胃癌患者外周血中γδT细胞水平升高

背景γδT细胞与免疫调节进程相关。然而,γδT细胞在胃癌病程中的特点目前尚无考据。本研究评价了胃癌患者外周血中γδT细胞和淋巴细胞亚群的产生情况。方法研究入组了48例患者,另设置49位健康受试者作为对照。采用流式细胞术分析γδT细胞和淋巴细胞亚群。     

卵巢癌患者γδT细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性

目的：研究从卵巢上皮性癌（ＯＥＣ）患者肿瘤浸润淋巴细胞（ＴＩＬ）、肿瘤相关淋巴细胞（ＴＡＬ）及外周血淋巴细胞中分离扩增的γδＴ细胞对同种异体和自体肿瘤细胞的体外细胞毒作用,同时对αβΤ细胞的细胞毒活性也作了比较。方法：用抗体固相法扩增γδ／αβＴＩＬ,γδ／αβＴＡＬ及外周血γδ／αβＴ细胞;用密度梯度离心法或组织块培养法扩增原代ＯＥＣ细胞,并进行鉴定;用ＭＴＴ法测定γδ／αβＴ及外周血γδ／αβＴ细胞对同种异体／自体ＯＥＣ细胞的细胞毒活性。结果：体外扩增出的γδ／αβＴＩＬ,γδ／αβＴＡＬ及外周血γδ／αβＴ细胞对同种异体／自体ＯＥＣ细胞均具有较强且水平相近的细胞毒活性;扩增到７０％细胞纯度所需时间为：外用血γδΤ细胞（１４ｄ）,γδＴＡＬ（２１ｄ）和γδＴＩＬ（２８ｄ）。结论：γδＴＡＬ有望成为ＯＥＣ过继细胞治疗的简便获得而有效的候选细胞。关     

中药对T细胞免疫干预的抗肿瘤作用

中药具有一定的抗肿瘤疗效,不仅能够缓解肿瘤患者症状从而改善生活质量,还能在一定程度上控制肿瘤大小并延长患者生存期。由于T淋巴细胞在肿瘤细胞所产生的免疫应答中起主要作用,因此探索中药对T细胞免疫干预的作用机制可以为肿瘤治疗提供新的思路与方法。目前大多数中药通过促进T细胞因子释放、诱导细胞凋亡、增加T细胞总数及T辅助细胞、促进γδT细胞增殖等途径达到抗肿瘤作用。由于T细胞可分为αβT细胞与γδT细胞两大类,本文综合归纳了常用中药及其单体对αβT细胞与γδT细胞进行干预的主要机制,并提出了未来研究的方向,为进一步研究提供参考。     

肺癌患者外周血γδT细胞的检测及意义

 目的　探讨肺癌患者群体的γδT细胞的功能状态。方法　应用流式细胞术检测124例手术前肺癌患者（肺癌组）和56名健康职工（健康对照组）外周血γδT细胞。结果　γδT细胞健康对照组为（6.54±2.90）%,患者组为（3.76±2.81）%（t＝3.568,P＜0.001）。肺癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于健康人（P＝0.000 ）;肺癌组织学分类、T 分期、N分期、M分期、临床分期、大体分型、病变部位各组与健康对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）;肺癌患者中不同年龄、性别各组患者外周血中γδT细胞比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　γδT细胞减少对肺癌的发生有重要影响。     

正常大鼠小肠上皮内T细胞的形态计量学研究

目的研究TCRαβT细胞和TCRγδT细胞在大鼠小肠上皮内各肠段间的分布规律。方法采用免疫组化和体视学测量方法,对10只180~220 g的雄性W istar大鼠小肠上皮内T细胞的数密度、体积密度、表面积密度、平均体积和表面积体积比进行测量,并比较它们在各肠段间的差异。结果从十二指肠到回肠各肠段上皮内CD+3T细胞和TCRγδT细胞的体积密度、数密度和表面积密度均依次降低;各肠段上皮内TCRαβT细胞的体积密度、数密度和表面积密度则依次有增大的趋势;各肠段上皮内TCRγδT细胞的平均体积大于TCRαβT细胞的;各肠段上皮内CD+3T细胞、TCRαβT细胞和TCRγδT细胞的算术平均体积和细胞表面积体积比均变化不大,提示各肠段间同种T细胞的体积接近形状相似。结论总体上,从十二指肠到回肠大鼠小肠上皮内T细胞数依减少;而TCRγδT细胞的体积比TCRαβT细胞的大。     

食管癌患者外周血γδT细胞对Th1/Th2细胞因子的影响

目的 探讨食管癌患者外周血γδT细胞水平及对Th／Th2细胞因子的影响。方法 用流式细胞仪测定46例食管癌患者、28例本院健康职工外周血γδT细胞在淋巴细胞中的百分率和血浆中Th1／Th2细胞因子的含量。结果 两组比较γδT细胞有显著性意义，Th类因子有显著性意义，Th2类细胞因子无显著性意义。结论 食管癌患者γδT细胞水平显著低于常人群，γδT细胞可以通过分泌细胞因子调节和维护机体Th1／Th2的免疫平衡。     

食管鳞状细胞癌患者γδT细胞研究

 目的 探讨食管癌患者机体γδT细胞水平及与临床的关系，为γδT细胞在食管癌综合治疗中的应用提供依据。方法 采用流式细胞术测定食管癌患者外周血中和癌组织中γδT细胞水平，分析其与临床的关系。结果 癌组织中浸润γδT细胞水平显著高于癌旁组织（P = 0.045）；食管癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于正常人（P = 0.011）；食管癌术后患者外周血中γδT细胞水平显著高于术前患者（P = 0.037）。食管癌T分期、N分期、M分期、大体分型、病变部位、病变长度（3 ~ 5 cm组和5 cm组）、组织学分级各组与正常组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。食管癌患者外周血中总T细胞，各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）；外周血中γδT细胞年龄、性别、病变长度（＜3 cm），各组与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 γδT细胞在机体抗食管癌中发挥重要作用，手术切除肿瘤后可使患者γδT细胞恢复正常水平。     

γδT细胞与肿瘤免疫

Ｔ细胞因其表面受体不同分为αβＴ细胞和γδＴ细胞两大类。γδＴ细胞在受体结构，组织分布，抗原识别以及功能等方面都与αβＴ细胞明显不同。随着研究的深入，人们发现γδＴ细胞亦在相当程度上参与了肿瘤免疫。本文就以上问题进行了综述。     

γδT细胞的细胞毒活性研究

目的 探讨选择性扩增人γδT细胞的方法及其细胞毒活性。方法 用耐热性结核杆菌分子多肽抗原（Mtb)刺激正常人PBMC，并用磁珠阳性分选法获得高纯度的γδT细胞，通过MTT试验观察γδ细胞对人红白细胞白血病细胞K562的细胞毒活性。结果 Mtb刺激及磁珠分选后的γδT细胞可达73％和98．05％，效靶细胞比例为10：1时其对K562细胞的杀伤率分别为59％和78．5％。结论 Mtb刺激及磁珠分选所获得的高纯度γδT细胞可介导对K562细胞的高效细胞毒活性。     

Gal-1单抗增强γδT细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用

目的:探讨γδT细胞联合半乳糖凝集素1(galectin-1,Gal-1)单抗对人宫颈癌细胞的杀伤作用。方法:从人宫颈癌组织中分离肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocytes,TILs),并通过固相单抗包被法在体外扩增获得γδT细胞,流式细胞术检测其纯度;Western blotting和ELISA法检测宫颈癌SiHa、HeLa细胞及其上清中Gal-1的表达,乳酸脱氢酶(lactate de-hydrogenase,LDH)释放实验检测γδT细胞联合Gal-1单抗对宫颈癌SiHa、HeLa细胞的杀伤作用。皮下注射SiHa细胞制备荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、同型对照组(IgG1组)、γδT细胞组(γδT组)、Gal-1单抗组(Gal-1mAb组)及γδT细胞联合Gal-1单抗组(γδT+Gal-1 mAb组),观察各组荷瘤小鼠移植瘤生长的情况。结果:固相单抗包被法体外扩增后TCRγδ阳性γδT细胞比例达(91.2±1.2)%,SiHa、HeLa细胞及其上清中Gal-1高表达。与对照组相比,Gal-1 mAb组能够增强γδT细胞体外杀伤SiHa细胞[(68.1±3.0)%vs(48.7±3.8)%,P<0.05]和HeLa细胞[(79.4±5.6)%vs(48.3±6.5)%,P<0.05]的效率。裸鼠荷瘤30 d,γδT+Gal-1 mAb组的移植瘤体积明显小于Gal-1单抗组[(31.3±9.1)vs(199.6±41.2)mm3,P<0.01]和γδT细胞组[(31.3±9.1)vs(85.6±45.1)mm3,P<0.05]。结论:Gal-1单抗能增强γδT细胞对宫颈癌细胞的杀伤作用。     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性的临床意义。方法:采用流式细胞仪测定乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,以正常人作对照。结果:乳腺癌患者外周血CD3 ,CD4 ,NK细胞数量及CD4 /CD8 比值较正常对照组均明显下降(P<0.05),而CD8 细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与乳腺癌临床病理指标有关,分期越晚,CD3 细胞、CD4 细胞、CD4 /CD8 细胞比值及NK细胞数量越低,CD8 细胞水平越高;I、II期乳腺癌患者与III、IV期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论:乳腺癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于乳腺癌患者的免疫监测。     

γδT细胞在细胞免疫治疗骨肉瘤中的潜在作用

γδT细胞是T淋巴细胞中一类数量比较少的细胞,不受MHC I、Ⅱ类分子以及相关抗原肽配体限制,可直接识别抗原,分泌细胞因子溶解靶细胞,具有广泛的抗肿瘤活性.在骨肉瘤患者中,γδT细胞可通过识别骨肉瘤细胞表面相关抗原,溶解杀灭肿瘤细胞.未来以γδT细胞为基础的细胞免疫疗法联合手术、化疗等方法可在较大程度上提高骨肉瘤患者生存率.     

Gamma delta T 细胞及其抗肿瘤研究的进展

Gamma delta（γδ）T细胞表达Vγ9Vδ2 T细胞受体,占外周血T淋巴细胞的2％～5％左右,主要分布于黏膜相关淋巴组织,是T细胞的亚群之一。其免疫作用介于固有免疫和适应性免疫之间,为主要组织相容性复合体（MHC）非限制性细胞, 具有一定的非特异性杀伤肿瘤细胞的作用,并且具有广泛的抗瘤谱。许多研究证实γδ T细胞参与了机体免疫防御系统的第一道防线,未来以γδ T细胞为基础的细胞免疫疗法,将会成为肿瘤免疫治疗的新战略。本文将对γδ T细胞的抗肿瘤作用机制及其临床应用作一综述。     

胃癌组织中Vδ1γδT细胞的数量及其NKG2D表达的研究

[目的]研究胃癌患者外周血和癌组织中以及正常胃黏膜的γδT细胞的数量变化和可能的功能改变。[方法]采用胃癌术后和非胃癌的胃溃疡病人(对照)组织样本,并取病人外周血30ml,分离其单核细胞。流式细胞仪检测外周血中γδT细胞数量百分比、正常胃黏膜和胃癌组织中的γδT细胞百分比和胃癌组织中Vδ1γδT细胞NKG2D的表达。[结果]Vγ9γδT细胞在胃癌患者外周血中的百分比显著低于对照组(2.95%±3.71%vs4.31%±3.64%,P=0.041),Vδ2γδT细胞百分比也低于对照组,但没有统计学差异(2.82%±3.63%vs4.02%±3.51%,P=0.115)。Vδ1γδT细胞在胃癌组织中的百分比显著低于正常胃黏膜(41.41%±15.04%vs53.44%±16.32%,P=0.027)。胃癌组织Vδ2、Vγ9γδT细胞的百分比与正常胃黏膜比较无显著性差异。胃癌组织中产生γ-IFN的Vδ1γδT细胞数为3.18±1.98,显著低于正常胃黏膜(5.87±3.25,P=0.007)。NKG2D表达与胃癌组织中生产γ-IFN的Vδ1γδT细胞呈显著正相关(r=0.78,P=0.007)。[结论]在胃癌组织中,Vδ1γδT细胞的数量明显下降,其功能受损。NKG2D的表达下降可能是Vδ1γδT细胞受抑制的原因之一。     

人外周血γδT细胞选择性增殖及其体内抗肿瘤的特性研究

观察人外周血γδＴ细胞在裸鼠体内的抗肿瘤效应。方法用ＭＥＰ和ＩＬ┐２共刺激培养方法,扩增人外周血γδＴ细胞,与人肠癌细胞系（ＬｏＶｏ）细胞混合接种于裸鼠体皮下。结果经共刺激培养１０天后,细胞总数可增加１００～３００倍,γδＴ细胞的比率上升到７０％以上。给裸鼠接种１×１０６ＬｏＶｏ细胞１个月后,不接种γδＴ细胞的对照组裸鼠皮下瘤块重量为０．４ｇ～０．９ｇ,瘤块病理切片显示有明显肿瘤细胞堆积;而同时接种１×１０７γδＴ细胞的实验组裸鼠瘤块重量仅为０～０．００５ｇ,瘤块病理切片显示其中除肿瘤细胞外,还伴有增生性淋巴细胞。结论人外周血γδＴ细胞能有效地抑制人肠癌细胞ＬｏＶｏ在裸鼠体内的生长。     

T细胞的扩增及其信号转导分子ZAP-70的检测

目的检测γδT细胞信号转导分子ζ链相关蛋白-70（ζ-chainassociated protein70,ZAP．70）。方法分离获取健康人PBMC,用结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb．Ag）刺激PBMC,通过流式细胞仪检测总T细胞和丫6T细胞CD69分子的动态表达;Mtb-Ag活化俩T细胞增殖培养,10d后收集细胞,用免疫磁珠阳性分选法分离获取高纯度的γδT细胞;westernblot方法检测γδT细胞内的ZAP．70分子。结果总T细胞和γδT细胞均在活化刺激24h时表达CD69分子达高峰,但总T细胞仅为16％,γδT细胞可达75．2％;新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为4．9％,Mtb-Ag刺激培养10d后升为69．2％,免疫磁珠阳性分选后达99-3％;检测到Y6T细胞内的ZAP-70分子。结论Mtb-Ag可特异性激活俩T细胞,用Mtb-Ag刺激γδT细胞活化增殖培养,可获得大量的γδT细胞;成功地检测到细胞内ZAP-70分子,这为Y6T细胞内其它分子的检测分析奠定方法学基础,也为进一步检测γδT细胞活化信号转导过程中ZAP-70分子的激活及作用奠定基础。     

肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及临床意义

目的:探讨肺癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中IL-17的分布特征及其临床意义。方法:流式细胞术检测15例肺癌组织和15例配对远癌正常组织中浸润淋巴细胞的IL-17表达水平。结果:肺癌患者肿瘤组织浸润淋巴细胞中IL-17A显著高于远癌正常组织（P＜0.000 1）,肿瘤组织中浸润产生IL-17的CD3+CD4+T细胞（Th17）（P＜0.001）、CD3+CD8+T细胞（Tc17）（P＜0.001）、γδT细胞（γδT17）(P＜0.000 1)均高于远癌正常组织;肺癌患者肿瘤组织浸润Th17和Tc17水平无明显差异（P＞0.05）,而γδT17水平显著高于Th17（P＜0.001）和Tc17（P＜0.000 1）;肿瘤组织中浸润的γδT17表达水平和淋巴结转移相关（P＜0.05）。结论:IL-17和肺癌发生相关,其早期主要来源是肿瘤浸润的γδT细胞;γδT17数量与淋巴结转移有关,提示γδT17细胞可能参与肺癌病程的进展。     

CD3~ TCRγδ~ T淋巴细胞亚群在肺癌患者外周血中表达及临床意义的研究

TCR存在于T细胞表面,现已证实,TCR有两种,即TCRαβ和TCRγδ在外周血中TCRγδ仅占5～15%.有关TCRγδT细胞亚群在肺癌患者外周血中表达及临床意义的研究国内外未见报道,本文通过流式细胞仪技术对20例健     

外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标与小儿白血病的关系研究

目的 研究与分析外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标与小儿白血病的关系.方法 选取60例白血病患儿为观察组,60例健康儿童为对照组,然后检测并比较两组的外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标水平,同时将观察组中不同分期与类型白血病患儿的外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标水平进行比较,并以Logistic分析上述外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标与小儿白血病的关系.结果 观察组的外周血IL-6及CD8+水平高于对照组,其他外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标水平则均低于对照组,且不同分期与不同类型白血病患儿其表达水平也存在显著性差异,以Lo-gistic分析显示,外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标水平均与小儿白血病有密切的关系.结论 外周血Th17及T淋巴细胞亚群指标在白血病患儿中呈现异常表达的状态,且与本病有密切的关系,可作为疾病的重要监测指标.     

鼻咽癌患者外周血共刺激分子的表达水平及其临床意义

目的:检测鼻咽癌患者外周血中T细胞表面程序性死亡分子1 (programmed death-1,PD-1)、刺激分子4-1BB的表达水平,探讨其在鼻咽癌中的临床意义.方法:选取2016年10至11月福建省肿瘤医院病理确诊的鼻咽癌患者30例作为研究对象,并选取同期本院体检中心性别、年龄相近的健康体检者30例作为对照组.通过流式细胞术检测外周血T细胞表面PD-1、4-1BB的表达情况以及T淋巴细胞亚群的比例.核磁共振扫描测量原发肿瘤体积.结果:鼻咽癌Ⅲ期患者外周血CD8+T细胞比例明显低于Ⅳ期患者[(13.1±6.2)％ vs(18.7±5.5)％,P＜0.05].与对照组相比,CD4+T细胞上PD-1阳性表达率显著上调[(8.7±6.5)％vs(3.87±3.0)％,P＜0.05].鼻咽癌患者外周血T细胞PD-1、4-1BB分子表达水平与临床分期、肿瘤负荷、性别及年龄无显著相关(P＞0.05).结论:鼻咽癌患者外周血PD-1和4-1BB两种共刺激分子在患者体内肿瘤免疫逃逸中可能存在协同效应.联合干预这两种共刺激分子的信号通路可能具有更高效持久的抗肿瘤效应,可为鼻咽癌免疫治疗提供新的思路.