涎腺肿瘤中细胞凋亡及其调控基因的表达

目的：探讨涎腺肿瘤中细胞财亡及调控基因p53、bcl-2、c-myc间的关系。方法：采用脱氧核糖核酸末断转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）技术，免疫组织化学染色和HE染色对18例多形性腺瘤和52例恶性涎腺肿瘤中细胞凋亡和bcl-2、p-53、c-myc蛋白表达进行观察和比较。结果：恶性涎腺肿瘤的凋亡细胞指数明显高于多形性腺瘤（P＜0．05），恶性涎腺肿瘤中bcl-2、p53和c-myc蛋白表达率及表达强度明显高于多形性腺瘤（P＜0．05）。结论：细胞凋亡的调控基因异常在涎腺肿瘤中可能起重要作用，bcl-2和c-myc蛋白的共同作用可抑制细胞凋亡。     

阿霉素诱导细胞凋亡过程中的信号传递

目的探讨阿霉素诱导人涎腺癌细胞凋亡的分子机制。方法通过光镜和电镜观察不同作用时间后细胞的形态学改变,ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳,流式细胞仪分析ＤＮＡ含量和细胞周期,并检测细胞内Ｃａ(２＋)浓度的变化。结果阿霉素作用于ｍＥｃ－１细胞后出现了细胞凋亡的特征,细胞内Ｃａ(２＋)浓度明显增力。。结论Ｃａ(２＋)参与细胞凋亡过程可能是阿霉素诱导ＩＥＣ－１细胞凋亡的机制之一。     

Raji细胞抵抗阿霉素诱导细胞凋亡分子机制的实验研究

目的：观察Ｒａｊｉ细胞抵抗职霉素诱导细胞凋亡的分子机制，从细胞凋亡的角度探讨肿瘤细胞耐药机制。方法：ＭＴＴ方法测定阿霉素和肽素诱导的细胞毒实验，碘化丙啶染色ＦＡＣＳ和ＤＮＡ降解断裂法分析阿霉素诱导的细胞凋亡，ＦＡＣＳ分析Ｒａｊｉ细胞ｂｃｌ－２的表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｏｌｔ观察Ｒａｊｉ细胞ｐ５３、ｂａｘ分子的表达，ＲＴ－ＰＣＲ检测ＭＤＲ１、ＭＲＰ和ＧＳＴπ的表达水平。结果：Ｒａｊｉ细胞对阿霉素和肽     

细胞凋亡的基因调控与大肠癌

细胞凋亡是细胞的正常死亡。文章阐述了细胞凋亡的基因调控及其与大肠癌发生的关系．和在大肠癌治疗方面的应肘策略、展望。     

阿霉素诱导人肝癌细胞BEL—7402凋亡的观察

目的研究化疗药物阿霉素抗癌作用与癌细胞凋广的关系及意义。方法应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜动态观察阿霉素对体外培养的人肝癌细胞BEL－7402的生长抑制作用与细胞凋亡的关系。结果阿霉素可阻滞人肝癌细胞BEL－7402从G0/G1期进入S期,诱导细胞凋亡。结论本研究显示阿霉素抗癌作用与诱导细胞凋亡有关。应用流式细胞仪、激光共聚焦扫描显微镜观察细胞凋亡是有效、可行的方法。     

药物治疗诱导肿瘤细胞凋亡的基因调控

药物治疗诱导肿瘤细胞凋亡的基因调控陈晓亮综述黎介寿刘福坤审校南京军区总医院全军普外研究所（南京市２１０００２）细胞凋亡（Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ，以下简称ＡＰＯ）是机体主动清除多余细胞和“缺陷细胞”的生理过程。与坏死不同，它具有特征性的形态学改变：细胞皱缩...     

细胞凋亡调控基因与肿瘤基因治疗

恶性肿瘤基因治疗的候选基因，包括细胞毒基因、细胞因子基因、抑癌基因等。细胞凋亡的调控基因及诱导细胞凋亡的基因是重要的候选基因。细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）是一个控制细胞消亡的机制，在调节细胞种群时，其作用与细胞分裂相对立，是一个主动的、程序化的细胞...     

丁酸钠诱导HT 29结肠癌细胞凋亡及其对 p 53靶基因的调控

目的：〖HT5"SS〗分析丁酸钠对HT29结肠癌细胞p53三个主要靶基因（p21waf1,bax和gadd45）的调控,并探讨其作用机制。〖HT5W〗方法：〖HT5"SS〗HT29细胞常规培养在含有和不含有丁酸钠的培养液中。分别用MTT和流式细胞仪(flow cytometry,FCM) 检测细胞增殖和细胞周期分布,通过形态学观察、亚G1峰的检测和AnnexinVFITC 双标记观察细胞凋亡情况;RTPCR和Western blot分别检测丁酸钠对p21waf1,bax和gadd45三种基因mRNA和蛋白表达水平的影响。〖HT5W〗结果：〖HT5”SS〗丁酸钠以剂量和时间依赖的方式抑制HT29细胞增殖和诱导凋亡,并阻滞细胞于G1期。RTPCR 和Western blot结果显示丁酸钠可以促进p21waf1和bax基因mRNA和蛋白的表达,而对gadd45基因的表达无明显影响。〖HT5W〗结论：〖HT5”SS〗2.5 mmol/L以上浓度的丁酸钠可以抑制HT29细胞增殖并诱导凋亡,该作用可能通过上调p21waf1和bax基因表达而实现。     

逆转录病毒介导的凋亡素基因诱导人结肠癌细胞Lovo的凋亡

目的 构建强力霉素诱导型重组凋亡素基因逆转录病毒载体,观察强力霉素诱导凋亡素基因表达的情况及对人结肠癌细胞的影响。方法 构建重组逆转录病毒表达载体pRevTRE-VP3。调节载体pRevTet-on和表达载体pRevTRE-VP3分别转染PT67包装细胞后,收集包装好的病毒依次感染人结肠癌细胞系Lovo,用抗生素筛选出抗性细胞株Lovo/on-vp3。通过向培养液中加入或去除强力霉素调控凋亡素基因在Lovo/on-vp3细胞中的表达,Annexin V-FITC/PI双染色后,以流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果 经酶切和测序鉴定,重组逆转录病毒载体pRevTRE-VP3构建成功,并添加了kozak序列。筛选出可经四环素调控凋亡素基因表达的人结肠癌细胞株Lovo/on-vp3,经PCR和RT-PCR证实凋亡素基因已整合入细胞DNA,并得到了表达;Lovo/on-vp3细胞在1mg/L强力霉素培养环境中培养24h、48h和72h凋亡率明显高于无强力霉素环境中相同时间点的细胞凋亡率,两者差异有显著性。结论 凋亡素基因经RevTet系统导入人结肠癌细胞Lovo后,在强力霉素诱导下可表达凋亡素蛋白并诱导Lovo细胞凋亡。并随诱导时间延长凋亡素蛋白表达增加、细胞凋亡增多。     

一氧化氮诱导的癌细胞凋亡中P53／P21的表达

一氧化氮诱导的癌细胞凋亡中ｐ５３／ｐ２１的表达董为人李进综述李福山审校关键词一氧化氮细胞凋亡基因表达中图号Ｒ７３０．２Ｒ３４１一氧化氮——一种致ＤＮＡ损伤的基因毒物１．１一氧化氮的来源及生理、病理作用〔１，２〕１９８０年Ｆｕｒｃｈｇｏｔ和Ｚａｗａｄｚ...     

阿霉素诱导人粘液表皮样癌细胞凋亡和p53蛋白表达的研究

本试验发现10μg／ml阿霉素可诱导人粘液表皮样癌MEC-1细胞凋亡，在用流式细胞仪（FCM）测细胞DNA变化及p53蛋白表达时，p53蛋白表达和凋亡细胞随着药物作用时间的延长而剧增，p53的免疫组化也说明了阿霉素可使细胞中p53蛋白表达增强。这些结果揭示了阿霉素诱导的MEC-1细胞凋亡为p53依赖性的。p53蛋白与细胞凋亡之间关系密切，也为基因疗法和凋亡的机理提供了一定的理论依据。     

p53基因诱导胱癌细胞HTB9凋亡及相关基因的表达

目的 研究野生型p53基因诱导膀胱癌细胞凋亡的作用,及其对凋亡相关基因bcl-2、bax和ICE表达的调控。方法 将野生型p53基因重组腺病毒载体转染人膀胱癌细胞HTB9,应用RT－PCR检测bax的mRNA表达水平,应用免疫组化法检测bcl-2、bax和ICE蛋白表达水平,以DNA琼脂糖凝胶电泳、脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术（TUNEL）和流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 野生型p53基因导入可诱导HTB9细胞凋亡,凋亡细胞百分率可达50．4％;bax mRNA和蛋白水平增高,ICE和Bcl-2蛋白水平分别增高和下降。结论 野生型p53基因很可能是通过调控凋亡相关基因ICE、Bax和Bcl-2的表达来诱导细胞凋亡。     

INDUCTION OF APOPTOSIS BY SeO_2 IN HUMAN LUNG CARCINOMA CELL LINE GLC-82

Thetraceelementselenium(Se)hasbeenshowntobecytotoxicinvitroinmultiplecellmodelsincludingbreastcancercelllineMCF-7[1],coloniccarcinomacellsHT29[2]andimmortalhumanhepaticcelllineHL-7702[3].Seleniumisanessentialcomponentofanumberofenzymespresentintheaminoacidselenocysteine(Se-Cys)andinhibittumorigenesisinbothanimalmodelsandhumans[3].SupplementingwithSeindietmayreducethehumancancerrisk[3].Clarketal.[4]foundthattheincidentoflungcancerwaslowerinSe-supplementedpatients.Apoptosisinducedbyselenium…     

p21^WAF1基因介导诱发的人肝癌细胞系的细胞凋亡研究

目的研究外源性ｐ２１ＷＡＦ１基因超表达对ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞系的作用和意义。方法通过脂质体介导方式将带有人全长ｐ２１ＷＡＦ１ｃＤＮＡ和潮霉素抗性基因的真核表达载体ＰＣＥＰ转入肝癌细胞中，用潮霉素筛选后，酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）法检测ｐ２１蛋白的表达情况，使用流式细胞仪检测细胞周期并判定有无细胞凋亡及程度。通过透射电镜进一步观察细胞的超微结构。结果ＥＬＩＳＡ法测定ｐ２１蛋白表达结果，对照组、空载体组和ＷＡＦ１组的吸光度（Ａ）值分别为０．１７５±０．０２、０．１８３±０．０３和０．３３±０．０４，提示转基因后ｐ２１蛋白量却明显增加（Ｐ＜０．０５）。流式细胞仪检测细胞周期表明Ｇ１期细胞显著增加，并在Ｇ１期前出现一凋亡峰，凋亡细胞占细胞总数的２２．５％。透射电镜可见ＷＡＦ１组部分细胞体积缩小，细胞完整，有出芽现象，细胞器结构完整，致密的染色体边集于核膜内侧，呈明显的凋亡细胞的形态。结论本实验成功地将ｐ２１ＷＡＦ１基因转入到培养的肝细胞中，获得了稳定表达ｐ２１蛋白的细胞株；外源性ｐ２１ＷＡＦ１基因的超表达可引起肝癌细胞自发凋亡。通过对该基因的进一步研究可为肝癌防治提供理论依据。     

快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的:研究及探讨快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及其相关基因表达。方法：不同剂量X射线（0、2、4、6、8、10Gy）及具有同等放射生物学效应的相当于射线1／3剂量的不同剂量快中子（０、０.67、1.34、2.01、2.68、３.34Gy)照射细胞,于３７℃孵育６小时,２４小时,４８小时,７２小时后,进行Ｈoechest33342荧光染色,观察细胞凋亡形态并凋亡指数ＡＩ（凋亡细胞的百分数）;用电子显微镜观察凋亡细胞特有的形态学特征;此外,我们分别对不同剂量（0、2、4、6、8、10Gy)X射线及快中子（0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射后24小时的细胞用免疫组化方法进行基因表达p53及bcl-2)的检测。结果：不同剂量X射线和快中子照射的细胞凋亡指数,随着照射剂量和受照时间的延长而逐渐增加,在同一时间点,快中子诱导的细胞凋亡水平明显高于X射线;不同剂量快中子照射后的细胞,较阳性对照组,p53基因表达下调明显,bcl－2基因表达下调不明显;不同剂量快中子照射后的细胞,p53及bcl-2基因表达下调均不明显。结论：高能X射线和快中子诱导人直肠癌细胞的凋亡具有明确的时间－剂量相关性,随着受照后时间的延长和剂量的逐渐增大,凋亡指数渐趋升高,无明显变缓之势;快中子照射人直肠癌细胞,与X射线相比较,可引起较大的凋亡反应;此外,照射后p53及bcl-2基因表达下调,说明此两类基因都参与了细胞凋亡的基因调控。     

基因HC56对人肝癌细胞（SMMC7721）基因表达水平的影响

目的：观测新发现的HC56基因对培养的人肝癌细胞SMMC－7721基因表达的影响。方法：用含HC56cDNA的重组表达载体转染SMMC－7721细胞后,由细胞总RNA反转录为cDNA,与Atlas人类cDNA表达方阵膜片杂交,通过molecular image system分析软件对暴光强度进行密度扫描定量（以看家基因β-actin对照校正）。结果：HC56转染的肝癌7721细胞有3个基因（C-myc,CAMP dependent protein kinasetypel bata regulatory subunit ,β,thymosin β-10)表达上调,3个基因（Glutathione perotidase,fos-related antigen-2,zinc finger protein 1)表达下调。结论;HC56基因转染对体外培养的肝癌细胞的基因表达有着不同的影响。本文为进一步研究HC56基因的功能提供了线索。     

CLONING AND EXPRESSION OF A GENE ASS0CIATE WITH HL_(60) CELL APOPTOSIS INDUCED BY INHIBITION OF POLYAMINE BIOSYNTHESIS

TosearchwhethsomeblDckedgenes0ftIJmorcellsarerePfOmOtedintheeVentsassociatedwithindUctionofcelldifferenti~andaPOPtsisby~inonofpolytabfotwsis,SCreeninandd0ninofthegenesfrDmffeboconsttuctedtoHhainducedtDdriationandwsisbydeofpolyaIninbiosynthsis,DFMO,andthetwanalsisofcbogenexPresshoandaCthatyofaP0PtsisindUCtiDwereperfOIminthesStUdymromonscenCtheHLoocellswereculturedinPRMIl64()containin1o?Sat37"CandWAn5%CO2.6fnInl/LDFMOwasusedtoinducedifferenthaandwsisofHLtocells.Cellulargro…     

快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的:研究及探讨快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及其相关基因表达.方法:不同剂量X射线(0、2、4、6、8、10Gy)及具有同等放射生物学效应的相当于X射线1/3剂量的不同剂量快中子(0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射细胞,于37℃孵育6小时24小时48小时72小时后,进行Hoechest 33 342荧光染色,观察细胞凋亡形态并计数凋亡指数AI(凋亡细胞的百分数);用电子显微镜观察凋亡细胞特有的形态学特征;此外,我们分别对不同剂量(0、2、4、6、8、10Gy) X射线及快中子(0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射后24小时的细胞用免疫组化方法进行基因表达(p53及bcl-2)的检测.结果:不同剂量X射线和快中子照射的细胞凋亡指数随着照射剂量和受照时间的延长而逐渐增加,在同一时间点,快中子诱导的细胞凋亡水平明显高于X射线;不同剂量X射线照射后的细胞,较阳性对照组,p53基因表达下调明显,bcl-2基因表达下调不明显;不同剂量快中子照射后的细胞,p53及bcl-2基因表达下调均不明显.结论:高能X射线和快中子诱导人直肠癌细胞的凋亡具有明确的时间-剂量相关性,随着受照后时间的延长和剂量的逐渐增大,凋亡指数渐趋升高,无明显变缓之势;快中子照射人直肠癌细胞,与X射线相比较,可引起较大的凋亡反应;此外,照射后p53及bcl-2基因表达下调,说明此两类基因都参与了细胞凋亡的基因调控.     

紫杉醇对浆液性卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨紫杉醇对体外培养的浆液性卵巢癌细胞HO-8910细胞凋亡的诱导作用。方法:体外培养卵巢癌细胞HO-8910,用浓度1×10-9 mol/L、1×10-8 mol/L、1×10-7 mol/L和1×10-6 mol/L的紫杉醇作用细胞12 h,24 h,48 h后,提取细胞DNA片段进行2.0 mg/L 琼脂糖凝胶电泳;消化HO-8910细胞并经碘化丙锭(IP)染色后,流式细胞仪(FCM)对细胞进行细胞周期分析;电子显微镜对紫杉醇作用后的HO-8910细胞进行形态学分析。结果:体外培养的卵巢癌HO-8910细胞经不同浓度的紫杉醇处理后,细胞生长明显受到抑制;于1×10-7 mol/L 紫杉醇作用48 h后可观察到细胞凋亡特异的DNA梯状电泳;流式细胞仪分析证实,细胞凋亡率达19.7 %;且电镜下可观察到典型的凋亡早期形态学改变。结论:卵巢癌HO-8910细胞对紫杉醇具有药物敏感性,紫杉醇对卵巢癌细胞的杀伤作用,是通过诱导细胞凋亡途径实现的。