同型半胱氨酸诱导细胞周期G1/S阻滞抑制人脐静脉内皮细胞的增殖

  【目的】 探讨同型半胱氨酸( Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和细胞周期的影响及其可能的机制&#65377;【方法】 HUVEC细胞采用含200 mL/L胎牛血清&#65380;0.06 g/L内皮细胞生长添加剂(ECGS)&#65380;0.05 g/L肝素的M199培养&#65377;分为对照组(Control)&#65380;50 μmol/L腺苷(Ade)组(A50)&#65380;50 μmol/L Hcy组(H50)以及Ade 50 μmol/L+Hcy 50 μmol/L组(A50H50)&#65377;分别通过细胞计数和MTT法观察Hcy对HUVEC增殖的影响,流式细胞仪检测Hcy对HUVEC细胞周期的影响,Western Blot检测Hcy对细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化状态的影响&#65377;【结果】 A50H50组的细胞数与细胞增殖活性显著低于对照组&#65380;A50组和H50组(P < 0.05)&#65377;A50H50组G1期细胞百分比显著高于对照组,S期细胞百分比则显著低于对照组(P < 0.05),出现明显的G1/S期阻滞&#65377;A50H50组ERK磷酸化水平明显低于对照组&#65377;【结论】 Hcy(50 μmol/L)和Ade(50 μmol/L)联合使用可引起HUVEC细胞周期的G1/S阻滞,抑制HUVEC细胞的增殖,其机制可能与ERK的磷酸化水平降低有关&#65377;     

姜黄素抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤的生长

目的 探讨姜黄素对人宫颈癌CaSki细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。方法 建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,35只荷瘤裸鼠随机分为5组,姜黄素高剂量(200 mg/kg)、中剂量(100 mg/kg)、低剂量(50 mg/kg)组、溶剂对照组和顺铂组(3 mg /kg),每组7只,姜黄素连续灌胃给药15 d,顺铂组每3 d腹腔注射给药,共5次。停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;结果 处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组(P结论 姜黄素对人宫颈癌CaSki细胞移植瘤的生长具有明显的抑制作用。     

蛞蝓有效提取物抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长

目的 观察蛞蝓有效提取物(EL-3)对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法制备宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤模型,检查EL-3对瘤体积、瘤重及VEGF蛋白表达的影响,评估EL-3在体内治疗宫颈癌的有效性。结果EL-3(10、30和100 mg/kg)实验组的瘤体积显著低于生理盐水组(P<0.05),同时,其移植瘤的瘤重抑制率分别为42.0%、67.0%和83.0%,提示EL-3在体内抗宫颈癌作用较强,且呈剂量依赖性;采用免疫组化检测证实EL-3下调宫颈癌裸鼠移植瘤细胞VEGF蛋白表达。结论EL-3具有抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的作用,其机理可能与抑制肿瘤血管生成有关。     

shRNA沉默雄激素受体基因抑制人前列腺癌裸鼠移植瘤

目的：探讨雄激素受体（androgen receptor,AR）小片段发夹RNA（short hairpin RNA, shRNA）通过沉默AR基因对人前列腺癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用。方法：建立人前列腺癌细胞株22RV1裸鼠移植瘤模型,同时构建针对其AR的shRNA,经酶切导入质粒载体,测序确认后行重组质粒的大量制备。将荷瘤裸鼠随机分为实验组和对照组,待移植瘤体积长至300 mm³左右时,实验组裸鼠予单次尾静脉注射AR shRNA质粒（2 μg/g体重）,对照组注射等量生理盐水。隔日观察并记录肿瘤体积变化情况,至实验后14 d为观察终点,处死裸鼠取出肿瘤组织称重,比较两组肿瘤生长差异。对肿瘤组织行AR、Ki-67蛋白免疫组织化学染色及TUNEL（terminal deoxynucleotidyl transterase-mediated dUTP nick end labeling）检测,用HSCORE计分法、增殖指数（proliferative index,PI）和凋亡指数（apopto-tic index,AI）分别量化AR、Ki-67免疫组织化学染色和TUNEL检测结果,比较两组肿瘤组织在AR蛋白表达及细胞增殖、细胞凋亡方面的差异。结果：实验组较对照组肿瘤生长缓慢,至观察终点,实验组肿瘤体积为（1 199.56±86.48）mm ³,较对照组肿瘤体积（1 742.02±98.16）mm ³明显缩小（P=0.002）。实验组肿瘤重量为（1 006.2±79.1）mg,较对照组肿瘤重量（1 383.4±74.8）mg明显减轻（P=0.005）。实验组的AR HSCORE、PI、AI分别为25.8±6.7、（26.0±3.1）%、（55.6±7.9）%,与对照组［268.8±18.7、（87.6±7.9）%、（27.2±3.9）%］相比,差异均有统计学意义（P均<0.01）。结论：AR shRNA可以通过静脉注射的方式,在体内抑制雄激素受体表达,从而抑制人前列腺癌细胞裸鼠移植瘤的生长。     

姜黄素抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:探讨姜黄素对人宫颈癌CaSki细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。 方法：建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,35只荷瘤裸鼠随机分为5组,姜黄素高剂量(200mg/kg)、中剂量(100mg/kg)、低剂量(50mg/kg)组、溶剂对照组和顺铂组（3mg/kg）,每组7只,姜黄素连续灌胃给药15d,顺铂组每3天腹腔注射给药,共5次。停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;结果:处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组(P相似文献   

白藜芦醇抑制胰腺癌裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:观察白藜芦醇(Res)对人胰腺癌Miapaca-2(PC-2)细胞构建的胰腺癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,并探讨其作用机制。方法:建立胰腺癌裸鼠移植瘤模型并随机分组,分别给予3种不同浓度的白藜芦醇干预后处死胰腺癌裸鼠,取出移植瘤,观察其体积、重量的变化情况;HE染色法观察移植瘤组织病理学变化;采用实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)和Western bolt法测定移植瘤组织Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平。结果:Res组移植瘤的体积、重量明显低于阴性对照组,随着浓度增加变化越明显(P<0.01);3个浓度组白藜芦醇作用于胰腺癌裸鼠后,移植瘤组织中Bcl-2、Bax、p53蛋白和mRNA表达水平较阴性对照组差异具有统计学意义(P<0.01),且随着浓度增加表达水平的差异越明显。结论:白藜芦醇可能通过调节Bcl-2、Bax、p53的表达来抑制胰腺癌移植瘤的生长。     

PC-SPESⅡ对雄激素非依赖型前列腺癌裸鼠移植瘤G1/S期及凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究PC-SPESⅡ影响AIPCa细胞周期进展及凋亡的分子机制。方法80只雄性Balb/c-nu/nu裸小鼠分为2大组,分别接种DU145或PC-3细胞,建立AIPCa移植瘤模型,每组再分成对照、PC-SPESⅡ125、250、500mg/kg4个剂量组,每组10只,接种第2天起每天给药,8周后各组中随机抽取3份标本,Westernblot和SABC免疫组织化学法检测G1/S期调节蛋白P16、P21、P-Rb及凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved-PARP表达的变化。结果Western blot:用药后DU145组P16表达显著升高(P=0.001),P21和P-Rb表达无变化(P=0.188和P=0.778);Bax、Cleaved-PARP表达升高(P=0.003和P=0.002),Bcl-2显著下降(P=0.001)。PC-3组P16、P21呈剂量依赖性上升(P<0.0001),P-Rb呈剂量依赖性降低(P=0.005);Bax无显著变化,每天500mg/kg时Bcl-2显著降低(P=0.021),Cleaved-PARP升高(P=0.02)。免疫组化:PC-3组6种蛋白及DU145组P16、P-Rb、Bax与Western blot结果一致。DU145组P21阳性率呈剂量依赖性升高(P=0.001),Bcl-2、Cleaved-PARP表现出更明显的剂量依赖性降低或升高趋势。结论PC-SPESⅡ可以通过调节G1/S阻滞和凋亡相关蛋白表达抑制AIPCa生长。     

慢病毒载体介导siRNA沉默Id-1通过ERK1/2信号通路抑制裸鼠人肝癌移植瘤生长

目的 构建慢病毒表达载体介导siRNA沉默Id-1,观察其对人肝癌HepG2细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其对ERK1/2信号通路的影响。 方法 构建合成特异性针对Id-1基因的siRNA慢病毒载体,转染肝癌HepG2细胞系,经半定量RT-PCR鉴定筛选沉默效果最佳的细胞系,于倒置荧光显微镜(×400)下观察转染前后细胞的形态学变化。取细胞浓度为5×10⁶ mL^-1的干扰效率最佳的稳定转染细胞系、稳定转染空载体病毒细胞系及正常HepG2细胞系悬液各0.2 mL,分别注射到转染实验组、阴性对照组及空白对照组的裸鼠右腋皮下,每周测量肿瘤体积及裸鼠体质量,绘制肿瘤生长曲线,28 d后处死裸鼠,制作肿瘤组织标本,行常规病理检查,采用半定量RT-PCR及Western-blot方法检测肿瘤组织Id-1,ERK1/2的mRNA和蛋白的表达水平及p-ERK1/2的蛋白表达水平。 结果 倒置荧光显微镜显示,转染前后细胞形态学变化不明显。经半定量RT-PCR筛选出Id-1基因的siRNA慢病毒载体的最佳细胞系为sh31,与稳定转染空载体病毒细胞系相比,目的基因Id-1的表达降低了80%以上,与未干扰的HepG2细胞相比降低了60%; 转染细胞皮下接种后,转染组最终瘤体大小明显小于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。半定量RT-PCR显示,转染组肿瘤组织的Id-1及ERK1/2 mRNA分别为(0.389±0.058)及(0.475±0.079),均明显低于阴性对照组[(0.845±0.113),(0.977±0.082)]和空白对照组[(0.917±0.083),(0.978±0.056)](均为P<0.05)。Western-blot检测显示,转染组的Id-1及p-ERK1/2蛋白均明显低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。 结论 Id-1基因特异性siRNA的慢病毒表达载体通过靶向抑制Id-1的表达,明显抑制人肝癌细胞HepG2裸鼠皮下移植瘤的生长,推测Id-1可能通过调节ERK1/2 MAPK信号通路参与肝癌的发生发展。     

细胞生长S期激酶及细胞周期抑制蛋白与细胞周期调控

近年来，随着分子生物学技术的广泛应用，细胞周期及其调控机制的研究也取得了重大进展。在哺乳动物细胞中．细胞周期的运行主要受正负调控蛋白调控，由细胞周期蛋白（cyclin）和细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclin dependent kinaseCDK）构成的复合物，在细胞周期中发挥正调节作用。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（cyclin dependent kinase inhibitots，CKI）则通过与cychn—CDK形成稳定的复合物，抑制CDK的催化活性，而产生负调节作用。细胞周期抑制蛋白（简称P27）。P27是一种新近发现的CKI，通过其活性的改变影响细胞周期的进程，进而影响细胞增殖。细胞生长S期激酶（简称SKP2），SKP2则可通过介导P27的泛素酶体途径降解而参与细胞调控。     

大黄素通过非Caspase依赖通路抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长机制研究

目的探讨大黄素对人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长抑制作用,并探讨其作用机制。方法建立人膀胱癌细胞株BIU87裸鼠移植瘤模型,并随机分为4组[对照组、大黄素组、Caspase抑制剂（Z-VAD-FMK）组及大黄素＋Z-VAD-FMK组]。观察各组裸鼠移植瘤生长情况并绘制肿瘤生长曲线,4周后处死全部裸鼠,取出肿瘤组织,称瘤质量;HE染色观察肿瘤细胞形态,RT-PCR检测各组肿瘤组织中线粒体蛋白凋亡诱导因子（AIF）和核酸内切酶G（Endo G）的mRNA的表达,Western blot检测各组肿瘤组织中AIF和Endo G蛋白的表达。结果大黄素组肿瘤生长速度明显慢于其他3组,大黄素组和大黄素＋Z-VAD-FMK组肿瘤较其他2组轻,差异均有统计学意义（均〈0.01）,大黄素组与大黄素＋Z-VAD-FMK组差异也有统计学意义（〈0.01）。大黄素＋Z-VAD-FMK组中AIF和Endo G的表达水平显著上调,与其他各组比较,差异均有统计学意义（均〈0.01）。结论大黄素能够明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能部分与大黄素可上调膀胱癌细胞BIU87中AIF和Endo G的表达,通过启动非Caspase依赖途径诱导细胞凋亡有关。     

甲状腺激素可抑制人胰腺癌裸鼠移植瘤的生长

目的探讨甲状腺激素对人胰腺癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法建立BALB/c人胰腺癌细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成
瘤裸鼠随机分为对照组（灭菌蒸馏水）、甲状腺激素（T3）高浓度组、T3低浓度组、丙基硫氧嘧啶（PTU）高浓度组、PTU低浓度组,
干预21 d。测量各组裸鼠体质量变化;测量各组移植瘤体积与瘤体质量变化;应用ELISA法检测裸鼠血清中甲状腺激素T3浓
度;应用免疫组化染色法检测瘤体组织中细胞增殖核抗原（PCNA）的表达和肿瘤微血管密度（MVD）的变化。结果与对照组相
比,甲状腺激素组裸鼠体质量较干预前均明显减轻（P<0.05）,而PTU组变化不明显。甲状腺激素组移植瘤体积增长明显滞后于
PTU组和对照组（P<0.05）。甲状腺激素组瘤体质量显著低于PTU组和对照组（P<0.05）。与PTU组和对照组相比,甲状腺激素
组的PCNA增殖指数与MVD亦明显降低（P<0.05）,但不同浓度组间无显著统计学差异（P>0.05）。结论甲状腺激素可抑制人
胰腺癌裸鼠移植瘤的生长,通过抑制肿瘤细胞的增殖和新生血管的形成来发挥抗肿瘤效应,具有潜在的临床应用价值。
     

幽门螺杆菌对胃癌上皮细胞株AGS细胞的生长抑制作用及其分子机理探讨

目的 观察体外实验中幽门螺杆菌(Hp)对胃癌上皮细胞株AGS细胞生长的影响,探讨Hp致病的分子机理。方法 胃癌细胞系AGS细胞体外培养,加入Hp活菌后,通过形态观察、细胞计数了解细胞生长情况;通过细胞核荧光染色、细胞DNA电泳检测细胞凋亡;通过流式细胞技术观察Hp对AGS细胞周期的影响,并进一步检测相应的细胞周期素。结果 Hp对AGS细胞生长有抑制作用。加入Hp后细胞凋亡增加,并导致G1／S细胞周期阻滞,伴有细胞周期素D1表达上调。结论 Hp急性感染可抑制AGS细胞生长,此作用可能与其诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞有关。提示Hp感染能够破坏正常细胞周期调节。     

双氢青蒿素通过下调NICD-1抑制胶质瘤生长

目的 探讨双氢青蒿素(dihydroartemisinine,DHA)对人神经胶质瘤生长的影响及机制.方法 人胶质瘤U251细胞株传代培养,设置空白对照组、二甲基亚砜(DMSO)组、DAPT组和DHA(10、20、40、80 μmol/L)实验组,应用CCK-8和FCM检测细胞增殖、周期及凋亡,Western blot检测Notch1的胞内区域(NICD-1)及其下游靶蛋白Hes1的表达水平.建立裸鼠皮下胶质瘤模型(n=20),按随机数字表法分为DMSO组、DAPT组、DHA(50、100 mg/kg)治疗组,每组5只,根据时间体积曲线计算各组抑瘤率,免疫组化法检测裸鼠皮下移植瘤组织中NICD-1表达水平变化.结果 与空白对照组和DMSO组相比,实验组U251细胞增殖率显著下降,G1期细胞所占百分比显著上升,S期细胞所占百分比显著下降,早期凋亡率显著上升(P＜0.05),NICD-1及Hes1蛋白表达水平显著低于空白对照组(P＜0.05),均呈浓度依赖关系;DHA各治疗组的裸鼠皮下移植瘤生长速率及移植瘤组织内NICD-1表达显著低于DMSO对照组(P＜0.05).结论 DHA有效抑制人神经胶质瘤的生长,其作用机制可能与通过下调NICD-1表达抑制Notch信号通路有关.     

葡萄籽原花青素对人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨葡萄籽来源的原花青素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖和凋亡的影响和机制.方法 建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分成3组(n=8):原花青素高浓度组(200 ms/kg)、原花青素低浓度组(100 mg/kg)、空白对照组.观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析细胞凋亡,RT-PCR,Westernblot检测肿瘤细胞Bax,Caspase-3在RNA及蛋白水平的表达情况.结果 原花青素处理组皮下移植瘤抑瘤率分别为34.303%、28.594%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);治疗组肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,流式细胞检测治疗组肿瘤细胞凋亡率分别为67.965%,24.650%;原花青素还可以明显增高Bax、Caspase-3 RNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性.结论 葡萄籽原花青素对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能通过增强Bax、Caspase-3的表达而实现.     

Overexpression of the promyelocytic leukemia gene suppresses growth of human bladder cancer cells by inducing G1 cell cycle arrest and apoptosis

Objectives To examine the anti-oncogenic effects of promyelocytic leukemia (PML) on bladder cancer and to explore its molecular mechanisms of growth suppression.Methods Wild-type PML was transfected into bladder cancer cells (5637 cell) and expressed in a replication-deficient adenovirus-mediated gene delivery system and introduced into human bladder cancer cells (5637 cell ) in vitro and in vivo. The effect and mechanisms of the PML gene in cell growth, clonogenicity, and tumorigenicity of bladder cancer cells were studied using in vitro and in vivo growth assays, soft agar colony-forming assay, cell cycle analysis, apoptosis assay and in vivo tumorigenicity assay.Results Overexpression of PML in 5637 cells significantly reduced their growth rate and clonogenicity on soft agar. PML suppressed bladder cancer cell growth by inducing G1 cell cycle arrest and apoptosis. Adenovirus-mediated PML (Ad-PML) significantly suppressed the tumorigenicity and growth of bladder cancer cells. Intratumoral injection of Ad-PML into tumors induced by 5637 cells dramatically suppressed their growth.Conclusions The results indicated that overexpression of PML protein may promote efficient growth inhibition of human bladder cancer cells by inducing G1 cell cycle arrest and apoptosis, and adenovirus-mediated PML (Ad-PML) expression efficiently suppresses human bladder cancer growth.     

CD81 inhibits the proliferation of astrocytes by inducing G0/G1 arrest in vitro

Astrocytes play a major role in the reactive processes in response to neuronal injuries in the brain. Excessive gliosis is detrimental and can contribute to neuronal damage. CDS1 （TAPA）, a member of the tetraspanin family of proteins, is upregulated by astrocytes after traumatic injury to the rat central nervous system （CNS）. To further understand the role of CD81 in the inhibition of astrocytes, we analyzed the effects of a CD81 antibody, on cultured rat astrocytes. The results indicated that the effect worked in a dose-dependent manner with certain dosage range. It, however, reached a dosage equilibrium at a high dosage. Furthermore, anti-CD81 antibody remarkably inhibited the proliferation of astrocytes after incubation with astrocytes for different periods of time and the effect presented a time-dependent fashion. However, anti-CDS1 antibody substantially inhibited the proliferation of astrocytes at low density and middle density but slightly inhibited the proliferation of as- trocytes at high density, suggesting that the effect was positively correlated with the proliferative ability of astrocytes. Finally, the cell cycle of astrocytes exposured to anti-CD81 antibody was arrested in S phase at the initial stage and at G0/GI phase over time. These findings indicated that CD81 exert significant inhibitory effect, dose-dependently and time-dependently, on the proliferation of astrocytes and the effect is positively correlated with the proliferative capability of astrocytes.     

裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立

目的: 建立一种裸鼠前列腺癌原位模型. 方法: 在10只裸鼠下腹部切口,显露膀胱和前列腺,用1 mL TB针筒、29G针头在其前列腺左右腹侧叶包膜下接种人前列腺癌DU145细胞50 μL,共计6×106个,以建立原位肿瘤模型,观察裸小鼠生命体征变化. 于濒死状态下处死,并取原位肿瘤、膀胱、盆腔淋巴结、肺脏和肝脏标本,用40 g/L甲醛固定、石蜡包埋和HE染色后显微镜下观察,X线照射显示骨骼转移情况. 结果: 10只裸鼠中有6只模型建立成功. 接种后14 d左右,可触及前列腺部位有黄豆大小的包块,质硬. 19 d后出现恶液质,解剖后发现前列腺部位有包块生长,直径约在0.8～1.5 cm,其中2例侵及膀胱. 肝脏泛黄、被膜皱缩,镜下呈急性重型肝炎的病理改变. 结论: 小鼠前列腺原位移植瘤模型建立成功.     

SNCG shRNA 对乳腺癌细胞种植瘤形成和生长的抑制作用

目的：SNCG为乳腺癌特异性基因,在进展的乳腺癌中过表达,并且预后较差,本研究应用小分子RNA干扰技术,检测SNCG-shRNA降低乳腺癌细胞SNCG的作用。方法：本实验设计4组SNCG shRNA及2组对照组,应用化学法构建动物实验媒介,应用转染后的稳定的基因降低乳腺癌细胞系MCF-7的SNCG的表达,用特异性siRNA和无关序列转染后的细胞及未处理的细胞注入裸鼠,并建立相应的裸鼠种植瘤模型,分析肿瘤生长抑制情况,采用半定量RT-PCR及免疫细胞化学、免疫组化SP法检测4组SNCG shRNA转染后的MCF-7细胞组和4组抑制瘤组织及各对照组中SNCG的mRNA和蛋白的表达情况。结果：与各对照组相比,SNCG-shRNA转染的4组细胞中SNCG的mRNA和蛋白表达均减弱,差异均有统计学意义（P均＜0.05）。SNCG在种植瘤乳腺癌组织中的表达率明显高于其他各组,SNCG-shRNA4组中SNCG的mRNA和蛋白的表达水平均降低,差异有统计学意义（P均＜0.05）;     

靶向CXCR4的siRNA对人食管鳞癌EC9706细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的 探讨CXCR4 siRNA对人食管鳞癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人食管鳞癌细胞株EC9706裸鼠移植瘤动物模型,瘤旁注射化学合成CXCR4 siRNA,同时以瘤旁注射阴性对照siRNA和PBS为对照.监测肿瘤生长变化,测量瘤质量.HE染色观察肿瘤病理学变化,RT-PCR、免疫组化方法检测CXCR4 mRNA和蛋白变化.结果 裸鼠体内实验结果显示,与对照组比较,CXCR4 siRNA组肿瘤生长受到明显抑制,瘤质量下降;HE染色显示对照组肿瘤体积大、异形明显;RT-PCR、免疫组化结果表明CXCR4 siRNA处理组CXCR4 mRNA和蛋白表达下调.结论 CXCR4 siRNA能抑制人食管鳞癌EC9706细胞株裸鼠皮下移植瘤的形成,且能在体内有效下调CXCR4 mRNA和蛋白的表达.     

SphK1及其抑制剂对人胃癌裸鼠移植瘤的作用

目的研究鞘氨醇激酶-1（sphingosinekinase-1,SphKl）及其抑制剂在人胃癌裸鼠移植瘤生长中的作用,并探讨其作用机制。方法对数生长期SGC7901细胞注射于裸鼠皮下建立人胃癌裸鼠移植瘤模型,建模成功后将裸鼠随机分为4组（每组8只）,分别用生理盐水、SKI-Ⅱ、顺铂（DDP）、SKI-Ⅱ联合DDP进行治疗,每周注射1次,共3次。定期测量肿瘤体积,绘制肿瘤时间-体积生长曲线。在治疗结束后的第7天脱颈处死裸鼠,取瘤体组织,免疫组化法检测瘤体内SphKl、Bax、Bcl-2蛋白的表达,TUNEL法检测肿瘤组织细胞凋亡。结果成功构建了人胃癌裸鼠移植瘤模型。SKI-Ⅱ联合DDP较SKI-Ⅱ、DDP更显著地减少肿瘤组织SphK1、Bcl-2蛋白的表达（P〈0．05）,并增加Bax蛋白的表达（P〈0．05）,且更明显地增加了肿瘤细胞的凋亡率并抑制了肿瘤的生长（P〈0．05）。结论SphK1通过引起胃癌细胞内Bax／Bcl-2比值的降低,在胃癌的生长过程中发挥了抑制胃癌细胞凋亡、促进肿瘤生长的作用,SphK1抑制剂SKI—Ⅱ与DDP有协同抗肿瘤作用。