Survivin在非小细胞肺癌中的表达及其与p53、细胞凋亡的关系

目的探讨Survivin基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其与p53、细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化方法检测60例NSCLC和16例肺良性组织中Survivin和p53的表达，用TUNEL技术检测NSCLC的凋亡情况。结果肺癌组织中Survivin蛋白表达的阳性率为63.3％（38／60），而在良性肺疾病肺组织均无表达；Survivin蛋白的表达与肺癌TNM分期、淋巴结转移和细胞分化程度有密切关系，但与肿瘤组织学类型、患者年龄及性别无关。p53蛋白表达阳性的NSCLC中，Survivin蛋白表达阳性率（80．5%）明显高于p53蛋白表达阴性者（26．3％）．P〈0．01。Survivin蛋白在NSCLC中的表达水平与癌细胞的凋亡指数（AI）星负相关（r=-0．231，P〈0．05）。结论Survivin基因异常表达引起的细胞凋亡抑制在NSCLC的发生中起一定作用，抑癌基因p53失活和Survivin基因过度表达可能在NSCLC癌变中起协同作用。     

细胞凋亡和p53、bc1-2蛋白在肝细胞癌中的表达

目的：探讨HCC中细胞凋亡情况及其与p53和bcl-2蛋白表达的关系。方法：细胞凋亡采用原位细胞凋亡检测法．p53和bcl-2蛋白表达采用免疫组他方法．细胞凋亡与p53、bcl-2蛋白表达的关系采用双标记法进行检测。结果：70例HCC中。癌组织和癌周组织中细胞凋亡指数(1000个细胞中)分别为3．63士1．96和10．63±3.64，bcI-2和突变型p53置自检出率分别为22．9％和42．9％．bcl-2主要表达在癌周组织中，抑制肝细胞凋亡。而p53则仅表过在癌组织，抑制癌细胞凋亡。双染色显示细胞凋亡与p53或bel-2不同时在一个细胞中表选。结论：HCC癌细胞凋亡减弱一突变型p53蛋白是癌细胞凋亡减弱的主要原因．而be-2则可能在维持HCC的肝脏功能方面具有重要作用。     

Plk1与Survivin蛋白在肝细胞癌中的表达及意义

目的探讨Plk1和凋亡抑制蛋白Survivin在HCC中表达情况,为临床诊断和治疗提供理论依据。方法采用免疫组化法检测100例肝细胞癌标本中Plk1、Survivin的表达。结果⑴肝细胞癌中,Survivin蛋白的表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）,Survivin在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、肿瘤分化程度、AFP表达及是否侵犯肝被膜均无关联（P〉0.05）。与HBsAg表达有关联（P〈0.05）。⑵肝细胞癌组织中,Plk1阳性表达明显高于癌旁正常组织（P〈0.05）;Plk1在肝细胞癌组织中的表达与患者性别、年龄、AFP表达、HBsAg表达及是否侵犯肝被膜均无关（P〉0.05）,与肿瘤分化程度相关（P〈0.05）。⑶肝细胞癌组织中,Plk1与Survivin表达呈正相关（P〈0.05）。结论 Plk1与Survivin的联合检测为肝细胞癌的诊断和治疗提供新的依据。     

原发性肝细胞癌组织中Smac、XIAP蛋白的表达变化及意义

目的检测原发性肝细胞癌（HCC）组织中Smac、XIAP蛋白的表达,并探讨其意义。方法采用免疫组化法检测50例肝癌组织、25例癌旁组织和15例正常肝组织中的Smac、XIAP蛋白。结果HCC组织、癌旁组织和正常肝组织中Smac蛋白阳性率分别为44．0％、80．0％、100％,XIAP蛋白阳性率分别为86．0％、28．0％、0,三者相比,P均〈0．05;HCC组织中Smac、XIAP蛋白表达均与HCC组织分化程度无关（P均〉0．05）;HCC组织中Smac和XIAP蛋白表达呈负相关（r=-0．270,P〈0．05）。结论HCC组织中Smac蛋白低表达和XIAP高表达,在HCC的发生发展有重要作用。     

Ki67、Survivin蛋白在原发性肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的探讨细胞核增殖抗原(Ki67)、凋亡抑制蛋白Survivin在原发性肝细胞癌(HCC)发生、发展中的作用。方法选择我院手术切除的HCC组织标本60份(肿瘤组),正常肝组织20份(正常组),采用免疫组化SP法检测两组中Ki67、Survivin蛋白表达,分析两者相互间及与HCC临床病理参数的相关性。结果肿瘤组Ki67、Sur-vivin蛋白表达阳性率明显高于正常组,P<0.01;Ki67、Survivin在HCC中的表达均与包膜侵犯、癌栓形成及肿瘤转移有关,P<0.05;HCC组织中Ki67与Survivin表达呈正相关。结论 Ki67与Survivin联合检测可为HCC的诊断和治疗提供依据。     

肝癌组织中凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3的表达及意义

目的：探讨凋亡调控因子Fas、FasL及caspase-3在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测80例HCC患者肝癌组织及其相应癌旁正常肝组织中Fas、FasL及caspase-3的表达,并分析其表达与 HCC临床病理因素的相关性。结果 Fas、FasL及caspase-3在 HCC、癌旁组织中的表达比较,均差异有统计学意义（P＜0．05）。在TNM 分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中Fas 的阳性表达率明显降低（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有门静脉癌栓、有淋巴结转移的肝癌组织中FasL的阳性表达率明显增高（P＜0．05）;在病理分级（Ⅲ～Ⅳ级）、TNM分期（Ⅲ～Ⅳ期）、有淋巴结转移的肝癌组织中 caspase-3的阳性表达率明显降低（P＜0．05）。80例 HCC患者肝癌组织中Fas、FasL与caspase-3的表达,两两之间并无明显关联性（狉＝0．057,P＞0．05）。结论 Fas/FasL系统的失衡及caspase-3低表达导致肝癌细胞凋亡障碍,在 HCC发生、发展及转移中起着重要作用。     

聚集素、P糖蛋白在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨聚集素（Clusterin）蛋白在肝细胞癌（HCC）中的表达及其与P糖蛋白（P-glycoprotein,P-gp）表达的相关性。方法采用免疫组化S-P法检测凋亡抑制基因Clusterin在HCC、肝硬化和正常肝组织中的表达及P-gp蛋白在HCC中的表达。结果Clusterin蛋白在HCC中的阳性表达率为82．93％,在肝硬化和正常肝组织中表达阴性或弱阳性;Clusterin蛋白阳性表达与患者的年龄、性别及肝硬化无关,与Edmenson组织学分级有相关性。P-gp蛋白在肝癌组织中的阳性表达率为70．73％。在HCC中,Clusterin蛋白的表达与P-gp蛋白表达呈正相关。结论Clusterin蛋白在HCC中呈高表达,与临床耐药密切相关,有望成为肝癌靶向治疗的一个新靶点。     

肝细胞癌热休克蛋白70过表达与自发性癌细胞凋亡

目的探讨肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma,HCC)热休克蛋白70（heatshockproteins70,HSP70）的表达及其与自发性癌细胞凋亡的关系。方法采用免疫组化SP法和原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测68例HCC手术标本中HSP70表达和细胞凋亡指数,以癌旁肝组织作为对照。结果HCC和癌旁组织中HSP70阳性率分别为71%和28%,过表达分别为53%和21%,两组之间差异有非常显著意义（P＜0.01),HSP70阳性率和凋亡指数有正相关关系（r＝0.8765,P＜0.05),两者都随HCC组织学分级增高而增加。结论HCC组织中存在HSP70过表达和自发性癌细胞凋亡,两者正相关性机理尚不明了,可能是HCC生物学恶性行为的标志。     

抑癌基因在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

应用免疫组化SP法检测35例肝细胞肝癌（HCC）患者癌组织及癌旁组织中抑癌基因PTEN蛋白的表达水平。结果显示，HCC组织中PTEN蛋白阳性率和阳性强度均明显低于癌旁组织（P〈0．01）；PTEN蛋白表达与HCC的分化程度密切相关（P〈0．05）．与癌栓形成有关（P〈0．01）。提示PTEN异常表达在HCC发生、发展过程中可能起重要作用．其表达水平可作为反映HCC进展和预后的生物学指标。     

肝细胞癌组织中信号素3F 蛋白表达变化及其与患者预后的关系

目的：探讨肝细胞癌（HCC）组织中信号素3F（SEMA3F）蛋白表达与患者预后的关系。方法采用Western blot法检测32例HCC患者手术切除的HCC组织（ HCC组）和相应癌旁肝组织（对照组）标本中的SEMA3F蛋白表达,分析SEMA3F蛋白表达水平与HCC临床病理特征、复发转移及预后的关系。结果 HCC组及对照组SEMA3F蛋白表达阳性率分别为84％、97％,HCC组SEMA3F蛋白表达量低于对照组（P＜0．05）。肿瘤有包膜者SEMA3F蛋白表达量高于无包膜者,肿瘤为单个结节者表达量高于多个结节者（P均＜0．05）。 HCC组有、无肝硬化者的SEMA3F蛋白表达量差异无统计学意义。15例SEMA3F蛋白低表达者复发率显著高于17例高表达者,生存时间短于高表达者（P均＜0．05）。结论 SEMA3F可能在抑制HCC的侵袭转移中起重要作用。癌组织中SE-MA3F表达水平有助于判断HCC患者的预后。     

Caspase-9和Survivin在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Caspase-9和Survivin在肝细胞癌(HCC)患者肝癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测92例肝癌患者肝癌组织及其对应癌旁正常肝组织中Caspase-9和Survivin的表达,并分析其表达与HCC临床恶性生物学行为的相关性。组间比较采用卡方检验,相关性分析采用Spearman等级相关法。结果 Caspase-9在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而Survivin在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ2=6.48、7.05,P0.05)。在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、门静脉癌栓、淋巴结转移的肝癌组织中Survivin的阳性表达率明显增高(χ2=5.07、6.18、8.29,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义;在病理分级Ⅲ~Ⅳ级的肝癌组织中Caspase-9的阳性表达率明显降低(χ2=7.63,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义。结论 Caspase-9低表达和Survivin异常高表达均参与肝癌的发生过程,Caspase-9低表达可能与肝癌细胞恶性分化密切相关,而Survivin高表达与肝癌的浸润或远处转移等恶性发展密切相关。     

Survivin和Livin在喉鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的进一步探讨喉鳞状细胞癌（喉鳞癌）的发生机制。方法选择手术切除的喉鳞癌标本50份（观察组）、正常喉黏膜标本50份（对照组）,采用免疫组化法检测存活素（Survivin）和活素（Livin）表达情况,采用Spearman等级相关分析法分析两指标间及与喉鳞癌病理特征的关系。结果观察组与对照组Survivin阳性表达率分别为64%、0%,Livin阳性表达率分别为48%、4%,两两比较P均〈0.05;两者的表达与喉鳞癌TNM分期、淋巴结转移、组织分化程度密切相关;Survivin和Livin在喉鳞癌组织中的表达无明显相关性。结论Survivin和Livin的异常表达可促进喉鳞癌的发生、发展及转移;二者可用于喉鳞癌患者预后的判断。     

细胞凋亡在大鼠酒精和高脂饮食诱导的脂肪性肝病中的作用

目的探讨在实验性脂肪性肝病动物模型中肝细胞凋亡的作用。方法雄性Wistar大鼠46只，分为对照组、酒精组、高脂组和高脂加酒精组。制模成功后取血测血清ALT、AST、CHO、TG、FFA；PCR法和免疫组化法测定肝组织caspase-3的基因与蛋白表达；TUNEL法测定肝细胞凋亡指数；电镜下观察肝细胞凋亡情况。结果酒精组、高脂组、酒精加高脂组细胞凋亡指数分别为2．16±0．43、2．33±0．60和3．93±0．80，显著高于正常对照组（1．070．27，P〈0．05）；实验组caspase-3无论是基因还是蛋白表达均较对照组升高（P〈0．05），其中以酒精加高脂组增加最明显。析因分析显示，加用与不加用酒精或高脂饮食对caspase-3及其基因表达有显著性影响（P=0．00）；高脂饮食与酒精交互效应显著（P〈0．05）。结论酒精和高脂均能诱导肝细胞发生凋亡，同时酒精和高脂同时作用于肝脏加重肝细胞caspase-3的表达，两者具有协同损伤肝脏的作用。     

子宫内膜异位症组织中hMLH1、hMSH2蛋白的表达及意义

目的观察人类错配修复基因h MLH1、h MSH2蛋白在子宫内膜异位症（EMS）病灶组织中的表达变化并探讨其意义。方法选择28例EMS患者的子宫内膜异位病灶组织作为病例组,其中Ⅲ期14例、Ⅳ期14例。选择因子宫肌瘤行子宫全切术的26例患者的正常子宫内膜组织作为对照组。采用免疫组化SP法检测两组h MLH1、h MSH2蛋白的表达。比较两组h MLH1、h MSH2蛋白的阳性率,比较病例组Ⅲ、Ⅳ期患者h MLH1、h MSH2蛋白的阳性率。结果病例组、对照组h MLH1蛋白阳性率分别为71.4%（20/28）、30.8%（8/26）,病例组h MLH1蛋白阳性率高于对照组（P〈0.01）。病例组、对照组h MSH2蛋白的阳性率分别为53.6%（15/28）、57.7%（15/26）,两组h MSH2蛋白表达差异无统计学意义。病例组Ⅲ、Ⅳ期患者h MLH1、h MSH2蛋白的阳性率差异无统计学意义（P均〉0.05）。结论 EMS组织h MLH1蛋白表达增高,h MLH1蛋白表达增高可能与EMS的发病有关。     

miR-143在HCC组织中的表达及其临床意义

目的 通过检测肝细胞肝癌（HCC）组织中micro RNA-143（mi R-143）的表达,探讨mi R-143在HCC侵袭转移过程中的作用。方法 收集45例HCC组织和对应的癌旁肝组织标本,采用实时荧光定量PCR（q PCR）法检测上述组织中mi R-143的表达,并分析其与HCC的临床病理学参数及HBV的关系。结果 癌旁肝组织中无mi R-143表达的病例,HCC组织中mi R-143的阳性表达率为88.89%（40/45）。mi R-143的表达与肿瘤数目、肿瘤包膜、门静脉癌栓、癌细胞分化、远处转移和肿瘤分期呈显著相关（P均〈0.05）,而与患者年龄、性别、肿瘤直径和HBV感染无关（P均〉0.05）;mi R-143表达阳性与阴性的HCC患者3年生存率分别为89.12%、32.56%,差异有统计学意义（P〈0.005）。结论 mi R-143表达可能与HCC的侵袭转移有关,mi R-143可作为预测HCC预后的标志物。     

Dynamic expression of apoptosis-related genes during development of laboratory hepatocellular carcinoma and its relation to apoptosis

AIM:To explore the expression of p53,bcl-2,bax,survivin and the cell apoptosis during the development of tree shrew hepatocellular carcinoma(HCC),the relationship between expression of these genes,its impact on HCC development,and its relation to cell apoptosis.METHONS:Tree shrew HCC was induced with aflatoxin B1(AFB1),and regular biopsy of liver tissues was carried out and the biopsy tissues were collected during cancer inducement.Liver biopsy tisue and HCC tissue were collected from 35pre-cancerous experimental animats at wk 30 and 60 and at the 30th_,60th_,and 90th-wk,Liver biopsy tissues were collected from 13 blank control animals at wk 30,60,and 90.Expression of p53,bcl-2,bax,and survivin at each stage was examined by immunohistochemistry method.Apoptotic cells were detected in situ by the terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated nick end labeling(tunel)technique.RESULTS:The apoptosis rate of normal hepatic cells was extremely low,whereas it increased during the formation of HCC.Expression of the apoptosis-related genes p53,bd-2,bax,and suvivin during the formation of HCC presented an increasing tendency.Expression of p53 did not noticeably relate to that of bcl-2,bax,and survivin,whereas expression of bcl-2 and bax was closely related.In HCC,p53 did not present a distinct relation to cell apoptosis,whereas its high level expression was probably related to liver cell proliferation.Survivin negetively correlated apoptosis index,and its overexpression could inhibit cell apoptosis.CONCLUSION:Apoptosis-related genes p53,bcl-2,bax,and survivin are all related to the occurrence of HCC.The anti-apoptosis effect of bcl-2 is influenced by bax,and ratio bcl/bax reflects more correctly the extent of cell apoptosis.