开闭复方对内毒素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡的保护作用

内毒素能诱导小鼠胸腺细胞凋亡,表现为凋亡细胞及凋亡小体明显增多,凋亡细胞百分率及DNA断裂百分率明显升高,琼脂糖凝胶电泳出现明显的细胞凋亡特有的“梯状”条带.用中药开闭复方后上述表现明显减轻,“梯状”条带不明显.结果提示:开闭复方对内毒素诱导的小鼠胸腺细胞凋亡有保护作用.     

加味玉屏风汤对小鼠胸腺细胞凋亡的抑制作用

目的：研究不同浓度的加味玉屏风汤对地塞米松磷酸钠（Dex-p)诱导的小鼠胸腺细胞凋亡和胸腺细胞自发凋亡的影响。方法：通过体外细胞培养，采用琼脂糖凝胶电泳、荧光显微镜检测手段，观察加味玉屏风汤作用前后对胸腺细胞凋亡程度的影响。结果：胸腺细胞既可发生自发凋亡，又可由Dex-p诱导凋亡，细胞凋亡率与Dex-p呈浓度依赖关系，最佳诱导浓度为10^-7mol/L。加味玉屏风汤（200－400μg/ml）可不同程度地抑制由Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡（P＜0.01)；而低浓度（＜100μg/ml)的加味玉屏风汤则对Dex-p(10^-7mol/L)诱导的胸腺细胞凋亡无明显影响（P＞0.05)；加味玉屏风汤200、400μg/ml可使胸腺细胞的自发凋亡率明显降低（P＜0.01)。结论：不同浓度加味玉屏风汤（200－400μg/ml)可不同程度抑制胸腺细胞的自发凋亡及由Dex-p(10^-7mol/L）诱导的凋亡。     

中华芦荟多糖对辐射小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期的影响

目的研究芦荟多糖(AP)对受60Coγ射线辐射后小鼠胸腺细胞凋亡及细胞周期进程的影响.方法取小鼠辐射后不同时间点胸腺单细胞悬液,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的改变,1.8%琼脂糖凝胶电泳检测DNA梯形条带,透射电镜观察细胞超微结构的变化.结果辐射前30 min ip 50 mg/kg AP能显著降低6 Gy γ射线辐射后4 h、8 h和12 h小鼠胸腺细胞凋亡率,显著提高各时间点G0/G1期细胞所占比例,降低G2/M期细胞比例.能使DNA片段明显减少;显著改善细胞超微结构,明显减少凋亡小体数量.结论AP对辐射小鼠胸腺细胞的保护作用与改善细胞周期紊乱、抑制细胞凋亡有关.     

姬松茸多糖对大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响

目的:观察姬松茸多糖对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱发大鼠胸腺细胞凋亡和线粒体膜电位的影响.方法:Wistar大鼠随机分为4组:正常组,模型组,姬松茸多糖低、高剂量组,每组10只.正常组和模型组灌胃(ig)生理盐水,姬 松茸多糖低、高剂量组ig姬松茸多糖溶液(60,120 mg·kg-1),1次/d,连续7d.模型组和姬松茸多糖低、高剂量于第7日腹腔注射DEX(0.02 g·kg-1).3h后处死各组动物,迅速无菌取胸腺,采用显微观察、流式细胞技术观察胸腺细胞形态学改变,胸腺细胞凋亡、脱氧核糖核酸(DNA)断裂百分率及线粒体膜电位变化,胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化.结果:与模型组比较,姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体嵴肿胀明显减轻;姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞凋亡率[低、高剂量(5.96±1.14)％,(5.07±1.02)％],DNA断裂率[低、高剂量(3.67±0.49)％,(3.24±0.45)％]及胸腺组织MDA含量[低、高剂量(1.87±0.25),(1.72±0.23)μg·mg-1]均明显低于模型组[(7.14±1.62)％,(4.25±0.86)％,(2.16±0.38) μg·mg-1];姬松茸多糖组大鼠胸腺细胞线粒体膜电位(荧光指数:低剂量38.57±6.29,高剂量41.36±7.18)及胸腺组织SOD活性量[低、高剂量(25.78±3.94),(27.36 ±4.21)U.mg-1]明显高于模型组(32.76 ±5.48)荧光指数,(21.45±3.52) i g· mg-1.结论:姬松茸多糖可阻断胸腺细胞DNA断裂和线粒体膜电位的下降,有效抑制DEX诱导的胸腺细胞凋亡,其作用机制与姬松茸多糖提高胸腺组织抗氧化功能有关.     

五味子多糖诱导SKOV3细胞凋亡及分子机制研究

目的 探讨五味子多糖对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养卵巢癌SKOV3细胞,应用MTT法检测五味子多糖对SKOV3细胞抑制率的影响,Westernblot检测五味子多糖对SKOV3细胞细胞Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响.结果 与对照组比较,给予不同浓度的五味子多糖细胞抑制率明显升高(P＜0.05);Western-blotting结果显示,与正常对照组细胞比较,五味子多糖组细胞中Bcl-2蛋白表达明显减少(P ＜0.05);Bax与Caspase-3蛋白表达明显增加(P＜0.05).结论 五味子多糖具有诱导卵巢癌细胞凋亡的作用,其机制可能与细胞凋亡的线粒体途径有关.     

当归多糖影响小鼠胸腺细胞凋亡的实验研究

目的:观察当归多糖(AP)对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法:以地塞米松造成胸腺细胞凋亡小鼠模型,观察胸腺细胞形态学的改变,并统计细胞凋亡率及各组小鼠胸腺细胞凋亡指数的变化。结果:模型组具有凋亡细胞典型的形态学特点,低剂量组凋亡细胞数目明显降低,胸腺细胞凋亡指数随着当归多糖剂量的加大而逐渐减少。结论:当归多糖具有抑制地塞米松诱导的胸腺细胞凋亡的作用。     

五味子粗多糖拮抗环磷酰胺诱导小鼠微核的实验研究

采用沸水浸泡并用水醇沉提取五味子多糖进行小鼠骨髓嗜多染红细胞（PCE）微核试验,目的是为了研究五味子多糖对环磷酰胺（CP）诱导的小鼠骨髓PCE微核突变的影响,结果表明,与阳性对照组比较,高中低3个剂量组微核形成率有显著的差异（P＜0.01）,说明五味子多糖具有抗突变的活性.     

杜仲总多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响

目的研究杜仲总多糖对环磷酰胺致免疫低下小鼠的影响。方法应用环磷酰胺建立免疫低下小鼠模型,给予不同剂量杜仲总多糖后,测定小鼠体重、胸腺指数、脾指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数等指标。结果300g杜仲原药材经提取分离得9.3g多糖干品。应用环磷酰胺后,小鼠体重、胸腺指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数均降低。杜仲总多糖能减轻环磷酰胺致小鼠体重的下降,升高免疫低下小鼠胸腺指数,明显增加小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率、吞噬指数(P<0.01)。与空白组比较,杜仲总多糖还能提高正常小鼠的脾指数(P<0.05)。结论杜仲总多糖能够较好地增强小鼠免疫功能。     

五味子多糖对环磷酰胺致生精障碍大鼠的治疗作用及对生殖激素的影响

目的 探讨五味子多糖对环磷酰胺（CTX）致生精障碍大鼠的治疗作用及其对生殖激素的影响。方法 醇碱法提取五味子多糖。50只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组以及五味子多糖低、中、高剂量组。除正常组外,其余4组均给予腹腔注射CTX 80 mg/（kg·d）连续5天,制备生精障碍大鼠模型。造模后,五味子多糖低、中、高剂量组分别给予五味子多糖100、200、400 mg/（kg·d）灌胃,正常组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,均每天1次,连续60天。末次灌胃后24 h,取大鼠血清和睾丸组织。酶联免疫法测定大鼠血清卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）和睾丸组织匀浆睾酮（T）水平;比较各组大鼠精子密度、活率及精子畸形率;HE染色观察睾丸组织形态。结果 与正常组比较,模型组精子密度和精子活率降低,精子畸形率升高,血清FSH和LH水平升高,睾丸组织匀浆中T含量降低,差异均有统计学意义（P<0.01）。与模型组比较,五味子多糖各剂量组精子密度、精子活率升高,精子畸形率降低,血清FSH和LH水平降低,睾丸组织匀浆中T含量升高,差异均有统计学意义（P<0.01,P<0.05）,且五味子多糖各剂量组呈剂量依赖性。组织学观察显示,五味子多糖各剂量组大鼠睾丸组织病理性损害均得到改善。结论 五味子多糖对CTX所致大鼠生精障碍具有明显的治疗作用,其机制可能与恢复下丘脑—垂体—性腺轴的调控功能有关。     

羊栖菜多糖对软脂酸诱导的HL-7702细胞凋亡的保护作用

目的:探讨羊栖菜多糖(SFPS)对软脂酸诱导的肝细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法:SFPS不同浓度(25、50、100μg/mL)预处理24h后,0.5mmol/L软脂酸(PA)作用48h诱导正常人肝细胞株(HL-7702)凋亡。MTT比色法检测SFPS对细胞增殖的影响;Annexin V-FITC标记法检测细胞的凋亡;RT-PCR法检测凋亡调控基因Bcl-2、Bax的表达并计算其比值(Bcl-2/Bax)。结果:0.5mmol/L PA处理48h的HL-7702细胞存活率下降为正常对照组的64.9%,细胞凋亡率为35.1%,Bax表达上升,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值明显下降(均P<0.05);与模型组相比,SFPS不同浓度(25、50、100 ug/ml)预处理后细胞存活率逐渐升高,细胞凋亡率显著降低,Bax表达逐渐下降,Bcl-2表达及Bcl-2/Bax比值逐渐上升(均P<0.05)。结论:SFPS对PA诱导的肝细胞凋亡有较好的保护作用,其作用机制可能与调节Bcl-2、Bax基因的表达有关。     

五味子多糖对荷瘤鼠瘤体抑制作用的病理学观察

目的:研究五味子多糖对S180荷瘤鼠的抑瘤作用.方法:采用肿瘤移植的动物模型,对瘤体包埋、制片、HE染色,观察五味子多糖的抑瘤情况.结果:五味子多糖可在一定程度上使瘤细胞退变、凋亡,使瘤内炎细胞增多,瘤周浸润部瘤细胞部分退变,有轻度抑瘤形态学表现.五味子多糖合并环磷酰胺有较强抑瘤作用.结论:五味子多糖具有一定的抑瘤作用,其抑瘤作用可能不是直接杀死瘤细胞,而与细胞凋亡、活化免疫细胞有关.且五味子多糖与环磷酰胺合用可使抑瘤作用增强.     

五味子多糖对化疗性肠道黏膜炎小鼠的保护作用

目的:观察五味子多糖对5-氟尿嘧啶(5-FU)引起的肠道黏膜炎的治疗作用及探讨其作用机制。方法:使用5-FU造模,将小鼠随机分为正常组,模型组,多糖高、中、低剂量组(20,10,5 mg·kg-1)。观测小鼠腹泻和体重情况;将小鼠处死后,通过测量小肠绒毛高度、隐窝深度、以及计算绒毛高度/隐窝深度比值进行形态学评价;通过酶联免疫(ELISA)法测定小肠组织白细胞介素-1β(IL-1β),IL-6,肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量。结果:给药第4天,与模型组相比,高、中剂量多糖组体重比率明显提高(P0.01);高、中剂量多糖组大便得分显著低于模型组(P0.05,P0.01)。五味子多糖显著抑制5-FU引起的小肠肠绒毛高度缩短、隐窝深度值更大、绒毛高度/隐窝深度比减少(P0.01);明显降低TNF-α,IL-1β,IL6水平(P0.01)。结论:五味子多糖能改善5-FU引起的肠道黏膜炎症状,其作用机制可能与通过抑制TNF-α,IL-1β,IL6等炎症因子的水平有关。     

南,北五味子的红外光谱鉴别

对南五味子和北五味子药材的石油醚、乙醚和水的提取物进行红外光谱测定，结果南五味子和北五味子分别具有和很好的光谱特征，根据其红外光谱可以准确地鉴别南、北五味子。     

南北五味子中木脂素类成分含量的比较

目的:建立同时测定南、北五味子中5种木脂素成分(五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素)含量的超高效液相色谱法,并比较不同产地五味子类药材中木脂素类成分含量。方法:Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm),流动相乙腈-水,梯度洗脱,流速0.4 m L·min-1,检测波长235 nm,柱温45℃,进样量1μL。以5种成分含量为评价指标,采用聚类分析法对南北五味子进行种类识别。结果:分析时间内,上述5种木脂素成分在10 min内分离度良好,在0.001~0.222μg线性关系良好,相关系数均0.999 8,平均加样回收率在97.7%~105.1%,RSD均3.0%。南北五味子中5种木脂素类成分含量差异显著,聚类分析结果也表明,南北五味子能完全被区分为两大类。结论:该方法重复性好,准确可靠,灵敏度高,可为五味子类药材的分类和质量控制提供参考。     

五味子与南五味子药材的DNA条形码鉴定

目的:利用内转录间隔区2(ITS2)序列对五味子及南五味子药材进行DNA条形码鉴定。方法:对五味子和南五味子样品的ITS2序列进行聚合酶链式反应(PCR)扩增和测序。从Gen Bank中下载了五味子属10个近缘种和2个外类群的ITS2序列。利用Codon Code Aligner软件拼接,采用MEGA 5.10计算相关数据,基于K2P模型构建聚类树(NJ树),应用Blast法进行鉴定分析。获取所测样品序列的ITS2二级结构信息,分析各样品间ITS2序列二级结构的差异。结果:五味子、南五味子样品序列长度分别为231,225~227 bp,Blast鉴定五味子药材原植物为五味子Schisandra chinensis,南五味子药材原植物为华中五味子S.sphenanthera。五味子与南五味子药材的种间K2P遗传距离(0.010 4~0.015 7)远大于五味子种内K2P遗传距离(0~0.002 5)和南五味子种内K2P遗传距离(0~0.005 1)。在NJ树模型中,五味子样品被独聚为1支,南五味子样品被独聚为1支,皆表现出单系性,Bootstrap支持率较高,可与五味子属近缘种区分开。结论:以ITS2序列为标准的DNA条形码能够有效地鉴定五味子和南五味子药材。     

五味子不同炮制品对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响

目的:比较五味子不同炮制品对小鼠脾淋巴细胞增殖作用的影响,为五味子临床合理用药提供实验依据。方法:将五味子不同质量浓度(400,200,100,50 mg·L-1)提取液与细胞密度为4×106个/m L的脾淋巴细胞于96孔板中共同培养48 h,每组6个复孔,以增殖率为指标,采用CCK-8比较生五味子、酒五味子、醋五味子对小鼠脾淋巴细胞、刀豆蛋白A(Con A)和脂多糖(LPS)诱导的T,B淋巴细胞增殖的影响。结果:与空白组比较,Con A,LPS可诱导T,B淋巴细胞增殖;与不同指标相应空白组比较,五味子给药组均能不同程度促进未活化脾淋巴细胞及Con A和LPS诱导的T,B淋巴细胞的增殖,同等剂量下,酒五味子增殖效果最佳,优于生五味子、醋五味子(P0.05,P0.01)。结论:五味子酒制后对小鼠淋巴细胞增殖作用显著增强,符合"入补药熟用"传统理论。     

南五味子、五味子HPLC指纹图谱研究和木脂素成分测定

目的 采用HPLC法建立南五味子和五味子药材的指纹图谱,并同时测定4种木脂素.方法 以五味子酯甲、五味子甲素、五味子醇甲和五味子乙素为对照,采用Eclipse XDB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-四氢呋喃-水梯度洗脱;检测波长220 nm;体积流量1.0 mL/min进行试验,用中国药典委员会颁布的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本:2004AB)计算处理,分别建立南五味子、五味子甲醇提取物的指纹图谱,并同时测定4种木脂素.结果 南五味子药材指纹图谱中标定了25个共有峰,五味子药材指纹图谱中标定了24个共有峰;不同产地南五味子指纹图谱相似度均大于0.9,但其主要木脂素成分量差异较大;不同产地五味子指纹图谱相似度亦大于0.9,但南五味子、五味子指纹图谱相似度小于0.3.结论 南五味子、五味子药材的指纹图谱特征性和专属性强,结合木脂素成分的测定,可为全面控制药材的质量提供科学方法.     

南北五味子化学成分、药理作用等方面差异的研究进展

五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinesis或华中五味子S.sphenanthera的干燥成熟果实,前者称为"北五味子",后者称为"南五味子"。五味子始载于《神农本草经》,作为中药使用已有一千多年历史,且应用于多种成方制剂。早在明代南北五味子的疗效差异已被众多医家认识,自2000年版《中国药典》开始,对五味子和南五味子分别收载,并建立了各自的质量控制标准,直至2015年版《中国药典》对其不断完善,南、北五味子形态、产地不同,成分各有差异,功能主治各有侧重,但目前临床使用存在南北五味子混用之现象。所以为了区分南北五味子,更加合理、安全、有效地将五味子应用于现代临床的治疗,该文对近年来关于南北五味子的研究进行搜集、检索、归纳、总结,从品种鉴别,化学成分(其中北五味子挥发油成分、总木脂素的含量、多糖疗效均大于南五味子),药理作用(以五味子对中枢神经系统、消化系统、心血管系统的影响为主)等方面的差异进行综述,以期为南、北五味子的研究开发以及临床应用提供参考,使南北五味子不但从形式上而且从根本上真正分开,使临床用药更加安全、准确。     

不同产地南五味子中木脂素分析研究

采用UPLC-TQ-MS技术对不同产地南五味子药材中的7种木脂素类成分进行分析评价,为南五味子的科学药用提供实验依据。结果显示秦岭以南,东侧的商洛市柞水县、山阳县所产南五味子中主要含五味子酯甲、五味子甲素;宝鸡市眉县,安康市石泉县、宁陕县,汉中市略阳县所产的南五味子主要含有安五酯素,其中宁陕县样品中五味子甲素含量也较高;而位于秦巴山区腹地的汉中市南郑县所产的南五味子主要含五味子酚、五味子甲素。总之不同产地的南五味子所含木脂素种类和含量差别很大,在实际应用中应结合现代药理实验和临床研究,根据所治疗疾病相关的主要功效成分对不同产地南五味子药材加以区别入药,以达到药物的最佳疗效。     

北五味子仁提取物对高胆固醇血症小鼠脂质代谢的影响

目的：研究北五味子仁石油醚提取物（A1）、乙醇提取后石油醚提取物（A2）、乙醇提取物（A3）和石油醚提取后乙醇提取物（A4）对高胆固醇血症小鼠脂质代谢的影响。方法：将雄性ICR 小鼠分为11组（n=10）,分别为正常饲料组、高脂饲料组、高脂饲料+1%或4%A1、A2、A3、A4 组和高脂饲料+0.1%非诺贝特（阳性药）组。饲养10 天后按照试剂盒说明书测定血清和肝脏脂质水平。结果：高脂饲料组小鼠血胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL）水平,以及胆囊和粪便中TC 含量显著升高。非诺贝特可显著降低高胆固醇血症小鼠血/肝脏脂质水平及胆囊中TC 含量,但增加粪便中TC 的排出量,并显著升高血清丙氨酸转移酶（ALT）活性。A1 具有升高高胆固醇血症小鼠的血脂和肝重量的作用。A2 和A3 降低高脂饲料组小鼠血TG水平,A4 降低血清中TC 和LDL 水平。北五味子仁4 种提取物均可显著降低胆囊TC 水平,A2、A3 和A4增加粪便TC 含量。结论：北五味子仁提取物可显著影响高胆固醇血症小鼠的脂质代谢,促进TC 排泄。