补阳还五汤对脑出血大鼠脑内MMP-2表达的影响

目的 观察脑出血大鼠脑组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达,探讨补阳还五汤治疗脑出血的作用机制。方法 采用立体定向技术制作大鼠脑出血模型,对出血后2、4、7、14、21、28 d后各组脑组织进行MMP-2免疫组织化学染色,检测脑组织各区域MMP-2的阳性微血管数。结果 正常组未见表达,假手术组皮质偶见MMP-2表达;模型组大鼠MMP-2呈双峰表达,在造模后4 d达最高峰（P〈0.01）,之后有所下降,至21 d仍有表达并再有小高峰出现（P〈0.01）;补阳还五汤组4 d时为表达低谷,并明显低于模型组（P〈0.01）,其后逐渐上升至高水平维持达2 w,其中7、14、21 d表达均高于模型组（P〈0.05）,28 d表达稍下降但仍高于模型组（P〈0.01）。结论 补阳还五汤可通过调节脑出血后MMP-2的表达,有利于微血管系统重建,改善出血后脑组织的微环境。     

补阳还五汤抗动脉粥样硬化机制的研究进展

补阳还五汤作为中医经典方剂在动脉粥样硬化的防治方面有着较好的疗效,但其治疗机制尚不明确。本文通过整理近年来补阳还五汤对于动脉粥样硬化的作用机制及其信号通路,包括炎症通路、Rho/Rho激酶信号通路、Toll样受体信号通路、基质金属蛋白酶信号通路等方面做一综述。     

银杏叶提取物对甲状腺癌细胞PI3K/Akt信号通路的影响及意义

目的探讨银杏叶提取物对甲状腺癌TPC-1细胞株磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路相关蛋白表达的影响及意义。方法培养甲状腺癌TPC-1细胞株,用96孔和6孔培养板将其分为空白组、银杏叶低、中、高剂量组(5、10、20μmol/L),实验分为3个时间点:培养24 h、48 h和72 h。通过噻唑蓝(MTT)实验、免疫组织化学法和实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测甲状腺癌TPC-1细胞株的增殖活性、PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、Akt、磷酸化(p)-Akt和凋亡蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3的蛋白含量及mRNA水平。结果银杏叶提取物能够抑制甲状腺癌TPC-1细胞株的增殖,且随时间延长和剂量的增加效果更为显著,各时间点间、各剂量组间均差异显著(P<0.05);与空白组比较,银杏叶低、中、高剂量组PI3K和p-Akt的蛋白含量及mRNA水平均显著降低且随剂量增加效果更显著(P<0.05),银杏叶低、中、高剂量组caspase-3的蛋白含量及mRNA水平均显著升高且随剂量增加效果更显著(P<0.05),银杏叶低、中、高剂量组Akt蛋白含量及mRNA水平未见显著差异(P>0.05)。结论银杏叶提取物抑制甲状腺癌TPC-1细胞株的增殖,可能与调控PI3K/Akt信号通路和促进细胞凋亡密切相关,且可见浓度依赖趋势。     

补阳还五汤对动脉粥样硬化大鼠模型血脂的影响

目的利用高脂饲料加维生素D3诱发的动脉粥样硬化(AS)模型,观察益气活血代表方剂补阳还五汤对AS模型血脂的影响,探讨其治疗作用及可能机制。方法大鼠动脉粥样硬化造模成功后,随机分为4组。补阳还五汤治疗组:造模成功后给予补阳还五汤17.5g/(kg·d)灌胃;川芎嗪治疗组:造模成功后给予川芎嗪0.2g/(kg·d)灌胃;正常对照组一直饲喂普通饲料;模型组造模成功后改喂普通饲料。灌胃30d。用药一月后测定血脂水平。结果高脂饮食加维生素D3可诱导大鼠形成动脉粥样硬化模型,模型组的血脂明显高于正常组。补阳还五汤治疗组的总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)水平均显著低于川芎嗪治疗组、模型组。结论益气活血的代表方剂补阳还五汤具有抗动脉粥样硬化作用,下调血脂水平可能是其作用机制之一。     

补阳还五汤对动脉粥样硬化大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨补阳还五汤对早期动脉粥样硬化（动粥）大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：50只雄性Wistar大鼠随机分为（1）正常对照组，（2）非高脂手术组，（3）高脂假手术组，（4）高脂手术组，（5）补阳还五汤组5组，其中（3）、（4）、（5）组采用高脂饲料喂养，（5）组每天补阳还五汤灌胃，36例w后采用双侧颈动脉结扎，脑缺血45min，再灌注3d后检测血脂水平，脑组织丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH－Px）的变化以及主动脉，脑组织的病理改变。结果：（1）高脂饲料喂养36w能形成早期动脉粥样硬化；（2）高脂手术组脑组织损伤较非高脂手术组严重且有显著性差异；（3）补阳还五汤能降低血脂水平，提高脑组织NOS、SOD、GSH－Px活性，并使病理改变明显减轻，结论：动脉粥样硬化可加重脑缺血再灌注损伤，补阳还五汤对粥大鼠脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用。     

秋水仙碱通过激动PI3K/AKT/eNOS信号通路对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的:探究秋水仙碱通过调节磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/内皮型一氧化氮合酶(eNOS)信号通路对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能的影响。方法:78只大鼠中随机选取12只作为假手术组,剩余大鼠构建AMI模型,造模成功大鼠分为模型组、秋水仙碱组[4 mg/(kg·d)]、秋水仙碱[4 mg/(kg·d)]+LY294002(20 mg/mL)组、秋水仙碱[4 mg/(kg·d)]+MK-2206(60μg/mL)组、秋水仙碱[4 mg/(kg·d)]+L-NAME(1.6 mg/mL)组,每组12只。超声心动图检测大鼠左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心室收缩末期内径(LVESD)、射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)。处死大鼠,苏木素-伊红(HE)染色检测大鼠心肌组织石蜡切片病理学变化;末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡率;酶联免疫吸附实验(ELISA)测定大鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及心肌组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢...     

PI3k/AKT信号通路在老年大鼠乳腺癌血管形成中的作用及对整合素连接激酶ILK的抑制效果

目的探讨磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路在老年大鼠乳腺癌血管形成中的作用及对整合素连接激酶(ILK)的抑制效果。方法随机选取老年大鼠30只设为对照组;另外选择老年大鼠30只,建立老年大鼠乳腺癌动物模型,设为观察组。观察组建模成功后以断颈方式处死,取乳腺病灶组织,对照组同样以断颈方式处死,常规取乳腺组织。采用免疫组织化学法测定两组大鼠PI3K蛋白表达阳性率;采用Western印迹法测定软骨组织中PI3K/Akt信号通路及ILK表达水平;记录并统计观察组大鼠病理资料,包括肿瘤的直径、组织分型、淋巴结转移情况,分析不同病理资料下PI3K蛋白阳性率。结果观察组老年乳腺癌大鼠PI3K蛋白及Akt蛋白表达阳性率显著高于对照组(P<0. 05);观察组老年乳腺癌大鼠中PI3K蛋白及Akt蛋白表达阳性率与性别无统计学差异(P>0. 05);观察组老年乳腺癌大鼠中PI3K蛋白及AKt蛋白表达阳性率在不同肿瘤直径、组织学分级、淋巴结转移情况中差异有统计学意义(P<0. 05);观察组乳腺癌大鼠PI3K/Akt信号表达水平显著高于对照组(P<0. 05);观察组乳腺癌大鼠ILK信号表达水平显著低于对照组(P<0. 05)。结论 PI3K/Akt信号通路在老年大鼠乳腺癌血管发展过程中有重要影响,能对ILK产生明显的抑制作用,能为乳腺癌靶向治疗提供方法与新的靶点。     

丁苯酞对脑瘫大鼠PI3K/Akt信号通路及海马神经元凋亡的影响

目的 探讨丁苯酞对脑性瘫痪(脑瘫)大鼠磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路及海马神经元凋亡的影响。方法 将75只SD雄性大鼠随机分成5组：假手术组(腹腔注射等量生理盐水)、模型组(腹腔注射等量生理盐水)、丁苯酞低、中、高剂量组[腹腔注射20、40、80 mg/(kg·d)丁苯酞]。除假手术组外,其他大鼠构建脑瘫大鼠模型,术后24 h后,对各组大鼠进行神经功能缺损评分,苏木素-伊红(HE)染色观察各组海马区组织病理变化,TUNEL染色观察海马区神经元细胞凋亡情况,Western印迹检测各组海马区B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达情况。结果 与假手术组相比,模型组海马区细胞排列稀疏紊乱、胞体减小、出现细胞核破裂现象,神经功能缺损评分、海马区细胞凋亡率、Bax蛋白表达显著升高(P<0.05),海马区Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,丁苯酞低、中、高剂量组海马区细胞上述病理症状明显减轻,神经功能缺损评分、海马区细胞凋...     

AKT/PI3K信号通路介导的干细胞动员在抗心梗后心律失常中的作用

目的 探讨心肌梗死（MI）后丝氨酸/苏氨酸/磷脂酰肌醇-3激酶（AKT/PI3K）信号通路介导的心脏干细胞（CSCs）动员对抗心梗后心律失常的影响.方法 将大鼠随机分为5组,每组20只：对照组（CON组）、结扎组（LI组）、结扎＋注射组（LI＋LY组）、缺血预处理＋结扎组（IP＋LI组）、缺血预处理＋结扎＋注射组（IP＋LI＋LY组）.采用结扎LAD的方法建立心梗模型,采用流式细胞分析、ELISA法等检测各组AKT/PI3K信号通路相关指标的表达情况及心律失常的发生情况.结果 LI＋LY组炎症反应显著高于其他各组,IP＋LI组显著低于IP＋LI＋LY组、LI＋LY组、LI组（P＜0.05）;IP＋LI组比LI组CD34＋、Oct4＋细胞的数量多（P＜0.05）;与CON组相比,IP＋LI组SDF-1表达显著增加,LI＋LY组及LI组表达明显减少（P＜0.05）;与LI组比较,IP＋LI组心律失常的发生率明显降低,QTc间期也明显缩短（P＜0.05）.结论 通过激活内源性Akt/PI3K信号通路,可有效促进内源性心脏干细胞动员及归巢,使心肌细胞再生,从而改善心脏功能,降低心肌缺血后室性心律失常的发生.     

大肠癌组织中PI3K、Akt和HGF的表达变化及意义

目的 观察磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)、丝苏氨酸激酶(Akt)和肝细胞生长因子(HGF)在大肠癌组织中的表达,探讨三者在大肠癌发生发展中的作用及其相关性.方法 采用免疫组化法检测48例大肠癌和9例正常大肠组织中PI3K、Akt和HGF.结果 大肠癌组织中PI3K、Akt和HGF的阳性表达率分别为60.42%、68.75%和72.92%,均明显高于正常大肠组织的11.11%、11.11%、22.22%(P均＜0.05);PI3K、Akt、HGF的表达呈正相关关系(r分别为0.348、0.465、0.451,P均＜0.05).PI3K、Akt和HGF异常表达与大肠癌Dukes分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),而与其组织分化程度无关(P＞0.05).结论 大肠癌组织中PI3K、Akt和HGF表达均上调,其与大肠癌的生长、侵袭、转移密切相关;HGF可能通过促进PI3K/Akt信号通路的激活,增强肿瘤细胞侵袭能力.     

基于PI3K/Akt信号通路探究电针对带状疱疹后遗神经痛大鼠神经功能的干预机制

目的 分析电针对带状疱疹后遗神经痛大鼠脊髓神经功能及磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响,明确电针治疗带状疱疹后遗神经痛的机制。方法 选取60只SFP级雄性大鼠,随机分为A、B、C、D组各15只,A组不做任何处理,B、C、D组接种水痘带状疱疹病毒制备带状疱疹后遗神经痛模型。建模完成后A组、B组不做任何干预,C组使用普瑞巴林灌胃,D组行电针干预。分析电针对带状疱疹后遗神经痛大鼠的干预作用。结果 与A组相比,B、C、D组机械痛敏阈值、热痛敏阈值均显著降低,神经递质P物质(SP)、神经激肽(NK)-1、脊髓神经元凋亡指数、p-PI3k、p-Akt蛋白表达量均显著升高(P<0.05);与B、C组相比,D组机械痛敏阈值、热痛敏阈值显著升高,SP、NK-1、脊髓神经元凋亡指数、p-PI3k、p-Akt蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论 电针可能经作用于PI3K/Akt信号通路调控带状疱疹后遗神经痛大鼠脊髓神经功能,改善神经递质异常表达,减少神经元凋亡,最终发挥抑制疼痛的作用。     

PI3K/AKT信号通路与辐射抵抗机制的研究概况

辐射抵抗的三个主要机制为内在辐射敏感性、肿瘤细胞增殖和乏氧。磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路是肿瘤细胞的存活通路之一,该通路的激活与辐射抵抗密切相关。该文就PI3K/AKT信号通路与辐射抵抗机制作一综述。     

肺癌中PI3K／AKT信号通路对Skp2调控机制的研究

目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）／AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2（Skp2）的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24h后实时RT—PCR法检测Skp2基因表达变化;Westernblot检测E2F1蛋白表达变化。结果实时RT—PCR显示LY294002作用后4种肺肿瘤细胞系中skp2基因表达均下降;Westernblot结果表明在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中E2F1蛋白表达降低,肺腺癌中E2F1蛋白未表达。结论肺癌中P13K／AKT通路可在转录水平调节Skp2表达,在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中此种调节可能通过转录因子E2F1发挥作用,而肺腺癌中E2F1不参与此种调节。     

丹参酮ⅡA对心力衰竭大鼠心室重构和PI3K/Akt信号通路的影响

目的 观察丹参酮ⅡA对心力衰竭大鼠心室重构和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的影响,阐明丹参酮ⅡA对心力衰竭的可能作用机制。方法 将48只Wistar大鼠采用随机数字表法分为正常对照组(A组)、模型组(B组)和丹参酮ⅡA治疗组(C组),各16只大鼠。采用皮下注射异丙肾上腺素建立心力衰竭大鼠模型。建模后C组大鼠腹腔注射丹参酮ⅡA干预28 d。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、脑钠肽(BNP)水平。测量左心室质量(LVM),计算左室质量指数(LVMI)、球型指数(SI)。苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察心脏组织形态学变化和纤维化情况。蛋白免疫印迹法测定心肌组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)蛋白水平。结果 与A组比较,B组大鼠血清AngⅡ、BNP水平、LVMI、LVM、心肌组织ColⅠ、ColⅢ、p-PI3K、p-Akt蛋白含量升高(P<0.05),心肌胶原容积比增加(P<0.05),SI降低(P<0.05);...     

肝癌细胞中PI3K信号通路对骨桥蛋白表达的影响

目的研究磷脂酰肌醇3-激酶（P13K）信号通路在肝癌细胞骨桥蛋白（OPN）表达调控中的作用。方法体外培养高转移性人肝癌细胞株HCCLM3,分为对照组、P13K特异性抑制剂LY294002浓度5、10、20μmol／L组,处理6h后,采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测OPNmRNA表达的变化。结果LY294002可使肝癌细胞HCCLM3的OPNmRNA的表达下降,且这种抑制作用随着LY294002浓度增大而增大（P〈0．01）,呈现剂量依赖性关系。结论LY294002可以抑制肝癌细胞株HCCLM3中OPN的表达,肝癌细胞OPN的表达调控受P13K信号通路调控。     

肺抑瘤膏对Lewis肺癌种植瘤PI3K/AKT通路的影响

目的观察肺抑瘤膏对Lewis肺癌种植瘤生长的影响,探讨肺抑瘤膏对Lewis肺癌种植瘤磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路的调节作用。方法复制Lewis肺癌小鼠模型,随机分为模型组、肺抑瘤膏低剂量组、肺抑瘤膏中剂量组、肺抑瘤膏高剂量组、顺铂组、顺铂加肺抑瘤膏中剂量组共6组,每组12只,各组药物干预后称瘤重计算抑瘤率,Western印迹法检测PI3K、AKT蛋白表达,种植瘤组织病理学镜下观察,免疫组化法检测雷帕霉素靶蛋白(mTOR)表达。结果肺抑瘤膏低、中、高剂量组Lewis肺癌种植瘤重量均明显降低(P0.05),抑瘤率依次为12.06%、23.76%、27.66%。与模型组比较,肺抑瘤膏中剂量组、肺抑瘤膏高剂量组种植瘤PI3K、AKT蛋白表达减少(P0.05)。各组种植瘤组织病理学镜下观察示细胞异型性大,属于低分化癌。与模型组比较,肺抑瘤膏低、中、高剂量组种植瘤mTOR蛋白表达减少(P0.05)。结论肺抑瘤膏能够抑制Lewis肺癌种植瘤的生长,可能通过抑制PI3K/AKT信号通路起到治疗作用。     

Aβ1~42对阿尔茨海默病小鼠PI3K/PKB信号通路的影响

目的探讨Aβ_1~42对阿尔茨海默病(AD)小鼠磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(PI3K/PKB)信号通路的影响。方法雄性小鼠侧脑室注射链脲佐菌素制备AD模型,随机分为:假手术组、模型组、Aβ_1~42低剂量(0.015 mg/kg)组、Aβ_1~42中剂量(0.050 mg/kg)组、Aβ_1~42高剂量(0.150 mg/kg)组、胰岛素组。跳台实验检测小鼠认知功能;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠海马胰岛素受体(InR)的含量;Western印迹法检测小鼠磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)、磷酸化糖原合成酶激酶(p-GSK)-3β和磷酸化Tau蛋白(p-Tau)的表达量。结果与假手术组比较,模型组练习错误和记忆错误次数增多、潜伏期缩短(P<0.05);与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组练习和记忆错误次数增加、潜伏期缩短(P<0.05),胰岛素组练习和记忆错误次数减少、潜伏期增加(P<0.05)。与假手术组比较,模型组InR表达量降低(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组InR表达量降低(P<0.05);胰岛素组InR表达量升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05)。与模型组比较,Aβ_1~42不同剂量组p-PKB、p-GSK-3β蛋白表达量降低,p-Tau表达量升高(P<0.05);胰岛素组p-PKB、p-GSK-3β的表达量升高,p-Tau表达水平降低(P<0.05)。结论Aβ_1~42能够产生神经毒性,诱导小鼠认知功能障碍,其机制可能为干扰PI3K/PKB信号通路传导,下调InR表达,抑制PKB和GSK-3β磷酸化,使AD小鼠Tau蛋白磷酸化水平增加,导致认知功能障碍。     

nesfatin-1在胰岛素抵抗骨骼肌细胞中对PI3K/AKT信号通路的影响

目的探讨过表达新型饱食分子蛋白(nesfatin-1)对L6骨骼肌胰岛素抵抗及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路和下游糖原合成酶激酶(GSK)-3β、葡萄糖转运蛋白(GLUT)-4表达的影响。方法建立L6细胞胰岛素抵抗模型后,用过表达nesfatin-1的腺相关病毒(AAV)和空载对照腺相关病毒(PC)感染L6细胞,将细胞分为四组,分别为空载对照腺相关病毒组(PC组),PC+棕榈酸(PA)组,过表达nesfatin-1组,nesfatin-1+PA组,四组均加入100 nmol/L重组人胰岛素(Insulin),PC+PA组和nesfatin-1+PA组再加入250μmol/L PA处理24 h后收集培养基上清,用葡萄糖过氧化物酶方法测定上清液中葡萄糖含量,用Western印迹检测PI3K、AKT及其下游信号分子GSK-3β、GLUT-4的蛋白表达变化。结果与PC组比较,过表达nesfatin-1组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与PC+PA组相比,nesfatin-1+PA组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显增高(P<0.05);与nesfatin-1组相比,nesfatin-1+PA组p-AKT、GSK-3β、GLUT-4蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论过表达nesfatin-1可显著增加骨骼肌细胞对葡萄糖的摄取,减轻胰岛素抵抗,并经PI3K-AKT通路上调下游GSK-3β、GLUT-4的表达。     

补阳还五汤合六味地黄汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织bFGF表达的影响

目的观察补阳还五汤合六味地黄汤对局灶性脑缺血大鼠脑组织碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响及反方是否有协同作用。方法采用改良Haruo Nagasawa法复制老龄大鼠脑缺血模型,随机分为补阳还五汤合六味地黄汤组（即健脑通络汤组）、六味地黄汤组、补阳还五汤组、模型组、假手术组,观察各组术后24 h、72 h、7 d后脑组织bFGF的表达。结果六味地黄汤和补阳还五汤合用能协同提高急性持续脑缺血大鼠bFGF的表达,其作用优于单用,其中单用补阳还五汤优于单用六味地黄汤。结论通过诱导内源性bFGF的表达,可能是健脑通络汤进行脑保护的机制,补阳还五汤与六味地黄汤合用优于单用补阳还五汤。