CD4+CD25+调节性T细胞研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞是调节性T细胞的亚群之一,主要来源于胸腺,具有多种独特的特征,包括可识别自身抗原肽、分泌抑制性细胞因子等.其功能是通过抑制自身反应性T细胞的免疫反应、抑制传统T细胞的活化以及促进一些抑制性细胞因子的分泌等,在维持机体内环境的稳定、肿瘤免疫监测、诱导移植耐受以及自身免疫性疾病的发生中发挥重要作用.     

强直性脊柱炎患者外周血T细胞亚群及其CD3+CD69+、CD3+CD54+检测

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种主要侵犯脊柱,并累及骶髂关节和周围关节,以慢性进行性炎症为主要表现的自身免疫性疾病.     

CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组．即去除CD4^＋CD25^＋T细胞组和未去除CD4^＋CD25^＋T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN一1分泌,以及多肽特异性CD8^＋T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,所诱导的特异性CD8^＋CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8＋T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明。预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

CD4+CD25+T调节细胞的研究进展

CD4 CD25 TH细胞通过抗原特异性方式或细胞接触的方式抑制自身反应性T细胞的活化,能有效地维持自身免疫耐受,是调节自身反应性T细胞和防止自身免疫病发生的重要调节细胞。     

CD4+CD25+T细胞与移植免疫耐受

调节性T细胞是机体维持自身耐受的重要组成部分.CD4+CD25+T细胞以持续高表达CD25为特征,可通过细胞间直接接触或分泌TGF-β、IL-10来发挥抑制功能.它广泛参与自身免疫耐受、肿瘤免疫、移植免疫.现就其发育、特性、发挥功能的机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景作一综述.     

TGF-β1诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞

目的 研究TGF-β1诱导CD4 CD25 调节性T细胞分化的能力及其相关机理.方法 ①利用丝裂霉素处理的Balb/C裸鼠脾细胞(同种抗原)刺激C57BL/6小鼠T细胞,同时给予TGF-β1予以干预(按TGF-β1剂量不同设立4组:对照组,低浓度组,中浓度组和高浓度组),共同培养5天后,用流式细胞仪检测CD4 CD25 T细胞比例;同时用RT-PCR检测培养细胞中Foxp3的表达水平.②在第一部分实验基础上,通过MACS分离获取C57BL/6小鼠CD4 CD25-T细胞,用同种抗原刺激后,给予TGF-β1干预,培养5 d后分离CD4 CD25 T细胞,利用混合淋巴细胞培养系统检测其抑制淋巴细胞增殖的能力.结果 T细胞经同种抗原刺激后,在中、高浓度TGF-β1诱导下CD4 CD25 T细胞比例均明显升高,Foxp3的表达水平也相应增加,与对照组相比有显著性差异(P＜0.05).TGF-β1可直接诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 T细胞,转化后的CD4 CD25 T细胞可有效抑制淋巴细胞增殖.结论 TGF-β1可诱导CD4 CD25-T细胞转化为CD4 CD25 Treg,促进其表达Foxp3,并能够抑制淋巴细胞增殖.     

天然CD4+CD25+Treg细胞的研究进展

天然CD4+ CD25+ Treg细胞在针对自身抗原和外来抗原的免疫应答中起关键控制作用,其缺乏或功能性的缺陷将导致多重病理性的失调.本文就近年在其产生、作用机制以及与免疫耐受的诱导关系等方面的研究进展进行了综述.     

非小细胞肺癌患者外周血CD11b~+CD33~+CD15~+CD14~-及CD11b~+CD33~+CD15~-CD14~+髓系细胞的比例变化及临床意义

髓源性抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)是一群具有免疫抑制作用的细胞,其在外周血中的表达规律与非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者的外周免疫逃逸及临床分期密切相关。本研究纳入116例NSCLC患者及30例健康者,流式细胞术检测外周血PBMC中MDSC、调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的比例,研究其与临床分期、病理及免疫的相关规律。结果显示:与健康组比较,粒系髓源性抑制细胞(G-MDSC)、单核系髓源性抑制细胞(M-MDSC)在NSCLC外周血中比例升高,具有统计学意义(P<0.05);G-MDSC、病理类型与临床分期具有相关性(n=116,r=0.330,P<0.001;n=116,r=0.441,P<0.001),而M-MDSC、Treg与临床分期之间未发现相关性(n=116,r=-0.053,P=0.558;n=116,r=0.173,P=0.052);G-MDSC与Treg具有相关性(n=116,r=0.343,P<0.001)且与病理类型也呈现正相关(r=0.333,P<0.001);而M-MDSC与Treg未发现相关性(r=0.122,P=0.174),与病理类型不具有相关性(r=-0.143,P=0.109)。研究表明NSCLC患者外周血PBMC中MDSC比例升高,其中G-MDSC与NSCLC临床分期及Treg呈正相关,调控MDSC的表达有望成为防治肺癌发生及术后复发与转移的新策略[临床研究国际注册号NCT02603003]。     

检测CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8细胞对慢性乙肝患者的临床意义

乙型肝炎病毒（HBV）是一种非细胞毒性病毒,当其进入机体后常可引起一系列复杂的免疫反应。而机体产生的免疫应答的强弱又与HBV感染所致的不同临床结果密切相关。而在这一系列免疫应答中,细胞免疫应答又是决定HBV感染机体后转归的最重要因素。而不同的T细胞亚群对病毒抗原的反应状态也不同,即对临床过程的轻重及转归的影响不同。本实验应用流式细胞仪对健康人、慢性乙型肝炎患者和乙肝肝硬化患者外周血中的测定CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8细胞的含量进行了检测计算,来探讨慢性乙型肝炎患者外周血中CD4+、CD4+/CD8+、CD4+/CD8细胞特点及其与肝病病情的关系。     

喘可治延长小鼠异基因移植皮片存活时间与CD4+CD25+调节性T细胞相关性研究

目的：研究喘可治抑制小鼠异基因皮片移植排斥作用与小鼠体内CD4+CD25+ 调节性T细胞（CD4+CD25+Tr）变化的相关性。 方法： 建立小鼠同种异基因与同基因皮片移植模型，通过腹腔注射给药喘可治(CKZ)观察其对皮片移植存活时间的影响，并利用3色免疫荧光标记和流式细胞术分析受鼠外周血CD4+CD25+ Tr变化规律。 结果： 同种异基因移植CKZ组的移植皮片存活时间显著长于同种异基因移植对照组，分别为（195±23）d和（102±22）d，P＜001；在同种异基因皮片移植后，受体外周血CD4+CD25+ Tr占CD4+T细胞百分率明显升高，术后8 d达到高峰（P＜001），然后出现下降趋势，其中同种异基因移植对照组在术后13 d时已回落至正常水平，而同种异基因移植CKZ组在术后23 d时仍维持在高于移植前水平；在同基因皮片移植后，CKZ组与对照组外周血CD4+CD25+ Tr水平均无明显升高（P＞005）。 结论： 喘可治可延长小鼠同种异基因移植皮片存活时间，通过升高CD4+CD25+ Tr水平而发挥免疫抑制效应可能是其机制之一。     

CD8+ alphabeta T cells can mediate late airway responses and airway eosinophilia in rats

BACKGROUND: The function of CD8+ T-cell subsets in mediating late allergic responses is incompletely understood. OBJECTIVE: We sought to test the hypothesis that CD8+ alphabeta T cells are proinflammatory in the airways in vivo by using a well-characterized animal model and the technique of adoptive transfer. METHODS: Brown Norway rats were administered CD8 + alphabeta T cells (10 6 ) intraperitoneally purified from lymph node cells of either naive or ovalbumin (OVA)-sensitized rats and were challenged with aerosolized OVA 2 days later. Control rats were sensitized to 100 mug of OVA in Al(OH) 3 subcutaneously or sham sensitized to saline and were OVA challenged 2 weeks later. RESULTS: The OVA-sensitized and OVA-challenged group and the recipients of OVA-primed CD8+ alphabeta T cells had significant late airway responses calculated from lung resistance measured for an 8-hour period after challenge compared with the naive CD8 + alphabeta T cell-transferred group and the sham-sensitized control group. The number of eosinophils in bronchoalveolar lavage fluid increased in the OVA-sensitized group and the OVA-primed CD8+ alphabeta T-cell recipients compared with numbers in the naive CD8+ alphabeta T-cell recipients and the sham-sensitized control group. IL-4 and IL-5 cytokine mRNA expression in bronchoalveolar lavage fluid increased in the OVA-sensitized group and the OVA-primed CD8+ alphabeta T-cell recipients compared with that in the sham-sensitized group. CONCLUSION: We conclude that antigen-primed CD8 + alphabeta T cells might have a proinflammatory role in allergen-driven airway responses in the rat.     

供体凋亡淋巴细胞预输注对猪肝移植受体CD4+T、CD8+T、CD4+CD25+调节性T细胞的影响

背景：凋亡细胞能够主动调节机体的免疫功能,并能通过调节机体细胞免疫和体液免疫的途径诱导免疫耐受,但这些结果只在大鼠肝脏移植模型中证实。 目的：探讨通过⁶⁰Co γ射线体外处理后的供体淋巴细胞预输注诱导猪肝移植特异性免疫耐受的作用中,对淋巴细胞亚群的影响。 方法：建立非转流小型猪原位肝移植模型。将受体猪随机摸球法均分为2组：空白对照组,受体猪无特殊处理,行肝移植;淋巴细胞组：受体猪在肝移植前7 d经耳静脉注射⁶⁰Co γ射线处理过的5×10⁸个供体淋巴细胞。观察两组受体猪移植后的存活时间,移植后T淋巴细胞亚型CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr变化及病理。 结果与结论：移植后3 d,两组病理活检均呈急性中、重度排斥反应;移植后6 d,两组均呈急性重度排斥反应。移植后1,3,6 d CD4⁺T、CD8⁺T、CD4⁺CD25⁺Tr升降趋势,两组间差异无显著意义(P > 0.05)。提示,⁶⁰Co γ射线体外处理过的淋巴细胞预输注未能够诱导猪同种异体肝移植特异性免疫耐受,未能引起T淋巴细胞亚群变化有关。     

HIV感染后胃黏膜CD4+、CD8+T细胞数量分布及CD38表达的改变

目的 研究不同感染阶段HIV感染者胃黏膜中CD4+和CD8+T细胞数量和分布情况,及免疫细胞激活状态的改变.方法 有胃黏膜组织活检标本的HIV感染者42例,其中有明确临床分期诊断的36例,另选非HIV感染者胃黏膜组织活检标本10例为对照,利用免疫组织化学方法检测研究对象胃黏膜活检组织中CD4、CD8及CD38的表达,以图像分析系统分析其差异.结果 (1)AIDS患者胃黏膜中CD4+T细胞与对照组和无症状者相比,均显著减少(P(0.01),无症状者多数淋巴滤泡中仍有一定量CD4+T细胞,间质中多呈不均匀聚集分布,统计学与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05);(2)HIV感染者胃黏膜内CD8+T细胞普遍噬腺体和黏膜上皮,部分病例胃黏膜内CD8+T细胞局部过度增生,与对照组相比,CD8+T细胞在感染者胃黏膜中显著增多(P<0.01),无症状者与AIDS患者CD8+T细胞差异无统计学意义(P>0.05);(3)在HIV感染者胃黏膜内,CD38阳性细胞主要分布于黏膜表层至浅1/3～2/3层,与对照组相比,HIV感染者胃黏膜中CD38表达增强(P<0.01),无症状者与MDS患者CD38表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 HIV感染者胃黏膜中CD4+T细胞的数量和分布与疾病进展有密切联系,HIV对CD4+T细胞的感染和破坏导致黏膜免疫系统功能异常,可能是胃黏膜内CD8+T细胞数量增加,CD38表达增强的重要原因之一.     

小鼠CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞体外扩增

目的:本研究旨在探讨CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞体外扩增的方法。方法:采用磁珠分选小鼠CD4+T细胞,αCD3单克隆抗体包被24孔板,加入αCD28单克隆抗体、雷帕霉素、rhIL-2,培养3周后,流式细胞仪测定培养细胞中CD4+CD25+T细胞的含量,实时定量PCR检测CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达;单向混合淋巴细胞反应和增殖抑制试验测定扩增的CD4+CD25+T细胞的增殖及其抑制功能;ELISA检测培养上清中IL-10和TGF-β1的含量。结果:小鼠CD4+T细胞培养3周后,CD4+CD25+T细胞达(76.05±2.73)%,高于未加雷帕霉素组(52.17±1.36)%(P<0.001),磁珠分选的CD4+CD25+T细胞Foxp3 mRNA的表达是未加雷帕霉素组的5倍(P<0.001),增殖能力是未加雷帕霉素组的0.29倍(P<0.001),对CD4+T细胞增殖抑制能力是未加雷帕霉素组的3.6倍(P<0.001),培养上清中IL-10和TGF-β1分别是对照组的1.8倍和1.6倍(P<0.001)。结论:小鼠CD4+T细胞在含有1μg/ml的αCD28、rhIL-2 100 U/ml和终浓度为10 nmol/L雷帕霉素的培养体系中培养3周后能有效扩增CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞。     

中国HIV感染长期不进展者CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞变化研究

目的 对中国HIV感染长期不进展者(LTNP)CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平及其与疾病进展相关性进行研究,探讨CD4+CD25+Foxp3+ 调节性T细胞在LTNP保护机制中发挥的作用.方法 选取74名HIV-1感染者(LTNP、典型进展HIV组、AIDS组)及16名健康对照,应用流式细胞仪胞内染色技术在单细胞水平检测CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达水平,分析其与CD4+ T细胞数量、病毒载量、淋巴细胞活化、凋亡水平的相关性.结果 中国HIV感染LTNP CD4+CD25+Foxp3+ T细胞百分率明显低于典型进展HIV、AIDS组及健康对照组(P<0.05).HIV/AIDS患者CD4+CD25+Foxp3+ T细胞百分率与CD4+ T细胞显著负相关(r=-0.509,P<0.001),与病毒载量明显正相关(r=0.414,P<0.01),与CD4、CD8+ T细胞表面CD38、CD95表达水平明显正相关(P<0.05),与CD4、CD8+ T细胞表面HLA-DR表达无显著相关性.结论 中国HIV感染LTNP CD4+CD25+Foxp3+ 调节性T细胞百分率明显低于典型进展者,提示调节性T细胞与LTNP保护机制相关.     

肾移植后外周血CD4+及CD8+T细胞亚群计数的临床意义

背景：临床上常以流式细胞检测受者外周血CD4、CD8细胞比值来揭示与排斥或感染相关的关系。 目的：探讨肾移植后排斥或感染时外周血CD4⁺及CD8⁺T细胞(简称CD4和CD8细胞)亚群计数的变化和意义。 方法：应用流式细胞仪检测肾移植121例受者CD4、CD8细胞数进行检测。根据入院病情将患者分为移植后正常组、急性排斥组、肺部感染组进行观察。 结果与结论：移植后正常患者和急性排斥患者相比,CD4、CD8细胞数差异均无显著性意义(P > 0.05)。肾移植后肺部感染患者CD4、CD8细胞数则均显著低于移植后正常组(P < 0.001)。当感染控制、症状改善时,CD4、CD8细胞数显著升高 (P < 0.001)。说明肾移植后CD4和CD8细胞计数可以作为免疫状态的参考,其对于感染的参考价值大于排斥,动态观察分析有助于指导治疗。     

成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者CD4+CD25+T细胞的变化研究

目的：通过观察成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者CD4^＋CD25^＋T细胞的变化并与速发性1型糖尿病（T1 DM）比较，了解成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者T细胞免疫功能的变化及与1型糖尿病的异同点。方法：LADA组24例，速发性T1DM18例，对照组20例，应用流式细胞技术测定3组人选者T细胞表面分子CD4、CD8、CD25、CD4^＋CD25^＋、CD8^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋，以百分比表示各表面分子阳性T细胞占外周血淋巴细胞的比例。结果：LADA与T1DM组CD4^＋T细胞、CD4／CD8比值明显高于健康对照组（P〈0．01），LADA与T1DM对比无差异。LADA组CD25^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞高于健康对照组（P〈0．05），明显高于T1 DM组（P〈0．01）。T1 DM组CD25^＋、CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞略低于健康对照组，但无统计学意义（P〉0．05）。结论：LADA患者外周血中诱导免疫耐受的CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD25^＋CD62L^＋T细胞较对照组升高并明显高于T1 DM患者。LADA患者胰岛B细胞功能下降较速发性T1 DM患者相对缓慢可能与CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫保护有关。     

Characterization of CD4+ CD8alphaalpha+ and CD4-CD8alphaalpha+ intestinal intraepithelial lymphocytes in rats

Intestinal intraepithelial lymphocytes (i-IEL) of aged rats comprise CD4+CD8alphaalpha+ and CD4-CD8alphaalpha+ T cells expressing TCR alphabeta. In the present study, we compared characteristics between CD4+CD8alphaalpha+ and CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL, which were purified by a cell sorter from the i-IEL of 6-month-old Lewis rats. Most of the CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL were of the CD44(hlgh) phenotype, while CD4-CD8alphabeta+ i-IEL were CD44(low). Vbeta usage in the CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL was much diversified, while CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL showed a skewed Vbeta repertoire. The CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL but not the CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL proliferated in response to syngeneic spleen cells, which was partially inhibited by addition of anti-MHC class I mAb. The CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL produced IFN-gamma and IL-2 but no IL-4 or transforming growth factor (TGF)-beta in response to syngeneic spleen cells, while CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL produced abundant levels of TGF-beta but no IL-2, IFN-gamma or IL-4. CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL proliferated in response to exogenous IL-2 but not to IL-15, while CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL could respond to IL-15 as well as IL-2. These results suggest that a significant fraction of CD4+CD8alphaalpha+ i-IEL belongs to Th1-type T cells capable of responding to self-MHC class I, while CD4-CD8alphaalpha+ i-IEL are a unique population with a diversified Vbeta repertoire that respond to IL-15 in rats.     

Resident CD8+ T cells suppress CD4+ T cell-dependent late allergic airway responses

BACKGROUND: The role of CD8+ T cells in the immune response to airway challenge with an allergen is poorly understood. OBJECTIVE: The aim of this study was to test the hypothesis that resident naive CD8+ T cells modulate the magnitude of CD4+ T cell-dependent allergic airway responses. METHODS: Cervical lymph node CD4+ T cells (2 x 10(6)) were harvested from ovalbumin (OVA)- or sham-sensitized rats and injected intraperitoneally into naive Brown Norway recipients. The recipients were treated with a CD8alpha mAb (OX-8) to deplete the resident CD8+ T cells (n = 12) or mouse ascites (n = 12). Two days after adoptive transfer, the recipient animals were OVA challenged, lung resistance was measured for 8 hours, and bronchoalveolar lavage (BAL) was performed. RESULTS: After OVA challenge, primed CD4-transferred CD8-depleted rats had larger early airway responses and late airway responses compared with primed CD4-transferred CD8-nondepleted rats (early airway responses: 158.6% +/- 19.2% vs 115.7% +/- 5.9%, P < .05; late airway responses: 8.5% +/- 1.7% vs 4.4% +/- 0.9%, P < .05). BAL eosinophilia was also greater (4.67% +/- 0.45% vs 2.34 +/- 0.26%, P < .01). The cells in BAL fluid expressing IL-4 mRNA were not significantly changed by CD8 depletion, but IL-5 mRNA+ cells were higher in number, and IFN-gamma mRNA+ cells were fewer in the CD8-depleted group. CONCLUSIONS: Resident CD8+ T cells downregulate the late allergic response and airway inflammation evoked by CD4+ T-cell transfers in Brown Norway rats. This downregulation does not require antigen priming.