叔丁醇脱水干燥法在游离细胞扫描电镜样品制备中的应用

游离细胞由于含水量高，需进行脱水和干燥处理后才能进行扫描电镜观察。该文采用叔丁醇对游离细胞进行脱水干燥，结果制备的样品结构清晰，适合于电镜观察，且无需特殊仪器，耗时短，成本低。     

游离细胞扫描电镜样品制备方法的改良

<正>作者将常规游离细胞扫描电镜样品制作方法法作了某些改良,取得了较为满意的效果,适于电镜观察,拍摄照片清晰,介绍如下。 方法 1.盖玻片预处理:盖玻片酸泡24小时,自来水冲洗,双重蒸馏水漂洗,无水酒精浸泡,烘干备用。此种玻片适合于贴壁生长的组织培养细胞如巨噬细胞、腹水癌细胞等;如果样品为游离不易贴壁生长的细胞,则可在上述处理过的玻片上涂一层5％的卵蛋白,烘干备用。     

游离细胞透射电镜样品预处理技术

电镜样品的生物组织来源一般分两种形式:一为组织块,二为游离细胞.组织块的常规电镜样品处理方法比较成熟、稳定,已被广大电镜工作者所掌握.但送检样品为液体及人工培养的微量细胞和细菌等游离细胞时,则须在包埋前经过细胞收集成块的预处理.关于这方面的技术也有相关报导,但往往由于步骤烦琐或赋型剂选择不当,影响样品的后期处理.本文介绍一种简便易行、细胞数量适中、利于切片的游离细胞预处理技术,以供参考.     

胶体金标记游离细胞表面抗原的电镜样品制备方法

目的 胶体金标记游离细胞表面抗原研究的样品制备方法。方法 对白血病细胞如耐药株K562／ADM细胞和敏感株K562细胞进行离心，前固定，清洗，冰冻切片，后固定，漂洗，脱水，包埋聚合，超薄切片，染色等电镜样品制备过程的研究。结果 在阳性细胞（耐药株K562／ADM细胞）实验组表面发现大量胶体金颗粒，而对照组没有发现胶体金颗粒。阴性细胞（敏感株K562细胞）实验组发现极少量胶体金颗粒，而对照组没有发现胶体金颗粒。结论 白血病细胞表面抗原可以用胶体金来标记。此种方法也适合游离细胞表面特异性抗原的技术定位。     

体外培养细胞扫描电镜制样技术的改进

体外细胞培养始于上世纪之初,现已成为重要的生命科学研究手段之一。其中,培养细胞的扫描电镜的观察是一种较为常见的形态学研究方法。由于扫描电镜的样品制备过程比较复杂,致使以盖玻片培养的细胞,到现在的多孔载体培养细胞来制备扫描电镜样品都有其不足之处。经各种固定液和缓冲液处理后于电镜下常可出现细胞脱落龟裂和重叠等人为假象。近年来,人们发现,以天然葡聚糖小颗粒（直径约50μm）为原料的多孔微载体上培养的细胞,其常规扫描电镜样品的观察效果较好,但存在着载体价格昂贵的问题。     

一例正常熊声带的扫描电镜观察

熊类具有独特的生理学、医学研究价值，有关熊声带的扫描电镜下超微结构的研究，国内、外杂志均未见报导，本实验将1例正常亚洲棕熊声带进行扫描电镜观察，报导如下。健康亚洲棕熊一只，雄性，2岁，发音正常，腹主动脉切断处死，立刻暴露切取正常声带组织置2．5%戊二醛磷酸缓冲液中固定，常规处理，扫描电镜观察。结果见熊声带粘膜上皮为复层磷状上皮，固有层内有大量弹性纤维。表浅层细胞为多边形，游离面有数条与声带     

扫描电镜组织样品制作方法

在制备扫描电镜样品的过程中,常遇到组织、细胞容易脱落和成像不良问题。对如何避免游离细胞在制备过程中脱落和变形问题我们作了初步探讨;关于组织样品制备方法有关杂志和专著已有所涉及,并作了一些研究,但如何使组织在标本台上附着牢固,又不产生充放电而影响成像,尚未得到解决。因此,我们结合日常实际工作对上述问题进行探讨。 一、材料和方法 1.材料:①采自人体组织,如胃粘膜、肝、肾、、牙齿等;动物如鼠、狗、兔的心、肝、肾、胃肠、骨、气管以及豚鼠的内耳等组织。②普通双面胶带(上海产)、分析纯单宁酸及常用扫描样品制作试剂。     

树突状细胞扫描电镜样本制备方法

目的探讨具有特殊结构的悬浮树突状细胞的扫描电镜制样方法.方法对比观察细胞离心成团与自然沉降法制备扫描电镜样品对细胞形态学的影响.结果自然沉降法能很好地显示树突状细胞的形态结构.结论自然沉降法是制作具有特殊结构悬浮细胞的扫描电镜制样方法.     

悬浮及游离细胞的电镜样品制备法研究

<正> 随着透射电子显微镜(TEM)在单细胞超微形态学研究方面的广泛应用,对于收集保存悬浮游离细胞(如培养细胞悬液、临床上细胞学检查的送检体液等),就显得非常重要。以往制备悬浮游离细胞电镜样品,通常采用从提取细胞到环氧树脂包埋步步离心的方法。由于这种收集方法离心次数多(十几次),细胞丢失亦多。致使包埋出的样品显得稀疏不集中,细胞切片机遇性小,给研究工作带来很多不便。为此,本文设计使用琼脂糖凝胶作预包埋,使细胞在锇酸固定前就再不呈游离状态,控制了细胞的丢失现象。经工作使用证明,该方法收     

应用扫描电镜显示染色体超微结构的方法

本文介绍一新的制样技术使用扫描电镜,制备了细胞染色体的样品,得到了核型完整、结构清晰的染色体图像,并首次在扫描电镜下显示出染色体的双螺旋结构。     

人食管鳞癌的进一步扫描电镜观察

利用扫描电镜观察13例人食管鳞癌。自肿瘤、增生细胞及正常粘膜部位分别取样品26个、26个及13个。食管的正常粘膜、增生细胞及瘤细胞之间的表面差别非常明显。食管癌细胞在扫描电镜上的表面特征为失去正常的微嵴和细胞间嵴,形成畸形的微绒毛及细胞突起,具有很多微凹,小圆形癌细胞间无紧密的连接。     

细胞与生物材料共培养的样品扫描电镜制备法

目的通过不同的样品制备法,在扫描电镜下观察制样方法对细胞形态的影响,筛选细胞与生物材料共培养的样品制备法。方法对样品分组采用戊二醛单固定和戊二醛、锇酸双重固定,使用间接移液法和直接移液法对样品进行脱水、置换。结果镜下显示采用戊二醛、锇酸双重固定,使用直接移液法制备的样品细胞无塌陷皱折、表面结构丰富清晰,图像反差好。结论对细胞与生物材料共培养的样品采用双重固定、直接移液法进行样品制备效果理想。     

人精子扫描电镜样品的制备与观察

扫描电镜在临床医学、基础医学等领域具有广泛的应用价值,尤其在白血病、红细胞病变、细胞凋亡等游离细胞的临床诊断及基础研究方面得到了广泛的应用[1].随着计划生育和优生优育工作的开展,对人精子的超微结构研究受到了广泛重视.     

鲜何首乌茎叶及块根组织的超微结构

目的：研究新鲜何首乌幼茎、纪叶及块根的超微结构。方法：采用ＯＤＯ扫描电镜法和冷冻蚀刻法行电镜观察。结果：发现叶表皮细胞游离面具有角质纹理，气孔由周细胞和中心细胞组成；幼茎韧皮部细胞核孔散在，膜蛋白颗粒散在或密集成惩；块根细胞质内淀粉粒的表面附有大小不一的微粒。结论：将ＯＤＯ法及冷冻蚀刻引入中草药学结构研究，可获得比光学显微镜及超薄切片透射电法更好的优势，并能更多植物细胞的三维微细结构。     

腹水癌细胞及悬浮培养细胞的透射电镜和扫描电镜样品制备技术

本文介绍一种腹水癌细胞和悬浮培养细胞的透射电镜及扫描电镜样品制备方法,操作简便,效果良好。     

新鲜何首乌组织电子显微镜制样技术的探讨

本文对新鲜何首乌根，茎，叶的电子显微镜制样技术进行了探索，结果发现：应用割断扫描电镜ＯＤＯ法，有利于从不同层次和不同方位分辨该样品的三维超微结构，有利于药用植物的分类鉴定，冷冻蚀刻电镜技术制备生鲜植物样品，由于细胞的内含水量大，细胞壁厚，易产生冰晶，该技术尚需改进。     

悬浮状物质的样品制备及扫描电镜观察

目的 通过改进物质的样品制备,以提高扫描电镜观察的图像质量.方法 将体外培养的人骨髓间充质干细胞(hMSCs)悬液经2.5%的戊二醛(pH 7.2～7.4)固定后,用吸管直接吸出固定液,经洗涤、梯度脱水、叔丁醇梯度置换,再制成细胞悬液进行涂片,空干燥,离子溅射镀膜进行扫描电镜观察.结果 hMSCs饱满、表面结构清晰,凸现质量改善明显.结论 用直接移液法处理悬浮物质扫描电镜样品明显优于传统的样品制作方法.     

甲状腺癌的扫描电镜诊断价值

扫描电镜以高分辨、大面积及立体像的观察效能研究肿瘤，是一种十分有利的工具。本文用扫描电镜观察了５例甲状腺乳头状癌和６例滤泡性癌，并以１５例甲状腺良性滤泡性肿瘤作为对照，结果表明，扫描电镜下所观察到的甲状腺滤泡结构及细胞表面形态的异常，明显反映甲状腺癌的特征。滤泡细胞的重度多形性、巨细胞、奇形细胞和奇形乳头或奇形细胞簇的出现，以及细胞排列紊乱、拥挤和被覆面崎岖不平是扫描电镜下具有诊断意义的癌的特征。此外，扫描电镜对光镜下不可辨认的早期癌变细胞亦可明确察及，说明扫描电镜对甲状腺癌的诊断有很大价值。     

体外细胞培养技术评价实验动物塑料笼具的毒性

用塑料薄片直接浸渍和直接接触两种体外细胞培养相结合方式,进行实验动物塑料笼具的细胞毒性试验,并作扫描电镜观察。钙塑盆和再生塑料盆均有明显毒性,塑料笼具有1/4样品表现轻微毒性。扫描电镜观察表明,塑料的毒性强弱直接影响细胞表面的超微结构损伤程度。     

大剂量放射性~（131）Ⅰ标记抗人肝癌单抗HAb18制剂的临床前质量控制

目的：对改良Ｍａｔｈｅｒ氏法标记的大剂量￣（１３１）Ⅰ－ＨＡｂ１８ＭｃＡｂ进行了临床前质量控制．方法：用常规检测方法（柱层析法、ＰＡＧＥ电泳法、体外培养细胞结合分析等）检测了三批样品的游离碘率、体外细胞免疫结合率、无菌、热原质及热稳定性实验等．结果：本法标记物样品热原质、无菌、毒性试验均合格，￣［１３１］Ⅰ蛋白标记率≥８８．３％，游离碘率≤１２．６％，细胞免疫结合率＞５０％，白蛋白非特异标记率＜６％，标记物在３７℃４８ｈ内，游离碘释放率＜２０％，细胞免疫结合率＞４０％．结论：本法制备的碘标记物各项安全指标合格．热稳定实验提示超过４８ｈ的标记物游离碘及免疫活性变化较大．