HCMV感染对单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用细胞ＥＬＩＳＡ法，研究发现人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ的影响。结果表明ＨＣＭＶ感染后１ｄ，单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达显著增高（Ｐ＜０．０１），以后逐渐降低，ｄ５降至对照水平；ＩＦＮγ（５００Ｕ／ｍｌ）．ＴＮＦ（２５０Ｕ／ｍｌ）、ＩＬ－６（５００／ｍｌ）、ＩＬ－１（５００／ｍｌ）均能不同程度地刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达；ＨＣＭＶ感染后，细胞因子刺激ＨＬＡ－ＤＲ表达的水平在感染后ｄ５，较对照组均显著降低（Ｐ＜０．０１）；ＩＬ－１＋ＩＦＮ－γ及ＴＮＦ＋ＩＦＮ－γ在刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达时有协同作用；ＨＣＭＶ感染后，ＩＦＮ－γ＋ＩＬ－１及ＴＮＦ＋ＩＦＮ协同刺激单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达水平较对照组显著降低（Ｐ＜０．０１）。结果提示：在ＨＣＭＶ感染引起免疫抑制过程中，其引起单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达降低是一重要机制。     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

GM－CSF对人单核细胞HLA－DR抗原表达的影响

本文采用ＥＬＩＳＡ方法，研究了重组的人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）对体外培养的正常人外周血单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的影响。结果表明ＧＭ－ＣＳＦ能提高单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达，并且呈剂量依赖关系，最适剂量（５００ｕ／ｍｌ）时能使ＤＲ抗原表达量提高到对照组的２．５倍。ＧＭ－ＣＳＦ对ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达的诱导作用并不是通过诱生的ＩＦＮ－γ的作用而实现的，因为有中和活性的ＩＦＮ－γ单抗并不能阻断这种效应。ＧＭ－ＣＳＦ能够增强低剂量ＩＦＮ－γ（５ｕ／ｍｌ）对单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导作用，但未观察到对高剂量ＩＦＮ－γ（１００ｕ／ｍｌ）的ＨＬＡ－ＤＲ抗原的诱导增强作用。     

干扰素和肿瘤坏死因子对人脐静脉内皮细胞表达HLA—Ⅱ类抗原…

采用ｃｅｌｌ－ＥＬＩＳＡ法对ＩＦＮ－α，γ及ｒＴＮＦα单独或协同影响人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）表达ＨＬＡ－Ⅱ类抗原作了定量观察，结果表明，ＩＦＮγ直接刺激ＨＵＶＥＣ可依浓度和时间依赖的方式提高其ＨＬＡ－Ⅱ类抗原表达量，而ｒＴＮＦα，ＩＦＮα单独处理ＨＵＶＥＣ无效，当ｒＴＮＦα和ＩＦＮγ同时诱导时，对ＨＵＶＥＣ表达ＨＬＡ－ＤＲ，ＤＰ，ＤＱ均表现抑制作用，但是，当先用ＩＦＮγ诱导ＨＵＶＥＣ２４ｈ后     

羧甲基茯苓多糖对HPBL分泌IL—2,TNF,IL—6,IFN—γ的调节作用

用ＣＭＰ培养外周血淋巴细胞（ＨＰＢＬ）２４、３６、４８、７２ｈ采样检测的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别可达１３．６±４．３，４１．９±２．０，１８３７．４±４６４．３，１０３７．９±２１１．０Ｕ／ｍｌ，分别比无ＣＭＰ的细胞培养对照组的效价高０．８，７．４，０．５，１０．９倍（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ的诱生剂功能。由ＣＭＰ预处理ＨＰＢＬ后经ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ促诱生组的ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ效价分别比无ＣＭＰ的ＰＨＡ和／或ＣｏｎＡ刺激的相应常规诱生组高１．２～２．８，０．５～１．１、０．５～０．８、０．４～０．６倍（Ｐ＜０．０１），尤以ＣＭＰ＋ＰＨＡ＋ＣｏｎＡ促诱生细胞因子效果最佳（Ｐ＜０．０１），说明ＣＭＰ又具有ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＦＮ－γ促诱生效应。     

IFN_γ对健康和肿瘤患者单核细胞HLA－DR表达的影响

本文采用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ方法，研究ｒＨｕＩＦＮ－γ（ＩＦＮγ）对体外培养的健康人及恶性肿瘤患者外周血单核细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的影响。结果表明：ＩＦＮγ能促进两者单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达，但ＩＦＮγ对健康人单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达促进程度较恶性肿瘤患者强（Ｐ＜０．０５）。     

IFNγ对健康和肿瘤患者单核细胞HLA—DR表达的影响

本文采用ＢＳＡ－ＥＬＩＳＡ方法，研究ｒＨｕＩＦＮ－γ（ＩＦＮγ）对体外培养的健康人及恶性肿瘤患者外周血单核细胞表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的影响。结果表明：ＩＦＮγ能促进两者单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原的表达，但ＩＦＮγ对健康人单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ表达促进程度较恶性肿瘤患者强（Ｐ＜０．０５）。     

IL－4对多发性骨髓瘤患者外周血细胞CD20及HLA－DR表达的影响

本文报道用流式细胞分析技术，检测了２８例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者和２０名健康对照者外周血Ｂ细胞（ＣＤ２０＋）以及Ｂ、Ｔ和单核细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞比率。结果发现，ＭＭ患者ＣＤ２０＋以及Ｂ、Ｔ及单核细胞中ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞比率与正常对照组差异非常显著（Ｐ＜０．０１）。加入重组ＩＬ－４，可使８名ＭＭ患者ＣＤ２０＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋ＣＤ２０＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋单核细胞比率提高非常显著（Ｐ＜０．０１）。而在Ｔ细胞，Ｐ值则＞０．０５。我们认为由于ＩＬ－４分泌减少，一方面使多克隆Ｂ细胞激活及增殖受抑，另一方面使单核细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达减少，抗原提呈能力下降可能是ＭＭ发生多克隆免疫球蛋白抑制的重要原因。     

α-黑素细胞刺激素体外对星形胶质细胞产生NO和前炎性细胞因子的影响

目的：研究α－黑素细胞刺激素（α－ＭＳＨ）对ＬＰＳ诱导星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子的影响。探讨α－ＭＳＨ的抗炎作用机制。方法：分别用ＬＰＳ或α－ＭＳＨ＋ＬＰＳ处理体外培养的大鼠脑星形胶质细胞,用Ｇｒｉｅｓｓ试剂测定ＮＯ,以ＭＴＴ显色法检测ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α,采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外培养的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结果：体外的星形胶质细胞在ＬＰＳ刺激下产生ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α和表达ＭＩＦｍＲＮＡ显著增高;若同时给予ＬＰＳ和α－ＭＳＨ,可明显降低ＮＯ、ＩＬ－１、ＩＬ－６和ＴＮＦ－α的产生以及ＭＩＦｍＲＮＡ表达。结论：Ｒ昧α－ＭＳＨ抑制星形胶质细胞产生ＮＯ和前炎性细胞因子与其抑制中枢神     

静注免疫球蛋白对新生儿单个核细胞IL-2、IL-4 mRNA表达的调节

目的探讨静注免疫球蛋白（ＩＶＩＧ）抑制体外脐血Ｂ细胞免疫球蛋白释放的机制。方法运用ＲＴ－ＰＣＲ法观察ＩＶＩＧ对体外新生儿单个核细胞（ＣＢＭＣ）分泌的ＩＬ－２ｍＲＮＡ及ＩＬ－４ｍＲＮＡ表达的影响。结果佛波醇乙酯结合钙离子导入剂（ＰＭＡ＋ＩＯＮＯ）激活ＣＢＭＣ，很容易检测到ＩＬ－２ｍＲ－ＮＡ的表达，但不能检测出ＩＬ－４ｍＲＮＡ的表达。将ＰＨＡ刺激后的ＣＢＭＣ与ｒＩＬ－２一起孵育，再用ＰＭＡ＋ＩＯＮＯ刺激，ＣＢＭＣ始表达ＩＬ－４ｍＲＮＡ。在活化后的ＣＢＭＣ接受ＰＭＡ＋ＩＯＮＯ再刺激的同时加入ＩＶＩＧ（５ｍｇ／ｍｌ）。发现ＩＶＩＧ抑制了上述两种细胞因子ｍＲＮＡ的表达。结论ＩＶＩＧ对ＩＬ－２，ＩＬ－４两种细胞因子产生的抑制可能源于转录到分泌至胞外整个阶段任一时相上的抑制     

Effect of interferon-gamma,tumor necrosis factor,interleukin-1 and interleukin-6 on the modulation of anti-tumor responses of bone marrow derived macrophages

Non-adherent bone marrow cells (NABMC) obtained from BALB/c mice were incubated in medium alone or containing granulocyte — macrophage-colony stimulating factor(GM-CSF) or macrophage-colony stimulating factor (M-CSF) for 4 days to obtain bone marrow derived macrophages. Treatment of GM-CSF or M-CSF derived macrophages with interferon-gamma (IFN-γ) (50 U/ml), tumor necrosis factor (TNF) (500 U/ml), interleukin-1 (IL-1) (200 U/ml) or interleukin-6 (IL-6) (100 U/ml) for 24 h rendered them significantly cytotoxic to different tumor cells. These macrophages also produced enhanced amounts of soluble or membrane associated TNF. Medium derived macrophages showed little cytotoxicity against tumor cells and production of TNF on treatment with TNF, IFN-γ, IL-1 or IL-6. M-CSF or GM-CSF derived macrophages on treatment with IFN-γ showed enhanced release of nitrite as compared to medium derived macrophages. TNF, IL-1 or IL-6 did not induce nitrite production in bone marrow derived macrophages. Out of the different combinations tested, only IFN-γ plus TNF-treated macrophages showed enhancement in nitrite production as compared to that of IFN-γ alone.     

IFN-α cannot substitute lack of IFN-γ responsiveness in cells of an IFN-γR1 deficient patient

Patients with complete IFN-γR deficiency are unable to respond to IFN-γ and have impaired Th1-immunity and recurrent, severe infections with weakly virulent Mycobacteria. Since IFN-α and IFN-γ share signalling pathways, treatment with IFN-α has been proposed in complete IFN-γR deficiency. We stimulated cells from healthy controls and from a patient lacking IFN-γR1 with IFN-α and IFN-γ, to establish whether IFN-α would substitute for IFN-γ effects. IFN-α induced STAT1 phosphorylation in monocytes of the IFN-γR1(-/-) patient, but did not prime for LPS-induced IL-12p70, IL-12p40, IL-23 or TNF production. In control cells, IFN-α inhibited the priming effect of IFN-γ on LPS-induced pro-inflammatory cytokine release. Finally, IFN-γ but not IFN-α induced killing of M. smegmatis in cultured macrophages. In conclusion, no evidence was found to support the use of IFN-α in IFN-γR-deficient patients as intervention against mycobacterial infection; on the contrary, treatment of individuals with IFN-α may even adversely affect host defence against Mycobacteria.     

慢性乙肝患者树突状细胞对Th1/Th2分化的影响

探讨慢性乙肝患者树突状细胞(dendritic cells,DC)对CD4+Th细胞亚群分化的影响。分离慢性乙肝患者外周血单个核细胞(PBMC),以rhIL-4(50 ng/ml)、rhGM-CSF(10 ng/ml)和rhTNF-α(100 u/ml)诱导培养DC。以流式细胞仪检测DC表面CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子表达情况。MTT法检测DC刺激同种异体淋巴细胞增殖能力。免疫磁珠分离外周血CD4+T细胞亚群,PMA+Ionomycin刺激后胞内荧光染色,流式细胞仪检测辅助性T细胞(helper T cell,Th)内特征性细胞因子IFN-γ/IL-4以判断Th1/Th2分化。ELISA法检测DC或Th细胞培养上清中IL-6、IL-12、IFN-γ和IL-4的含量。结果:慢性乙肝患者的DC表达CD1a、CD83、CD80、CD86、HLA-DR分子水平明显低于正常人(P<0.01);培养至第7天,慢性乙肝患者DC分泌的IL-12水平低于正常人(P<0.01),而分泌的IL-6水平增高(P<0.05)。与正常人相比,慢性乙肝患者外周血中Th1细胞占CD4+T细胞的百分比较低(P<0.01),其Th细胞培养上清中IFN-γ的量也较低(P<0.01)。患者DC与同种异体的健康人Th细胞共培养,刺激Th1型细胞因子IFN-γ产生的能力低于正常人(P<0.01)。慢性乙肝患者体内DC功能的异常可能导致了外周血Th1细胞分化不足。     

不同佐剂的复合黏膜疫苗鼻内免疫小鼠抗弓形虫感染的保护作用

目的比较IFN-γ和蜂胶作为佐剂鼻内免疫小鼠抗弓形虫攻击的能力,探索两种佐剂联合应用的效果。方法将5-6周龄雌性BALB／c小鼠60只随机分为4个组,每组15只,分别用20雌可溶性速殖子抗原（STAg）、20μg STAg＋40μg蜂胶、20μgSTAg＋1000U IFN-γ或20μgSTAg＋40μg蜂胶＋1000UIFN-γ鼻内免疫小鼠2次．间隔14d。末次免疫后第10天,用RH株弓形虫速殖子4×10^4个／只灌胃攻击,逐日观察小鼠存活情况。攻击后第43天处死全部存活小鼠,计算胸腺、脾指数,计数脑、肝组织速殖子。结果STAg＋IFN-γ组、STAg＋蜂胶＋IFN-γ组胸腺、脾指数显著高于STAg组（P〈0．05）;组织内速殖子虫荷显著降低（P〈0．01）,STAg＋IFN-γ组小鼠脑、肝组织减虫率分别为57．00％和79．06％;STAg＋蜂胶＋IFN-γ组小鼠脑、肝减虫率分别为68．30％和79．06％。STAg＋蜂胶组小鼠胸腺、脾指数有升高趋势,组织内速殖子虫荷降低,但与STAg组比较差异无统计学意义。结论在抗弓形虫感染中,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ的佐剂效果优于蜂胶,IFN-γ、蜂胶＋IFN-γ辅助STAg显著提高小鼠胸腺、脾比重,增强机体免疫能力,有效抵抗弓形虫的感染攻击,脑、肝组织速殖子虫荷显著减少。     

早孕期弓形虫感染对大鼠胎盘IL-4、IL-10和IFN-γ表达水平的影响

研究早孕期弓形虫感染对Wistar大鼠胎盘IL-4、IL-10及IFN-γ表达水平的变化,从而探讨弓形虫感染致不良妊娠的分子免疫学机制。将Wistar孕鼠随机分为2组:①对照组12只;②早孕感染组12只。早孕感染组每只孕鼠于妊娠第5天腹腔注射1×105个弓形虫强毒株(RH株)速殖子,对照组不做任何处理。所有孕鼠均于孕19 d颈椎分离处死,无菌获取胎盘,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-ti me PCR)及酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其胎盘IL-4、IL-10及IFN-γ mRNA及蛋白表达水平的变化。结果:①实验组与对照组IL-4、IL-10及IFN-γmRNA相对表达水平分别为(0.006±0.010)、(0.119±0.080)、(0.82±0.354)和(0.596±0.444)、(0.478±0.224)、(0.297±0.180),三者之间均具有显著性差异(P<0.01);②实验组与对照组IL-4、IL-10及IFN-γ蛋白表达水平分别为(4.63±1.26)、(239.24±83.16)、(105.47±67.88)和(2.40±1.33)、(103.03±79.72)、(208.02±74.95),三者之间均具有显著性差异(P<0.01)、(P<0.05)、(P<0.05);③实验组与对照组mRNA水平IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10分别为(390.67±264.12)(37.65±21.10)和(1.31±0.96)、(0.79±0.60)两者之间均具有显著性差异(P<0.01);④实验组与对照组蛋白水平IFN-γ/IL-4、IFN-γ/IL-10分别为(176.51±212.95)、(7.26±8.81)和(23.09±12.95)、(0.44±0.21)。两者之间均具有显著性差异(P<0.01)、(P<0.05)。大鼠早孕期弓形虫感染后,胎盘局部Th1型细胞因子表达增高,Th2型细胞因子表达降低,打破了正常妊娠所需的Th1/Th2平衡状态,使平衡倾向于Th1,可能是弓形虫孕期感染致不良妊娠的重要分子机制之一。     

The effect of IκK-16 on lipopolysaccharide-induced impaired monocytes

This study focuses on impaired monocyte function, which occurs in some patients after trauma, major elective surgery, or sepsis. This monocyte impairment increases the risk of secondary infection and death. We aimed to determine the influence IκK-16 had on monocytes using an ex-vivo model of human monocyte impairment. We included the effects of the well-studied comparators interferon-gamma (IFN-γ) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) on impaired monocytes. Primary human monocytes were stimulated with 10 ng/mL of lipopolysaccharide (LPS) for 16 h and then challenged with 100 ng/mL LPS to assess the monocyte inflammatory response. Treatment regimens, consisting of either IκK-16, IFN-γ, or GM-CSF, were administered to impaired monocytes near the time of initial LPS stimulation. Stimulation with 10 ng/mL LPS initially promoted a pro-inflammatory response but subsequently impaired production of both tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-10 (IL-10) and decreased HLA-DR expression. IκK-16 treatment attenuated TNF-α production and programmed death-ligand 1 (PD-L1) expression and increased IL-10 and CD14 expression. IFN-γ treatment increased TNF-α production as well as PD-L1 and HLA-DR expression. In conclusion, limiting early inflammation with IκK-16 suppresses TNF-α production and PD-L1 expression but enhances IL-10 production and preserves CD14 expression for potential future exposure to infective stimuli.