抗膀胱癌单克隆抗体导向的粘附性LAK细胞体外抗膀胱癌作用的研究

为了进一步探索治疗膀胱癌的新途径，用人体脾脏组织制备粘附性淋巴因子激活的杀伤细胞（Ａ－ＬＡＫ细胞），通过生物素－亲和素系统将抗人膀胱癌单克隆抗体（ＢＤＩ－１）与Ａ－ＬＡＫ细胞偶联构建出ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物。采用４小时５１Ｃｒ释放法测定ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物体外对人膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞的杀伤率，结果显示，扩增５天从每克人脾脏组织可制备得５．５×１０８个Ａ－ＬＡＫ细胞，ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物对ＢＩＵ－８７细胞具有较强的特异性杀伤作用。提示ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物可望用于膀胱癌导向治疗     

生物疗法预防膀胱癌术后复发

为评价ＢＣＧ及ＩＬ２在预防膀胱癌术后复发中的作用，联合应用ＢＣＧ膀胱灌注加ＩＬ２肌注预防膀胱癌术后复发（Ａ组）并与丝裂霉素Ｃ（Ｂ组）随机对照观察。Ａ组１４例，随访１８～２６个月，无１例复发。Ｂ组１４例，随访１５～２９个月，４例复发，两组比较有显著性差异。Ａ组治疗后外周血ＮＫ活性、ＬＡＫ活性、ＣＤ３细胞数均较治疗前有显著性升高（Ｐ＜００５），ＣＤ４细胞数，ＣＤ４／ＣＤ８值治疗后均有提高趋势。结果表明：联合应用ＢＣＧ及ＩＬ２可显著提高肌体免疫细胞功能，是预防膀胱癌术后复发较理想的疗法。     

P53,C—erbB—2基因蛋白和EGFR在泌尿系移行细胞癌中的表达及 …

应用免疫组化技术研究６５例泌尿系移行细胞癌（包括４７例膀胱癌和１８例肾盂癌）组织中Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白和表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达及相互关系。结果显示Ｐ５３在膀胱癌中阳性率为５７．５％（２７／４７），在肾盂癌中５０．０％（９／１８）；Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因蛋白在膀胱癌和肾盂癌中的表达率分别为４０．４％和３８．９％；ＥＧＦＲ的表达率分别为４２．６％和４４．４％。Ｐ５３、Ｃ－ｅｒｂＢ     

逆转录病毒介导人白细胞介素2基因在人膀胱癌细胞中高效表达

构建人白细胞介素２（ｈＩＬ－２）基因逆转录病毒表达载体ｐＺｉｐ－ｈＩＬ－２，用ＰＡ３１７包装细胞系包装后获得高效价逆转录病毒（１～５×１０５ｃｆｕ／ｍｌ）。病毒感染人膀胱癌细胞系ＢＩＵ８７并用Ｇ４１８选择培养，得到Ｇ４１８抗性克隆；经小鼠脾母细胞增殖法测定、ＲＮＡＳｌｏｔ打点杂交实验和Ｗｅｓｔｅｒｎ免疫印迹实验证实其高效表达ｈＩＬ－２，平均活性在２４小时每毫升为７５Ｕ／１０６细胞（最高达１２５Ｕ／ｍｌ）。转ｈＩＬ－２基因在人膀胱癌细胞中的高效表达，可为人膀胱癌转基因瘤苗的应用研究提供实验基础。     

卡介苗防治膀胱肿瘤原位免疫细胞活化的研究

采用免疫组化技术及单克隆抗体Ｔａｃ（抗ＩＬ－２受体），Ｉ２（抗ＨＬＡ－ＤＲ抗原）及ＯＫＴ９（抗ＴＦＲ），对１７例膀胱肿瘤和２３例术后预防肿瘤复发者卡介苗（ＢＣＧ）灌注后膀胱原位单核细胞中免疫细胞的活化进行研究。ＢＣＧ灌注后，膀胱粘膜上皮出现大量ＤＲ＾＋抗原表达，膀胱粘膜上皮细胞成为抗原递呈细胞，可能是ＢＣＧ抗膀胱癌重要作用机理之一。ＢＣＧ灌注后，膀胱粘膜固有层单核细胞中的Ｔａｃ＾＋，Ｉ２＾＋，Ｔ９     

卡介苗联合白细胞介素-2膀胱灌注预防膀胱癌复发机理的研究

目的探讨卡介苗（ＢＣＧ）联合白细胞介素－２（ＩＬ－２）膀胱灌注预防膀胱癌复发的机理。方法对３５例膀胱移行细胞癌术后患者分别行ＢＣＧ和ＢＣＧ加ＩＬ－２膀胱灌注,随访１４～２２个月,复发率分别为３１．２５％和２１．０５％。结果应用ＩＬ－２加ＢＣＧ膀胱灌注６周后,外周血天然杀伤细胞激活因子（ＮＫＣＦ）活性明显增强,在ＮＫＣＦ活性与ＩＬ－２活性间有显著正相关变化。结论ＩＬ－２加ＢＣＧ膀胱灌注预防膀胱癌复发作用明显优于单纯用ＢＣＧ,ＩＬ－２和ＢＣＧ两者间有免疫促进和协同作用。     

BCG和IL－2膀胱灌注预防膀胱癌复发的疗效观察

为了解ＢＣＧ＋ＩＬ－２联合应用膀胱灌注预防膀胱癌术后复发的疗效，将６０例膀胱癌随机分为两组：一组用ＢＣＧ６０ｍｇ（常用量的１／２）＋ＩＬ－２１００００Ｕ，一组用丝裂霉素Ｃ２０ｍｇ行膀胱内灌注。随访１０～４８个月，平均３３个月，无肿瘤复发者ＢＣＧ＋ＩＬ－２组２６例（８６．７％），丝裂霉素Ｃ组２３例（７６．７％），两组比较有显著性差异。ＢＣＧ＋ＩＬ－２组除有２４小时后自限性的轻微膀胱刺激症状外，无骨髓抑制等全身毒副反应。结果表明，ＢＣＧ＋ＩＬ－２较丝裂霉素Ｃ能更有效地防止膀胱癌术后复发，且可减少ＢＣＧ剂量。     

卡介苗激活杀伤细胞抗膀胱肿瘤作用研究

为了进一步探讨ＢＣＧ抗膀胱肿瘤的作用机理，采取１５例膀胱肿瘤患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），置于含ＢＣＧ或ＩＬ２的培养基中培养，计算扩增倍数，检测培养细胞抗自体及异体膀胱癌细胞活性。结果：卡介苗激活杀伤细胞（ＢＡＫ）与淋巴因子激活杀伤细胞（ＬＡＫ）分别于培养第７和第３天达增殖高峰，对自体瘤杀伤率分别为３６．２％和３１．４％，差异有显著性（Ｐ＜０．０５）；对异体瘤杀伤率分别为２５．２％和２８．３％，差异无显著性。结果表明：ＢＡＫ细胞抗自体瘤活性高于ＬＡＫ细胞，死ＢＣＧ对ＰＢＭＣ无激活作用，ＢＡＫ细胞抗肿瘤效应可能是ＢＣＧ抗膀胱肿瘤重要作用机理之一。     

膀胱癌发生中树突细胞与凝集素表达的关系

为探讨凝集素染色与树突细胞（ＤＣ）的关系，在膀胱癌发生、发展过程中的作用，选取二种凝集素和抗Ｓ１００蛋白抗体，对８７例膀胱癌进行免疫组化（ＡＢＣ法）染色。结果显示：肿瘤的病理分级与ＣｏｎＡ和ＷＧＡ的强表达呈正相关，与ＤＣ的数量呈负相关（Ｐ＜０．００５）；膀胱癌复发组ＣｏｎＡ和ＷＧＡ的强阳性率在８０．０％以上，而ＤＣ的强阳性率仅５．４％，有显著性差异（Ｐ＜０．００５）；术后生存＜５年病例的ＣｏｎＡ和ＷＧＡ强阳性率高于９４．０％，而ＤＣ数量则显著减少（Ｐ＜０．００１）。提示ＤＣ的减少或消失，破坏了机体局部免疫监视系统，导致膀胱癌的发生，认为ＤＣ、ＣｏｎＡ、ＷＧＡ是判断膀胱癌分级及预后有价值的标记物。     

抗膀胱癌单克隆抗体导向的粘附性LAK细胞体外抗膀胱癌作…

为了进一步探索治疗膀胱癌的新途径，用人体脾脏组织制备粘附性淋巴因子激活的杀伤细胞，通过生物素－亲和素系统将抗人膀胱癌单克隆抗体与Ａ－ＬＡＫ细胞偶联构建出ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物。采用４小时＾５１Ｃｒ释放法测定ＢＤＩ－１－Ａ－ＬＡＫ细胞偶联物体对外人膀胱癌ＢＩＵ－８７细胞的杀伤率。     

肝癌病人树突状细胞诱导高效而特异的抗肝癌免疫

目的 以肝癌病人树突状细胞（ＤＣ）体外诱导抗肝癌免疫。方法 自肝癌病人外周血中分离出单个核细胞（ＰＢＭＣ０;以人肝癌细胞系ＨｅｐＧ２肿瘤细胞的肿瘤相关抗原（ＴＡＡ）激活ＤＣ;以粒／巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）及白介素４（ＩＬ－４）联合刺激ＰＢＭＣ中ＤＣ;ＤＣ诱导自体Ｔ淋巴细胞增殖,分化为细胞毒性Ｔ细胞（ＣＴＬ）;检测ＣＴＬ及其上清液对ＨｅｐＧ２,ＢＥＬ－７４０２,ＬＯＶＯｅｙ ＨＯＳ－８６     

人胃腺癌阿霉素耐药细胞系BGC—823／DOX耐药机理的研究

为了进一步阐明人胃腺癌阿霉素耐药细胞系ＢＧＣ－８２３／ＤＯＸ耐药机理和特点，作者应用ＤＮＡ分子杂交、ＲＴ－ＰＣＲ、免疫组化和流式细胞技术进行了ＢＧＣ－８２３／ＤＯＸ多药耐药（ＭＤＲ１）、拓扑异构酶Ⅱα（ＴｏｐｏⅡα）、多药耐药相关蛋白基因的基因扩增、转录、表达分子水平检测以及细胞内阿霉素含量分析。结果表明，ＢＧＣ－８２３／ＤＯＸ亲本细胞具有原发耐药的特性，与消化道肿瘤较为相似。多药耐药是ＢＧＣ－８２３／ＤＯＸ主要的耐药机理。亲本细胞具有原发耐药ＢＧＣ－８２３／ＤＯＸ与亲本无原发耐药的阿霉素耐药细胞系相比，在耐药性质上有显著的差异。     

BCG－PSN、rIFN－r对膀胱癌患者T细胞MHCⅡ类抗原及IL－2R表达的诱导作用

采用鼠单克隆抗体间接免疫荧光技术观察了卡介苗多糖核酸（ＢＣＧ－ＰＳＮ）、重组免疫干扰素（ｒＩＦＮ－ｒ）在体外对膀胱癌患者外周静脉血Ｔ淋巴细胞主要组织相容性复合体（ＭＨＣ）Ⅱ类抗原及白细胞介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）表达的影响。结果表明；两者均能诱导病人Ｔ细胞ＤＲ抗原ＩＬ－２Ｒ的表达（Ｐ＜０．０５），而对正常人Ｔ细胞表达的影响无统计学意义。提示ＢＣＧ和ｒＩＦＮ－ｒ防治膀胱癌的作用可能与其诱导ＤＲ抗原、ＩＬ－２Ｒ的表达有关。     

人膀胱癌BIU－87细胞系多重抗药性的形成

应用阿霉素（ＡＤＭ），大剂量短暂冲击结合低浓度持续递增法，逐步诱导人膀胱癌移行上皮细胞系ＢＩＵ－８７，在体外持续培养６个月，获得了具有多重抗药性的ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞。该细胞能在浓度为２．０ｇ／Ｌ的ＡＤＭ中持续增殖。通过测定抗癌药物５０％抑制浓度（ＩＣ_（５０））发现，ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞对阿霉素的敏感性下降了２１倍，同时对表阿霉素（４－ｅｐｉ）、长春新碱（ＶＣＲ）、足叶乙甙（ＶＰ－１６）也具有显著的交叉抗药性，对顺铂（ＤＤＰ）、丝裂霉素（ＭＭＣ）、５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）和氨甲喋呤（ＭＴＸ）无抗药性；ＢＩＵ８７／ＡＤＭ细胞在脱离阿霉素诱导第８周时，其抗药性仍保持在９０％以上，结果表明：ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞具有多重抗药性（ＭＤＲ）表型，且抗药性较稳定，是研究人膀胱移行细胞癌ＭＤＲ机制和筛选抗药性逆转剂的理想模型。     

阿魏酸钠对犬心脏停跳复苏后脑组织TXB_2、6-keto-PGF_(1a)及MDA含量的影响

研究了阿魏酸钠对犬心脏停跳１０分钟复苏后４小时脑组织中血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１ａ（６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ）及丙二醛（ＭＤＡ）含量的影响。１７只犬随机分为非缺血对照组（Ａ组）、缺血再灌注常规治疗组（Ｂ组）及缺血再灌注阿魏酸钠治疗组（Ｃ组）。结果发现，Ｂ组ＴＸＢ２、ＭＤＡ含量及ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ比值均较 Ａ组明显升高（Ｐ＜０． ０１）。 Ｃ组 ＴＸＢ２、ＭＤＡ含量及 ＴＸＢ２／６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦ１ａ比值升高幅度均较Ｂ组明显低（Ｐ＜０．０１）。表明阿魏酸钠可明显抑制犬心脏停跳复苏后脑组织花生四烯酸代谢及脂质过氧化反应。     

BCG细胞壁骨架膀胱灌注防治浅表膀胱癌复发的研究

为了提高膀胱癌的治疗效果，采用ＢＣＧＣＷＳ（细胞壁骨架）行膀胱内灌注，防治浅表膀胱癌复发。５３例膀胱癌患者手术后分为ＢＣＧＣＷＳ组和ＢＣＧ组。ＢＣＧＣＷＳ组（２５例）５ｍｇＢＣＧＣＷＳ加无菌生理盐水５０ｍｌ注入膀胱，ＢＣＧ组（２８例）７５ｍｇＢＣＧ加生理盐水５０ｍｌ注入膀胱。每周１次，连续６周，以后每月一次连续两年。随访６～３２个月，中位数２６个月。两组比较肿瘤复发率无显著性差异，ＢＣＧＣＷＳ组毒副反应比ＢＣＧ组明显减少。结论：ＢＣＧＣＷＳ能有效地防治浅表膀胱癌复发，毒副反应低，并具有保存期长，使用方便的特点。     

PCNA反义寡核苷酸抑制人膀胱癌EJ细胞增殖活性的实验研究

目的 探讨全硫代修饰型ＰＣＮＡ反义寡核苷酸（ＡＳＯ）对人膀胱癌ＥＪ细胞体外增殖活性及裸鼠体内致瘤性的影响。方法 ＰＣＮＡ－ＡＳＯ在脂质体介导下转染ＥＪ细胞后,运用细胞计数,ＭＴＴ法,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入试验,流式细胞术（ＦＣＭ）,克隆形成率（ＣＦ）,ＳＡＢＣ免疫组化,建立裸鼠动物模型等方法分析其体内外抗瘤活性及机制。结果 在脂质体介导下,０．４－２．０μｍｏｌ／Ｌ ＰＣＮＡ－ＡＳＯ对人膀胱癌ＥＪ细胞     

抗P—糖蛋白单克隆抗体JSB—1和环孢素A协同逆转人膀胱癌MD…

为了证实抗Ｐ－糖蛋白单克隆抗体协同环孢素Ａ逆转入膀胱癌耐药细胞亚株的抗药性以及建立能有效地克服ＭＤＰ的治疗方案对人膀胱移行细胞癌ＢＩＵ－８７细胞系和ＢＩＵ－８７．ＡＤＭ耐药 株经柔红霉素与抗Ｐ－ｇｏ单克 抗 ＪＳＧＢ－１和单独或联合ＣｓＡ；ＪＳＢ－１和单独或联合异搏定自理后，采用Ｍ ＴＴ法评价细胞毒作用荧光光光度计检测细胞民内ＤＮＲ的聚集量。结果ＪＳＢ－１和ＣｓＡ能协同增加ＤＮＲＢＩＵ－８７／ＡＤ     

尿视黄醇结合蛋白在诊断早期糖尿病肾病中的评价

目的：探讨尿视黄醇结合蛋白（ＲＢＰ）在糖尿病肾病中的诊断价值。方法：非胰岛素依赖型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者５０例，正常对照组２５例。分别检测尿ＲＢＰ、Ａｌｂ、ＴＲＦ、β２－ｍ、ＮＡＧ和Ｃｒ。结果：ＮＩＤＤＭ组尿ＲＢＰ／Ｃｒ较对照组显著增高，尿ＲＢＰ／Ｃｒ与尿Ａｌｂ／Ｃｒ、ＴＲＦ／Ｃｒ、β２－ｍ／Ｃｒ、ＮＡＧ／Ｃｒ均呈显著性正相关。当尿Ａｌｂ／Ｃｒ在正常范围时，尿ＲＢＰ／Ｃｒ显著增高（Ｐ〈０．０５）     

bFGF调节PDGF对人成骨细胞的促增殖作用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对血小板衍生生长因子（ＰＤＧＦ）促成骨细胞增殖作用的影响及其机制。方法 分离培养人成骨细胞;以ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）单独培养、ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＢ（１００ｎｇ／ｍｌ）混合培养、不加生长因子等３种方式培养细胞,绘制细胞生长曲线;ｂＦＧＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）与ＰＤＧＦ－ＡＡ或ＰＤＧＦ－ＢＢ（浓度均为４０ｎｇ／ｍｌ）以不同方式联