钠/碘转运蛋白和促甲状腺激素受体在甲状腺癌中的表达及相关性

目的 研究钠/碘转运蛋白(NIS)和促甲状腺激素受体(TSHR)在甲状腺癌中的表达特征,探讨二者表达的相关性.方法 收集正常甲状腺组织18例、结节性甲状腺肿标本27例和甲状腺癌标本23例,通过荧光定量分析和免疫组化法研究NIS和TSHR的表达.结果 甲状腺癌NIS和TSHR mRNA的表达显著低于正常甲状腺组织和结节性...     

甲状腺乳头状癌中促甲状腺激素受体与钠碘转运体mRNA的表达

目的钠碘转运体(Na+/I-symporter,NIS)是介导甲状腺细胞摄取碘的重要载体,其表达、定位与促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)关系密切。文中主要研究甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinomas,PTC)及癌旁组织中TSH受体(TSH receptor,TSHR)与NIS基因的表达。方法实时荧光定量PCR法测定36例PTC及癌旁组织,20例正常组织中TSHR mRNA及NIS mRNA的表达水平。结果 PTC及癌旁组织中TSHR mRNA表达水平明显低于正常组织,P<0.05;NIS mRNA表达水平在PTC组织中显著下降,P<0.05。结论 PTC组织中TSHR与NIS mRNA基因表达水平呈现同步下降趋势,可能与TSH-TSHR信号通路的调控有关。     

促甲状腺激素受体在甲状腺相关眼病眼外肌原位表达的研究

目的研究甲状腺相关眼病(thyroid-associated ophthalmopathy, TAO)患者眼外肌组织中促甲状腺激素受体(Thy-rotropin receptor, TSHR)的表达,确定TSHR在TAO发病机制中的作用。方法收集手术治疗的12例严重的TAO患者的眼外肌组织标本及10例健康人意外死亡1 h内取出的眼外肌组织标本,4%中性甲醛固定24 h,石蜡包埋组织,作连续切片,采用免疫组织化学链霉卵白素·过氧化物酶连接法对12例严重TAO患者及10例健康人的眼外肌石蜡组织切片进行光学显微镜观察。结果TSHR在眼外肌肌束膜、细胞膜及少量胞浆中表达,12例TAO患者中有10例检测出TSHR蛋白,阳性检出率为83.3%,正常对照组未检测出TSHR蛋白的表达。结论TSHR蛋白TAO患者眼外肌组织中有表达,而在正常个体中没有表达,证实TAO患者球后眼外肌组织中存在有活性的TSHR蛋白,提示TSHR可能作为交叉抗原在TAO发病机制中起重要作用。     

分化型甲状腺癌组织中促甲状腺激素受体的表达

目的:探讨分化型甲状腺癌(DTC)组织中促甲状腺激素受体(TSHR)的表达及意义。方法:应用免疫组织化学SP法对43例DTC(39例乳头状癌,4例滤泡状癌)、30例甲状腺腺瘤及16例正常甲状腺组织进行TSHR的测定。结果:正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和DTC组织TSHR均有不同程度表达,甲状腺腺瘤组织的表达与正常甲状腺组织相似,而DTC中有88.37%(38/43)的表达与正常组织相似,11.63%(5/43)的表达低于正常甲状腺组织。DTC组织中TSHR的表达与肿瘤病理分期、有无淋巴结转移、年龄有关(P<0.05);与性别、肿瘤大小、病灶多少无关(P>0.05)。结论:DTC可能为TSHR依赖性肿瘤,TSHR检测有助于提高DTC的诊疗水平。     

射频对甲状腺癌细胞钠／碘转运体表达的影响

目的 探讨射频对甲状腺癌细胞钠/碘转运体表达的影响.方法 对29例钠/碘转运体低表达或不表达的甲状腺癌,采用射频联合131I治疗,射频前后分别行全身核素显像及血清Ig测定.结果 全身显像摄碘阳性分别为射频前4例（4/29）,射频2周19例（19/29）、4周12例（12/29）.射频4周时血清Ig水平升高5例、降低17例、无变化7例.治疗总有效25例（25/29）,治愈15例（15/29）.结论 射频诱导钠/碘转运体失表达的甲状腺癌细胞出现了碘摄取,提高了131I治疗失分化甲状腺癌的临床疗效.     

促甲状腺激素受体在甲状腺相关眼病眼外肌原位表达的研究

OBJECTIVE: To investigate the expression of thyrotropin receptor (TSHR) in the extraocular muscles (EOM) of the eyes of patients with thyroid-associated ophthalmopathy (TAO). METHODs: EOM specimens were obtained from 12 patients with severe TAO and 10 healthy subjects within 1 hour after accidental death and the paraffin-embedded sections were observed by streptavidin-peroxidase (SP) immunohistochemical methods. RESULT: The expression of TSHR was observed in the perimysium, cytomembrane and cytoplasm in 10 of the 12 TAO specimens, accounting for a TSHR expression rate of 83.3% in the EOM of TAO patients. No TSHR protein was found in the healthy subjects. CONCLUSION: High TSHR expression in the EOM of TAO patients indicates that as a common antigen between the orbit and thyroid, TSHR play a key role in the pathogenesis of TAO.     

甲状腺钠/碘转运蛋白研究进展

甲状腺钠/碘转运体（NIS）是一种糖化膜蛋白,甲状腺滤泡细胞摄入碘主要依赖NIS,其表达于甲状腺滤泡细胞基底膜。NIS的主要功能是转运细胞外碘进入细胞内,可使细胞内碘浓度高于细胞外20～40倍。甲状腺滤泡细胞能否表达NIS蛋白是施行甲状腺癌131I治疗的基础和确定疗效的关键指标。本文复习有关文献,对甲状腺组织NIS的表达调控,NIS转染法介导的甲状腺癌和其它肿瘤131I治疗最新进展进行归纳总结。     

乳头状甲状腺癌与促甲状腺激素受体第三胞内环基因突变的研究

目的探讨乳头状甲状腺癌的发病是否与促甲状腺激素受体(TSHR)第3胞内环基因突变相关。方法采用多聚酶联反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)和DNA测序方法,对65例乳头状甲状腺癌和44例正常甲状腺组织TSHR第3胞内环基因进行检测。结果经PCR-SSCP检测乳头状甲状腺癌促甲状腺激素受体(TSHR)第3胞内环未发现明显带型异常;取2例对照组织和3例甲状腺癌组织进行DNA测序,TSHR2000位点碱基均由C→T,使得所编码的601位氨基酸由组氨酸(CAT)→酪氨酸(TAT)突变(His→Tyr),余未发现其他基因突变。结论乳头状甲状腺癌发病与TSHR第3胞内环基因突变无关;中国人TSHR基因与国外人群存在多态性差异。     

甲状腺良恶性病变组织中钠碘同向转运蛋白mRNA的表达变化

目的 探讨良恶性病变甲状腺组织中钠碘同向转运蛋白(NIS) mRNA的表达变化.方法 取甲状腺切除术中的新鲜组织标本,根据病理学检查结果分为结节性甲状腺肿组、甲状腺腺瘤组、甲状腺癌组和瘤周甲状腺组织对照组,采用Real-Time PCR技术测定各组甲状腺组织中NIS mRNA表达.结果 与对照组相比,结节性甲状腺肿组、甲状腺腺瘤组、甲状腺癌组甲状腺组织中NIS mRNA的相对表达量显著减少(P＜0.01).在不同病变组,甲状腺癌组NIS mRNA的相对表达量下降更为明显(P＜0.01);结节性甲状腺肿组与甲状腺腺瘤组NIS mRNA的相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 甲状腺良恶性病变均存在NIS mRNA表达的下调,且以恶性病变更为明显.提示甲状腺病变时甲状腺“碘泵”功能存在不同程度的损害.     

钠/碘转运体在不同甲状腺组织中的表达

目的：检测钠/碘转运体（sodium/iodide symporter,NIS）在不同甲状腺组织中的表达以及在甲状腺乳头状癌中的分布。方法：选取正常甲状腺组织16例、结节性甲状腺肿组织14例、甲状腺乳头状癌23例,运用蛋白免疫印迹（Western blot）技术检测NIS的表达,并分开提取甲状腺乳头状癌胞浆、胞膜蛋白,分析NIS在甲状腺乳头状癌组织中的分布情况。结果：乳头状癌组、结节性甲状腺肿组NIS表达与正常组相比增高,差异有统计学意义（P〈0.05）;23例乳头状癌中,21例表达于胞浆,仅10例在胞膜上检测到,阳性率分别为91.3%和43.5%,两者差异有统计学意义（P〈0.01）;10例胞浆、胞膜均阳性者胞浆组NIS表达高于胞膜组,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：在甲状腺乳头状癌、结节性甲状腺肿中NIS表达增高,但是在甲状腺乳头状癌中NIS主要表达在细胞浆中,而非细胞膜上。     

促甲状腺激素受体的分子结构与自身免疫疾病的相关研究进展

Graves'病是一种常见的器官特异性自身免疫性疾病,与其他自身免疫性疾病引起器官损伤不同,它表现为器官的高功能状态,临床特征为甲状腺功能亢进。在Graves’病中,甲状腺刺激性自身抗体模仿TSH的作用,刺激甲状腺细胞产生及分泌过多的甲状腺激素。目标抗原TSHR的分子结构是导致甲状腺刺激性自身抗体产生的主要原因。编码TSHR的基因位于人14号染色体长臂3区1带,翻译后完整的TSHR要经过一系列加工修饰,如糖基化,硫酸盐化,蛋白棕榈化及裂解和脱落等。近十年来我们对TSHR受体分子的结构和功能特点及其与Graves’病发病相关性等方面的研究有了更大突破。本文就此领域做一综述。     

钠/碘转运体在分化型甲状腺癌及其淋巴转移灶中的表达和分布

目的:研究钠/碘转运体(sodium/iodide symporter,NIS)在分化型甲状腺癌及其淋巴转移灶中的表达情况,探讨NIS与分化型甲状腺癌的关系及放射碘治疗分化型甲状腺癌的意义?方法:用实时荧光定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)法及组织芯片免疫组化法检测分化型甲状腺癌原发灶,癌旁组织及其淋巴转移灶中NIS表达情况?结果:RT-PCR示:癌旁组织和分化型甲状腺癌原发灶NIS的mRNA表达量无显著性差异,转移淋巴结组NIS mRNA表达较其他组低?免疫组化示:NIS在分化型甲状腺癌原发灶?癌旁组织及淋巴转移灶中NIS阳性表达率无统计学差异,但是NIS在分化型甲状腺癌原发灶及淋巴转移灶胞膜中的表达比在癌旁组织胞膜中的表达低?结论:在甲状腺分化型癌中,NIS表达量正常,但NIS蛋白在细胞中的定位发生了改变,主要表达在细胞浆内,并非表达在功能靶位细胞膜上,此结果对放射碘治疗甲状腺分化型癌有指导意义?     

子宫内膜癌组织中卵泡刺激素受体、黄体生成素受体的表达及意义

目的：研究子宫内膜癌组织中卵泡刺激素受体（FSHR）和黄体生成素受体（LHR）的表达情况及其意义。方法：运用免疫组化S-P法检测78例子宫内膜癌标本中FSHR和LHR的表达。结果：FSHR和LHR在高分化内膜癌中的表达阳性率分别为70.6%和70.1%,在中分化内膜癌中的表达阳性率分别为37.8%和45.9%,在低分化内膜癌中的表达阳性率分别为20.8%和25.0%。子宫内膜癌组织中FSHR和LHR表达水平具有相关性（r=0.371,P〈0.01）。结论：FSHR和LHR在子宫内膜癌组织中均有表达,且表达水平同组织分化程度密切相关。子宫内膜癌患者可能从针对FSHR和LHR的辅助性内分泌治疗中获益。     

维甲酸对乳腺癌细胞MDA-MB453钠碘转运体调控

目的本实验通过维甲酸对乳腺癌细胞的钠碘转运体(NIS)基因及蛋白表达和摄碘功能的影响,探讨乳腺癌细胞NIS的表达特点和调控因素.方法我们采用乳腺癌细胞MDA-MB453进行培养,分别给予不同浓度的维甲酸(RA)进行刺激72 h.采用RT-PCR方法检测细胞中NIS的mRNA表达;用WesternBloot方法检测NIS蛋白水平;采用125I测定乳腺癌细胞摄碘功能的变化.结果乳腺癌细胞MDA-MB453在经过RA刺激后,细胞中NIS的mRNA表达比对照组有明显增加,并且与RA浓度成正比.细胞中NIS的蛋白表达比对照组也有明显增加,并且与RA浓度相关.经过RA刺激的乳腺癌细胞摄碘能力明显增加.结论维甲酸对乳腺癌细胞MDA-MB453的NIS基因和蛋白表达均有促进作用,而且促进乳腺癌细胞的摄碘,这提示维甲酸可能通过调节乳腺癌NIS基因和蛋白的表达,从而影响乳腺癌细胞对放射性碘治疗的敏感性.     

人甲状腺钠/碘转运体基因全长的克隆及其重组表达质粒的构建

目的:利用基因工程的方法制备甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)cDNA,为今后的转基因治疗奠定物质基础。方法:采用TRIzol一步法,从甲状腺组织中提取总RNA,再应用RT-PCR扩增出hNIS基因全长,然后采用TOPO克隆技术构建重组表达质粒pcDNA3.1D/FLhNIS,并进行酶切和测序鉴定。结果:成功制备了hNIScDNA并构建了其重组表达质粒。结论:为最终实现131I治疗不摄碘的肿瘤提供了分子生物学基础。     

钠碘转运体报告基因共表达对嵌合型受体T细胞体外增殖及杀伤能力的影响

目的 探讨钠碘转运体（NIS）报告基因的共表达对嵌合型受体T（CAR-T）细胞体外增殖和杀伤活性的影响。方法 慢病毒感染法制备CAR-T细胞（仅表达CD19 CAR的T细胞）、NIS-T细胞(仅表达NIS报告基因的T细胞)和NIS-CAR-T细胞（共表达NIS和CD19 CAR的T细胞）,然后按T细胞蛋白表达情况分为4组∶T细胞组（未转染的T细胞）、CAR-T组、NIS-T组、NIS-CART组。流式细胞术检测各组NIS和CAR转染率。各组细胞常规培养24、48、72 h,CCK-8法检测增殖能力。各组T细胞为效应细胞,Nalm6肿瘤细胞为靶细胞,按效靶比0.5∶1、1∶1、2∶1、4∶1共培养24、48、72 h,乳酸脱氢酶细胞毒性检测法（LDH）检测各组细胞对肿瘤细胞的杀伤率,酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测共培养上清液中各组细胞因子人干扰素-γ（IFN-γ）和人肿瘤坏死因子-β（TNF-β）释放水平。摄碘实验检测表达NIS蛋白各组细胞的NIS功能。结果 CAR-T细胞、NIS-CAR-T细胞的CAR转染率分别为91.91%、99.41%,NIS-T细胞、NIS-CAR-T细胞的NIS转染率分别为47.83%、50.24%。常规培养24、48、72 h CAR-T细胞与NIS-CAR-T细胞增殖率差异无统计学意义（P>0.05）。0.5∶1、1∶1、2∶1和4∶1效靶比作用24 h时CAR-T细胞杀伤率（%）均高于NIS-CAR-T细胞（P<0.05）,作用48 h和72 h时两组杀伤率差异均无统计学意义（P>0.05）。CAR-T细胞与NIS-CAR-T细胞均存在IFN-γ和TNF-β释放现象,释放水平均高于对照组（P<0.05）。NIS-T细胞与NIS-CAR-T细胞均具有特异性摄碘能力,二者间摄碘能力差异无统计学意义（P>0.05）,但均高于对照组T细胞（P<0.05）。结论 NIS报告基因的共表达不影响CAR-T细胞中CAR转染率,对细胞增殖和杀伤活性无抑制现象。