腺病毒介导HBx对人淋巴细胞影响的体外实验

目的 探讨体外条件下腺病毒介导乙型肝炎病毒x基因(HBx)在正常人外周血淋巴细胞中的复制扩增及其对淋巴细胞凋亡和白细胞介素-10(IL-10)分泌的影响。 方法 淋巴细胞取自正常人外周血,分别用携带HBx的腺病毒Ad-HBx、空载腺病毒Ad-EGFP感染淋巴细胞(设为Ad-HBx组和Ad-EGFP组),未感染腺病毒的淋巴细胞作为空白对照组(Lymphocyte组)。Q-PCR检测HBx在淋巴细胞内的复制扩增。ELISA检测3组淋巴细胞IL-10的表达。流式细胞术检测3组淋巴细胞的凋亡。 结果 Q-PCR检测显示,Ad-HBx组淋巴细胞被Ad-HBx感染48 h后,细胞内HBx的表达较Ad-EGFP组和Lymphocyte组明显增高(P<0.05)。ELISA检测结果显示,Ad-HBx组淋巴细胞被Ad-HBx感染12、24、36、48 h后,IL-10的表达水平明显低于Ad-EGFP组和Lymphocyte组,差异有统计学意义(P<0.001)。流式细胞术检测结果显示,Ad-HBx组早期凋亡细胞明显多于其余2组,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论 体外环境下,HBx在正常人外周血淋巴细胞内能够完成复制扩增,明显抑制淋巴细胞IL-10的表达和促进淋巴细胞的早期凋亡。HBx对人免疫系统的调控作用可能是通过在人淋巴细胞内的基因表达、抑制抗炎性因子表达和促进早期凋亡实现的。     

Toll样受体4抑制过氧化物酶体增殖物激活受体γ加重血脂蓄积的分子机制

目的 选取高脂饮食模型大鼠和氧化低密度脂蛋白(oxLDL)暴露下巨噬细胞模型,验证在血脂蓄积过程中Toll样受体4(TLR4)和过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的具体干预机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠20只,随机分为对照组和高脂组,每组10只。测定各组大鼠总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平,采用苏木精-伊红染色检测颈动脉血管内膜中膜厚度比,采用Western blotting法检测TLR4、PPARγ蛋白表达水平。体外培养小鼠巨噬细胞RAW264.7,以oxLDL(50 mg/L)刺激巨噬细胞制备模型,且应用siRNA-TLR4沉默巨噬细胞内的TLR4因子制备TLR4沉默模型,将细胞分为空白组(A组)、oxLDL组(B组)、oxLDL+siRNA组(C组)、oxLDL+siRNA-TLR4组(D组)、oxLDL+siRNA-TLR4+PPARγ激动剂组(E组)、oxLDL+siRNA-TLR4+PPARγ抑制剂组(F组)。采用油红O染色法观察巨噬细胞内血脂蓄积情况,定量检测巨噬细胞内胆固醇含量,采用Western blotting法检测 TLR4、PPARγ蛋白表达水平。 结果 在动物模型实验中,与对照组相比,高脂组总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平、颈动脉内膜中膜厚度比、TLR4蛋白相对表达含量明显增高(P<0.01),血清高密度脂蛋白水平、PPARγ蛋白相对表达含量明显降低(P<0.01),且TLR4与PPARγ呈负相关性(r=-0.928 1,P<0.001)。在oxLDL暴露巨噬细胞实验中,与A组比较,B、C组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒、光密度值及TLR4蛋白相对表达含量明显增多(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显减少(P<0.05),且B组TLR4与PPARγ呈负相关性(r=-0.986 7,P<0.001)。与B组相比,C组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒、光密度值及TLR4、PPARγ蛋白相对表达含量未见明显改变(P>0.05)。与B组相比,D组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒及光密度值及TLR4蛋白相对表达含量明显减少(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显增多(P<0.05)。与D组相比,E组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒及光密度值明显减少(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显增多(P<0.05),TLR4蛋白相对表达含量未见明显改变(P>0.05)。与D组相比,F组巨噬细胞内胆固醇含量、油红O颗粒及光密度值明显增多(P<0.01),PPARγ蛋白相对表达含量明显减少(P<0.05),TLR4蛋白相对表达含量未见明显改变(P>0.05)。 结论 细胞内的血脂蓄积是动脉粥样硬化形成的机制之一,PPARγ可以抑制巨噬细胞血脂蓄积进而参与动脉粥样硬化调节,是巨噬细胞血脂蓄积过程的保护性因子。而TLR4作为PPARγ上游调控位点,通过抑制PPARγ的表达,加重血脂蓄积的过程,进而干预动脉粥样硬化进程。     

miR-203靶向Survivin抑制卵巢癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的 探讨miR-203靶向抑制Survivin对卵巢癌SKOV3及OVCAR3细胞增殖、迁移及侵袭的影响。 方法 构建过表达miR-203、Survivin及空白对照组的慢病毒载体,转染卵巢癌SKOV3和OVCAR3细胞,嘌呤霉素筛选后构建空白对照组、过表达miR-203组、过表达Survivin组及过表达miR-203联合Survivin组卵巢癌细胞系。Western blotting方法测定各组卵巢癌细胞中Survivin及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达;MTT和平板克隆实验检测卵巢癌细胞增殖能力的改变;Transwell实验检测对细胞迁移和侵袭能力的影响。 结果 (1) 过表达miR-203抑制Survivin的表达及EMT(P<0.05);(2) MTT、平板克隆实验及transwell实验显示,与空白对照组相比,过表达miR-203组能够抑制卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05);而过表达Survivin逆转了miR-203对卵巢癌的抑制作用(P<0.05)。 结论 miR-203通过靶向Survivin抑制EMT从而抑制卵巢癌的增殖、迁移及侵袭,miR-203/Survivin/EMT轴有望成为卵巢癌治疗的新靶点。     

miR-1/133对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞离子通道表达的影响

目的 探讨miR-1/133是否参与病毒性心肌炎心肌细胞钾离子、钙离子通道基因表达的调节。 方法 建立Balb/c小鼠急性病毒性心肌炎模型。将小鼠分为对照组、心肌炎组、心肌炎+miR-1/133mimics组、心肌炎+miR-1/133 NC组,每组10只。采用苏木精-伊红染色法观察心肌形态学改变;采用 qRT-PCR法检测心肌中miR-1、miR-133及Kcnd2、Irx5、Kcnj2和α1c的相对表达量; 采用Western blotting法检测心肌中蛋白Kv4.2、Kir2.1、Cav1.2的相对表达量。 结果 苏木精-伊红染色显示对照组心肌细胞排列整齐,间质无炎性细胞浸润;心肌炎组与心肌炎+miR-1/133 NC组心肌细胞水肿、排列紊乱,炎性细胞浸润间质;心肌炎+miR-1/133mimics组心肌细胞排列较整齐,无细胞水肿,间质少量炎性细胞浸润。与对照组相比,心肌炎组与心肌炎+miR-1/133 NC组心肌miR-1、miR-133及Kcnd2、Kcnj2表达下调,蛋白Kv4.2、Kir2.1的表达下调(P<0.01);Irx5、α1c及蛋白Cav1.2表达均上调(P<0.01);心肌炎+miR-1/133 mimics组较心肌炎组与心肌炎+miR-1/133 NC组相比,miR-1、miR-133及Kcnd2、Kcnj2表达上调,蛋白Kv4.2、Kir2.1表达上调(P<0.05),Irx5、α1c及蛋白Cav1.2表达均下调(P<0.01)。 结论 miR-1/133参与病毒性心肌炎心肌细胞钾离子和钙离子通道基因表达的调节。     

托伐普坦联合达格列净对心衰大鼠心肌纤维化的影响

目的 探讨托伐普坦(TLV)和达格列净(DAPA)对慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。 方法 将雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、TLV-L组、TLV-H组、DAPA组和TLV-H+DAPA组。除空白对照组外,其他各组大鼠均给予腹腔注射阿霉素3 mg/kg,1次/周,6周造模,心脏彩超检查射血分数<60%提示心衰大鼠造模成功,随机分组后药物干预30 d。采用苏木精-伊红染色法观察大鼠心脏组织形态学变化,采用Masson染色法检测心肌纤维化程度,并计算胶原容积分数(CVF);采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡指数;采用Western blotting法检测各组大鼠左心室心肌组织中TGF-β1、磷酸化Smad2(p-Smad2)及磷酸化Smad3(p-Smad3)的蛋白水平。 结果 与空白对照组相比,模型对照组心肌纤维排列紊乱,较多炎性细胞浸润,心肌纤维化显著,细胞凋亡增加,TGF-β1蛋白表达显著升高,p-Smad2和p-Smad3蛋白水平下降(P<0.05);与模型对照组相比,TLV组、DAPA组及TLV-H+DAPA组心肌纤维化程度明显降低,心肌凋亡指数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),TGF-β1蛋白表达明显降低;p-Smad2和p-Smad3蛋白水平明显升高(P<0.05)。 结论 TLV与DAPA单用及联合应用均可通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路发挥抑制心肌纤维化的作用,且联合用药的效果优于单独用药。     

血糖波动与持续性高血糖对糖尿病大鼠肾脏病理改变及IV型胶原表达的影响

目的: 观察血糖波动与持续性高血糖对糖尿病大鼠肾脏病理改变及 IV型胶原(Col IV)表达的影响。方法: 将60只SD雄性大鼠随机分为正常组和模型组,正常组大鼠喂以普通饲料,模型组大鼠高糖高脂饲料喂养6周后予以小剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)皮下注射制造糖尿病大鼠模型。再将糖尿病组大鼠随机分为持续性高血糖组和血糖波动组,其中血糖波动组给予每日两次皮下注射胰岛素人为诱导血糖波动。3个月后将大鼠剖腹取出肾,行HE染色、PAS染色、Col IV免疫组织化学及Western印迹检测。结果: 与正常组大鼠比较,模型组大鼠肾小球体积增大、毛细血管内皮细胞基底膜增厚、系膜基质增多、肾小球球囊腔扩张,肾小管体积增大、肾小管管腔扩张、上皮细胞基底膜增厚,肾小球通透性增强,肾脏病理形态改变明显;肾肥大指数增加、肾小球硬化指数增加、Col IV表达量明显增加(P<0.01)。与持续性高血糖组比较,血糖波动组大鼠上述指标变化更为明显(P<0.05)。结论: 糖尿病大鼠出现了肾小球基底膜增厚、系膜基质增多等病理形态的改变,血糖波动组肾小球硬化更明显, Col IV的增多可能与糖尿病肾病的严重程度有关。     

绿原酸对高脂饲料诱导的肥胖大鼠糖耐量及其曲线特征的影响

目的 观察绿原酸(chlorogenic acid,CGA)对高脂饲料诱导的肥胖(diet-induced-obesity,DIO)大鼠糖耐量及其曲线特征的作用, 为开发利用CGA早期预防和延缓糖尿病的发生提供依据.方法: 46只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机选择8只作为普通饲料组(normal control group,CON), 其余大鼠饲喂高脂饲料.4周后按标准筛选高脂诱导的肥胖大鼠24只并随机分为高脂饲料组(high fat diet group,HFD),50%(质量分数)CGA组和98%(质量分数)CGA组,每组8只,分别给予磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS),50%CGA和98%CGA灌胃8周,每周检测体质量,每4周进行一次口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT),实验期末检测空腹胰岛素及胰岛素释放,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment insulin resistance,HOMA-IR)和内脏脂肪百分比,苏木精和伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色检测胰腺组织病理变化.结果: CGA干预前,与CON组相比,HFD组OGTT第120分时(OGTT-120min)血糖值(P<0.05)和葡萄糖曲线下面积(area under curve-glucose,AUC-G)(P<0.05)均显著升高;干预4周后葡萄糖峰值时间延迟(P<0.05);干预8周 HOMA-IR指数显著升高且OGTT-0min,OGTT-30min,OGTT-60min,OGTT-120min胰岛素水平和胰岛素曲线下面积(area under curve-insulin,AUC-I)显著升高(P<0.05), 胰腺胰岛显著增生(P<0.05).与HFD组相比,干预4周末,50%CGA和98%CGA组大鼠糖耐量及其葡萄糖峰值时间均无显著变化;干预8周后,50%CGA组大鼠OGTT-60min,OGTT-120min血糖值,HOMA-IR指数,OGTT-0min,OGTT-30min,OGTT-120min血清胰岛素水平显著降低(P<0.05);98%CGA组大鼠OGTT-60min,OGTT-120min血糖值,HOMA-IR指数,OGTT-0min,OGTT-120min血清胰岛素水平显著降低(P<0.05);50%和98%CGA组大鼠的葡萄糖峰值时间均显著前移(P<0.05), 胰岛异常增生改善(P<0.05).结论: OGTT葡萄糖峰值时间延迟是DIO大鼠糖耐量异常表现之一,50%和98%CGA均可改善DIO大鼠的糖耐量和葡萄糖峰值时间延迟.     

cyclin E基因siRNA抑制K562细胞生长的研究

目的 应用RNAi技术,研究cyclinE基因小干扰RNA(siRNA)对K562细胞生长的抑制作用。方法 针对cyclinEmRNA设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,以LipofectamineTM2000脂质体法转染K562细胞,分别设置为干扰组、阴性对照组以及空白对照组,转染48h后进行细胞计数、RT-PCR及通过PI染色进行流式细胞仪检测,观察其干扰效果。结果 干扰组与阴性对照组和空白对照组相比,活细胞计数减少约80%,G₁期细胞百分比增高30%,细胞基本停止增殖。干扰组cyclinEmRNA表达明显减弱,相对阴性对照组及空白对照组,干扰组mRNA表达下降70%。阴性对照组与空白对照组无显著性差异。结论 应用RNAi技术可以有效地干扰cyclinE基因的表达,并进一步抑制细胞的生长,但对于干扰的长期有效性尚无实验结论,需通过长效表达载体实验验证。     

陈皮、半夏对动脉粥样硬化小鼠PI3K-Akt通路、SOD、MDA、SA-β-gal水平的影响

目的 探讨陈皮、半夏治疗动脉粥样硬化的机制。方法 将40只Klotho 敲除小鼠采用数字表法随机分为模型组、治疗组（高、中、低剂量组,每组10只）。对照组C57BL/6小鼠10只。通过HE染色观察小鼠颈动脉病理改变;通过血浆分光光度法检测丙二醛（malonaldehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、β-半乳糖苷酶（senescence-associated beta-galactosidase,SA-β-gal）;通过免疫组化法观察PI3K与p-Akt表达。结果 与模型组比较,陈皮、半夏组动脉内膜呈轻度增生改变;SOD浓度与对照组比较上升,差异有统计学意义（P<0.01）,MDA和SA-β-gal则显著降低（P<0.01）;大剂量和中剂量治疗组中PI3K下降水平与模型组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;陈皮、半夏各治疗组p-Akt表达均显著低于模型组,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 陈皮、半夏可能通过PI3K和p-Akt通路而调控SOD、MDA及SA-β-gal水平,达到延缓衰老、治疗动脉粥样硬化的作用。     

白藜芦醇调控SIRT1改善高脂小鼠肾损伤的作用及机制研究

目的: 探究白藜芦醇(RSV)对高脂小鼠肾功能的影响及其调控SIRT1抑制氧化应激反应改善小鼠肾损伤的作用机制。方法: 选取30只6周龄C57BL/6J小鼠构建高脂小鼠模型,将小鼠分为对照组(CTRL组)、高脂组(HL组)、白藜芦醇组(RSV组)三组,各10只。喂养18周后取血检测小鼠血脂、肌酐(CRE)水平;采用HE、免疫组化染色观察小鼠肾脏病理变化;采用Western blot和RT-PCR法观察小鼠肾脏SIRT1、氧化应激相关蛋白的变化。结果: RSV组小鼠血TG、TC、LDL-C及肌酐(CRE)水平均降低,肾组织中系膜增生和纤维化程度减少,纤维粘连蛋白(FN) 的表达增加,小鼠肾脏中SIRT1及抗氧化酶GPx4、SOD2表达增加。结论: RSV通过调控SIRT1通路提高抗氧化酶的表达,抑制肾组织氧化应激反应改善了高脂小鼠诱导的肾功能损伤。     

胰岛素抵抗动脉粥样硬化小型猪模型的研究

目的观察高脂诱导对藏猪糖脂代谢和粥样斑块形成的影响,探讨藏猪胰岛素抵抗动脉粥样硬化模型的病症特点。方法取4~5月龄藏猪随机分为正常对照组4只饲喂普通饲料、AS模型组共8只饲喂高脂饲料,连续造模24周。检测造模前、造模后4、8、12、16、20、24周的空腹血糖、果糖胺、血脂、血清胰岛素含量测定和糖耐量试验,并计算动脉硬化指数(AI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和胰岛素敏感指数(HOMA-IS)。造模后24周,测定麻醉状态下动脉血压和左心室功能指标,并取主动脉进行大体观察和HE染色及油红"O"染色。结果与正常对照组比,AS模型组从第16周开始空腹血糖显著升高(P0.05,P0.01),果糖胺从第4周起即发生显著升高(P0.01)血脂水平亦在造模第4~24周时升高显著(P0.01),AS模型组藏猪在第4~24周期间AI显著上升(P0.05,P0.01),造模第16~24周HOMA-IR亦显著升高(P0.05,P0.01),HOMA-IS则显著降低(P0.05)。第24周时,AS模型组MBP和SBP显著升高(P0.05,P0.01),LVEDP、+dp/dt max、-dp/dt max较正常组均发生显著性改变(P0.05,P0.01),病理学观察显示模型组出现明显的脂质沉积和粥样硬化形成。结论藏猪高脂饲料诱导后能形成明显的动脉粥样硬化,并伴有高血压、高血脂、糖耐量异常等胰岛素抵抗症状,是研究的胰岛素抵抗动脉粥样硬化的理想的实验动物。     

海南省长期住院精神病患者血糖血脂代谢异常分析

目的 分析长期住院精神病患者血糖血脂代谢异常发生率在精神病人群中的分布情况,为临床治疗患者提供依据。方法 收集2017—2018年海南省安宁医院的住院3个月以上精神病患者临床和血糖、血脂检测资料,并进行统计学分析。结果 共收集4 172例病程1年,住院3个月以上精神病患者临床和血糖、血脂检测完整资料,血糖、血脂及合并血糖血脂异常率分别为12.94%、53.74%、9.11%,且三者均随着年龄增加呈现递增趋势（P<0.01）;不同性别间,血糖以及合并血糖、血脂异常率差异无统计学意义（P>0.05）,血脂异常率男性高于女性（P<0.01）;住院3~<6个月和≥6个月精神病患者,三项指标异常率差异均有统计学意义（P<0.01）;器质性精神障碍和抑郁症患者血糖异常发生率较高,分别为21.68%和16.96%,广泛性焦虑症患者血脂异常发生率最高,为63.45%,精神发育迟滞患者糖脂异常发生率最低,分别为0.00%、26.92%。结论 临床医生在治疗精神疾患时应考虑性别、年龄以及诊断等因素,合理使用抗精神病类药物,同时限制高脂肪、能量饮食,指导或督促病人增加活动也应成为今后精神患者治疗工作的重要部分。     

1型糖尿病儿童血糖控制及生活质量状况调查

目的 调查1型糖尿病(T1DM)儿童血糖控制与生活质量的状况。方法 随机抽取98例1型糖尿病患儿展开调查,采集患儿血液标本,并使用生存质量测定量表对患儿血糖控制情况与生活质量状况进行评价分析。结果 98例患儿糖化血红蛋白水平为(7.63±1.97)%;T1DM儿童血糖控制情况与年龄、病程、糖尿病饮食、血糖自我监测、糖尿病教育、居住地、经济水平有关;低龄、病程较短、饮食管理、频繁监测血糖水平、接受糖尿病教育均为T1DM儿童良好控制血糖水平的保护因素;血糖控制良好组生活质量量表生理功能、心理社会功能评分与总分显著高于血糖控制不佳组。结论 T1DM儿童血糖控制水平与生活质量有待提高,可通过加强饮食管理、血糖监测与疾病教育等途径提高血糖控制水平进而提高生活质量。     

褪黑素对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制

目的 观察褪黑素(MLT)对实验性动脉粥样硬化兔心脏的保护作用及其可能的分子机制.方法 普通级纯种新西兰大耳白兔随机分为3组,正常组:饲喂普通饲料;模型组:饲喂高脂饲料(普通饲料+1％胆固醇+5％猪油);褪黑素组:饲喂高脂饲料的同时MLT灌胃10 mg/(kg·d)治疗.纯种大耳白兔适应性饲养一周后,采用高脂饮食诱导造模,同时给予褪黑素药物治疗.于12周后处死进行采血,检测血清中血脂等指标.取动脉进行油红染色,检测脂质斑块形成情况;取心脏组织,包埋后HE染色观察心肌组织的形态变化;Masson染色检测心肌组织中胶原纤维的变化;Western blot法检测p38/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关蛋白及肌球蛋白轻链激酶(MLCK)、肌球蛋白轻链(MLC)、肌球蛋白轻链磷酸化(p-MLC)的表达水平.结果 动脉油红染色结果显示模型组出现大量脂质斑块,证明造模成功.血脂结果显示模型组总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)浓度明显上升,而褪黑素组相对模型组下降.油红染色HE染色结果显示MLT能改善心肌组织形态的紊乱情况,Masson染色结果显示MLT能缓解心肌组织胶原纤维的堆积.Western blot结果显示MLT能下调p38的磷酸化水平以及MLCK蛋白的表达水平,以及下调MLC的磷酸化表达水平(P＜0.05).结论 MLT可能通过降低MAPK通路中相关蛋白p38的磷酸化调控MLCK蛋白的表达,从而降低MLC的磷酸化水平对动脉粥样硬化兔心肌组织起到保护作用.     

L－精氨酸抗家兔动脉粥样硬化内皮损伤

将新西兰兔分成三组：正常组、高胆固醇组、高胆固醇加Ｌ－精氨酸组。分别喂养４周和８周。扫描电镜下观察到：高胆固醇组与高胆固醇加Ｌ－精氨酸组相比，内皮细胞排列不规则，细胞间隙银染较粗，内膜损伤和增生明显。说明补充Ｌ－精氨酸可减轻内膜损伤。     

虎杖苷对ApoE-/-小鼠肝脏miR-214表达水平及肝功能的影响

目的研究虎杖苷（PD）对ApoE-/-小鼠肝脏miR-214及肝功能的影响。方法采用高脂饲料喂养雄性ApoE-/-小鼠,建立小鼠 AS模型。将ApoE-/-小鼠随机分为4组（n=10）,即模型组（Model）、辛伐他汀组（Simvastatin）、PD低剂量组（PDL）、PD高剂量组 （PDH）,另设10只同龄C57BL/6J小鼠为正常对照组。连续给药12周后取血,检测小鼠血糖、血脂、谷草转氨酶（AST）、谷丙转 氨酶（ALT）、肝脏T-SOD及MDA等指标,HE染色观察肝组织病理切片,实时荧光定量PCR检测miR-214水平。结果模型组小 鼠血糖和血清中TC、TG、LDL-C、ALT和AST,以及肝脏中MDA较正常对照组显著增高（P<0.01）,血清中HDL-C和肝脏中 T-SOD、miR-214则显著降低（P<0.01）,肝切片可见细胞内充满大小不一脂滴,大部分肝细胞呈现脂肪变性;与模型组相比,PD 高剂量组能显著降低小鼠空腹血糖、血清TC、TG、LDL-C、AST、ALT以及肝脏中的MDA（P<0.05）,并且能够显著升高血清 HDL-C和肝脏miR-214及T-SOD（P<0.05）;PD高、低剂量组小鼠肝细胞脂肪变性与模型组相比均有所减轻。结论PD能降低 AS小鼠血糖、血脂,并保护肝功能,其机制可能主要与PD升高肝脏miR-214水平,调节T-SOD与MDA等氧化应激指标有关。     

高脂饲料中添加丙硫氧嘧啶对大鼠血脂、体质量及体脂的影响

目的 研究添加丙硫氧嘧啶对高脂饲料诱发的高脂血症模型大鼠的血脂、体质量、体脂含量及脂肪细胞大小的影响,探讨含有丙硫氧嘧啶的高脂饲料诱发的高脂血症动物模型的适用性。方法 SD大鼠采用数字表法随机分为4组,分别为正常饲料组、正常饲料+丙硫氧嘧啶组、高脂饲料组、高脂饲料+丙硫氧嘧啶组,分别给予相应的饲料,灌胃给予丙硫氧嘧啶50 mg·kg^-1·d^-1,共4周,期间记录动物的采食量、体质量、体长,检测血脂、转氨酶、甲状腺激素浓度,计算Lee's指数、肝系数、睾周脂肪和肾周脂肪系数,并进行肝脏油红O染色,脂肪组织HE染色,Image J测量脂肪细胞大小。结果 添加丙硫氧嘧啶可显著升高高脂饲料诱发的动物血浆总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇（low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C）浓度,肝系数升高,肝脏脂质沉积,造模速度快、效果好,但是随着给予丙硫氧嘧啶时间的延长,动物采食量迅速降低,继之动物体质量、睾周脂肪质量、肾周脂肪质量、脂肪细胞面积及Lee's指数显著降低,同时伴有动物毛色发暗、缺乏光泽、活动减少及对刺激反应下降等。结论 添加丙硫氧嘧啶为制作高胆固醇血症及脂肪肝模型的有效方法,但是在血浆总胆固醇和LDL-C浓度升高、肝脏脂肪沉积的同时,动物体质量明显下降,体脂减少,脂肪细胞面积减小的特点与临床常见的饮食相关的高血脂特征不符,并且丙硫氧嘧啶对多种脂代谢酶有影响,进行降脂药物机制研究时可能会影响对药物作用靶点的分析,因此进行降胆固醇药物药效学研究可适当选用,进行药物机制研究时需根据研究目的慎重选用。     

明月草总黄酮对2型糖尿病模型小鼠降血糖作用研究

目的 分析明月草总黄酮对2型糖尿病模型小鼠降血糖的作用。方法 采用腹腔灌注链尿佐菌素(STZ)配合高脂饲料复制2型糖尿病小鼠模型,并将其分成对照组、模型组、阳性组以及明月草总黄酮低、中、高剂量组。考察明月草总黄酮多模型小鼠体质量、空腹血糖、糖耐量及血清总胆固醇(TC)、血清甘油三脂(TG)及游离脂肪酸(NEFA)等血脂指标的影响。结果 给药2和4 周,明月草总黄酮中、高剂量组小鼠体质量、空腹血糖改善情况均优于低剂量组,且与低剂量组比较差异有统计学意义,中、高剂量组之间比较差异无统计学意义。各组血糖均于葡萄糖溶液灌胃后0.5 h达峰值,之后逐渐下降。灌胃后1.0 h,除对照组血糖外,其余各组血糖下降幅度大小顺序依次是:阳性组>高剂量组>中剂量组>低剂量组>模型组。给药4周时,明月草总黄酮低、中、高剂量组TC、TG及NEFA比较差异无统计学意义,但均低于模型组。结论 明月草总黄酮可较好地改善2型糖尿病模型小鼠空腹血糖及脂质代谢异常。     

ET、CK-18 M30在大鼠非酒精性脂肪性肝炎组织中的表达及意义

目的 探讨血清内毒素(ET)和细胞角蛋白-18 M30(CK-18 M30))在大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的表达及意义。方法 20只雄性SD大鼠,完全随机配对将6只分配到观测组,14只按体重配成区组并随机分为对照组和实验组。对照组饲以基础饲料,实验组与观测组饲以高脂饲料。每隔4周从观测组随机选取2只大鼠,观察肝组织病理学改变是否达到NASH,若达到,处死对照组和实验组全部大鼠。测定血清中谷丙转氨酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ谷氨酰转移酶(GGT)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、总胆固醇(TC)、CK-18 M30、ET,肝组织进行石蜡包埋切片HE染色。结果 12周末大鼠病理评分、肝指数、血清ALT、TG、LDL、GGT、CK-18(M30)、ET水平均高于对照组(P＜0.05),体重低于对照组(P＜0.05),AST、GGT水平高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05);spearman相关性分析显示ALT与病理评分无相关性(P＞0.05);血清TG、LDL、TC、CK-18 M30及ET与肝脏病理评分呈正相关(P＜0.05)。CK-18 M30＋ET的AUC面积为1.000。CK-18 M30+ET的敏感度100%、特异度100%。结论 血清ET与CK-18 M30水平联合检测有望成为NASH新的无创检测方式。