红曲菌株的分离纯化和鉴定

[目的]对红腐乳中的红曲菌进行分离纯化和鉴定。[方法]根据红曲菌嗜酸、耐乙醇的生长特性,用含乙醇的麦芽汁、含乳酸的大米培养基分离红腐乳汁中的红曲菌,并用对数稀释平板法进行纯化。纯化后的红曲菌显微观察确定其属别。依照其在MEA培养基上25℃培养的菌落形态特征鉴定到种。[结果]从红腐乳中分离的两个菌株经鉴定M-1属丛毛红曲菌(M.pilo-sus),M-3属红曲红曲菌(M.anka)。[结论]红腐乳中分离的纯培养为红曲属真菌。     

幽门弯曲菌培养特性探讨

本文用多种培养基分别加入血清、脱纤维血、维生素、葡萄糖、活性炭和淀粉分离培养幽门弯曲菌,并与直接镜检、脲酶试验比较。该菌在心脑血琼脂平板上生长良好,在血清琼脂、普通血琼脂、空弯血琼脂上几乎不生长。加入活性炭和淀粉能提高检出率。加入维生素K_1和葡萄糖能显著提高检出率,菌落明显增多,与直接镜检基本一致     

红曲菌代谢产物 lovastatin 的定性定量检测及其作用观察

用红曲菌对实验性动脉粥样硬化家兔进行治疗，观察红曲菌对高脂血症和动脉粥样硬化病变的影响。结果证实红曲菌能明显降低高胆固醇血症家兔的血胆固醇浓度，并能缓解其动脉粥样硬化病变的进展。通过薄层层析和高效液相的方法对红曲菌的代谢产物进行了定性、定量检测，证实红曲菌在代谢过程中可以产生具有抑制胆固醇合成的物质———ｌｏｖａｓｔａｔｉｎ。     

红曲菌菌株M7的生物学特性研究

红曲菌为真菌界（Fungi）、子囊菌门（Ascomycota）、子囊菌纲（Ascomycetes）、散囊菌目（Eurotiales）、红曲菌科（Monascaceae）、红曲菌属（Monascus）。红曲菌为食品发酵菌种。红曲是一种传统的发酵食材，含有能降低胆固醇的成分和具有其他生理活性的物质。红曲菌一直被广泛用作食品着色剂、调味剂、肉类保存剂和药物原辅料。我们对其形态和生物学特性作了研究。结果报告如下。     

红曲菌代谢产物 lovastatin 的定性定量检测及其作用观察

用红曲菌对实验性动脉粥样硬化家兔进行治疗,观察红曲菌对高脂血症和动脉粥样硬化病变的影响.结果证实红曲菌能明显降低高胆固醇血症家兔的血胆固醇浓度,并能缓解其动脉粥样硬化病变的进展.通过薄层层析和高效液相的方法对红曲菌的代谢产物进行了定性、定量检测,证实红曲菌在代谢过程中可以产生具有抑制胆固醇合成的物质——lovastatin.     

红曲与红曲菌

3.红曲菌的色素 红曲菌产生的色素色泽鲜艳,引起许多人的重视和研究。1926年Salmon等从红曲中分离出一种黄色索,命名为monascin(红曲菌素)。1926年四川由紫色红曲菌的菌丝体中分离到一种红色结晶,名之为monascorubrin(红曲菌红索)[注:此色素实际上是橙色],     

乳酸菌分解草酸体外试验与影响因素

目的研究乳酸菌菌种在体外培养基中的草酸分解能力和耐草酸生长能力。方法鉴定6种市售品牌酸奶所含的乳酸菌菌种。将不同品牌的酸奶分别接种在MRS培养基中,37℃、5%CO2培养48h,平板计数法分别测得乳酸菌的浓度,选择乳酸菌浓度最高的酸奶品牌作为研究对象。将各纯菌种和从选定的品牌酸奶中培养所得的混合乳酸菌分别接种在3种不同草酸浓度的MRS液体培养基中,设置空白对照组,培养72h后检测培养基中乳酸菌数量的变化,铬酸钾氧化甲基红催化光度法测量草酸浓度变化。结果市售品牌酸奶均含有3种乳酸菌(保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌),其中味全牌酸奶所含乳酸菌数量最多。经过72h培养,所有培养基中的草酸浓度都有不同程度的下降,但乳酸菌组的降幅明显大于对照组,其中嗜酸乳杆菌组的降幅最大。环境草酸浓度越高,乳酸菌的草酸分解绝对量也越大,但相对分解率越低,乳酸菌繁殖速度减慢。结论市售酸奶中所含的乳酸菌种均具有草酸分解能力,并随着环境草酸浓度的增加而增加;但高草酸浓度使乳酸菌的生长趋缓。     

乳酸菌分解草酸体外试验与影响因素

目的研究乳酸菌菌种在体外培养基中的草酸分解能力和耐草酸生长能力.方法鉴定6种市售品牌酸奶所含的乳酸菌菌种.将不同品牌的酸奶分别接种在MRS培养基中,37℃、5%CO2培养48 h,平板计数法分别测得乳酸菌的浓度,选择乳酸菌浓度最高的酸奶品牌作为研究对象.将各纯菌种和从选定的品牌酸奶中培养所得的混合乳酸菌分别接种在3种不同草酸浓度的MRS液体培养基中,设置空白对照组,培养72 h后检测培养基中乳酸菌数量的变化,铬酸钾氧化甲基红催化光度法测量草酸浓度变化.结果市售品牌酸奶均含有3种乳酸菌(保加利亚乳杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌),其中味全牌酸奶所含乳酸菌数量最多.经过72 h培养,所有培养基中的草酸浓度都有不同程度的下降,但乳酸菌组的降幅明显大于对照组,其中嗜酸乳杆菌组的降幅最大.环境草酸浓度越高,乳酸菌的草酸分解绝对量也越大,但相对分解率越低,乳酸菌繁殖速度减慢.结论市售酸奶中所含的乳酸菌种均具有草酸分解能力,并随着环境草酸浓度的增加而增加;但高草酸浓度使乳酸菌的生长趋缓.     

变应性真菌性鼻窦炎的研究进展

变应性真菌性鼻窦炎是真菌性鼻窦炎的常见类型。1976年，Safirstein首次描述了具有鼻息肉，干酪样物鼻窦分泌物，分泌物培养有曲菌生长的一组病证，其临床表现类似变应性支气管肺曲菌病(ABPA)。后来这种疾病被命名为变应性真菌性鼻窦炎(AFS)。随着AFS临床资料的不断增多，人们对其病原学，病理过程，病程发展，治疗方法都有了深入的研究。     

肺曲菌病

肺曲菌病主要由烟曲霉感染引起，少数为黑曲霉、土曲霉、黄曲霉和构巢曲霉等。曲霉菌在自然界如空气、土壤中繁殖力较强。室温、37℃或更高温度中均能生长。肺曲菌病大多数是在原有肺部疾患的基础上或因长期使用抗生索和激素后继发感染。临床上分4型：变态反应性曲菌病、支气管一肺炎型曲菌病、肺曲菌球和继发性肺曲菌病。     

铜绿微囊藻抗性株与野生株对铜离子的富积效应

目的：分离筛选高铜离子抗性的铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa),并研究其抗性机制及对铜离子的富积效果。方法：将抗性株与野生株分别加入不同浓度铜离子的BG11培养基中,在不同时间段取样过滤,分析过滤液中铜离子的残留量。结果：在相同时间内,抗性株比野生株产生类金属硫蛋白(MTL)的量要大,培养基中Cu^2 减少主要发生在培养后24h以前。抗性株在24h之前对Cu^2 富积较快,24h的去除率为48．87％,96h的去除率为80．77％;而野生株在24h之前对Cu^2 富积相对较慢,24h去除率为20．88％,96h的去除率为34．29％。结论：利用抗性株铜绿微囊藻治理高铜离子污染源具有较大的应用前景。     

不同富集培养方法对噬菌体PEf771的滴度影响

目的 对比3种不同富集培养方法对噬菌体PEf771的滴度影响,探讨有效提高噬菌体PEf771滴度的方法。方法 通过噬菌体PEf771/粪肠球菌E. faecalis YN771比例法、挖斑法和丝裂霉素C诱导法在E.faecalis YN771不同生长时期加入PEf771原液进行富集,来获得较高的PEf771的滴度。结果 PEf771/E.faecalis YN771=1∶3和挖斑法得出的PEf771的滴度较高,将这2种方法扩大培养后无明显差异（P> 0.05）,且在24 h滴度达108 pfu/mL。丝裂霉素C诱导法未能明显提高PEf771的滴度。通过在E. faecalis YN771生长早期（OD600=0.3）和对数期（OD600=1）加入PEf771进行富集培养,前者培养6 h滴度高达1010 pfu/ml,24 h滴度仍保持1010 pfu/ml,达到了理想滴度。结论 在E. faecalis YN771培养早期（OD600=0.3）加入PEf771以噬菌体/菌=1∶3的方法或挖斑法富集培养可有效提高PEf771的滴度,为研究E.faecalis YN771的噬菌体PE...     

Fluoride binding capacity of bone charcoal and its effects on selected micro-organisms

Water is a major source of fluoride ions in areas where skeletal and dental fluorosis are endemic. We investigated the capacity of bone char to remove fluoride from water and its effects on selected bio-indicator organisms. Under static and dynamic conditions, the capacity of bone char was in the order of 2.5 mg of fluoride per g of bone char. Bone charcoal did not appear to support growth of yeast and S. aureus. E. coli and S. faecalis counts in the filtrate decreased with time but there was substantive growth in the bone charcoal.     

雌激素的抑瘤机制初探

目的 :研究雌激素对S180 荷瘤小鼠的抑瘤作用及其免疫机制。方法 :观察雌激素对S180 荷瘤小鼠瘤重的影响 ,检测各实验组小鼠巨噬细胞 (M)相关免疫功能指标。结果 :一定剂量的雌激素能明显抑制S180 肉瘤在小鼠体内的生长 ,能增强正常小鼠及荷瘤小鼠M介导的肿瘤细胞毒 (MTC)功能 ,并可促进一氧化氮 (NO)的分泌 ,而且MTC功能与NO水平呈正相关。结论 :雌激素增强M的免疫功能可能是其发挥抑瘤作用的重要机制之一。     

Ag85B-卡介苗重组疫苗对结核病预防及治疗效果研究

目的评价Ag85B-卡介苗重组疫苗对结核病的预防及治疗效果。方法将小鼠随机分为6组,A、B、C为预防组,D、E、F为治疗组,A、D组为Ag85B-卡介苗重组疫苗免疫组,B、E组为BCG免疫组,C、F组为生理盐水对照组。通过研究各组小鼠在实验中的血清抗体水平、细胞免疫功能等指标以及体重变化、半数死亡时间、2个月死亡率、大体病变等,评价Ag85B-卡介苗重组疫苗在小鼠结核分枝杆菌感染的预防及治疗成效。结果在注射结核分枝杆菌后,各组小鼠体重平均增长明显减慢,C、F组增长最慢。A、B、D、E组与C、F组相比能延长半数死亡时间,降低一定时间内的死亡率。小鼠脏器大体病变各组之间无显著差别。A、B、D、E 4组小鼠,肺脏的结核分枝杆菌生长培养最低稀释度集中在105,肝脏、脾脏结核分枝杆菌生长培养最低稀释度集中在104。C、F组小鼠,肺脏结核分枝杆菌生长的培养最低稀释度集中在106,肝脏、脾脏结核分枝杆菌生长的培养最低稀释度集中在105。各组间的抗体检测及淋巴细胞增殖实验结果无显著差别。结论 Ag85B-卡介苗重组疫苗与卡介苗对于结核分枝杆菌感染的预防作用无显著区别,Ag85B-卡介苗重组疫苗和卡介苗对结核病无明显的治疗效果。     

TGF-β1改善体外培养小鼠胚胎种植率及其作用机制的研究

目的 探讨TGF-β1在体外对小鼠胚胎发育及胚胎种植的影响及其作用机制.方法 ①收集小鼠2-细胞期胚胎,在含不同剂量TGF-β1的M16培养液中进行体外培养,观察胚胎发育情况,并进行胚胎移植,观察着床率;②测定移植后小鼠外周血及胚胎种植部位母胎界面IL-10/INF-γ水平.结果 ①1 ng/mL和10 ng/mL TGF-β1能提高2-细胞期胚胎体外发育速率、质量和胚胎着床率.其中TGF-β1 10 ng/mL时作用最显著,TGF-β1浓度过高对体外胚胎发育不利;②M16+TGF-β1 10 ng/mL组体外培养囊胚移植后母胎界面INF-γ低于M16组,差异有统计学意义[(30.89±11.31) pg/mL vs. (43.23±18.09) pg/mL,P<0.05].两组间IL-10水平无明显差异.结论 ①小鼠胚胎体外培养基中加入适宜浓度TGF-β1可提高2-细胞期胚胎体外发育速率、质量和胚胎着床率;②TGF-β1可能通过促进体外胚胎发育速率和质量,改善胚胎和内膜发育同步性,促进母胎界面Th1/Th2平衡向Th2偏移而促进胚胎着床.     

中药红曲基原真菌的毛细管气相色谱法鉴别

目的：建立检测中药红曲基原菌中挥发性成分的毛细管气相色谱分析方法（CGC）。方法：采用毛细管气相色谱法分析紫色红曲霉系7种红曲栳瓣挥发性成分;进样口温度280℃,检测器温度280℃,程序升温条件：130℃,5min→10℃/min→200℃,10min,FID结果。结果：不同种红曲霉挥发性成分的种类和含量均存在显差异。根据红曲霉挥发性成分指纹图谱的主要峰及其相对含量,可以有效地鉴别红曲霉属真菌。结论：毛细0管气相色谱法对于鉴别红曲霉属真菌具有一定的实用价值。     

粪肠球菌在根管内定植模式的体外研究

目的：建立体外粪肠球菌感染根管模型,观察根管内粪肠球菌的感染状态及其分布特征。方法：选择因正畸减数拔除的健康前磨牙10例,随机分为两组,将其中5例高压灭菌后分别浸泡于含有1.5 mL无菌脑心浸液(brain heart infusion,BHI)培养基和0.1 mL麦氏比浊度为5的粪肠球菌菌液的Eppendorf管中, 于CO₂孵育箱中培养21 d建成体外粪肠球菌根管感染模型,其余5例则作为对照组。将所有样本沿牙长轴近远中向劈为两半,一半作组织学Brown&Brenn染色观察,另一半置扫描电镜下观察粪肠球菌在根管内的感染状态。结果：组织学结果显示,在所有研究组样本中,粪肠球菌均不同程度地侵入牙本质小管中,测微尺测量深度可达330～1 000 μm。所有对照组样本的根管壁表面干净,牙本质小管排列有序,无细菌染色颗粒。扫描电镜结果显示,在所有研究组样本的根尖1/3段,粪肠球菌与无定形基质形成典型的生物膜结构,而在根管的冠1/3和中1/3段,粪肠球菌则成对或短链状排列在根管壁表面,呈现浮游状态。对照组的根管壁表面洁净,牙本质小管和管间牙本质结构清晰可见,未见细菌侵入。结论： 粪肠球菌可单独定植于根管内,形成生物膜并侵入牙本质小管深部。此模型可用于体外评价各种机械预备和化学消毒药物对根管内感染的清除效果,从而为临床选择治疗操作提供参考。     

霍乱肠毒素分离方法的改进

用作者改进的液体培养基在5%CO_2环境中培养霍乱弧菌(Inaba 569B),每ml培养滤液可获得霍乱肠毒素(CT)1.215～2.012μg。在分离提纯CT时,先用DEAE-Sephadex A_(50)除去大部分色素及杂蛋白,再用Sephacryl S_(-200)分纯,效果好,重复性强;其第Ⅰ组分即为CT,肠襻试验阳性,双向琼脂扩散试验及HPLC检测结果均与上海CT一致。分子量为86000。     

结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究

目的：获得重组ESAT6蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值。方法：分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠8周后,以结核分支杆菌接种小鼠。应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体。结果：重组质粒pET24b-ESAT6在大肠杆菌BL2（DE3）细胞内以包涵体形式存在,分子量约6kDa,每100ml培养菌可获得约18mg纯化的重组蛋白。生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别。结论分支杆菌攻击后,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值＋2标准误。以33例正常人血清的OD值＋2S为正常界限值,33例正常人和32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6 ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为：一步法87.9%(29/33),65.6%(21/32),PPD93.9%(31/33),62.5%(20/32);rESAT6 97%(32/33),18.2%(4/32)。结论：pET24b-ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白,卡介苗免疫对血清中ESAT6抗体无影响,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一。