究较多的参与骨形成的生长因子包括骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMPs)、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGF-β)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors,FGF)、血小板衍生因子(platelet-derived growth factor,PDGF)等。本研究总结国内外相关研究,综述了骨生长因子在骨修复中的作用机制及临床应用,以期为骨生长因子的临床应用提供一定的理论基础。     

TGF-β1对单核细胞来源的树突状细胞表型和功能的影响

目的:研究 TGF-β1对树突状细胞(DC)的分化、成熟及功能影响.方法:应用100万U/L粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)7 d诱导单核细胞分化为不成熟DC,加入终浓度20万U/L的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)48 h后获得成熟DC的体外模型,将TGF-β1加入该模型中,用流式细胞术分别检测DC分化,成熟阶段细胞表型的变化,应用ELISA检测DC IL-12的分泌水平,应用MTT法检测DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果:TGF-β1对不成熟DC的特征性分子 CD1a的表达无明显影响,但在诱导DC的成熟阶段,TGF-β1明显抑制CD40、CD86及CD83上调.此外,TGF-β1显著减少DC IL-12的分泌,显著抑制DC刺激同种异体T 细胞增殖的能力.结论:DC是TGF-β1免疫抑制活性的靶细胞.TGF-β1不影响DC的分化,但抑制DC的成熟和细胞因子的分泌,降低DC刺激同种异体反应T细胞增殖的能力.     

自体骨、同种异体骨及骨形态发生蛋白重组骨治疗腰椎骨折

背景：骨形态发生蛋白重组骨是一种新型植骨材料,已逐步应用于临床,但在腰椎骨折植骨融合中效果仍少见报道。 目的：比较自体骨、同种异体骨及骨形态发生蛋白重组骨治疗腰椎骨折的疗效差异。 方法：选择2005年3月至2009年3月南阳医学高等专科学校附属第一医院收治的腰椎骨折患者78例,根据植骨材料不同随机分为3组,分别植入自体骨、同种异体骨、骨形态发生蛋白重组骨。 结果与结论：78例腰椎骨折患者均获24个月的随访。植骨后24个月JOA评分改善率骨形态发生蛋白植入组90%>自体骨植入组85%>同种异体骨植入组70%(P < 0.05);植骨后12,24个月,同种异体骨植入组Cobb角较其他2组和植骨后6个月增大(P < 0.05),较植骨前减小(P < 0.05);自体骨植入组与骨形态发生蛋白植入组相比,差异无统计学意义(P > 0.05);同种异体骨植入组植骨后各时间点骨融合率均低于其他2组(P < 0.05)。提示骨形态发生蛋白重组骨与自体骨应用于脊椎腰椎骨折近期疗效相似,均优于同种异体骨移植,骨形态发生蛋白重组骨在腰椎骨折脊柱融合快,效果更好,临床应用更有优势。     

骨组织工程支架材料--陶瓷化骨

陶瓷化骨作为骨移植材料 ,得到广泛的研究 ,并已应用于临床。由于其具有天然的骨小梁结构 ,可降解 ,无免疫原性 ,是骨组织工程比较理想的支架材料 ,因此越来越受到重视。本文主要综述陶瓷化骨的理化性质、生物学特性及在骨组织工程中的应用     

纳米脱钙骨基质促进骨愈合

背景：纳米脱钙骨基质具有较大的表面积/体积比,纳米颗粒团聚后在表面自然形成不规则的纳米沟槽,可促进成骨细胞在其表面黏附生长及基质分泌。 目的：评价纳米脱钙骨基质作为骨移植替代物的植骨融合能力。 方法：以改良Urist法制备人同种异体脱钙骨基质,使用液氮冷冻球磨机及MICROS超细粉碎机制备纳米脱钙骨基质。咬除家兔L2-4双侧小关节及双侧椎板和横突表面皮质骨,随机分为3组,分别在腰椎椎板及横突间植入纳米脱钙骨基质、脱钙骨基质及自体骨,术后4,8,12周通过影像学、组织学观察植骨融合效果。 结果与结论：①X射线与CT表现：术后12周,纳米脱钙骨基质组椎板、附件形态已接近正常节段,新生骨与椎板间隙完全消失,新生骨与植骨床骨质密度均匀一致;脱钙骨基质组植骨区域椎板表面有少量新生骨块影,在新生骨与椎板表面尚有一定间隙;自体骨组椎板与植骨融合界面愈合良好,植骨区有新生骨块影,融合骨块质地均匀。②组织学表现：术后12周,纳米脱钙骨基质被新生骨替代,与椎板间形成骨性连接,新生骨内可见大量骨细胞,与自体骨组效果相似;脱钙骨基质组植骨区达到骨性愈合,新生骨内可见板层样骨,也有类骨物质。表明纳米脱钙骨基质具有良好的成骨诱导能力,是自体骨移植的良好替代物。     

Replacement of bone marrow by bone in rat femurs: the bone bioreactor

During development and repair of bone, two distinct yet complementary mechanisms, intramembranous and endochondral, mediate new bone formation via osteoblasts. Because mechanical bone marrow ablation leads to the rapid and transient formation of new bone in the marrow cavity, we postulated that parathyroid hormone (PTH), which is a bone anabolic hormone, enhances the formation of new bone that forms after marrow ablation. We subjected the left femur of rats to mechanical marrow ablation, or sham operation, and injected the animals daily with PTH or vehicle for 1, 2, or 3 weeks in a first experiment, then with PTH, parathyroid hormone-related peptide (PTHrP), or vehicle for 3 weeks in a second experiment. We subjected both femurs from each rat to soft X-ray, peripheral quantitative computed tomography, computed tomography on a microscale, and histological analysis, and determined the concentration of serum osteocalcin. In addition, in the second experiment, we determined the serum concentration of calcium, tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP), and receptor activator of NF-kappaB ligand (RANKL) at 3 weeks, and subjected femurs to biomechanical testing. Following treatment with PTH or PTHrP for 3 weeks, bone filled the marrow cavity of the shafts whose marrow had been ablated. PTH increased trabecular density in the right femur, but failed to induce bone formation in the medullary region of the right unoperated femoral shafts. The newly formed bone endowed left femoral shafts with improved biomechanical properties when compared to those of right femurs and left femurs from control, sham-operated, and vehicle-treated rats. PTHrP, like PTH, increased serum osteocalcin, but neither increased serum calcium, TRAP, or RANKL at 3 weeks. Our results reveal that the newly formed bone that follows marrow ablation is responsive to PTH, expand the role of PTH in bone, and might open new avenues of investigations to the field of regenerative medicine and tissue engineering. Local bone marrow removal in conjunction with pharmacologic intervention with an anabolic agent might provide a technique for rapid preferential site-directed bone growth in areas of high bone loss.     

自体骨及重组人骨形态发生蛋白2复合骨在腰椎中融合的效果：与异体骨比较

BACKGROUND: Recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP2) can effectively promote new  bone formation and fracture healing, but its specific application in the lumbar spinal fusion remains controversial. OBJECTIVE: To study the effect of autogenous bone, rhBMP2 composite bone or allogeneic bone on the lumbar spinal fusion of rabbits.  METHODS: Forty-five New Zealand white rabbits were enrolled to make intertransverse lumbar interbody fusion models and then randomly subjected to autogenous iliac bone, rhBMP2 composite bone or allogeneic iliac bone via L5-L6 intertransverse process, respectively. Then, the rats were sacrificed under anesthesia at 8 weeks after operation to observe the lumbar fusion. RESULTS AND CONCLUSION: Compared with the allogeneic iliac bone group, the fusion rates, tensile strength ratio of L5-6/L4-5, and percentage of new bone tissues were increased more significantly in the other two groups  (P < 0.05), and moreover, there was no difference between the autogenous iliac bone and rhBMP2 composite bone groups. These findings indicate that the autogenous iliac bone and rhBMP2 composite bone have similar fusion effects, both of which are superior to the allogeneic bone.   中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

Bioactive glass and autogenous bone as bone graft substitutes in benign bone tumors

In a prospective randomized study, 25 patients with benign bone tumors were surgically treated with either bioactive glass S53P4 (BG) or autogenous bone (AB) as bone graft material. X-rays were taken preoperatively and postoperatively at 2 weeks and at 3, 8, 12, 18, 24, and 36 months. In addition, for most of the patients, CT scans were performed at the same time-points. No infections or material-related adverse reactions occurred in any patient. The filled cavity was replaced faster by new bone in the AB group than in the BG group (p = 0.0001). However, at 36 months, no statistical difference in cavity volume between the two groups was observed on X-rays (p = 0.7881) or on CT scans (p = 0.9117). In the BG group at 3 years, the filled cavity appeared, however, dense on X-rays, and glass granules on CT scans were observed. During the follow-up period, the cortical thickness seemed to increase more in the BG group than in the AB group (p < 0.0001).     

自体骨髓移植复合人工骨治疗骨缺损

背景：到目前为止,国内人工骨联合自体骨髓移植治疗新鲜骨折、骨缺损方面的基础与临床研究尚未见报道。 目的：分析自体骨髓移植复合人工骨修复四肢粉碎性骨折骨缺损的作用途径。 方法：42例四肢骨缺损患者按治疗方法分为3组,均采用内固定方法修复骨折骨缺损。复合组采用自体骨髓移植复合人工骨,人工骨移植组仅作单纯的人工骨移植,自体骨髓移植组仅将单纯的自体骨髓注射入骨缺损处。所有患者均行骨特异性碱性磷酸酶活性检测和影像学随访,观察骨痂形成及骨折愈合情况。 结果与结论：在内固定后第3,4,6周,复合组伤肢骨痂形成率、骨特异性碱性磷酸酶活性均显著高于人工骨移植组及自体骨髓移植组(P < 0.01)。提示自体骨髓移植复合人工骨较单纯的人工骨移植或自体骨髓移植更能促进早期骨痂反应,加速骨折后骨缺损愈合,缩短骨愈合时间及住院时间。     

骨水泥成形术治疗骨转移瘤的临床观察

目的 观察应用微创技术治疗骨转移瘤引起疼痛的效果.方法 17例骨转移患者,59处骨转移病灶(55处在椎体,3处在四肢骨,1处在骨盆),其中男性5例,女性12例,年龄30～78岁,平均年龄58.9岁,影像学检查均证实有骨转移瘤(X线片、CT及MRI).临床伴有明显持续性骨痛,症状持续时间为2～18个月,平均5.7个月.17例患者59处骨转移灶均给予骨水泥成形术治疗.观察治疗前后患者的疼痛强度的变化情况、镇痛药使用评分并行SF-12健康状况调查.结果 17例59处病灶手术顺利完成.患者的疼痛评分由治疗前的5.0～9.5(平均7.9±1.2)减少为治疗后的3.1～6.8(平均5.1±1.0)(P＜0.01).患者的止痛药使用评分由治疗前的3～4(平均3.6±0.6),减少为治疗后的1～3(平均2.4±1.1)(P＜0.01).SF-12健康调查评分治疗前为-17～-33,平均-30.00±4.03,治疗后为-18～-33,平均-26.00±3.94(P＜0.05).术后随访6～17个月,平均12.3个月,患者疼痛均较术前减轻,17例患者中1例在治疗期间出现1个椎体新发的压缩性骨折.结论 应用骨水泥成形术治疗骨转移瘤可有效地缓解疼痛,改善患者后期生活质量.     

Pseudotumors of bone and bone lesions mimicking tumours

We review entities that have historically been thought to be pseudotumors or mimics of bone tumours. We discuss tumifactive amyloid deposits, the brown tumours of hyperparathyroidism, the various types of cysts that can be seen in bone, Nora lesion, subungual exostosis, haemophilic pseudotumors, non-ossifying fibroma, fibrous dysplasia, osteofibrous dysplasia, Paget disease, tophaceous gout and pseudogout.     

医用硫酸钙人工骨与同种异体骨修复良性骨肿瘤骨缺损的对比分析

背景：探讨医用硫酸钙人工骨可替代同种异体骨作为骨缺损的修复材料的可行性。 目的：观察医用硫酸钙人工骨材料治疗良性骨肿瘤骨缺损的临床疗效。 方法：纳入应用医用硫酸钙人工骨材料于临床修复良性骨肿瘤刮除术后骨缺损病例31例和同种异体骨材料修复病例36例。观察植入材料后4,8,12周摄X射线片植骨吸收情况及植骨材料降解率。 结果与结论：全部病例均获随访3个月以上。两组病例在随访期间植骨材料降解率差异无显著性意义。良性骨肿瘤植骨区无复发。患者植入材料后3个月X射线片示骨缺损部位有新骨生成。结果表明医用硫酸钙人工骨材料临床疗效和同种异体骨接近。