bcl-2和bax蛋白表达与乳腺癌钙化的相关性研究

目的研究乳腺癌组织中bcl-2和bax蛋白表达与乳腺癌钙化之间的关系.方法 54例乳腺癌,术前双侧乳腺钼靶X线摄影检查.术后应用免疫组化的方法检测乳腺癌组织细胞的bcl-2和bax蛋白表达.结果钙化性乳腺癌2 3例,非钙化性乳腺癌31例. 钙化性乳腺癌bcl-2蛋白高表达21例(91.3 %);非钙化性乳腺癌高表达20例(64.5% ),两组间存在显著性差异(P<0.05). 钙化性与非钙化性乳腺癌 bax蛋白的高表达率分别为60.9%和58.1%,两组间无显著性差异(P>0.05).结论钙化性乳腺癌组织细胞的bcl-2蛋白表达水平明显高于非钙化性乳腺癌,说明乳腺癌病变中钙化灶的出现与bcl-2蛋白表达水平之间存在着某种关系.     

急性白血病bcl-2和bax mRNA表达及其临床意义

目的 研究凋亡调控基因 bcl-2和 bax 在急性白血病(AL)中的表达、相互关系和临床意义。方法 应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和 Southern blot 技术检测32例 AL 患儿 bcl-2和 bax mRNA 水平及其比值。结果 AL 患儿骨髓细胞中 bcl-2 mRNA 的表达明显高于对照组(P<0.01),bax 的表达明显降低(P<0.01)。治疗后,bcl-2 mRNA 的表达在完全缓解(CR)组中明显低于未缓解(NR)组(P<0.01),但 bax mRNA 在两组间的表达无差异(P>0.05)。分析 bcl-2/bax mRNA 表达比值显示,高比值组 NR 率显著高于低比值组(P<0.01)。结论 AL 的发病与凋亡调控基因 bcl-2和 bax 的异常表达有关。bcl-2和 bax mRNA 及其比值可作为判断 AL 预后及指导治疗的主要监测指标。     

氨基胍对癫痫大鼠海马区bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的探讨氨基胍对癫痫大鼠海马区bcl-2、bax蛋白表达的影响。方法32只SD大鼠随机分为4组：空白对照组（Ns＋Ns组）,模型组（Ns＋KA组）,氨基胍预处理组（AG＋KA组）和单纯氨基胍组（AG＋Ns组）,每组8只。4组大鼠造模后存活24h、48h,免疫组织化学法显示bcl-2、bax的蛋白表达情况。结果bcl-2的免疫反应在Ns组和AG组最强,AG＋KA组次之,KA组最弱;bax的免疫反应在KA组最强,AG＋KA组次之,Ns组和AG组最弱。结论氨基胍预处理癫痫模型大鼠可以使bcl-2的表达增加、bax的表达降低。     

TZD对糖尿病肾病中细胞凋亡及相关基因bcl-2/bax的影响

目的　探讨细胞凋亡在糖尿病肾病中的作用以及吡格列酮(TZD)对糖尿病肾病中细胞凋亡的影响。方法　建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病动物模型,随机分为正常对照组(NC)、正常对照治疗组(NCT)、糖尿病组(DM)、糖尿病治疗组(DMT)。NCT组和DMT组均给予TZD(3mg/kg d)灌胃治疗。采用免疫组织化学方法(S P法)检测大鼠肾组织bcl- 2及BAX蛋白表达,原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠肾组织细胞凋亡指数,电镜下观察大鼠肾组织超微结构的改变。结果　DM大鼠肾细胞凋亡指数较其他3组肾组织高(P <0 .0 5 ) ,各组大鼠肾组织中bcl- 2以及BAX均有不同程度的蛋白表达,DM大鼠肾组织BAX、bcl -2蛋白表达高于其他3组(P <0 . 0 5 )。电镜见DM大鼠肾组织有较多的系膜细胞核内染色质趋边浓缩,聚集等细胞凋亡的形态学改变。结论　bcl- 2和BAX蛋白均参与糖尿病肾病组织中细胞凋亡的调控,并在糖尿病肾病的发生发展中发挥重要作用。TZD通过影响BAX /bcl- 2蛋白表达抑制细胞凋亡,是其对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用的机制之一。     

海藻糖对低温保存胸骨中bcl-2和bax基因表达的影响

背景:研究已经证实海藻糖对低温保存中的胸骨具有保护作用,但作用途径尚不清楚.目的:观察海藻糖对低温保存胸骨bcl-2和bax基因表达的影响.方法:新鲜配置4组保存液:低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组、低钾右旋糖酐+海藻糖组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组+海藻糖组.切取SD大鼠胸骨后立即分别放入含上述4 种溶液的冻存管中低温保存.抽取新鲜大鼠胸骨组织和低温保存120 d的4组标本,采用RT-PCR方法检测不同保存液保存的胸骨及新鲜胸骨bcl-2和bax基因mRNA表达量.结果与结论:低钾右旋糖酐+海藻糖组bcl-2表达量高于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01),但bax表达量低于低钾右旋糖酐组、低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组(P < 0.01);低钾右旋糖酐+二甲基亚砜组+海藻糖组bcl-2表达量最高,bax表达量最低,基本接近新鲜骨组织(P > 0.05).结果提示海藻糖可能通过增强bcl-2基因、抑制bax基因的表达保护低温保存中的胸骨细胞活性,其与二甲基亚砜合用保护作用更好.     

Survivin基因在不同肝癌细胞中的表达及与bcl-2／bax的关系研究

目的：探讨Survivin基因在肝癌细胞中的表达及与bcl-2／bax的关系。方法：体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,Hep—G2及正常肝细胞,采用免疫组化,RT—PCR法及Western blot法检测Survivin及bcl-2／bax基因的表达。结果：免疫组化法显示肝癌细胞中有Survivin基因表达,且在SMMC-7721比在Hep—G2表达更明显,而在正常肝细胞中Survivin基因表达不明显;Survivin高表达的细胞,bcl一2也增高。Western blot和RT-PCR法均显示Survivin基因的表达在肝癌细胞中增加。结论：Survivin基因与人肝癌细胞SMMC-7721及Hep—G2有关,与肝癌细胞的分型相关,由此推断,Survivin基因与肝癌的发生、发展及预后有关。     

卵巢黏液性肿瘤中bcl-2和bax的表达及其意义

目的检测bcl-2和bax在卵巢黏液性肿瘤中的表达,分析卵巢黏液性肿瘤发生发展过程中凋亡调控相关基因的作用。方法应用免疫组化SABC法,检测bcl-2、bax在55例原发性卵巢黏液性肿瘤中的表达。结果 Bcl-2在良性、交界性和恶性组中的阳性表达率分别为10%、46.67%和85%;良性与交界性、交界性与恶性比较均具有统计学差异（P〈0.05）,良性与恶性比较有显著统计学差异（P〈0.01）。bax在三组中阳性表达率分别为80%、60%和10%;交界性与恶性、良性与恶性间比较有显著统计学差异（P〈0.01）。Bcl-2/bax比率在良性、交界性和恶性组平均值分别为0.24±0.42、0.85±1.56、15.46±19.58;交界性与恶性、良性与恶性间比较均有统计学差异（P〈0.05）。bcl-2和bax表达呈负相关（r=-0.208,P〈0.01）。结论在卵巢黏液性肿瘤的良恶性演变过程中存在凋亡调控的紊乱,其中线粒体途径可能为诱导凋亡紊乱的主要通路。交界性卵巢黏液性囊腺瘤患者检测到bax的缺如提示有潜在恶变的可能;bcl-2的表达异常在卵巢黏液性肿瘤的良恶性演变过程中是一连续性事件。Bcl-2/bax比率可能与卵巢黏液性肿瘤的良恶性程度密切相关。     

bcl-2和bax在口腔癌组织中表达与凋亡关系的研究

目的　通过对口腔癌组织及癌旁正常组织中bcl 2和bax基因表达与本底凋亡细胞的研究 ,探讨口腔癌组织及癌旁正常组织中凋亡与基因表达的关系。方法　利用免疫组化法检测 67例口腔癌组织标本及 42例癌旁正常口腔组织中bcl 2和bax基因表达 ,利用TUNEL方法检测口腔癌组织标本中凋亡的情况。结果　bcl 2、bax基因在口腔癌组织及癌旁口腔组织中的阳性及阴性表达均具有显著性差异 ;两者在口腔癌组织中的阳性及阴性表达 ,其细胞凋亡的指数均有显著性差异。bcl 2、bax基因表达呈显著负相关。结论　口腔癌组织中bcl 2基因阳性表达时 ,其本底凋亡指数较阴性表达时低 ;而bax基因性表达时 ,其本底凋亡指数较阴性表达时高 ,两者在细胞凋亡过程中存在着拮抗作用的关系     

前癃通胶囊对人前列腺组织bcl-2、bax表达的影响

目的:检测前癃通对前列腺组织bcl-2、bax表达的影响。方法:(1)免疫组化法检测前癃通对体外培养BPH患者前列腺组织bcl-2、bax蛋白表达的影响。(2)RT-PCR法检测前癃通对体外培养BPH患者前列腺组织块细胞bcl-2mRNA、baxmRNA基因表达的影响。结果:前癃通高、中剂量组对前列腺组织bcl-2蛋白、bcl-2mRNA基因的表达有不同程度的抑制作用,对bax蛋白、baxmRNA基因的表达有不同程度的增强作用。结论:前癃通对前列腺组织能抑制bcl-2的基因表达,增强bax的基因表达,从而抑制前列腺增生。     

脑出血周围组织细胞凋亡与bcl-2及bax蛋白表达的关系

目的：探讨脑出血灶周围组织中bcl-2，bax蛋白表达和细胞凋亡的关系。方法：SD大鼠70只。随机分为两组（实验组和对照组）。实验组采用胶原酶诱导大脑尾状核脑出血模型，分别于术后第6h、12h、24h、48h、72h、7d、14d，7个时相点（每个时相点5只）处死大鼠，运用TUNEL法、免疫组化SP技术，检测血肿周围脑组织中细胞凋亡及bcl-2．bax蛋白表达。结果：实验组细胞凋亡、bcl-2，bax蛋白表达与对照组有非常显著性差异（P〈0．01）．高峰期分别为脑出血术后第6h、48h。bcl-2蛋白表达与凋亡阳性细胞数呈负相关（r=-0．7628，P〈0．05），bax蛋白表达与凋亡阳性细胞呈正相关（r=0.8438，P〈0．01）。结论：脑出血灶周围脑组织中存在细胞凋亡，bcl-2，bax蛋白对凋亡具有调控作用。     

姜黄素致HepG-2细胞的凋亡作用及对bcl-2/bax表达的影响

目的:研究姜黄素致人肝癌HepG-2细胞的凋亡作用及bax与bcl-2 mRNA表达的变化,为姜黄素的临床应用提供实验依据.方法:当HepG-2细胞处于对数生长期时,分别加入不同浓度(0、2.5、5、10、20、30 mg/L)的姜黄素处理48 h,MTT试验检测细胞的抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;实时荧光定量PCR检测bax和bcl-2mRNA的含量.结果:随着姜黄素浓度的增高,其对HepG-2细胞的抑制作用逐渐增强.当姜黄素浓度为30mg/L时,其抑制率达到(58.23±2.56)%,IC50=25.44 mg/L,而细胞的凋亡率由对照组的(1.1±0.3)%上升到(38.4±1.5)%;bax和bcl-2分别是对照组的(5.00±0.55)倍和(0.28±0.05)倍.结论:姜黄素能抑制HepG-2细胞的生长,诱导细胞凋亡,它的分子机制可能是上调bax基因和下调bcl-2基因的表达.     

汉防己甲素干预急性损伤脊髓神经元凋亡及bcl-2和bax表达:与甲基强的松龙的比较

背景:研究证实汉防己甲素对急性脊髓损伤有保护作用,但其具体机制尚不清楚.目的:观察汉防己甲素对急性脊髓损伤大鼠的神经保护作用,并从细胞凋亡通路探讨其作用机制.方法:将100只成年大鼠随机分为4组.采用加速压迫型Allen's打击法制备脊髓损伤模型.甲强龙组和汉防己甲素组分别于造模前和造模后24,48 h经尾静脉注射甲基强的松龙和汉防己甲素.假手术组与模型组注射等量生理盐水.造模后8 h,1,3,7,14 d采用BBB评分评估大鼠的运动功能,苏木精-伊红染色观察损伤脊髓组织的形态改变,免疫组织化学染色检测bcl-2和bax的表达.结果与结论:伤后7,14 d,甲强龙组和汉防己甲素组大鼠的BBB评分显著高于模型组(P<0.05),各时间点甲强龙组和汉防己甲素组间BBB评分差异无显著性意义(P>0.05).伤后3～7 d,脊髓组织损伤最为严重,甲强龙组和汉防己甲素组的损伤程度较模型组轻,同时bax表达较模型组少,而bcl-2表达较模型组多(P<0.01).说明汉防己甲素可通过增加bcl-2表达、降低bax表达,抑制急性脊髓损伤大鼠神经细胞凋亡,促进大鼠运动功能恢复,其作用不逊于甲基强的松龙.     

硫化氢对大鼠心脏骤停后海马组织bax和bcl-2表达的影响

目的 通过检测大鼠海马组织bcl-2和bax表达来探讨硫化氢(H2S)在心脏骤停(cardiac arrest, CA)后脑细胞凋亡中的作用.方法 雄性SD大鼠160只,初始选择108只随机均分为三组,建立CA/CPR模型.①第1组(36只):在自主循环恢复(ROSC)后予以NaHS干预;②第2组(36只),在自主循环恢复(ROSC)后予以羟胺干预;③第3组为常规复苏组(36只).上述三组根据观察终点又均分为1、3和7 d三个亚组,每个亚组再等分两组分别做相关凋亡的免疫组化和RT-PCR检测.结果 ①三组经历CPR大鼠死亡及备用鼠使用的差别无统计学意义(P>0.05);②在CPR后,三组之间大鼠血清H2S浓度变化的差异有统计学意义(F=189.917,P=0.000),在CPR后各时点上三组之间血清H2S浓度的差异均有统计学意义(P=0.000);③在CPR后,三组之间大鼠海马组织CA1区bax和bcl-2蛋白表达累积光密度变化的差异有统计学意义(P<0.05),在CPR后各时点上三组之间海马组织CA1区bax和bcl-2蛋白表达累积光密度的差异均有统计学意义(P<0.01);④在CPR后,三组之间大鼠海马组织bax和bcl-2 mRNA相对表达量变化的差异有统计学意义(P=0.000),在CPR后各时点上三组之间海马组织bax和bcl-2 mRNA相对表达量的差异有统计学意义(P<0.01).结论 在CPR后,H2S可能通过促进bcl-2和抑制bax表达来影响bcl-2/bax的平衡而参与神经细胞凋亡.     

阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织bcl-2和bax表达的影响

目的:观察阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注脑组织bcl-2和bax表达的影响。方法:Wistar大鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注组(IR组)和阿托伐他汀治疗组(MT组)。采用线栓法复制大鼠脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学法检测再灌注12h和24h大鼠脑组织bcl-2和bax的表达。结果:与正常组和假手术组比较,IR组和MT组bcl-2、bax表达均显著增高(P<0.01);与IR组比较,MT组bax表达显著降低(P<0.05),bcl-2表达增高(P<0.05)。结论:阿托伐他汀能抑制大鼠脑缺血再灌注后脑组织bax和促进bcl-2表达。     

创伤性股骨头缺血坏死过程中凋亡调控基因bcl-2、bax的表达及意义

背景:由于骨细胞是股骨头的主要功能细胞,因此股骨头中骨细胞的凋亡及影响凋亡的因子已经成为目前探讨缺血性股骨头坏死发病机制的研究热点.目的:观察兔股骨头缺血坏死过程中凋亡调控基因bcl-2、bax的表达变化,探讨股骨头缺血坏死的发病机制.设计、时间及地点:动物观察试验,于2007 12/2008-09在遵义医学院珠海校区中心实验室完成.材料:35只新西兰白兔随机分为对照组和实验组(缺血后3,6,12,24,48,96 h)共7组,每组5只.方法:实验组采用开放手术中断兔股骨头血供致股骨头缺血坏死;对照组动物仅进行皮肤切开和肌肉分离至关节囊的手术.在缺血的不同时间段对股骨头内骨细胞以及Bcl-2、Bax两种蛋白进行测试及比较.主要观察指标:应用苏木精-伊红染色,免疫组织化学(ABC法)来观测股骨头缺血后3,6,12,24,48,96 h股骨头内骨细胞陷窝变化及Bcl-2、Bax蛋白表达的变化情况.结果:缺血12 h内苏木精一伊红染色见骨细胞变化较少,48 h出现部分骨细胞和成骨细胞消失,96 h空骨陷窝出现百分比明显高于48 h和对照组的(P<0.01). Bcl-2在缺血后3 h开始出现阳性表达,缺血后12 h出现高峰,然后缓慢下降;Bax在缺血后3 h开始出现阳性表达,高峰出现在缺血后24 h:bcl-2/bax在24 h最小,然后逐渐升高.结论:创伤性股骨头缺血坏死过程中凋亡基因bcl-2、bax表达变化说明其参与了股骨头细胞凋亡及股骨头缺血坏死过程,结合bcl-2/bax比率变化显示bcl-2、bax在缺血性股骨头坏死中通过调控骨细胞凋亡起作用.     

熊果酸诱导结肠癌HT-29细胞凋亡与凋亡相关基因的关系

目的：体外实验探讨熊果酸诱导结肠癌HT-29细胞凋亡的可能性，揭示该凋亡发生与其相关基因之间的关系。方法：采用四甲基偶氮唑蓝比色、TUNEL法、流式细胞术检测熊果酸对结肠癌HT-29细胞的增殖抑制与杀伤作用；应用免疫组织化学SP法检测凋亡相关基因caspase-9、bcl-2、bax的表达。结果：熊果酸在体外对HT-29细胞有中度增殖抑制效应，在熊果酸作用下，HT-29细胞出现显著的细胞凋亡征象，TUNEL法显示细胞固缩，核染色质聚集或断裂，形成凋亡小体。流式细胞术检测在G1期之前出现sub-G1峰，凋亡率最高为11．63％，熊果酸的作用具有浓度和时间依赖性。在HT-29细胞凋亡过程中，凋亡相关基因caspase-9、bax的表达增强，bcl-2的表达减弱。结论：熊果酸在体外对结肠癌HT-29细胞有诱导凋亡作用，而caspase-9和bax的表达增强，bcl-2的表达减弱可能是其作用机制之一。