微板法血型自动检测几个影响因素的探讨

笔者采用微板法血型自动检测方法［1］,对自配红细胞的保存时间、加样顺序、血型板的洁净程度,作了较详细的探讨。并通过19223例的血型检测,正反定型相符达到99.99%,准确率达到100%。从而完善微板法血型自动检测,节约了耗材和开支。 1 材料与方法 1.1 仪器与试剂 AT-PLUS2全自动加样系统(HAMILTON公司瑞士),HT-Ⅲ酶标仪和T.S温控孵育振荡仪(Anthos 公司奥地利),ModelTJ-6平板式离心机(BECKMAN公司美国),96孔U型板(购自上海血液中心参比实验室)。抗-A、抗-B单克隆抗血清（购自长春生物制品研究所）,标准4%A、B红细胞（购自澳斯邦公司）自配试剂红细胞（A型和B型红细胞分别取自筛选后的3人份新鲜ACD抗凝血,洗涤混合后配成4%的红细胞）。96孔洗板机（TECAN,A-5082购自奥地利） 1.2 实验操作程序①利用自动加样仪加样,正定：25μl标准血清+25μl样品细胞（4%）,反定：25μl样品血浆+25μl试剂细胞（4%）;②振荡孵育28℃、400r/min、8min、3accel;③平板离心400r/min、1min;④振荡悬浮28℃、1000 r/min、2min、2 accel;⑤静置5～10min;⑥判读：扫描点数15、测定波长620nm。（借助于AUSFINE判读软件） 1.3 实验例数：19223例;实验组：微板法;对照组：纸片法。     

全自动微板法血型鉴定的影响因素分析

目的了解全自动微板法血型鉴定的影响因素。方法使用Tecan公司生产的Freedom evo clinical全自动加样设备和深圳爱康公司生产的Poseidon数字血型分析仪做正反血型检测。结果到2009年12月为止共检测标本183599例,检测结果与报道的正反相符率达99%,准确率达100%相符。结论由于血型抗原抗体的多样性、复杂性,抗原抗体效价减弱,亚性型的存在,给正确判定血型带来了很大困难,全自动微板血型法采用自动加样扫描判定,结果自动传输,所以更容易受到各种影响因素的干扰。     

120孔梯形微板法血型自动检测技术的应用

目的了解120孔梯形微板法血型检测的效果及影响因素。方法采用深圳爱康波塞东数字血型分析仪120孔梯形微板法血型检测技术,检测无偿献血标本459份,与试管法血型检测作对比试验。结果 120孔梯形微板法与试管法血型检测结果无显著差异性;轻微脂肪血标本对检测无影响,轻微溶血标本会造成正反定型不符现象;血型判读一次正确判读率达到99%以上。结论 120孔梯形微板法血型自动检测技术可完成大批量标本的处理,大大减少了劳动强度和人为误差,与手工法相比更为简单、经济、节省成本。     

120孔梯形微板法血型自动检测技术的应用

目的了解120孔梯形微板法血型检测的效果及影响因素。方法采用深圳爱康波塞东数字血型分析仪120孔梯形微板法血型检测技术,检测无偿献血标本459份,与试管法血型检测作对比试验。结果 120孔梯形微板法与试管法血型检测结果无显著差异性;轻微脂肪血标本对检测无影响,轻微溶血标本会造成正反定型不符现象;血型判读一次正确判读率达到99%以上。结论 120孔梯形微板法血型自动检测技术可完成大批量标本的处理,大大减少了劳动强度和人为误差,与手工法相比更为简单、经济、节省成本。     

微板法鉴定Rh血型临界值的选择

目的研究微板法检测Rh血型临界值的选择.方法通过已知Rh阳性及Rh阴性标本的试验结果,选择判读是否凝集的临界值,并观察所选临界值的实际应用效果.结果所选临界值判读准确率达99.5%,实现了Rh血型检测的自动化、标准化、结果的数据化.结论微板法筛查Rh血型,适用于血站系统Rh阴性献血员的大批量筛选和管理.     

用自动化微板法初筛RhD血型建立RhD阴性库

试管法筛查与鉴定RhD血型，存在操作步骤繁琐，人为因素影响较大，且结果只能当时凭肉眼判断，无法使结果数据化的不足。本血站于2003年1月建立了RhD血型大规模初筛的自动化操作方法，使RhD血型初筛纳入了献血者初筛的常规检测项目。     

微板法检测ABO血型的应用

目的使ABO血型鉴定原始记录易于保留,结果判定避免人为误差。方法采用全自动仪器加样,酶标仪判读,试验结果经计算机显示。结果可应用于大批量的血型检测,并能实现实验结果的计算机管理,建立完整准确的试验记录档案。     

U型微板法反定型试验的探讨

在以往的反定型试验中,通常采用平板法或试管法,其操作繁琐,加样量不准.肉眼判读结果缺乏一定的客观性且资料不易保存.现改用U型微板法由STAR加样、酶标仪扫描、电脑判读打印全自动系统操作试验.     

ABO血型全自动微板检测法可靠性探讨

本站最近研究开发了ABO血型全自动微板检测法,并对2857名献血者进行ABO血型鉴定,一次判读准确率达到99.83%.该法的应用大大地降低了实验者的工作强度,避免了人为因素导致的错判血型,确保了临床输血的安全.笔者着重对该方法的可靠性和干扰因素进行研究 ,结果报告如下.     

改良自动化固相微板法检测红细胞抗体的应用

红细胞抗体检测是血型血清学的一项重要技术,广泛应用于输血前检查．我国有专家已经指出,对受血者的血清应常规检测红细胞抗体,以发现有临床意义的不规则抗体,有条件的血液中心也应开展献血者的红细胞抗体检测,以减少不规则抗体进入受血者体内。国家卫生部颁发的《临床输血技术规范》已规定对有免疫史的患者做红细胞抗体检测．笔者自2003年建立和改良了固相微板法红细胞抗体检测技术,现报告如下。     

微板法漏检Ax亚型鉴定1例

ABO血型抗原变异较多，可形成许多亚型，主要表现为抗原不同程度的减弱。笔者用微板法做献血者ABO正反定型时发现1例被误定为O型，试管法鉴定实为Ax亚型的献血者，现报道如下。     

微板法初步筛查批量标本Rh血型D抗原的检测方法

目前,Rh血型的筛查及鉴定基本上采用盐水法、酶法及聚凝胺等技术在试管中进行[1],操作周期长,效率低,判定标准的人为因素影响多.随着多克隆(Polycolne)抗血清的生产以及微板技术的应用,出现了盐水介质抗血清一步法筛查Rh血型的微板操作技术.本中心于1999年4月建立了Rh血型大规模初筛的自动化操作方法,实现了Rh系统初筛的标准化,使也其成为本中心的常规检测项目.     

固相微板法红细胞抗体检测技术的建立

目的　摸索建立一种简单实用的红细胞抗体检测技术。方法　采用一种新的固相红细胞方法 ,把筛选红细胞固定于 96孔U型板。分别用固相法和试管法 ,对多种抗血清、供血者、有免疫史的病人 3批标本检测 ,对结果加以比较。结果　对抗血清的效价测定 ,两种方法结果一致 ;在对供血者和病人的检测中 ,固相法检出了所有试管法能检出的抗体。结论　与试管法比较 ,固相法的灵敏度可以得到肯定 ,结果可靠 ,而且易制备 ,操作技巧容易掌握、普及。     

梯度板法ABO血型正定型参数选择

<正>经典的ABO血型试验方法为试管法[1],但其试验步骤繁琐、效率不高,并不适合于血站系统大批量血液标本的检测。本站利用全自动血型仪,采用梯度板技术,对ABO血型正定型的试验参数进行了优化选择,并将其应用于献血者血液标本的检测,效果良好,现报道如下。1材料与方法     

微孔板法自动检测技术筛查 Rh 血型

目的：建立微孔板法快速筛查献血者Rh阴性血型的方法。方法（1）用A T-PL U S2全自动加样系统,在96孔微孔板上按编制好的程序进行加样;（2）通过离心、孵育、悬浮、静止等过程,完成微孔板凝集试验,利用自动扫描技术判读结果,凝集孔 A值超过阳性下限判定为Rh血型D抗原阳性,非凝集孔 A值未超过阴性上限判定为Rh血型D抗原阴性;（3）通过优化选择最适抗-D血清浓度、受检红细胞浓度及孵育、悬浮、判读等最佳条件。结果抗-D血清1∶4稀释为最适工作浓度;受检红细胞最适浓度为4％;孵育条件为8 min ,400 r/min ,3 accel ;悬浮最适条件：2 min ,1000 r/min ,2accel ;阳性下限 A值为0．75,阴性上限 A值为0．35。结论实现了大批量筛选Rh血型的自动化及标准化。     

应用梯度板法检测无偿献血者ABO血型探讨

目的探讨梯度板法在无偿献血者ABO血型检测中的应用。方法选取已知血型的血液标本,通过正交试验、优化梯度板法检测ABO血型正、反定型实验参数,并常规应用于无偿献血者血液标本的检测。结果检测无偿献血者血液标本24 922例,ABO血型1次判读符合率99.6%。发现流动采血车采血前初定ABO血型错误5例,A2型2例,B3型1例,不规则抗体1例。结论梯度板法1次判读符合率高,对亚型及不规则抗体检出能力强。实现了血型实验的标准化、自动化、实验结果的数据化及网上自动发布,满足了血站简便、快速、准确的检测大批量无偿献血者血液标本的需求,值得推广应用。     

ABO血型反定型梯形微板法的建立

目的建立梯形微板ABO血型反定型检测方法。方法随机选用常规A、B、O、AB型血样各8份。运用正交设计原理选择血浆稀释度、红细胞浓度、反应温度、静止时间4个参数的最佳条件;采用混合血样倍比稀释,确定凝集与非凝集灰区值。根据已确定的最佳条件和灰区值,进行重复性试验、灵敏度试验、准确性试验、脂血干扰试验、溶血干扰试验,并检测6份ABO亚型血样AM、AX、A2B、A3B、AXB、BM和5份含不规则抗体血样抗-M、抗-N、抗-P1、抗-Leb、抗-HI,以评价对特殊血样的检出能力。结果重复性符合率100%。灵敏度可达到与试管法相同效价的检出能力。准确性达99.99%。47份不同脂血程度血样抗干扰试验一次判读正确率100%。溶血干扰试验在Hb≤20g/L时,对梯形微板法试验结果无明显影响,在严重溶血情况下(Hb>20g/L),对凝集端无影响,对非凝集端有影响。对11份特殊血样均有较好的检出能力。结论梯形微板法不仅能够很好地完成普通血样ABO反定型的检测,还具有提高对弱凝集血样检测灵敏度的优势,进而提高试验的准确性。     

加样后放置时间对ALT微板速率法检测结果的影响

血液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)的测定目前仍是采供血机构筛选献血者的项目之一。在肝炎早期，检测ALT有一定的实际意义。本中心引进全自动加样系统，采用微板速率法测定ALT，快速准确，避免了手工操作的误差。加样品后间隔不同时间进行检测，现将结果报告如下。