射频消融治疗兔肝VX2肿瘤后消融病灶鬼影细胞的形态变化

目的 观察射频消融治疗兔VX2肿瘤后病灶鬼影细胞存在的时间及不同时间段形态的变化.方法 将VX2肿瘤组织块接种于32只新西兰兔肝脏,建立肝脏肿瘤模型,2周后控制肿瘤边缘温度行射频治疗,于治疗结束后0、1、2、4周切取标本,在相邻切面分别行HE染色、NADH活力染色,观察鬼影细胞存在时间以及随时间变化过程.结果 射频治疗结束后4周,HE染色下鬼影细胞形态无明显变化,NADH染色显示无活力.结论 消融灶鬼影细胞形态至少能保持到治疗后4周,HE染色不能辨别是否是残癌,必须加用NADH活力染色,才能与残癌正确区分.     

经脾种植VX2瘤株兔肝转移瘤模型的DSA表现

目的分析经脾种植VX2瘤株兔肝转移瘤（liver metastases,LM）模型的数字减影血管造影（digital subtraction angiography,DSA）表现,探讨该模型能否成为动脉灌注化疗/栓塞(hepatic artery infusion chemotherapy/transcatheter arterial chemoembolization,HAI/TACE)治疗LM的理想动物模型。 方法选取新西兰大白兔40只,建立经脾种植VX2瘤株兔LM模型。采用直视方法经右侧股动脉穿刺,将微导管选入肝动脉内,行肝动脉DSA,观察VX2瘤株兔LM的供血血管及染色情况;行肝动脉锥形束强化CT,观察VX2瘤株兔LM的动脉强化方式,并行HE染色,镜下观察组织学表现。 结果成功建立VX2瘤株兔LM模型37只,均行股动脉穿刺插管,1次穿刺插管成功32只,穿刺成功率为86.5%（32/37）。DSA发现LM病灶57个,其中中等血供38个、乏血供19个。DSA表现为肝内动脉走行迂曲,LM的肿瘤供血支紊乱、不规则,动脉中晚期可见多发LM染色,呈类圆形,中心区域染色较边缘染色浅淡,实质期LM染色进一步加重,但是染色程度低于正常肝实质。肝动脉锥形束强化CT表现为多发大小不等LM,强化特点为转移瘤周边呈环形强化,中心区域未见强化。LM的DSA染色部分、肝动脉锥形束CT肿瘤强化部位及程度与腹部增强CT的LM强化表现一致,为LM周边强化,对应于HE镜下观察肿瘤外周存在活性的肿瘤细胞、炎性细胞及结缔组织;LM的DSA中心染色浅淡、肝动脉锥形束CT未强化部位与腹部增强CT的LM未强化表现一致,对应HE镜下肿瘤中心分布嗜碱性红染坏死肿瘤细胞。 结论经脾种植VX2瘤株兔LM模型符合临床上影像学表现为环形强化、DSA下为中等血供或乏血供的LM,能提供临床上研究中等血供或乏血供LM的HAI/TACE治疗疗效实验研究的理想动物模型,值得在基础或临床实验中推广和应用。     

兔VX2肝癌模型制作及肝动脉插管技术改良

目的 应用VX2细胞株制作新西兰兔移植性肝癌模型,并探讨对肝动脉插管技术的改良.方法 开腹分别种植VX2瘤块于兔肝左、右叶.制作40只兔VX2肝癌模型.瘤株接种2周后,实验组(26只)采取改良显微外科手术直接行肝动脉插管法行介入治疗,对照组(10只)采用3F微导管经股动脉.肝动脉插管法作对比研究.术前及术后用多层螺旋CT和DSA造影方法进行兔VX2肝癌的影像学观察.结果 CT扫描及开腹手术证实瘤株接种成功36只.实验组的插管成功率为88%(23/26);对照组的插管成功率为40%(4/10).多层螺旋CT平扫兔VX2肝癌表现为低或等密度结节灶;DSA造影示肿瘤呈均一的或结节状染色.结论 采用改良显微外科手术直接行肝动脉插管法对兔VX2肝癌行介入治疗成功率较高,实验人员可较大程度地避免辐射,是值得推广的实验方法.     

兔VX2肺癌模型的建立及MSCT观察

目的：探讨肺内注入组织块悬液建立兔VX2肺癌模型的方法。方法：将VX2肿瘤组织块悬液注入12只中国大耳白兔右肺下叶内。利用CT扫描观察肿瘤生长和胸腔内转移情况,同时观察动物的一般情况。结果：建立的兔VX2肺癌模型组织学表现与荷瘤种兔相同。接种成功率为100%,胸壁种植率为8.3%,实验动物自接种到CT扫描发现肿瘤生长的时间为（7±1.5）d,从发现肿瘤生长到出现右侧胸腔积液间隔（8±1.6）d。12只中国大耳白兔自然存活时间为（27±4.7）d。结论：采用组织块悬液肺内注入法建立兔VX2肺癌模型方法简便,接种成功率高,是建立兔VX2肺癌模型的理想方法。     

兔VX2肝癌模型的建立

目的建立可供实验研究的稳定的兔VX2肝癌模型。方法新西兰大白兔59只,取瘤块（1mm^3大小）开腹包埋法接种到兔肝脏左叶,于种植后第1,1．5,2,2．5,3,3．5,4周分别行超声学检查主要观察兔肝VX2成瘤检出情况。成瘤情况均经病理学证实。结果①围手术期3只兔因麻醉死亡,1只因感染死亡,成活率为93．2％（55／59）;②兔肝原位肝实质内种植成功50个,其中伴有16只异位种植,单纯异位种植为3只,未发现病灶2只,原位成瘤率为90．9％（50／55）;③接种后1周、1．5周经超声检查22例,发现病灶者8例,检出率为36．4％（8／22）;其余肿瘤在2周及2周以后超声检查全部检出。两个时间段检出率有明显差异;④兔肝VX2肝癌的超声主要表现为略高回声、等回声、低回声,周围可见声晕。结论建立兔VX2肝癌模型成功率高、方法简单、周期短、动物死亡率低,种植2周后超声学筛选及监测本瘤有意义。     

不同浓度四氯化碳诱导兔肝纤维化模型的对照研究

目的通过比较不同浓度四氯化碳（CCl4）诱导兔肝纤维化模型的差异,寻找高效的CCl4诱导兔肝纤维化模型的方法。方法 48只新西兰大白兔随机分组,分为实验组1（n=21）、实验组2（n=21）和对照组（n=6）。实验组1、实验组2分别以起始浓度5%和10%CCl4橄榄油溶液腹腔注射,0.1mL/kg CCl4,1次/6d,4次注射为1个周期,共4个周期,后续3个周期分别依次调整浓度（实验组1：10%、15%和20%,实验组2：20%、30%和40%）和剂量（0.2mL/kg、0.3mL/kg和0.4mL/kg）。对照组予1ml/kg生理盐水腹腔注射,首次注射后第6、9、12周分批处死7、7、2只实验兔,行肝脏病理学检查。结果实验组1实验兔死亡率28.5%,实验组2实验兔死亡率42.8%,两组实验兔死亡率差异无统计学意义（χ2=0.933,P〉0.05）。第9、12周兔肝脏病理评分显示实验组2与实验组1相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论长期持续给予CCl4可诱导实验兔肝纤维化形成。采用起始10%浓度和0.1mL/kg剂量腹腔注射,浓度、剂量逐渐等量递增的模型建立方法,造模进程较快,成模率较高。     

超声引导下经皮穿刺瘤块填塞法建立兔VX2肝癌模型

目的探讨超声引导下经皮穿刺瘤块填塞法制作兔VX2肝癌模型的方法技巧,并观察其超声及病理学特点,评价适宜的介入治疗研究时机。方法12只新西兰大白兔在超声引导下采用18GChiba穿刺针将VX2肿瘤组织块填塞接种于实验兔肝脏内,接种后分别于第14天、第21天、第28天行超声检查,并于检查后随机处死2只实验兔,行病理检查。结果实验兔VX2肝肿瘤接种成功率1oo％（12／12）,超声表现为肝脏内圆形或类圆形低回声结节,其周边血供丰富,中央血供稀少,病理检查结果肿瘤呈巢状,与正常肝实质分界清楚,高倍光镜下瘤细胞呈条索状或腺样排列,细胞异型明显。结论超声引导下穿刺组织块填塞制作兔VX2肝癌模型方法简单,耗时短,创伤小,成功率高,成瘤后2周左右为介入治疗研究的最佳时机。     

三种兔肾VX2肿瘤模型制作方法的比较

目的　探讨三种建立兔肾 VX2肿瘤模型方法的有效性。方法　研究对象为健康家兔 36只 ,动物模型建立采用三种方法 :1超声引导下肿瘤组织混悬液注射法 ;2手术直视下肿瘤组织块包埋 ;3手术直视下肿瘤组织混悬液注射法。结果　健康成年家兔 36只 ,成功建立 VX2肿瘤模型共 2 6只家兔。其中采用超声引导下肿瘤组织混悬液注射法接种 2 2只家兔的 2 8个肾脏 ,其中 10只家兔接种成功 ,成功率为 (10 /2 8) 35 .71% ;手术直视下肿瘤组织块包埋法接种 12只家兔 ,接种成功 4个左肾 ,成功率 (4 /12 ) 33.33% ;手术直视下肿瘤组织混悬液注射法接种 14只家兔左肾 ,成功 12只 ,成功率 (12 /14 ) 85 .71%。结论　三种建立兔肾 VX2肿瘤模型的方法是可行的 ,其中手术直视下肾内 VX2肿瘤组织混悬液注射法建立兔肾 VX2肿瘤模型的成功率较其他两种方法高     

四氯化碳诱导的肝硬化小鼠肝部分切除后肝再生模型的建立及评价

目的：建立并评价肝硬化小鼠的肝部分切除后肝再生模型。方法：50只小鼠随机分成实验组和对照组,每组25只。实验组小鼠腹腔注射四氯化碳（CCl₄）,每周2次,8周后形成肝硬化模型,对照组小鼠腹腔注射豆油。2组小鼠均行37%肝部分切除术。观察2组小鼠的手术成功率、术后存活率、术后生存情况和术后肝再生率;HE染色和Masson染色观察2组小鼠肝组织的病理学表现;ELASA法观察2组小鼠血清肝细胞生长因子（HCG）和丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平。结果：2组小鼠手术成功率均为100%,术后6周存活率均为100%。术后3周内实验组小鼠肝再生率低于对照组,术后3周时两者基本一致,术后3周之后实验组小鼠的肝再生率高于对照组。HE染色和Masson染色,CCl₄注射8周后肝脏呈肝硬化病理改变,肝部分切除术后肝组织结构逐渐改善。实验组小鼠血清HGF水平明显高于对照组,术后2组小鼠血清HGF水平均较术前有所升高,随后恢复至术前水平。与对照组比较,肝切除后实验组小鼠血清ALT水平升高明显,持续时间较长且到达峰值时间延迟。结论：CCl₄诱导肝硬化小鼠采用丝线结扎后切除左外叶的方法极易建立稳定、可靠的肝硬化小鼠肝部分切除后肝再生模型。     

兔VX2肝癌动物模型的建立

目的:介绍应用VX2肿瘤组织块制作兔移植性肝癌模型方法。方法:新西兰大白兔26只,采用开腹瘤块包埋法接种兔VX2瘤于肝左叶。于移植后2-3周进行CT扫描及数字减影血管造影(diagnostic digital subtraction angiography,DSA),实验完成后处死实验兔进行病理学检查。结果:26只兔均接种成功,接种成功率100%。VX2肝癌在CT平扫呈低密度,在肝动脉期表现为不同程度的环形强化,在门脉期呈低密度,病灶与周围肝组织分界清楚。肝动脉数字减影血管造影可见肿瘤染色。结论:兔VX2肝癌的表现与人类原发性肝癌类似,是肝癌介入治疗实验研究的理想动物模型。     

加味四逆散对实验性肝硬化大鼠防治作用的研究

目的研究加味四逆散对肝硬化大鼠的防治作用,并对其机制进行初步探讨。方法 Wist-ar雄性大鼠48只随机分为4组,每组12只。除正常组外,模型组、西药组和中药组均给予大鼠皮下注射40%四氯化碳（CCl4）花生油溶液2.5 ml/kg,每周注射2次,连续注射11周。连续注射CCl4的最后2周（即已注射9周后）,中药组同时用加味四逆散灌胃治疗;西药组以秋水仙碱灌胃治疗;正常组和模型组则给予等体积生理盐水灌胃;各组连续干预2周后,检测各组大鼠肝功能和肝组织病理改变。结果与模型组比较,中药组血清总蛋白（TP）、血清清蛋白（ALB）含量明显升高,丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）含量明显下降,差异均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）;肝组织病理改变明显减轻;中药组与西药组比较,TP、ALB含量明显升高,ALT、AST含量明显下降,差异均有统计学意义（P〈0.01或P〈0.05）;肝组织病理改变减轻。结论加味四逆散可显著提高TP、ALB含量,降低ALT和AST含量。加味四逆散能有效地保护肝细胞,恢复肝功能,具有较好的防治实验性大鼠肝硬化的作用。     

两种建立兔肝VX2肿瘤模型方法的比较

目的 比较超声引导下和开腹直视下两种接种方法建立兔肝VX2肿瘤模型的特征.方法 日本大白兔24只,随机分成2组,分别在超声引导下及开腹直视下将同大小瘤块接种在兔肝左叶,比较两种建模方法下肿瘤生长情况,观察接种后并发症.结果 超声引导下及开腹直视下原位种植成功率分别为8/12(67%)和10/12(83%),异位种植率分别为2/12(17%)和4/12(33%),无统计学差异.与开腹接种方法相比,超声引导下接种的肿瘤呈局限性生长,而且操作简单,并发症少.结论 超声引导下接种制作的兔VX2肝癌模型是超声介入治疗研究的理想动物模型.     

经肝动脉化疗栓塞对兔肝VX2移植瘤生长与转移的影响

目的：评价经肝动脉化疗栓塞（Transcatheter arterial chemoembolization,TACE）对兔肝VX2移植瘤生长与转移的影响.方法：45只荷瘤兔随机分成3组,每组15只.A组为对照组（Control组）：经肝动脉灌注0.5mL生理盐水;B组为化疗灌注（transcatheter hepatic arterial infusion,TAI）组（TAI组）：经肝动脉灌注5mg阿霉素与0.5mL生理盐水的稀释液;C组为化疗栓塞组（TACE组）：经肝动脉灌注5mg阿霉素与0.5mL碘化油的混悬液.经股动脉穿刺插管,依分组情况行介入治疗.比较不同处理组术后2wk肝移植瘤的增长率、坏死率以及肝内转移、肺转移的发生率.结果：介入治疗前各组肿瘤平均体积之间无显著性差异（P〉0.05）;与对照组及TAI组相比,介入治疗后TACE组肿瘤体积、肿瘤增长率明显降低（P〈0.01）,肿瘤的坏死率明显增加（P〈0.05）,肿瘤的肝内转移、肺转移的发生率明显增加（P〈0.05）.结论：TACE能够抑制兔肝VX2移植瘤的生长,但增加术后肝内转移和肺转移的发生率.     

对抗大鼠肝纤维化模型自发逆转的实验研究

目的探讨一种可行的方法对抗CCL4腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型的自然恢复趋势,以确保药物或细胞移植等方法对肝纤维化治疗效果的可靠性。方法50%CCL4腹腔注射诱导大鼠肝纤维化模型,然后随机分4组改皮下注射不同剂量CCL4（0.02-0.08ml/100g）,通过纤维化程度分期、纤维化半定量统计分析、肝功能和血清肝纤维化指标测定来评估肝纤维化。结果CCL4腹腔注射6周,肝组织汇管区和血管周围出现较粗大的纤维间隔。在抗逆转实验的第2周和第4周,皮下注射0.06ml/100g体重CCL4组的纤维化水平与造模成功时的差异无统计学意义（P〉0.05）。结论对大鼠肝纤维化模型使用皮下注射50%CCL4,0.06ml/100g体重,1次/周,能够将造模时的纤维化水平维持4周。     

兔VX2肝癌模型的建立及其CT灌注评价

目的探讨建立兔VX2肝癌模型的关键技术及兔VX2肝癌CT灌注成像的血流动力学特点。方法 35只新西兰大白兔随机挑选2只,于后肢皮下注射肿瘤细胞保留瘤种(荷瘤组),余33只随机分为实验组25只和对照组8只,实验组再随机分为实验1组10只,实验2组15只。对照组开腹种植明胶海绵;实验1组、2组分别采用CT引导下针头注入法及包埋法接种肿瘤细胞于兔肝左叶。实验组接种10 d后行CT扫描判断接种是否成功,并比较两种接种方法的差异。成功者3周后行CT灌注扫描,应用CT灌注软件程序计算肝脏的灌注参数,包括:肝动脉灌注指数(Hepatic Arterial Fracture,HAF)、门静脉灌注指数(Hepatic Portal Perfusion Index,HPPI)、血流速(Blood Flow,BF)、血容量(Blood Volume,BV)、平均通过时间(Mean Transit Time,MTT)、表面通透性(Per-meability Surface,PS)和到达时间(Time of Arrival,TO)。对照组同时行此项检查,比较实验组及对照组各灌注参数的异同。结果实验1组肿瘤种植成功率60%,实验2组种植成功率100%;种瘤3周后实验组与对照组相比,肿瘤区域CT灌注参数:实验组HAF值、PS值、BF值分别为:(0.90±0.03)、(42.73±8.47)ml.100 g-1.min-1、(225.93±5.64)ml.100 g-1.min-1;对照组HAF值、PS值、BF值分别为:(0.26±0.03)、(23.69±4.40)ml.100 g-1.min-1、(163.42±4.01)ml.100 g-1.min-1;HAF值、PS值、BF值两组间差异均具有统计学意义(P<0.05)。实验组TO值和HPPI值分别为:(2.11±0.54)ml/100 g(、0.11±0.27)ml.100 g-1.min-1;对照组TO值和HPPI值分别为:(9.63±1.34)ml/100 g、(0.77±0.08)ml.100 g-1.min-1,实验组TO值和HPPI值均较对照组减低,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组与对照组MTT、BV的差异无统计学意义(P>0.05)。结论兔VX2肝癌模型的建立,以包埋法较针头注入法成功率更高;CT灌注成像能反映瘤体的灌注特点,并能评价其血供及血流动力改变特点。     

兔肝VX2肿瘤模型MSCT灌注成像与血管生成的关系研究

目的研究兔肝VX2肿瘤多层螺旋CT(MSCT)增强表现,以及其与肿瘤微血管密度(MVD)、血管内皮生长因子(VEGF)之间的变化关系。方法选取25只实验兔,分为对照组和实验组,采用MSCT灌注成像和免疫组化方法对对照组、实验组、兔肝VX2肿瘤模型组于建模后的7、14、21和28 d进行检查,测定分析MSCT灌注参数值:肝动脉灌注量(HAP)、门静脉灌注量(HPP)、肝动脉灌注指数(HPI)以及VEGF和MVD表达的变化,并分析MSCT灌注参数值和VEGF、MVD表达的相关性。结果实验组的HAP、HPI、VEGF和MVD值显著高于对照组,HPP明显低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05),实验组兔肝VX2模型组的HAP、HPP和HPI值以及其VEGF和MVD值在模型建立后不同时间段的差异均有统计学意义(P0.05),HAP的变化与VEGF、MVD的变化具有显著正相关性(P0.05),HPP、HPI的变化与VEGF、MVD变化无明显相关性(P0.05)。结论 MSCT灌注成像可以提供肝动脉和门静脉灌注的量化信息,HAP与MVD、VEGF表达有明显正相关性,可间接反映肝肿瘤的血管生成。     

兔VX2肝种植瘤盐酸消融治疗后骨髓抑制及肝功能并发症相关性分析

目的：通过建立兔VX2肝种植瘤模型,了解盐酸消融治疗后的并发症,为进一步评价盐酸消融效果提供实验依据。方法：新西兰大白兔20只,采用组织块种植法制成兔肝VX2模型,随机分为治疗组和对照组,2周后治疗组接受盐酸消融治疗;于治疗术前1 d、术后第3 d、术后第14 d分别对两组兔经耳缘静脉抽血检测血常规及肝功能。结果：治疗组治疗后14 d WBC计数恢复正常,而对照组WBC数明显减低,两组差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗组治疗后14 d谷丙转氨酶降低,而对照组谷丙转氨酶明显升高,两组差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：盐酸消融治疗对兔骨髓抑制不明显,对兔正常肝组织肝功损害轻并且短期内损害可以恢复,为临床开展盐酸消融治疗后评价并发症提供了科学的依据。