用多重及套式PCR同时检测血清中的HBV和HCV方法的建立

首次应用多重及套式ＰＣＲ技术同时检测人血清中的ＨＢＶ和ＨＣＶ。将抽提的ＨＢＶＤＮＡ和（或）ＨＣＶＲＮＡ在含ＡＭＶ逆转录酶、ＴａｑＤＮＡ多聚酶以及ＨＢＶ和ＨＣＶ外套引物的ＰＣＲ缓冲引物的ＰＣＲ缓冲液中进行逆转录后连续进行ＰＣＲ扩增，以第一轮扩增产物为模板，在含ＨＢＶ和ＨＣＶ内套引物的ＰＣＲ反应体系中进行第二轮扩增，产物经电泳后，以ＤＮＡ分子量标志物或已知片段做参考，出现５２３ｂｐ和（或）２６０ｂｐ产     

雄激素受体对前列腺癌内分泌治疗的预后评价

以阻滞雄激素受体（ＡＲ）通道为主的内分泌治疗是晚期前列腺癌（ＰＣ）的主要治疗手段之一，但ＰＣ患者对内分泌治疗的反应性存在很大差异，目前临床上还不能预测晚期ＰＣ的预后。有作者认为癌组织中的ＡＲ水平对ＰＣ内分泌治疗具有预后判断价值〔１〕，ＡＲ基因突变是导...     

蛋白激酶C在肢体缺血预处置中的作用

目的：探讨缺血预处置（ＰＣ）减轻骨骼肌组织缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）损伤的作用机制．方法：采用大鼠后肢原位灌流方法观察ＰＣ和ＰＣ加用蛋白激酶Ｃ抑制剂ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ或Ｈ７对Ｉ／Ｒ的影响．实验动物分为５组：Ｉ／Ｒ组，ＰＣ组，ＰＣ＋ＰＢ组，ＰＣ＋Ｈ７组，对照组．比较各组灌流液中和肌组织中的损伤性指标变化．结果：ＰＣ可以明显减轻肢体的Ｉ／Ｒ损伤，使用ｐｏｌｙｍｙｘｉｎＢ或Ｈ７则阻断ＰＣ对Ｉ／Ｒ骨骼肌细胞内酶漏出、丙二醛产生及钙超载等损伤性指标的改善作用．结论：ＰＣ对Ｉ／Ｒ肢体具有保护作用，其保护机制与蛋白激酶Ｃ的激活有关     

毛细管PCR技术的建立及其在传染病快速诊断上的应用

毛细管ＰＣＲ技术的建立及其在传染病快速诊断上的应用李建标，谭津，赖进祥，王春颖，朱美财，林万明临床实验科主题词聚合酶链反应，传染病，基因聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的发展及其在传染病诊断上的应用，使传染病的基因诊断有了新的突破［１］。然而常规ＰＣＲ反应...     

Inter Alu PCR技术在鉴定分离人源DNA片段中的应用

目的：探讨ＩｎｔｅｒＡｌｕＰＣＲ技术在筛选鉴定含人ＤＮＡ小鼠转染细胞和分离人源ＤＮＡ片段中的应用。方法：设计人特异性Ａｌｕ引物，通过ＩｎｔｅｒＡｌｕＰＣＲ扩增对转染人基因组ＤＮＡ后回复突变的小鼠细胞进行鉴定筛选；分离插入的人源ＤＮＡ片段；经原位ＰＣＲ鉴定其人源性。结果：应用该技术从８株回复突变株中筛选出６株含特异性人ＤＮＡ；从其中１２号小鼠细胞基因组ＤＮＡ中分离出３条人源ＤＮＡ片段；ＰＣＲ原位杂交确证所分离的ＤＮＡ片段具有人的特异性。结论：ＩｎｔｅｒＡｌｕＰＣＲ技术是应用于筛选鉴定含人ＤＮＡ杂种细胞、分离其中人源插入片段的简便、有效的方法。     

聚合酶链反应法与荧光免疫法检测沙眼衣原体的比较研究

为了评价聚合酶链反应法（ＰＣＲ）对泌尿生殖道标本中沙眼衣原体的检测结果，每份临床标本进行了ＰＣＲ法和荧光免疫法（ＤＦＡ）平行检测比较。检测临床标本９３例，ＰＣＲ法阳性率为２５．８％，ＤＦＡ法的阳性率为１７．２％（Ｐ＞０．０５）。结果说明ＰＣＲ是一高度特异和敏感的检测方法。     

一种新的分子诊断标准——荧光定量PCR

ＰＣＲ(聚合酶链反应 )技术自 80年代用于临床检验以来 ,广泛应用于肝炎、传染病、遗传病、肿瘤及优生优育等领域 ,以其简便、快速、灵敏的特点一度成为实验诊断学的热点。但其易污染、假阳性及不能定量的问题也日益突出 ,且商品试剂混乱 ,所测结果差异很大 ,给临床造成误导。荧光定量ＰＣＲ技术集ＰＣＲ和ＤＮＡ探针杂交技术的优点为一体 ,直接探测ＰＣＲ过程中的荧光变化 ,获得ＤＮＡ模板的准确定量结果。整个过程在闭管状态下进行 ,避免了因污染而导致的假阳性 ,使结果准确可靠 ,是目前最先进的ＰＣＲ技术。以乙肝病为例 ,荧光定量ＰＣＲ…     

戊型肝炎病人及实验感染猴粪便中戊型肝炎病毒基因的检出

采用反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）结合ＤＮＡ杂交技术，直接检测急性戊型肝炎病人和实验感染猴粪便标中的戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）基因，将从粪便标本中提取的ＲＮＡ反转录合成ｃＤＮＡ后，用ＨＥＶ特异引物进行套式ＰＣＲ扩增，并用长臂光敏生物素村记的ＨＥＶＥＴ１．１核酸探针进行杂交，结果显示，直接从６份病人１０％粪悬液标本中提取的ＲＮＡ进行ＲＴ－ＰＣＲ，在琼脂糖凝胶电泳上未见任何信号带，点杂交也未见阳性，但     

PCR检测慢性髓细胞白血病bcr／abl mRNA的临床意义

ＰＣＲ检测慢性髓细胞白血病ｂｃｒ／ａｂｌｍＲＮＡ的临床意义５１０５１５广州第一军医大学南方医院孙竞，周淑芸，郑维扬，徐兵关键词白血病，髓细胞性，慢性；聚合酶链反应中国图书资料分类号　Ｒ５５７．３采用我们已报道的常规一次ＲＣＲ、巢式ＰＣＲ方法检测Ｍｂｃ...     

人巨细胞病毒^32P标记PCR产物探针敏感度

＾３２Ｐ探针杂交是病原微生物基因诊断应用最广泛的方法之一，在建立了人巨细胞病毒ＰＣＲ、套式ＰＣＲ的基础上，我们用６１３ｂｐ ＰＣＲ外引物扩增产物的制备了杂交探针，并与３００ｂｐ内引物扩增产物进行转膜杂交，可将单纯琼脂糖凝胶电泳１７ｎｇ的检测水平提高到０．５ｎｇ，释释梯度相当于提高２个数量级。因此，利用ＰＣＲ结合＾３２Ｐ杂交就可以检测出不到１个病毒的基因拷贝（１００ａｇ），为临床人巨细胞病毒潜伏感染     

hM1R表达载体的构建及其转入CHO细胞系作为药物靶点的研究

Ｇ蛋白偶联受体 (Ｇｐｒｏｔｅｉｎｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＰＣＲ)一直是新药研制和药理研究的最重要靶标 ,而且在今后的新药研究和开发中仍具有不可替代的地位。人毒蕈碱样胆碱能受体Ⅰ型 (ｈｕｍａｎｍａｒｃｒｉ ｎｉｎｅｒｅｃｅｐｔｏｒ 1,ｈＭ1Ｒ)作为ＧＰＣＲ的一员 ,具有重要的生理功能和病理意义 ,在ＧＰＣＲ中有着较典型的代表性。人类基因组计划的研究成果和相关新技术的应用 ,将会进一步促进新药研究和现代药理学的发展 ,建立靶向ＧＰＣＲ ,特别是靶向孤儿ＧＰＣＲ(ｏｒｐｈａｎＧＰＣＲ ,ｏＧＰＣＲ)的新药筛选体系…     

mRNA差异显示技术及其在辐射研究中的应用

ｍＲＮＡ差异显示技术是建立在ＡＰ－ＰＣＲ（锚定引物聚合酶链式反应）和ＲＴ－ＰＣＲ（逆转录聚合酶链式反应）技术基础上的一种筛选别差异表达基因的有效方法。该自建立以来，一直在不断地完善少发展，已成为一项重要的分子生物学技术手段。目前，ｍＲＮＡ差异显示技术已在辐射研究领域得到初步应用，但还未充分发挥其巨大的潜能。应用该技术研究辐射损伤和损伤后修复的相关基因，有利于阐明辐射损伤和损伤后修复病理过程的分子机     

用PCR及Southern杂交方法对HBsAg阴性献血员HBV感染的检测

用ＰＣＲ与Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交（ＳＢＨ）方法对７８例ＨＢｓＡｇ阴性献血员进行ＨＢＶ感染检测，结果２份标本经ＰＣＲ后直接在２５４ｎｍ紫外灯下观察就可见到特异扩增带，另有１２份标本经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转膜杂交后可观察到特异扩增带，总阳性率较原来ＨＢｓＡｇ检测提高１７．９％，说明ＰＣＲ－ＳＢＨ可以区分ＨＢｓＡｇ阴性但仍然存在ＨＢＶ潜伏感染的献血员，使用ＰＣＲ－ＳＢＨ方法检测的ＨＢＶ可以提高输血的安全性。     

盐酸苯环壬酯抗运动病效应的观察

目的为观察军事医学科学院研制的抗运动病（Ｍｏｔｉｏｎｓｉｃｋｎｅｓｓ，ＭＳ）新药盐酸苯环壬酯（Ｐｈｅｎｃｙｎｏｎａｔｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ，ＰＣＨ）的疗效。方法选科里奥利旋转刺激耐受水平低于９０°／ｓ的受试者９人，进行下列试验：①ＰＣＨ对急性ＭＳ的预防作用：观察受试者在电动转椅旋转过程中的胃电周期和急性ＭＳ症状；②ＰＣＨ对视前庭相互作用的影响：观察视动性眼震（Ｏｐｔｏｋｉｎｅｔｉｃｎｙｓｔａｇｍｕｓ，ＯＫＮ）、前庭眼动反身（Ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒｏｃｕｌａｒｒｅｆｌｅｘ，ＶＯＲ）和视前庭眼动反射（Ｖｉｓｕａｌ－ｖｅｓｔｉｂｕｌａｒｏｃｕｌａｒｒｅｆｌｅｘ，ＶＶＯＲ）的频率和最大慢相速度。用东莨菪碱和安慰剂作对照，将ＰＣＨ分为每次服２ｍｇ和４ｍｇ两组，严格按双盲法给药。用前庭功能检查仪评定结果。结果ＰＣＨ有显著的预防ＭＳ的效应，对ＯＫＮ、ＶＯＲ和ＶＶＯＲ三种眼动反射均有一定的抑制作用，且其效应有剂量依赖性。结论ＰＣＨ具有与东莨菪碱相近的抗运动病效应。     

利用T—载体克隆法对人脑源性神经营养因子全长基因PCR产物…

利用Ｔ－载体克隆法完成了含信号肽及前导肽的人脑源性神经营养因子，全长基因ＰＣＲ产物的克隆。序列测定结果表明，所克隆的人ＢＤＮＦ基因从起始密友子ＡＴＧ致 止密友子ＴＡＧ的７４４ｂｐ中，除下游端ＰＣＲ引物因为采用猪的ＰＣＲ引物而有一个碱基改变外，其它序列与国外文献报道序列完全一致。     

中国大陆庚型肝炎病毒结构区与非结构区部分cDNA基因的序列分析

作者在建立检测庚型肝炎病毒酶免疫和ＰＣＲ技术的基础上，将抗－ＨＣＶ上阳性病人血清经逆转录－巢式ＰＣＲ分离部分ＨＧＶｃＤＮＡ片段，用与ＨＧＶ基因互补的特异寡核苷酸引物进行双脱氧核苷酸链末端终止法－ＰＣＲ直接测序。结果表明，中国大陆ＨＧ－３０２Ⅰ株部分ｃＤＮＡ序列与Ｌｉｎｎｅｎ等报道的ＨＧＢ美国株ｃＤＮＡ序列有极高的同源性。     

PCR快速诊断结核性脑膜炎25例

ＰＣＲ快速诊断结核性脑膜炎２５例①７１００３２西安第四军医大学西京医院苏明权马越云祝道成穆士杰姚娟关键词结核分枝杆菌；聚合酶链反应；脑膜炎中国图书资料分类号Ｒ５１本研究根据人型结核杆菌特异性基因序列设计一对引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）快速检测脑脊液...     

PCR技术在病毒性疾病诊断中的应用

ＰＣＲ技术在病毒性疾病诊断中的应用武警医学院微生物教研室王丹敏综述于德芳审校（天津３００１６２）关键词聚合酶链式反应病毒性疾病聚合酶链式反应技术（ＰＣＲ）是８０年代中期出现的分子生物学技术,它可使靶ＤＮＡ序列在短时间内由极少量增加至上百万倍。由于具有...     

颅脑磁共振血流成像：不同成像方法的临床应用

本文旨在研究磁共振血流成像（ＭＲＡ）在颅脑疾病的应用价值及最佳方法选择。６０例脑血管疾病ＭＲＡ检查中，４８例用两种以上ＭＲＡ方法检查，２４例做了ＤＳＡ对照。研究结果显示：无出血时，脑动脉狭窄、动脉瘤应首选ＭＯＴＳＡ；ＡＶＭ首选多流速编码的２Ｄ－ＰＣ，并联用３Ｄ－ＴＯＦ或３Ｄ－ＰＣ；有明显出血时，各种病变均应首选３Ｄ－ＰＣ。     

PCT检测HCV-RNA阳性与血清HCV抗体的对比研究

ＰＣＴ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性与血清ＨＣＶ抗体的对比研究武警河南总队医院病理科梁喜林，郑晓芙，彭亚丁，粟娟（郑州４５００５２）关键词ＰＣＲ检测，ＨＣＶ－ＲＮＡ，抗－ＨＣＶ采用ＰＣＲ技术检测ＨＣＶ－ＲＮＡ及酶免检测血清丙型肝炎抗体（抗－ＨＣＶ）来测定及辅...