TNP-470联合CTX对小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤生长的影响

目的 研究血管生成抑制剂TNP-470联合CTX对小鼠L795肺腺癌生长的抑制作用。方法 将40只接种高转移性的LA795肺腺癌细胞T739小鼠随机分成5组：(1)对照组；(2)溶剂对照组；(3)TNP-470组；(4)环磷酰胺(GⅨ)组；(5)TNP-470 CTX组。接种4d后开始用药，用药期间，每隔1d测量皮下移植瘤体积，20d后处死全部小鼠，剥离皮下移植瘤并称重。采用免疫组化和图像分析系统定量检测皮下移植瘤中微血管密度(MVD)、血管生长因子bFGF及增殖核抗原FCNA的表达，用原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果 各用药组肿瘤的生长明显受到抑制，而联合用药组抗瘤作用进一步增强，且具有协同作用。CTX组、TNP-470组和联合用药组与对照组相比都能减少bFGF表达；与GTX组相反，TNP-470组肿瘤组织中抗原PCNA的表达与对照组相比差异无显著性。TNP-470组和联合用药组肿瘤组织中的MVD与对照组相比都明显减小，而凋亡指数，各用药组都比对照组明显增高。结论 TNP-470组、CTX组中LA795肺腺癌生长受到明显抑制，两者联合应用具有协同作用。     

TNP-470联合CTX对小鼠LA795肺腺癌皮下移植瘤生长的影响

目的研究血管生成抑制剂TNP-470联合CTX对小鼠L795肺腺癌生长的抑制作用。方法将40只接种高转移性的LA795肺腺癌细胞1739小鼠随机分成5组：对照组、溶剂对照组、TNP-470组、环磷酰胺（CTX）组和TNP-470＋CTX组。接种4d后开始用药，用药期间，每隔1d测量皮下移植瘤体积，20d后处死全部小鼠，剥离皮下移植瘤并称重。采用免疫组化和图像分析系统定量检测皮下移植瘤中微血管密度（MVD）、血管生长因子bFGF及增殖核抗原PCNA的表达，用原位凋亡TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果各用药组肿瘤的生长明显受到抑制，而联合用药组抗瘤作用进一步增强，且具有协同作用。CTX组、TNP-470组和联合用药组与对照组相比都能减少bFGF表达；与CTX组相反，TNP-470组肿瘤组织中抗原PCNA的表达与对照组相比无差异显著性。TNP-470组和联合用药组肿瘤组织中的MVD与对照组相比都明显减小；而各用药组的凋亡指数比对照组都明显增高。结论TNP-470组,CTX组中LA795肺腺癌生长受到明显抑制，两者联合应用具有协同作用。     

烟曲霉醇联合5-氟尿嘧啶对SCID鼠胃癌生长的影响及机制研究

目的 探讨血管生成抑制剂烟曲霉醇(TNP-470)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对胃癌生长的影响及相关机制.方法 完整组织块SCID鼠胃壁原位种植,建立胃癌模型.将荷瘤小鼠48只随机分成4组:对照组、5-FU组、TNP-470组和联合组,每组12只.移植后第7天开始,分别自腹腔注射生理盐水(对照组)、5-FU(5-FU组)、TNP-470(TNP-470组)、5-FU和TNP-470联合用药(联合组),每日1次,共6周.种植后第8周末处死动物,原位肿瘤切除称重,计算抑瘤率及q值,采用免疫组化半定量检测肿瘤组织微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)表达水平,用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡指数(AI).结果 5-FU组、TNP-470组以及联合组肿瘤的生长明显受到抑制,瘤重明显低于对照组(P<0.05),其抑瘤率分别为35.1%、44.8%、73.3%,联合组抑瘤率明显高于5-FU组及TNP-470组(P<0.05),q=1.16.TNP-470组和联合组MVD、VEGF表达水平明显低于对照组,差异有显著性(P<0.05),而5-FU对MVD及VEGF表达无明显影响.各用药组AI较对照组显著增高,以联合组最高(P<0.05).结论 TNP-470对胃癌生长有明显抑制作用,与5-FU联用可起协同作用,其机制可能与抑制微血管形成和促进细胞凋亡有关.     

抑制肿瘤血管生成在大鼠膀胱癌细胞增殖与凋亡中的作用

目的:观察抑制肿瘤血管生成在大鼠膀胱癌细胞增殖与凋亡中的作用。方法:利用BBN诱导大鼠膀胱癌形成,应用血管生成抑制剂TNP-470 30 mg腹腔注射,每周2次,观察膀胱癌组织中微血管密度(MVD)、增殖指数(PI)、凋亡指数。结果:应用TNP-470实验组的MVD为(15.31±3.66)个/mm2,明显低于对照组(22.81±7.69)个/mm2(P<0.01);PI范围:对照组为5.2％～41.1％,平均21.7％;实验组为9.6％～21.6％,平均15.0％,差别有显著性(P<0.05)。凋亡指数范围:对照组为1.0％～4.3％,平均2.3％;实验组为1.1％-20.7％,平均6.81％,差别十分显著(P<0.01)。结论:TNP-470能抑制大鼠膀胱癌的增殖,同时增强其凋亡或坏死。     

灯盏花素改善肿瘤化疗药物对小鼠lewis肺癌的治疗指数

目的:观察灯盏花素对肿瘤化疗药物治疗效果的影响。方法:MTT法检测灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导脾脏细胞凋亡的保护作用;将lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠皮下和肺,采用灯盏花素联合阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶治疗小鼠,观察肿瘤大小、外周血细胞数、骨髓细胞数、脾细胞凋亡、及小鼠存活时间。结果:灯盏花素体外对阿霉素、环磷酰胺或氟脲嘧啶诱导的脾脏细胞凋亡有保护作用。在体研究,治疗组均有比未治疗组不同比例的肿瘤生长减慢,单独化疗导致骨髓细胞和外周血细胞数减少、脾细胞凋亡增加。实验结束时,与单一药物治疗相比,灯盏花素联合化疗均能显著延长小鼠存活时间。单独化疗虽比未治疗组小鼠存活时间稍长,但无统计学差异。结论:单独化疗对伴随肿瘤转移的荷瘤小鼠生命延长无实际意义,灯盏花素能改善肿瘤化疗药物的治疗指数。     

TNP-470对肺腺癌细胞诱导的血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其与Flk-1表达的关系

目的：探讨TNP-470对肿瘤细胞诱导的血管内皮细胞增殖和凋亡的影响及其与血管内皮生长因子(VEGF)受体酪氨酸激酶受体（Flk-1）的关系。方法：培养肺腺癌AGZY-82A细胞株，并制备条件培养液，加入培养的血管内皮细胞，用免疫组化S-P法检测TNP-470对癌细胞诱导后内皮细胞增殖细胞核抗原（PCNA）、p53和VEGF受体Flk-1表达的影响。结果：TNP-470能抑制癌细胞诱导的内皮细胞表达PCNA，当TNP-470的浓度达10^3ng/ml，细胞增殖几乎停止；而凋亡相关基因蛋白p53的表达逐渐增加；并且TNP-470以剂量依赖方式抑制内皮细胞Flk-1的表达，当TNP-470浓度达10^4ng/ml时，Flk-1的表达几乎完全受到抑制。结论：TNP-470可以通过阻止肿瘤细胞诱导的内皮细胞表达VEGF受体，抑制内此细胞的增殖，促进其凋亡，而达到体内抑制肿瘤生长和转移的作用。     

TNP-470对小鼠腹水瘤腹水生成的影响

[目的]研究血管生成抑制剂TNP-470对小鼠腹水瘤细胞腹腔种植的影响。[方法]80只615小鼠腹腔内接种腹水瘤细胞株后，随机分为5组，然后分别腹腔内注射生理盐水（第1组），DDP（第2组）及不同剂量的，TNP-470（第3、4、5组），观察瘤细胞株对各组小鼠的腹水生成，瘤细胞数及生存时间；透射电镜观察TNP-470作用后腹腔内肿瘤细胞的形态学变化。[结果]与生理盐水对照组相比，DDP、不同剂量的TNP-470可显著抑制615小鼠腹水的生成，减少瘤细胞数量，延长生存期，DDP组、TNP-470低剂量组、TNP-470中剂量组、TNP-470高剂量组生存时间分别为26．25、19．75、28．38、21．25d，与对照组生存时间14．88d相比，有显著性差异（P〈0．05），且中剂量TNP-470可使小鼠寿命明显延长，平均可达28．38d。[结论]TNP-470能抑制小鼠腹水瘤腹腔种植及腹水生成，不同程度的延长生存期。     

化疗药物剂量依赖性下调化疗敏感膀胱癌细胞中X染色体连锁的凋亡抑制蛋白的水平

目的探讨化疗药物诱导膀胱癌细胞凋亡及其对X染色体连锁的凋亡抑制蛋白（XIAP）表达和caspase-3剪切的影响。方法培养4种膀胱癌细胞系RT4、MGH-U1、EJ及T24,用低剂量阿霉素和丝裂霉素诱导凋亡启动,用细胞增殖分析试剂盒CCK-8分光法测定不同浓度化疗药物对膀胱癌细胞的杀伤力,确定化疗敏感细胞和耐药细胞,流式细胞术检测化疗药物诱导的细胞凋亡变化;用Western印迹检测阿霉素和丝裂霉素对膀胱癌细胞XIAP蛋白水平及caspase-3剪切的影响。结果4种膀胱癌细胞系中XIAP的表达水平差异无统计学意义。随着阿霉素和丝裂霉素的浓度增高,CCK-8检测到化疗药物对膀胱癌细胞的抑制率相应增加,流式细胞术检测到化疗药物诱导的细胞凋亡率相应增加。在化疗敏感的RT4细胞中可见caspase-3的剪切随着化疗药物浓度的增高而加强,而XIAP的蛋白水平却相应下降。这种效应在耐药的T24细胞中却不明显。结论阿霉素和丝裂霉素能剂量依赖性地杀伤膀胱癌细胞,而且这种杀伤力是通过诱导膀胱癌细胞凋亡实现的,XIAP和caspase-3与膀胱癌细胞的化疗耐药有一定相关性。     

胃液、稀盐酸、阿霉素对BIU-87细胞系细胞凋亡的影响

目的 :探讨胃代膀胱术抑制膀胱肿瘤复发的机制。方法 :采用HE染色、荧光染色、DNA电泳、流式细胞术等技术 ,观察了胃液、稀盐酸、阿霉素对膀胱癌细胞系BIU 87细胞凋亡的影响。结果 :发现胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡 ,细胞形态学观察凋亡细胞数增多 ,DNA电泳出现梯状电泳带 ,流式细胞术可见凋亡峰 ,胃液组细胞凋亡率为 8.0 9% ,与阿霉素组 (4 2 .74% )和无药培养液组 (6 .71% )比较差异有高度显著性 (P <0 .0 1) ,与稀盐酸组 (7.2 6 % )比较差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 :胃液作为一种诱导膀胱癌细胞系细胞凋亡的因子 ,可能在胃代膀胱术中起到抑制膀胱肿瘤复发的作用。     

NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素诱导裸鼠肝癌细胞HepG_2凋亡

目的:探讨NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素对裸鼠肝癌细胞HepG2的作用及机制。方法:接种传代培养的人肝癌细胞HepG2于裸鼠皮下,局部注射NF-κB decoy寡核苷酸和/或阿霉素进行治疗。观测裸鼠瘤体大小变化,计算抑瘤率;HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素治疗组裸鼠肝癌细胞的生长受到明显抑制,抑瘤率为80.52%;肿瘤重量、体积明显小于单用NF-κBdecoy寡核苷酸、阿霉素治疗组及对照组;联合组癌组织凋亡增加,凋亡指数为(39.8±1.6)%,与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素能抑制NF-κB活性,促进肝癌细胞凋亡,增加其对化疗药物的敏感性。     

血管生成抑制剂联合分化诱导剂治疗结肠癌肝脏转移的实验研究

目的:实验通过建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠肝脏转移瘤模型,研究血管生成抑制剂(TNP-470)联合分化诱导剂(RA)抗结肠癌转移的效应,二者是否具有协同效果.方法:建立人LOVO细胞结肠癌裸鼠肝脏转移瘤模型,随机分为4组,模型建立后分组治疗,至治疗结束时处死裸鼠,检测肝脏转移率和肝转移结节数及肝脏转移瘤组织中血管内皮生...     

贝伐单抗联合TNP-470治疗结肠癌的实验研究

目的观察贝伐单抗联合血管生成抑制剂TNP-470治疗裸鼠结肠癌移植瘤的疗效,二者是否有协同效果。方法随机将48只大肠癌裸鼠分为对照组(A组)、贝伐单抗组(B组)、血管生成抑制剂(C组)、贝伐单抗与血管生成抑制剂联合组(D组),A组于左侧腋部皮下注射0.9%生理盐水30mg/kg,B组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg,C组于左侧腋部皮下注射血管生成抑制剂TNP-470 30mg/kg,D组于左侧腋部皮下注射贝伐单抗5mg/kg和TNP-470 30mg/kg,1次/d,连用14d,至治疗结束时处死裸鼠,测量皮下移植瘤的长短径,分析各组间肿瘤体积差异的显著性;测量皮下移植瘤重量,计算抑瘤率;用细胞凋亡检测试剂盒测定裸鼠移植瘤凋亡水平,免疫组化检测结肠癌转移瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达和肿瘤微血管密度(MVD)。结果各实验组肿瘤的生长明显受到抑制,裸鼠皮下移植瘤瘤重、抑瘤率,D组和A组、B组、C组比较差异均有统计学意义(P<0.01),且B组、C组和A组之间差异亦有统计学意义;B、C、D组均可诱导移植瘤的凋亡,且差异有统计学意义;D组中的VEGF表达及MVD计数较A、B、C组均明显降低,差异有统计学意义。结论贝伐单抗与血管生成抑制剂TNP-470联合治疗结肠癌裸鼠皮下移植瘤比贝伐单抗或TNP-470单药治疗具有更强的抑瘤作用,二者联和应用,抗肿瘤效应明显增强。     

血管生成抑制剂TNP-470对人恶性胶质瘤细胞系SHG-44及其移植瘤生长的影响

目的：观察TNP－470对人恶性胶质瘤细胞系SHG－44体内和体外生长的影响。方法：采用MTT法、软琼脂克隆法、流式细胞仪、光镜和透射电镜技术观察SHG－44细胞体内外增殖、克隆形成、细胞周期和形态学变化及异种移植瘤生长情况。结果：20－2000ng/mlTNP－470可显著抑制SHG－44细胞体外增殖,克隆形成率显著降低,G0／G1期细胞明显增多,S、G2／M期细胞减少。彩和30mg/kg体重TNP－470隔日皮下注射后,移植瘤体积缩小、重量显著减轻,组织出现明显调亡细胞和坏死。结论：TNP－470对SHG-44细胞的生长抑制作用与其调控细胞周期和诱导细胞凋亡相关,提示TNP－470作为一种血管生成抑制剂对胶质瘤细胞生长也具有直接抑制作用。     

Inhibitory effects of TNP-470 in combination with BCNU on tumor growth of human glioblastoma xenografts

This study investigated the effect of TNP-470 in combination with carmustine (BCNU) on the growth of subcutaneously implanted human glioblastoma xenografts in nude mice.Human glioblastoma U-251 cells (1×10 7) were injected into 24 nude mice subcutaneously.The tumor-bearing mice were randomly divided into 4 groups on the seventh day following tumor implantation:TNP-470 group,in which TNP-470 was given 30 mg/kg subcutaneously every other day 7 times;BCNU group,in which 20 mg/kg BCNU were injected into peritoneal cavity per 4 days 3 times;TNP-470 plus BCNU group,in which TNP-470 and BCNU were coadministered in the same manner as in the TNP-470 group and the BCNU group;control group,in which the mice were given 0.2 mL of the mixture including 3% ethanol,5% acacia and 0.9% saline subcutaneously every other day 7 times.The tumor size and weights were measured.The tumor microvessel density (MVD) was determined by immunostaining by using goat-anti-mouse polyclonal antibody CD105.The results showed that on the 21th day following treatment,the volume of xenografts in the TNP-470 plus BCNU group was (108.93±17.63)mm 3,markedly lower than that in the TNP-470 group [(576.10±114.29)mm 3 ] and the BCNU group [(473.01±48.04)mm 3 ] (both P<0.01).And the xenograft volume in these 3 treatment groups was even much lower than that in the control group [(1512.61±470.25) mm 3 ] (all P<0.01).There was no significant difference in the volume of xenografts between the TNP-470 group and the BCNU group (P>0.05).The inhibition rate of the tumor growth in the TNP-470 plus BCNU group was (92.80±11.37)%,notably higher than that in the TNP-470 group [(61.91±6.29)%] and the BCNU group [(68.73±9.65)%] (both P<0.01) on the 21th day following treatment.There was no significant difference in the inhibition rate of tumor growth between the TNP-470 group and the BCNU group (P>0.05).The MVD of xenografts in the TNP-470 plus BCNU group was decreased significantly as compared with that in the TNP-470 group or the BCNU group (both P     

血管生成抑制剂对肿瘤抑制作用的研究

目的:探讨特异性血管抑制剂-TNP470对肿瘤生长抑制作用。方法:利用血管内皮细胞特异性抑制剂-TNP470,抑制鼠S-180移植实体瘤的生长,来探讨TNP470对实验性肿瘤的治疗作用,并利用免疫组织化学的方法研究肿瘤间质血管密度及肿瘤细胞增殖活性。结果:TNP470明显抑制了肿瘤的生长,肿瘤间质血管的密度降低,使肿瘤的细胞增殖活性明显低下。结论:血管抑制剂-TNP470能够较好地抑制肿瘤的生长。     

TNP-470对人肝癌细胞增殖和凋亡的实验研究

目的:研究TNP-470对肝癌细胞(SMMC-7721)的增殖抑制效应和凋亡诱导作用。方法:采用四氮唑盐还原法(MTT)检测药物对SMMC-7721细胞的增殖抑制作用。琼脂糖凝胶电泳测定DNA梯状条带,流式细胞仪检测细胞凋亡峰和细胞周期变化。结果:MMT法显示TNP-470可显著抑制SMMC-7721细胞体外增殖,DNA电泳显示典型的梯状条带,流式细胞仪检查有明显的凋亡峰出现,细胞周期阻滞在G2/M期,实验用药组细胞凋亡率明显增高,与对照组存在显著性差异(P<0.01)。结论:TNP-470对SMMC-7721体外直接杀伤作用不明显,但可诱导SMMC-7721细胞体外凋亡,诱导凋亡可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

烟曲霉醇联合健择抑制人肺腺癌细胞和脐静脉内皮细胞VEGF及其受体的表达

目的研究烟曲霉醇（TNP-470）联合健择（Gem）对人肺腺癌细胞（A549）和人脐静脉内皮细胞（ECV-304）血管内皮生长因子（VEGF）及其受体FLT-1、KDR表达的抑制作用。方法不同浓度的Gem（10^6-10^-4mg／m1）和TNP-470（10^-3mg／ml）单用或联合处理A549和ECV-304细胞，用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测药物对细胞的毒性及增殖的影响，用半定量RT-PCR法和蛋白免疫印迹法（Western-blot）检测药物对细胞VEGF及其受体FLT-1和KDR的基因及蛋白表达的影响。结果Gem和TNP-470对两种细胞的增殖活性均有抑制作用（Gem的IC50为10^-4mg/ml；TNP-470的IC50为10^-2mg／ml），Gem联合TNP-470能明显抑制两种细胞VEGF及受体的mRNA和蛋白表达水平。结论TNP-470联合Gem能显著抑制A549、ECV-304细胞的VEGF、FIX-1和KDR的核酸和蛋白的表达，具有协同抗肿瘤作用。     

大鼠膀胱癌血管生成与细胞增殖及凋亡的相关性研究

目的:定量研究大鼠膀胱癌组织中血管生成与细胞增殖、凋亡之间的相关性.方法:利用BBN诱导大鼠膀胱癌形成后,采用免疫组织化学技术观察大鼠膀胱癌组织中微血管密度(MVD)、细胞增殖指数(PI)及细胞凋亡指数(AI)的变化和相关性.结果:随着肿瘤发展,膀胱癌组织中MVD,PI均逐渐增加,二者呈正相关,且PI增加速率明显高于MVD的增加速率,从而导致AI亦逐渐增加.结论:肿瘤血管生成是肿瘤细胞增殖的前提和基础,二者之间的变化与肿瘤细胞凋亡、坏死的变化相关.