肠道硫化氢合成酶CSE与糖尿病大鼠结肠动力的相关研究

目的：探讨肠道硫化氢（H2 S）合成酶胱硫醚‐γ‐裂解酶（CSE）与糖尿病（DM ）大鼠近端结肠动力的关系。方法一次性腹腔注射1％链脲佐菌素（STZ）65 mg／kg ,建立1型糖尿病模型,观察大鼠的一般情况;注药第10天制作结肠平滑肌纵行肌条,使用生物机能实验系统记录每组纵行肌肌条自发性收缩活性;分别采用免疫组化及双重免疫荧光的方法观察结肠全层标本及肌间神经丛（M P）中CSE分布;采用Western blot方法观察肠道组织（去黏膜及黏膜下层）CSE的表达。结果 DM组近端结肠肌条收缩活性均低于对照组（P＜0．05）;CSE在黏膜下层、黏膜下神经丛、MP、纵行肌和环形肌都有分布;CSE在大鼠肌间神经元细胞核中分布,但CSE阳性神经元所占MP比例差异无统计学意义（P＞0．05）;DM组大鼠结肠（去除黏膜及黏膜下层后）CSE的表达上调（P＜0．05）。结论 CSE表达上调可能是DM大鼠近端结肠运动减退的原因之一。     

内源性硫化氢在糖尿病大鼠肾脏的变化及作用（英文）

新型内源性气体信号分子-硫化氢(内源性H_2S)具有类似氧化亚氮(nitric oxide,NO)的某些特征,如松弛血管、抑制血管平滑肌细胞增生、调节血管平滑肌细胞张力等作用。本系列研究观察了糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠肾脏内源性H2S的变化以及与H2S合成酶-半胱氨酸胱硫醚2β2合成酶(cystathionine 2β2 synthase,CBS)、胱硫醚2γ2裂解酶(cystathionine 2γ2 lyase,CSE)的关系,对DN大鼠肾脏病理改变的影响,对成肌纤维细胞特征性标志物-a平滑肌肌动蛋白(asmooth muscle actin,α-SMA)和细胞外基质成分-纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)在大鼠肾组织分布和表达的影响,来探讨内源性H_2S在糖尿病肾病发病机制中的作用。结果显示:①DN大鼠内源性H_2S量明显减少,肾脏CSE的表达亦明显减少。②内源性H_2S的减少与DN大鼠临床表现和肾脏病理改变密切相关。③DN组大鼠肾组织中α-SMA和肾小球基质中FN均增加,分布增多,补充外源性H_2S后,α-SMA和FN明显下降。DN大鼠肾脏内源性H_2S降低。肾脏CSE的减少可能是导致DN大鼠肾脏内源性H_22S降低的直接因素。外源性补充H_2S可抑制糖尿病肾病大鼠肾脏中成肌纤维细胞的生成和细胞外基质的过度积聚。提示,内源性H_2S的减少与糖尿病肾病的发生有关。     

内源性硫化氢与阴茎勃起

内源性硫化氢(H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后发现的第3种气体信号分子,通过胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)途径合成或产生。它通过直接作用于KATP通道、减少细胞外Ca2+的内流及与睾酮、NO、CO协同作用等方式来舒张阴茎海绵体血管平滑肌,改善血管舒张功能;还可抑制血管平滑肌细胞增殖,促进其凋亡,改善血管重构。因此,深入研究H2S在阴茎勃起调节中的作用,可为治疗勃起功能障碍(ED)提供新的途径。     

高原肺动脉高压大鼠硫化氢／胱硫醚-γ-裂解酶体系的变化

目的探讨气体信号分子H2S及其生成酶胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）在大鼠高原性肺动脉高压形成中的作用及其动态变化规律。方法60只雄性Wister大鼠,随机抽取10只大鼠作为低海拔对照组,其余50只为高原组。高原组大鼠在到达海拔4617m的第1、3、7、15、30d不同时间采集血浆及肺组织标本,采用右心导管法测定肺动脉压、敏感硫电极法测定血浆H,S浓度、酶促反应法测定肺组织CSE转化率、Western blot方法检测CSE在蛋白中的表达。结果大鼠第1d到达高原时,各项观察指标无明显变化;到达高原第3d时肺动脉压（18．12±3．34mmHg）无明显变化,而血浆H2S和CSE转化率明显增高;大鼠在高原7d时可形成肺动脉高压[（30．31±4．05）mmHg];随着高原低压低氧和大鼠肺动脉高压的持续,血浆H2S浓度、肺组织CSE转化率及蛋白表达逐渐下降,15d组和30d组与其他各组比较差异均有统计学意义。结论在高原暴露早期,内源性H2S／CSE体系上调而肺动脉压不增高,而在后期H2S／CSE体系下调且肺动脉压增高,提示内源性H2S体系可能与高原性肺动脉高压形成有关,并起着保护作用。     

大鼠阴茎组织NOS活性及海绵体平滑肌细胞NO含量的增龄变化

1　实验资料　不同月龄 (2 ,8和 16ｍｏ)健康雄性ＳＤ大鼠 4 8只平均分为 3组 ,由东南大学医学院动物实验中心提供 .ＮＯ测定试剂盒及ＮＯＳ活性测定试剂盒均由南京建成生物工程公司提供 .Ⅰ型胶原酶由Ｓｉｇｍａ公司提供 ;Ｍ 199培养基由Ｇｉｂｃｏ公司提供 ;2 0 0ｍＬ·Ｌ-1胎牛血清由杭州四季青公司提供 ;胰蛋白酶产自Ｄｉｆｃｏ公司由南京生兴生物工程公司提供 .取每一年龄段大鼠 10只 ,断颈处死 ,迅速解剖分离出阴茎组织 ,去除皮肤、阴茎头、阴茎骨及大部分尿道海绵体 ,剪碎、匀浆、离心 ,取上清液利用ＮＯＳ测定试剂盒行ＮＯＳ活性测…     

糖尿病大鼠肾脏胱硫醚-β-合成酶和胱硫醚-γ-裂解酶mRNA表达初步研究

目的研究糖尿病大鼠肾脏内源性硫化氢(H2S)的两种合成酶胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase CSE)mRNA表达.方法采用腹腔注射链脲佐菌素诱发糖尿病模型,大鼠随机分为两组:正常对照组(C组)和糖尿病组(D组).建模后第8周,测定24 h尿蛋白、血糖及肌酐清除率[1],应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质CBS、CSE mRNA表达.结果糖尿病组大鼠尿蛋白、血糖及肌酐清除率均较正常对照组明显升高(P＜0.05),但肾皮质CBS、CSE mRNA表达较正常对照组无显著性差异(P＞0.05).结论CBS、CSE/H2S系统不能通过两种合成酶mRNA水平的改变而参与糖尿病肾病中血流动力学紊乱发生,其作用通路中的其他环节改变是否参与糖尿病肾病的发生发展尚需进一步证实.     

硫化氢及其合成酶在膀胱癌细胞株中的表达及其作用

目的：探讨正常膀胱和膀胱癌细胞株中硫化氢（H₂S）及其合成酶胱硫醚β合成酶（CBS）和胱硫醚γ裂解酶（CSE）的表达,阐明其在膀胱癌发生发展中的作用。方法：选取膀胱癌5637、T24、EJ、UM-UC-3细胞株和人膀胱永生化上皮SV-HUC-1细胞株,Western blotting检测CBS和CSE蛋白酶表达水平,敏感硫电极法检测H₂S产率;选取EJ细胞株进行药物处理,实验分组为,① 10 μmol·L^-1硫酸氢钠（NaHS）组、50 μmol·L^-1NaHS组、100 μmol·L^-1NaHS组和对照组,MTT法检测24和48 h细胞生存率;②顺铂组（5 μg·L^-1）、顺铂（5 μg·L^-1）+NaHS（100 μmol·L^-1）组,另设无药物处理为对照组,药物处理48 h,MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞增殖活性和凋亡率。结果：与SV-HUC-1细胞株比较,膀胱癌5637、T24、EJ和UM-UC-3细胞中CBS和CSE表达及H₂S产率均明显增加（P<0.05或P<0.01）;外源性H₂S可促进EJ细胞增殖,细胞增殖活性随药物剂量增加而升高（P<0.05）,且随着药物作用时间的延长而增加（P<0.05）。与顺铂组比较,顺铂联合NaHS组细胞增殖活性明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率明显下降（P<0.05）。结论：H₂S及其合成酶CBS和CSE在膀胱癌细胞株中有表达且高于膀胱正常上皮细胞,H₂S促进膀胱癌细胞增殖并降低顺铂的促细胞凋亡作用。     

硫化氢在膀胱癌细胞株的作用试验研究

目的:探讨硫化氢在膀胱癌细胞株中的作用与相关机制。方法:选用膀胱肿瘤T24细胞株30瓶,随机分三组,每组10瓶,一组经正常繁殖(作为对照组),一组在繁殖的同时采用同一浓度的硫氢化钠刺激(A组),第三组各瓶细胞分别采用0.0001~0.5 mmol/L浓度的硫氢化钠刺激(B组)。结果:B组随着硫氢化钠浓度的增加,膀胱肿瘤T24细胞的OD(吸光度,Opticaldensity)值也在增加,在不同浓度之间对比差异有统计学意义(P<0.05)。A组的CSE蛋白表达水平明显高于对照组,A组的CSEmRNA表达水平明显高于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。结论:硫化氢在膀胱癌细胞株的应用能增强肿瘤细胞的增殖,其作用的发挥与增强CSE的表达有关。     

内源性硫化氢在糖尿病大鼠肾脏的变化及作用

新型内源性气体信号分子-硫化氢(内源性H₂S)具有类似氧化亚氮(nitric oxide,NO)的某些特征,如松弛血管、抑制血管平滑肌细胞增生、调节血管平滑肌细胞张力等作用.本系列研究观察了糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)大鼠肾脏内源性H₂S的变化以及与H₂S合成酶-半胱氨酸胱硫醚2β2合成酶(cystathionine 2β2 synthase, CBS)、胱硫醚2γ2裂解酶(cystathionine 2γ2 lyase, CSE)的关系,对DN大鼠肾脏病理改变的影响,对成肌纤维细胞特征性标志物-a平滑肌肌动蛋白(a-smooth muscle actin, α-SMA)和细胞外基质成分-纤维粘连蛋白(fibronectin, FN)在大鼠肾组织分布和表达的影响,来探讨内源性H₂S在糖尿病肾病发病机制中的作用.结果显示:1DN大鼠内源性H₂S量明显减少,肾脏CSE的表达亦明显减少.2内源性H₂S的减少与DN大鼠临床表现和肾脏病理改变密切相关.3DN组大鼠肾组织中α-SMA 和肾小球基质中FN均增加,分布增多,补充外源性H₂S后,α-SMA和 FN明显下降.DN大鼠肾脏内源性H₂S降低.肾脏CSE的减少可能是导致DN大鼠肾脏内源性H₂S降低的直接因素.外源性补充H₂S可抑制糖尿病肾病大鼠肾脏中成肌纤维细胞的生成和细胞外基质的过度积聚.提示,内源性H₂S的减少与糖尿病肾病的发生有关.     

硫化氢和同型半胱氨酸在动脉粥样硬化病变中的研究现状

动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)性病变是目前世界上心血管疾病的发生率与死亡率高的首位原因,严重危害人们的生命健康安全。动脉粥样硬化主要累及大中动脉,是一种慢性复杂的累进型病理过称。高同型半胱氨酸血症(Hyperho-mocysteinemia,HHcy)是动脉粥样硬化形成的独立危险因子,它可以通过转硫基作用等转化成硫化氢,但是其致病机制尚未完全阐明。近年来,硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)因其在心血管健康和内稳态调节平衡方面的诸多积极性作用而受到重要关注。新近研究发现H2S在动脉粥样硬化病变过程中发挥重要作用。AS的发生发展与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)和H2S存在一定的内在联系,本文拟对此方面的研究和认识作一综述。     

内源性硫化氢对柯萨奇病毒B3性心肌炎小鼠心肌内病毒复制的影响

目的观察内源性硫化氢（H2S）对柯萨奇病毒B3（CVB3）所致病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌内病毒复制的影响,探讨内源性H2S在VMC发病机理中的作用。方法雄性Balb／c小鼠通过腹腔接种CVB,复制VMC模型。75只雄性Balb／c小鼠随机分为5组（每组15只）：正常对照组、VMC组及胱硫醚-1-裂解酶（CSE）不可逆抑制剂-炔丙基甘氨酸（PAG）低、中、高剂量干预组（PAG给药采用皮下注射,PAG低、中、高剂量干预组的PAG剂量分别为：20．0、40．0、80．0mg·kg^-1,1次／d,共6次。PAG的首次给药为腹腔接种CVB,的同时皮下注射PAG）。于腹腔接种CVB,后第7天处死小鼠。用光镜观察心肌组织的病理变化;用分光光度法测定心肌组织的H2S含量;用酶免疫吸附法测定心肌组织的CSE活性及血清的心肌肌钙蛋白I（cTnI）含量;用逆转录．聚合酶链反应方法检测心肌组织CVB,mRNA表达。结果VMC组心肌组织的CSE活性、H2S含量明显低于正常对照组（P〈0．01）,心肌组织的病理积分、CVB,mRNA表达水平及血清的cTn I含量明显高于正常对照组（P〈0．01）;PAG低、中、高剂量3个干预组心肌组织的CSE活性、H2S含量明显低于VMC组（P〈0．01）,心肌组织的病理积分、CVB,mRNA表达水平及血清的cTn I含量明显高于VMC组（P〈0．01）。结论心肌内源性H2S能抑制CVB,在心肌内复制。     

内源性硫化氢在大鼠黑质氧化损伤中的变化及作用

目的 观察大鼠黑质氧化损伤后内源性硫化氢（hydrogen sulfide,H2S）的变化及其作用。方法 将SD雄性大鼠单侧黑质内微量注射6-羟基多巴胺（6-Hydroxydopamine,6-OHDA）作为黑质氧化损伤模型;H2S供体硫氢化钠（sodium hydrosulfide,Na HS）在6-OHDA损伤前连续腹腔注射3周作为预处理;实验分为对照组、6-OHDA损伤后7 d（D7组）、11 d（D11组）、17 d组（D17组）、Na HS预处理组（Na HS＋6-OHDA处理）,每组各8只;采用亚甲基蓝分光光度计法检测黑质胱硫醚-β-合酶（cystathionine-β-synthase,CBS）活性及H2S的含量;免疫组织化学法检测黑质酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase,TH）阳性细胞数;紫外分光光度法测定黑质谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活性和丙二醛（malondialdehyde,MDA）水平。结果 与对照组比较,6-OHDA损伤后7、11、17 d黑质CBS酶活性分别下降为[（96.21±8.40）%,P〉0.05],[（86.48±9.85）%,P〈0.05]和[（75.16±7.45）%,P〈0.01];内源性H2S含量分别减少为[（90.12±10.03）%,P〈0.05],[（82.58±9.52）%,P〈0.01]和[（78.16±11.55）%,P〈0.01]。TH阳性细胞与对照组比较,在6-OHDA损伤后7 d即下降为[（84.32±6.06）%,P〈0.05],同时伴随黑质GSH-Px活性降低及MDA含量升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。但早期给予Na HS预处理补充H2S之后,与单纯6-OHDA损伤后7 d比较,TH阳性细胞则增加为[（96.15±5.03）%,P〈0.05],且黑质GSH-Px的活性升高,MDA的含量降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 6-OHDA氧化损伤导致大鼠黑质CBS酶活性及H2S含量下降,外源性H2S预处理可早期发挥抗黑质氧化损伤的神经元保护作用,这可能与其增加GSH-Px活性及减少MDA含量有关。     

糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白的表达及意义

目的了解糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞Ot一肌动蛋白（actin）的表达及意义。方法利用链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组（每组20只）,分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ（60mg／kg）是否成模,分为对照组（未注射STZ,5只）、成糖尿病性勃起功能障碍模型组、成糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用免疫组化SP染色法对不同处理组的标本进行α-肌动蛋白的研究,利用免疫组化SABC染色法对不同处理组的标本进行肌间线蛋白的研究,利用原位杂交技术检测不同组别骨桥蛋白（OPN）mRNA含量的改变。图像分析利用彩色图文分析系统,第三人进行图像分析及数据采集,测量随机每高倍镜视野下累积光密度（IOD）,以IOD的值反映组织切片中相应阳性物质的表达程度。结果糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组（均P〈0．05）,糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组和未成模组（P〈0．05）,不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F＝3．801,P＝0．62）,交互效应不显著（F＝1．549,P=0．225）。免疫组化染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=0．052,P=0．821）,各处理组间的IOD不存在显著性差异（F=0．045,P=0．987）,交互效应不显著（F=0．572,P=0．639）。OPN mRNA原位杂交染色不同时间点间的IOD不存在显著性差异（F=1．288,P=0．266）,交互效应不显著（F=1．819,P=0．168）,糖尿病性勃起功能障碍组的IOD均大于其余三组（P均〈0．001）。糖尿病非勃起功能障碍组的IOD大于对照组和未成模组（P均〈0．001）。对照组的IOD与未成模组未见显著差异（P=0．873）。结论糖尿病可以引起阴茎海绵体平滑肌的表型转化;阴茎海绵体平滑肌表型转化可以导致勃起功能障碍。     

硫化氢对糖尿病大鼠视神经病变的防治作用

目的 观察硫化氢（H2S）对糖尿病大鼠视神经病变的影响,并探讨其可能的机制.方法 将SD大鼠随机分为对照组、糖尿病模型组和外源性H2S供体硫氢化钠（NaHS）治疗组,每组最终选入大鼠10只.糖尿病模型组和NaHS治疗组大鼠通过尾静脉注射链脲佐菌素（50 mg/kg）建立糖尿病大鼠模型,NaHS治疗组大鼠腹腔注射NaHS（100 μmol/kg）,对照组和糖尿病模型组大鼠给予相同量的生理盐水腹腔注射,每天1次,共8周.于实验末采用劳克坚牢蓝染色法观察大鼠视神经髓鞘结构的变化,分别检测血浆活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）水平,采用化学法测定血浆H2S浓度,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血浆睫状神经营养因子（CNTF）的水平.结果 与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血浆中H2S水平显著降低[（73.85±8.27）μmol/L比（38.45±4.82）μmol/L,t=3.24,P＜0.05];与糖尿病模型组大鼠比较,NaHS处理组大鼠血浆中H2S水平[（82.36±7.41）μmol/L]显著升高（t=2.97,P＜ 0.05）.对照组视神经髓鞘的染色均匀,视神经视束的直径和髓鞘的厚度一致.糖尿病模型组大鼠视神经的髓鞘出现较明显的溃变,有的髓鞘溃变成半环状或空白,可见空泡变性和崩解碎片.与糖尿病模型组比较,NaHS组大鼠视神经髓鞘的上述变化明显减轻.与对照组比较,糖尿病模型组大鼠视神经髓鞘面积所占的百分率显著降低[（22.56±14.81）％比（11.37±2.94）％,t=4.02,P＜0.05].NaHS处理组大鼠视神经髓鞘面积所占的百分率与糖尿病模型组比较显著增加[（11.37±2.94）％比（19.78±3.05）％,t=3.42,P＜0.05].与对照组比较,糖尿病模型组大鼠血浆中ROS[（458.61±65.75）au比（1128.46±91.32）au,t=2.84,P＜0.05）]和MDA[（5.21±0.47） μmol/L比（9.76±0.86）μmol/L,t=4.18,P＜0.05]的水平显著增加,而SOD水平显著降低（127.58±10.52）比（48.31±5.39） kU/L,t=2.91,P＜0.05）.Na     

外源性硫化氢对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响及机制探讨

目的 探讨外源性硫化氢(H2S)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(spinal cord alchemist-repercussion injury,SCII的影响及可能的机制。方法 30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和H2S干预组,制备大鼠SCII模型,H2S干预组于恢复灌流60 s内由大鼠尾静脉按10 mg/kg剂量注射NaHS,假手术组和模型组以同样的方法给予等量的生理盐水,分别于再灌注后3 h、6 h和12 h时,根据大鼠脊髓运动功能评分(Basso-Beattle-Bresnahan,BBB)标准对各组大鼠测定下肢神经运动功能评分,免疫组化观察各组大鼠脊髓组织变化,实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脊髓组织中CONFAB、VCAM-1、TNF-α和IL-6基因表达,Western blot法检测各组大鼠脊髓组织中p38MAPK、p-p38MAPK、ERK、p-ARK、JNK和p-DINK蛋白表达。结果 与模型组相比,H2S干预组再灌注后3 h、6 h、12 h时大鼠神经行为学评分均升高,差异均有统计学意义(P0.05);与模型组相比,H2S干预组大鼠脊髓组织中CONFAB、VCAM-1、TNF-α和IL-6相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P0.05);H2S干预组与模型组相比,H2S干预组大鼠脊髓组织中细胞出现损伤性改变,但变化程度较模型组大鼠明显减轻;H2S干预组大鼠脊髓组织中p38MAPK、ERK、JNK蛋白相对表达量均升高,而p-p38MAPK、p-ARK、p-DINK蛋白相对表达量均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论 外源性硫化氢可有效减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤,改善脊髓神经功能,其机制可能是通过抑制CONFAB和MAPK中p38MAPK和JNK信号通路而减少炎症反应,同时,通过抑制MAPK中ERK信号激活而抗细胞凋亡,保护神经元。     

胰岛素抵抗大鼠硫化氢/胱硫醚γ-裂解酶体系的实验观察

目的：探讨硫化氢/胱硫醚γ-裂解酶(H2S/CSE)体系在胰岛素抵抗大鼠体内的变化,与高血压和胰岛素抵抗状态的关系。方法:随机将雄性健康Wistar大鼠30只分为正常对照组(NC组)、胰岛素抵抗对照组(IR组)、胰岛素抵抗加外源性H2S供体NaHS组(NaHS组)，每组各10只。IR组及NaHS组给予高糖饲料喂养6周建立代谢综合征模型，NC组给予普通饲料喂养。成模后NaHS组每日腹腔注射NaHS(56μmol／kg)，IR组及NC组腹腔注射同等剂量生理盐水，继续喂养6周后，检测其体重、血压、血脂、血糖、血胰岛素，血浆H2S水平和胸主动脉CSE mRNA转录水平, 计算胰岛素敏感指数。结果：IR组及NaHS组体重、血脂、血压、血胰岛素显著高于NC组(P＜0.01), 胰岛素敏感指数显著低于NC组(P＜0.01), CSE mRNA 转录水平及H2S水平均低于NC组大鼠(P＜0.01)。NaHS组CSE mRNA转录水平(P＜0.05)及H2S水平(P＜0.01)均高于IR组, 血压显著低于IR对照组(P＜0.01)，但体重、血脂、血压、血糖、血胰岛素、胰岛素敏感指数与IR组无显著差异。结论：胰岛素抵抗大鼠硫化氢/胱硫醚γ-裂解酶体系受到抑制，是其高血压形成的重要因素，外源性给予H2S有助于缓解高血压，但对于胰岛素敏感性无明显改善作用。     

糖尿病性大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡和增殖特征分析

目的了解糖尿病性大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)凋亡和增殖特征,探讨其对糖尿病性大鼠CCSM数量的影响。方法利用链脲佐菌素建立糖尿病性大鼠模型。CCSM原代培养,并进行免疫细胞化学染色鉴定。采用WST-1检测细胞增殖率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用qRT-PCR检测阴茎海绵体组织增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡蛋白caspase-3mRNA的表达。结果造模后12周,糖尿病组和正常对照组大鼠体质量和随机血糖水平差异显著(P<0.001)。糖尿病组大鼠阴茎勃起功能较正常对照组大鼠差。原代培养所获细胞绝大部分为CCSM。糖尿病组CCSM的增殖速度明显低于正常对照组(P<0.001)。在生长因子刺激下,糖尿病组CCSM增殖速率也慢于正常对照组(P相似文献   

新型气体信号分子硫化氢在大鼠肺纤维化发病中的作用

目的:在博来霉素(Bleomycin,BLM)诱导的肺纤维化大鼠模型上,观察内源性胱硫脒-γ-裂解酶/硫化氢(CSE/H2S)体系的变化以及应用外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)对肺纤维化的影响,以探讨内源性H2S在肺纤维化发病中的病理生理意义.方法:(1)雄性Wistar大鼠48只,随机分为对照组、肺纤维化组(经气管内滴入BLMA5 5 mg/kg)、肺纤维化+NaHS低剂量组(腹腔注射NaHS 1.4 μmol/kg,每日两次)和肺纤维化+NaHS高剂量组(腹腔注射NaHS 7 μmol/kg,每日两次).分别于第7天、第28天取肺组织行HE染色和Masson染色,用生化法测定丙二醛(MDA)、羟脯氨酸含量,采用敏感硫电极测定血浆H2S的生成量及亚甲基蓝法测定CSE活性,用半定量RT-PCR方法测定肺组织CSE的mRNA水平.(2)以羟自由基发生系统Fe2+(5 mmol/L)/H2O2(25 mmol/L)单独及与不同浓度NaHS(10^-5、5×10^-5、10^-4、10^-3mmol/L)共同孵育离体大鼠肺组织,测定MDA含量.结果:(1)第7天纤维化组大鼠血浆H2S含量较对照组下降46%,第28天时增加25%(均P＜0.01);肺组织CSE活性在第7天时比对照组降低26%(P＜0.01),第28天时CSE活性恢复,与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);第7天和第28天纤维化组肺组织CSE mRNA含量较对照组分别升高34%和144%(P＜0.01);第7天及第28天纤维化组肺组织MDA、羟脯氨酸含量均较对照组明显升高(P＜0.01),NaHS高剂量组和低剂量组的MDA、羟脯氨酸含量均较纤维化组显著降低,高、低剂量组间差异无统计学意义(P＞0.05).(2)Fe2+/H2O2孵育组肺组织MDA含量较对照组明显升高,经给予不同浓度NaHS处理后,MDA含量均显著下降.结论:内源性CSE/H2S体系参与了大鼠肺纤维化的病理生理过程,外源性补充H2S可能通过减轻氧化应激抑制肺纤维化的发生.