干细胞的研究进展

在美国《Ｓｃｉｅｎｃｅ》杂志评选出的１９９９年度１０大科学进展中，干细胞（ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ， ＳＣ）的研究工作格外令人瞩目。这不仅因为在过去短短的一年里，科学家们在干细胞的功能研究方面发表了１０余篇具有里程碑意义的论文，更重要的是，这些突破性进展使得生物学家和医学家们更进一步地认识到：ＳＣ作为一类既有自我更新能力、又有多分化潜能的细胞，具有非常重要的理论研究意义和临床应用价值［１］。这些成果一方面揭示了许多有关细胞生长和发育的基础理论难题；另一方面，可望将其用于创伤修复、神经再生和抗衰老等临床医…     

干细胞标志物在免疫细胞化学中应用的研究现状

干细胞以其自我更新和分化为成熟组织细胞的能力成为当前科研与临床应用的热点,但干细胞的鉴定目前尚无公认一致的方法,随着干细胞相关的分子标记物的发现以及功能的明晰,免疫细胞化学染色法在各种干细胞的鉴定中以其简便、快速、准确的优势发挥越来越重要的作用。本文就应用免疫细胞化学鉴定干细胞的主要分子标记进行综述。     

干细胞基础研究的新进展

近5年来,在世界范围出现干细胞的研究热潮,有关干细胞的论文大量发表,风起云涌。然而,有部分的实验结论缺乏充足的证据,而引起质疑。例如干细胞“横向分化”的假设错误地认为干细胞可以跨胚层、跨系别地任意地变身,脂肪变肝脏,肌肉变神经等等。成体干细胞的存在是21世纪一个伟大的科学发现。越来越多的实验证明成体组织中还存在胚胎发育过程遗留下的各个胚层的干细胞和各类组织干细胞。全身各类组织中的成体干细胞含有除了生殖干细胞外的各种干细胞。至今,只有在生殖组织中才能发现生殖干细胞,因而生殖组织以外的成体干细胞又称为亚全能干细胞。成体干细胞包括造血和非造血的干细胞,非造血的干细胞又包括了各种非造血组织的干细胞,例如神经干细胞和间充质干细胞等。间充质干细胞是全身结缔组织(骨、软骨、肌肉、脂肪、纤维、血管等)的干细胞,它是创伤、烧伤、缺血坏死、骨髓损伤等修复过程中所必不可少的,有巨大的临床应用前景。随着生命科学的全面发展,干细胞领域中的认识误区将逐步得到澄清,干细胞科学也必将健康地发展起来。     

干细胞及其诱导技术在培育成体细胞、筛选药物和移植实验中的作用

利用干细胞及其诱导技术在实验室内培育出的成体细胞,可以为干细胞的基础研究及未来开展的针对人类疾病的临床移植试验创造条件。此外,干细胞及其诱导技术在药物筛选中也能发挥积极的作用。     

多潜能干细胞的研究进展

多潜能干细胞是一类具有向外胚层、中胚层以及内胚层细胞分化的干细胞,从胚胎发育早期分离获得的胚胎干细胞、胚胎生殖细胞到成体组织骨髓、睾丸中获得的干细胞,都具有三胚层分化能力.近年来,研究证实,可以将成体分化细胞经基因操作逆转为多能干细胞.就各种来源多潜能干细胞的特点予以综述,并对细胞间可能存在的关系加以探讨.     

成体干细胞龛的研究进展

成体正常干细胞具有自我更新与繁衍级别分化后代的双重功能。两种能力的动态平衡维系着组织正常命运。否则,分化过度、削弱自我更新,可致干细胞枯竭;而自我更新过度,则阻碍级别分化,干细胞由之扩增,甚至向肿瘤转化。防止更新与分化的过度,依赖于干细胞遗传程序与龛     

干细胞技术及其在口腔医学中的研究及应用前景

阐述了干细胞技术相关背景及其在口腔医学领域的研究进展，着重介绍了牙髓干细胞，骨髓基质干细胞和胚胎干细胞在口腔医学中诸如修复颅面缺损，重建牙齿缺损以及重建腮腺等其它组织的最新研究，干细胞技术为口腔医学提供了新的选择和广泛的应用前景，值得进一步深入探讨。     

胃癌干细胞表面标记物的研究与最新进展

背景:最近人们研究发现,肿瘤的复发与肿瘤干细胞密切相关。肿瘤干细胞理论为研究胃癌的发病机制以及诊治开辟了新的途径,确定的表型有利于锁定胃癌干细胞,这有助于探讨胃癌干细胞在自我更新和分化过程中的作用,并为治疗胃癌提供新思路,但其表型仍存在争议。目的:综述胃癌干细胞表面标志物的研究进展。方法:由第一作者分别以"Gastric Cancer Stem Cells"为英文关键词检索PubM ed英文数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed)中1965年1月至2015年10月的文献,共保留68篇文献进行综述。结果与结论:通过分析整理,传统上的肿瘤干细胞表型不适合于标记胃癌干细胞。研究发现CD90在胃癌原发性肿瘤中有表达,分离后经无血清肿瘤球培养法培养可获得肿瘤球。CD24的表达有助于提高胃癌细胞的黏附、侵袭、迁移能力。此外研究证实CD44及CD54共表达的细胞会大量出现在胃癌复发早期患者的体内而不是晚期,表达CD44及CD54的肿瘤细胞很可能是导致胃癌发生以及复发的重要原因。综上所述,CD44^+CD24^+CD90^+CD54^+很可能是胃癌干细胞的表型。     

干细胞研究进展

干细胞包括胚胎干细胞与成体干细胞。介绍了近年来诱导胚胎干细胞向多种或某一种组织细胞分化的实验报道 ,并对成体干细胞“可塑性”分化的几个问题进行了讨论     

干细胞研究进展

干细胞研究已成为生命科学中的热点，本综述了近年来的有关研究，从以下五个方面介绍了干细胞研究取得的重要进展：(1)干细胞的基本概念，包括定义和分类；(2)小鼠胚胎干细胞、人胚胎干细胞的分离、培养及其特征；(3)骨髓干细胞的表面标志特征等；(4)干细胞向特异组织细胞(如心肌细胞、肝细胞、神经细胞等)分化诱导研究；(5)干细胞在治疗心脏疾病、肝脏疾病、神经系统疾病、糖尿病、角膜疾病等方面取得的研究成果。     

miR-486对胶质瘤干细胞的抑制作用

背景：既往研究发现,miR-486在胶质瘤干细胞(CD133⁺)中的表达水平显著低于其在胶质瘤非干细胞(CD133^-)中的表达水平,但是miR-486对CD133⁺细胞的影响尚不明确。 目的：探索miR-486对CD133⁺细胞的作用。 方法：利用流式细胞分选将U87胶质瘤细胞中分为CD133⁺和CD133^-细胞。通过脂质体转染构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞。 结果与结论：流式细胞分选和纯化获得高比率的CD133⁺胶质瘤干细胞。实时反转录PCR检测发现miR-486在CD133⁺胶质瘤干细胞的表达水平比CD133^-胶质瘤细胞明显下降。脂质体转染成功构建miR-486过表达的胶质瘤干细胞,体外实验发现miR-486高表达抑制胶质瘤干细胞的增殖,将其阻滞于G₁/S期,并促进凋亡。提示miR-486对胶质瘤干细胞具有抑制作用。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

当归多糖对人白血病干细胞体外增殖与体内移植模型的影响

目的 探讨当归多糖(ASP)对人白血病干细胞(LSCs)增殖及体内移植的影响.方法 1.ASP 对CD34+CD38-人LSCs体外增殖的影响.免疫磁性法分选正常人和髓系白血病患者骨髓中CD34+CD38-细胞,分为正常CD34+CD38-对照组、CD34+CD38-LSCs对照组、正常CD34+CD38-ASP组和C...     

肝癌干细胞分离及其细胞生物学特性

背景：正常干细胞和肿瘤干细胞在基因表达和依赖的细胞信号通路上应该存在不同,如何发现能选择性杀伤肿瘤干细胞的治疗手段是一个仍然需要大量研究的课题。 目的：分离人肝癌细胞系肿瘤干细胞MHCC97,分析其细胞生物学特性。 方法：采用流式细胞技术在人高转移肝癌细胞系MHCC97中筛选肿瘤干细胞,分离正常人肝脏干细胞CD133^-CD34^- MHCC97和人肝癌细胞系肿瘤干细胞CD133⁺CD34⁺ MHCC97,分别检测其表型、生长曲线、细胞周期和多系分化能力。 结果与结论：人肝癌细胞系CD133⁺CD34⁺ MHCC97肿瘤干细胞的表型为CD133⁺CD34⁺ ,人肝癌细胞系CD133⁺CD34⁺ MHCC97具有与CD133^-CD34^- MHCC97相似的细胞曲线和生长周期,可以向上皮和内皮细胞分化,并表达相应特异性的分子标志。提示人肝癌细胞系中CD133⁺CD34⁺MHCC97细胞具有肿瘤干细胞的特性,可以向内皮和上皮细胞分化,同时具有肿瘤干细胞的生物学特性,是肿瘤复发转移的根源,也是临床治疗的靶点。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

miR-34a通过Notch1信号通路对肺癌干细胞的抑制

BACKGROUND:It has been proved that miR-34a plays an inhibitory role in the growth of lung cancer stem cells, but the underlying mechanism remains unclear. OBJECTIVE:To explore the inhibitory effect of miR-34a on lung cancer stem cells and the underlying mechanism. METHODS:The CD133⁺ lung cancer stem cells were separated from lung cancer A549 cell lines using magnetic activated cell sorting method. And miR-34a-overexpressing CD133⁺ lung cancer stem cells were established by liposome transfection technology. Besides, the targeted relationship between miR-34a and Notch1 was analyzed by the dual-luciferase reporter. Afterwards, Notch1 silencing was performed by gene knockout, and its effect on lung cancer stem cells was determined. RESULTS AND CONCLUSION:After sorted and detected by immunomagetic selection and flow cytometry assay respectively, a high rate of CD133⁺ lung cancer stem cell was obtained. And qRT-PCR detected that the expression level of miR-34a in CD133⁺ lung cancer stem cells was significantly lower than that in CD133^- lung cancer stem cells. Moreover, miR-34a-overexpressing CD133⁺ lung cancer stem cells were successfully constructed and miR-34a significantly inhibited proliferation and induced apoptosis of lung cancer stem cells. Dual-luciferase reporter assay indicated that Notch1 mRNA was a target of miR-34a. In addition, Notch1 silencing obviously inhibited proliferation and induced apoptosis of lung cancer stem cells. These findings suggest that miR-34a can inhibite lung cancer stem cells via the Notch1 signaling pathway.     

THE PERIPHERAL BLOOD LEUKOCYTE PHENOTYPE IN PATIENTS WITH BREAST CANCER: EFFECT OF DOXORUBICIN/PACLITAXEL COMBINATION CHEMOTHERAPY

Presence of functional immune system is critical for any attempt aimed at improving survival of breast cancer patients by strategies based on immune system manipulation. We evaluated by flow cytometry the phenotype of peripheral blood leukocyte of 43 breast cancer patients. In 11 patients, the phenotype was evaluated before and during the chemotherapy by combination of doxorubicin and paclitaxel (AT). Compared with controls breast cancer patients had significantly higher relative and absolute numbers of CD3^-HLADR⁺, CD3^-CD69⁺ and CD14⁺CD16^-, and significantly lower percentages of CD3^- and CD8^-CD28⁺ cells. After one cycle of AT, the absolute numbers of CD3⁺, CD3^-CD4^-, CD3⁺CD8⁺ and CD8^-CD28⁺ cells increased significantly. Present data show a presence of T-cell activation in breast cancer patients. Administration of AT may lead to an increase in functional T-cells in peripheral blood, indicating a potential for combining chemotherapy with immunotherapy in the treatment of breast cancer patients.     

帕金森病患者外周血中骨髓来源抑制性细胞的检测及临床意义

目的:检测帕金森病患者外周血中2群骨髓来源抑制性细胞及相关临床意义。方法:选择2016年1月~2017年3月于我院收治并确诊为帕金森病的患者80人和健康志愿者20人为研究对象。按照HoehnYahr分期法将80名患者进行分期,其中Ⅰ级22人,Ⅱ级24人,Ⅲ级20人, Ⅳ级14人,Ⅴ级0人。分别收集帕金森病患者和健康志愿者的外周血各5 mL,分离获得单个核细胞,采用流式细胞术检测外周血中CD14~+CD11b~+和CD14~-CD11b~+细胞的水平,磁珠分选2群细胞,通过q PCR检测2群细胞中免疫抑制相关因子精氨酸酶1(ARG1)、白细胞介素10(IL~-10)和环氧合酶2(COX-2)的mRNA水平,Western blot法和ELISA法检测2群细胞表面膜蛋白CD14和CD11b,以及ARG1、IL~-10和COX~-2蛋白表达水平。结果:帕金森病患者外周血中CD14~+CD11b~+细胞比例与正常人相比无明显变化,而CD14~-CD11b~+细胞比例显著增加(P0.05);不同分期的帕金森病患者外周血中CD14~-CD11b~+细胞比例与Hoehn~-Yahr分期呈正相关,且CD14~-CD11b~+和CD14~+CD11b~+细胞共同高表达IL~-10和COX~-2,仅CD14~-CD11b~+细胞中高表达ARG1,与CD14~+CD11b~+细胞和正常人的2群细胞比较具有显著差异(P0.05)。结论:帕金森病患者外周血中CD14~-CD11b~+细胞和ARG1的高水平表达可以作为帕金森病发病和分期的参考依据。免疫抑制在帕金森病的发生和发展中具有重要的意义。     

骨髓基质细胞联合细胞因子对脐血单个核细胞表面抗原表达的影响

背景：课题组已建立胎儿骨髓基质细胞联合细胞因子的造血细胞体外培养体系,该培养体系能否有效扩增各个发育阶段的造血细胞有待验证。 目的：观察骨髓基质细胞联合细胞因子培养体系对脐血单个核细胞表面抗原CD133、CD34表达的影响。 方法：将从脐血标本中分离出来的单个核细胞接种于无血清培养体系,实验分为3组：①F组：干细胞因子+Flt3配体+促血小板生成素+单个核细胞。②S组：基质细胞+单个核细胞。③SF组：基质细胞+干细胞因子+Flt3配体+促血小板生成素+单个核细胞。在第0,6,10,14天检测有核细胞总数、CD133⁺、CD34⁺、CD133⁺CD34⁺细胞数以及集落形成单位数。 结果与结论：SF组有核细胞总数在各个检测时间点均比其他两组高;除了第14天外,第6、10天两个时间点SF组中CD133⁺、CD34⁺、CD133⁺CD34⁺细胞及集落形成单位数均高于其他组;含骨髓基质细胞的S组和SF组中CD133⁺细胞/有核细胞、CD34⁺细胞/有核细胞、CD133⁺CD34⁺细胞/有核细胞的比例保持在较高的水平。结果说明骨髓基质细胞联合细胞因子能有效的扩增脐血单个核细胞及其中的CD133⁺、CD34⁺、CD133⁺CD34⁺细胞,基质细胞对维持造血干细胞的原始性具有重要的作用。     

CD7、CD56共表达对急性髓系白血病侵袭性的影响

目的:探讨CD7和CD56共表达免疫表型对急性髓系白血病（acute myelocytic leukemia,AML）侵袭性的影响。方法:采用多色流式细胞术检测AML患者免疫表型,对6例CD7⁺CD56⁺AML患者和6例CD7^-CD56^-AML患者进行临床资料比较和无病生存（disease-free survival,DFS）率随访。结果:CD7⁺CD56⁺AML在M₀+M₁分型中的分布比例、外周血血红蛋白、骨髓原始细胞比例、中枢系统浸润率均高于CD7^-CD56^-AML,差异具有显著统计学意义（P<0.01或P<0.05）;但平均无病生存期低于CD7^-CD56^-AML,差异具有显著统计学意义（P<0.01）。结论:AML中检出CD7、CD56的共表达的免疫表型意味着预后较差,需加强巩固治疗和中枢系统微小残留病灶监测。     

miR-125b通过下调HAX-1的表达提高CD133~+ SW480细胞对顺铂的敏感性

目的:探讨miR-125b在CD133~+结直肠癌细胞中发挥的作用并研究其是否和顺铂的体外治疗有关。方法:用RT-qPCR方法检测miR-125b在常规SW480肿瘤细胞及CD133~+ SW480肿瘤细胞中的表达水平。流式细胞术检测miR-125b和顺铂对SW480细胞系中CD133~+ 细胞比例的影响。MTT法检测miR-125b对顺铂杀伤CD133~+ SW480细胞能力的影响。利用生物信息学及Western blot方法验证miR-125b是否调节CD133~+ SW480细胞中HAX-1的表达。运用JC-1染色、Annexin V染色及Western blot方法研究miR-125b影响顺铂疗效的信号通路的效应。结果:CD133~+ SW480细胞中的miR-125b表达水平显著低于正常结直肠上皮细胞系FHC和常规SW480肿瘤细胞。顺铂体外单独治疗能提高SW480细胞系中CD133~+细胞的比例,然而联用miR-125b模拟物后CD133~+ SW480细胞的比例显著下降。MTT实验结果表明miR-125b可显著增强顺铂对CD133~+ SW480细胞的杀伤活性。Western blot实验表明miR-125b的靶基因可能为HAX-1。miR-125b联合顺铂可引起CD133~+ SW480细胞线粒体膜电位的丧失并诱导线粒体内细胞色素C的释放,进而引起细胞凋亡。转染HAX-1表达载体后miR-125b联合顺铂对CD133~+ SW480细胞的凋亡诱导效应显著降低。结论:miR-125b通过下调HAX-1的表达提高CD133~+结直肠癌细胞对顺铂的敏感性。