流式细胞仪检测GFW对荷瘤鼠细胞免疫的影响

目的探讨桂枝茯苓丸抑瘤作用及对T细胞亚群的影响。方法制备荷瘤小鼠模型,计算抑瘤率,FACS直接免疫荧光染色法测定T淋巴细胞表型CD4、CD8分子。结果中药组抑瘤率为38.93%。模型组、环磷酰胺组CD8分子表达降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。中药组CD8分子表达升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组和环磷酰胺组CD4/CD8升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05),GFW可以降低荷瘤鼠CD4/CD8,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);但不能使之恢复正常,与正常组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论桂枝茯苓丸能促进CD8分子的表达,使荷瘤鼠异常分布的T细胞亚群趋于正常水平,提示桂枝茯苓丸可通过调节机体免疫功能发挥抑瘤作用。     

人脐血造血祖细胞与脐血浆依赖性的研究

人脐带血与骨髓、外周血干祖细胞生物学特性虽基本相同,但同时也存在一些不同的特性。通过造血祖细胞体外半固体培养发现3种不同来源的粒系祖细胞(CFU—GM)体外生长所需条件不同。骨髓和外周血CFU—GM培养需要外源细胞生长因子GM—CSF存在。脐血CFU—GM培养仅需要脐血浆单独存在即可获得较高的集落产率。揭示了脐血浆中存在一种脐血祖细胞依赖的成分。它不同于GM—CSF,也可能不是GM—CSF协同因子,尚待进一步探讨。此外,提出了一个脐血粒系祖细胞体外培养简便易行的培养体系。     

脐血抗—HPCA—2和Tük3标记的CD34阳性细胞的流式细胞仪比较分析

在标记脐血造血祖细胞表面抗原（ＨＰＣＡ），ＣＤ３４中，比较抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ和Ｔｋ３（纯抗体）标记的ＣＤ（３４＋）细胞在流式细胞仪分析中的荧光特征及两种单抗标记的ＣＤ（３４＋）细胞与体外培养的粒单细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ），红系爆发形成单位（ＢＦＵ－Ｅ），和混合集落形成单位（ＣＦＵ－Ｍｉｘ）的相关性。结果发现脐血有核细胞中，抗ＨＰＣＡ－２阳性细胞占１．０５±０．７２％（ｎ＝１３），Ｔｋ３阳性细胞占２．０６±１．２５％（ｎ＝８），差别显著（Ｐ＜０．０５）。每毫升脐血两种抗体标记的细胞分别为９６．５６±５６．６４和２３１．４０±１６３．９３（Ｐ＜０．０５）。尽管ＨＰＣＡ－２阳性细胞与Ｔｋ３阳性细胞数量呈显著正相关（ｒ＝０．８７５，Ｐ＜０．０１），前者与ＣＦＵ－ＧＭ，ＢＦＵＥ，ＣＦＵ－Ｍｉｘ及集落总数ＣＦＵｓ均呈正相关，而后者仅与ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵｓ相关。研究提示在检测造血祖细胞时，用抗－ＨＰＣＡ－２－ＦＩＴＣ代替Ｔｋ３可降低假阳性，获得较好的ＯＤ（３４＋）细胞与ＣＦＵ间的线性关系。     

应用流式细胞仪检测白血病MDR1的表达

探讨白血病ＭＤＲ１表达的意义，建立ＭＤＲ１检测的简便快速方法。方法”用流式细胞术和经ＦＩＴＣ标记ＭＤＲ１单克隆抗体检测白血病外周血有核细胞ＭＤＲ１的表达。结果：２４例急性白血病ＭＤＲ１表达为８．９８±７．４３，３例慢性白血病ＭＤＲ１表达为３．６０±１．３０，两组间差异有高度显。     

脐血造血细胞体外扩增及其粘附特性变化

目的 探讨脐血造血细胞体外扩增过程中的粘附特性变化,为扩增最佳时机的选择提代实验依据,方法 用长期培养法体扩增脐血造血细胞,并用流式细胞仪测定其表面粘附分子变化。结果 CD11b表达于第10天显著增加,第30天达34.3％;CD44表达于第20天达最高水平;CD54表达则于第5天明显增加,第30天达14.9％;CD34 造血细胞在第15天达高峰,之后渐下降,并维持在一定水平。CD44及CD54表达与CD34^ 造血细胞变化存在相关性。结论 脐血造血细胞体外扩增过程中,CD44和CD54的持续高表达有利于造血细胞移植后的归巢;移植的最佳时机以长期培养第14天为宜。     

流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用

凋亡是一种细胞主动参与的自毁过程,与细胞坏死有根本区别。异常的凋亡状态与多种疾病密切相关,凋亡研究在临床有广泛的应用前景。本文介绍了4种应用流式细胞仪检测凋亡的方法。DNA含量分析最为常用,操作简便、成本低廉;Caspase-3是凋亡的早期检测指标,可以发现细胞内蛋白酶的升高;Annexin-Ⅴ探针能检测凋亡早期胞浆膜的改变;DNA断裂点标记是对凋亡形态学改变特征的流式检测方法。     

脐血造血细胞培养的特性

目的　培养脐血中具有造血潜能的造血细胞 ,分析脐血中造血细胞的特性。方法　用密封的采血袋采集脐血 ,采用羟乙基淀粉一次沉淀法分离有核细胞 ,用半固体培养体系培养 ,7天计数红系集落形成单位 (CFU E) ,14天后计数红系爆式集落形成单位 (BFU E)、粒单系集落形成单位 (CFU GM) ,同时染色分析集落的组成成分。结果　采集 34份脐血 ,平均体积为 (99± 2 2 )ml;有核细胞数为 (0 6 4～ 2 5 9)×10 9,有核细胞回收率为 79 2 %± 13 7% ,回收的有核细胞绝对值为 (1 2 2± 0 43)× 10 9;平均每份脐血中含有BFU E(1 39± 0 75 )× 10 6,CFU GM (2 15± 1 2 2 )× 10 6。结论　脐血富含各期具有造血潜能细胞 ,每份脐血在有核细胞数和各种集落总数都可以满足成人移植的需求。     

应用流式细胞仪检测脐血CD34+细胞的绝对值计数

[目的]应用流式细胞仪技术(FCM)精确测定CD34 细胞的绝对值计数,以指导脐血输注标本的选择,评价脐血的造血潜能.[方法]收集脐血100份,应用FCM测定CD34 细胞的绝对值计数,统计分析其与脐血常规、分娩方式及新生儿体重的关系.[结果]脐血CD34 细胞的绝对值均数为(48.5±27.9)/μL,与脐血白细胞有显著相关性,与红细胞、血小板无相关性.与新生儿体重有显著相关性.各分娩方式之间CD34 细胞的绝对值均散无差异.[结论]选择脐血白细胞计数较高、高出生体重儿及CD34 细胞绝对值计数高(＞100/μL)的脐血进行输注或移植将更有效.     

流式细胞仪在异体外周血干细胞移植中的应用

目的：研究外周血干细胞移植时，流式细胞仪在干细胞含量检测方面的应用。方法：用CD34单抗标记动员后CS－3000plus分离的外周血单个核细胞。用Facscalibur中的Cellquest软件收集分析。结果：正常人外周血中CD34+细胞从动员前的0．02％～0．22％上升到1．21％～2．47％。受者输入的CD34+量为3．71～11．8×106个细胞／千克受者体重。结论：流式细胞仪为临床提供了一种快速简捷的干细胞测定方法。     

流式细胞仪在细胞凋亡检测中的应用

凋亡是一种细胞主动参与的自毁过程，与细胞坏死有根本区别。异常的凋亡状态与多种密切相关，凋亡研究在临床有广泛的应用前景。本文介绍了４种应用流式细胞仪检测凋亡的方法。ＤＮＡ含量分最为常用，操作简便、成本低廉；Ｃaspase－３是凋 亡的早期检测指标可以发现细胞内蛋白酶的升高；Ａnnexin-Ｖ探针能检测凋亡早期胞浆膜的改变；ＤＮＡ断裂 点标记是对凋亡形态学改变特征的流式检测方法。     

流式细胞仪在医学研究与检验工作中的应用

流式细胞仪 (flowcytometry ,FCM)是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分进行快速定量分析与分选的医学仪器。它集光学、电子学、流体动力学、细胞化学、生物学、免疫学和计算技术于一体 ,可以高速度分析上万个细胞 ,并能同时从一个细胞中测得多个参数 ,具有速度快、精密度高、准确性好等特点。目前 ,流式细胞仪已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学研究领域。1　工作原理流式细胞仪主要由液流系统、光学系统、检测系统和数据处理系统 4部分组成 ,有些FCM还包括细…     

流式细胞仪的临床应用进展

流式细胞仪(flow cytometry, FCM)是七十年代起随着激光技术、计算机技术以及荧光化学与单克隆抗体技术的发展而完善起来的一种高速的单细胞定量分析和分选(Sorting)技术。FCM分析测定结果客观精确,并具有高统计学精度。因而在基础医学研究和临床医学各学科中都已得到广泛的应用。     

外周血不同处理方式对流式细胞仪检测结果影响分析

目的:观察不同方式处理外周血对流式细胞仪检测结果的影响,以探讨外周血标本稳定时间范围,为临床上充分利用流式细胞仪奠定理论基础。方法:选择健康体检人群,抽取新鲜外周血,制备固定后,放置不同时间,将这些标本作为研究对象,分为5组,A组为固定后放置12h标本,B组为固定后放置24h标本,C组为固定后放置4_8 h标本,D组为固定后放置96 h标本,E组为对照组,即新鲜外周血标本,采取流式细胞仪检测淋巴细胞百分率,比较5组之间差异。结果:固定后放置12 h、24 h标本与新鲜血液标本检测结果各细胞百分率均无明显差异;固定后放置24 h、4_8 h标本CD~+_3/CD~-_(19)、CD~-_3/CD~+_(19)、CD~+_3/CD~+4、CD~+_3/CD~+_8、CD~+4/CD~+_8、CD~+_3/CD~-_(16)CD~+_(56)、CD~+_3/CD~+_(25)与新鲜血液标本比较均下降,P<0.05,CD3+/HLA-DR+与新鲜血液标本比较升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:血液标本采集放置24 h内对外周血对流式细胞仪检测结果无明显影响,放置时间超过24 h对检测结果有所影响,临床应加以重视。     

流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白

用流式细胞仪检测10例正常人血小板膜糖蛋白GPⅡb-Ⅲa、GPⅠb--Ⅸ，并用于诊断1例血小板无力症。结果表明，流式细胞仪可快速、简便、敏感地检测血小板膜糖蛋白，为血小板功能缺陷性疾病的诊断和研究提供了一种新方法。     

经胎鼠腹腔途径进行人脐血造血干 细胞宫内移植的实验

【目的】探讨经胎鼠的腹腔途径用人脐血造血干细胞进行宫内移植后出现的并发症及移植情况,建立人脐血造血干细胞鼠宫内移植的动物模型,为临床某些遗传性疾病的宫内治疗及脐血的应用研究提供理论基础。【方法】将人脐血单个核细胞注入胎龄15～17d胎鼠的腹腔内,并设阴性及空白对照组,观察手术并发症及妊娠结局,待出生后1个月及2个月,分别用流式细胞仪和免疫组化检测移植情况。【结果】小鼠外周血中检测到逐渐增加的人CD     

低温冻存对脐血造血细胞增殖潜能的影响

目前脐血库长期库存脐血造血细胞的唯一有效方法是加入细胞保护剂后深低温冻存[1] ,这使得脐血细胞必然要经历进入深低温状态和复苏两过程 ,因此将不可避免地引起细胞理化性质的变化[2 ] 。从理论上讲 ,这有可能影响脐血造血细胞的生物特性 ,尤其是增殖潜能。为此 ,本研究采用Ｄｅｘｔｒａｎ 4 0 ＤＭＳＯ作为脐血造血细胞低温保护剂 ,探讨低温冻存对脐血造血细胞增殖潜能的影响。1　材料与方法1.1　材　料羟乙基淀粉 (Ｈｅｓｐａｎ ,ＨＥＳ)购自Ｄｕｐｏｎｔｐｈａｒ ｍａ公司 ;二甲基亚砜 (ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｌｆｏｘｉｄｅ ,ＤＭＳＯ…     

应用流式细胞仪对肺癌细胞增殖活力的分析

本文应用流式细胞仪对35例肺癌、10例良性病变肺组织及10例正常肺组织的细胞增殖活力(S％)进行了分析,结果显示肺癌组织细胞增殖活力非常显著高于良性病变组,良性病变组细胞增殖活力亦非常显著高于正常组,提示检测细胞增殖活力对肺癌的诊断、筛选有一定意义。