盐酸戊乙奎醚对脓毒症大鼠肺组织中组织因子表达的影响

目的研究大鼠在脓毒症时组织因子（TF）的表达,探讨盐酸戊乙奎醚（penehyclidine hydr ochl ordie,PHC）是否通过核因子-1（B（NF-1（B）途径抑制组织因子的增加。方法将30只大鼠随机分为假手术组（A组）、手术组（B组）、PHC组（C组）、四氢化吡咯二硫代氨基甲酸酯（PTDC）组（D组）、PHC＋PTDC组（E组）。B、c、D、E组用盲肠结扎穿刺法（CLP）造模,A组除结扎穿刺外处理同其他组。造模后12h处死大鼠,留取右肺上叶组织约O．5cm3测TF,右肺中叶组织约O．5cm。测NF-kB。结果12h时A、B、c、D、E组,TF及NF-kB比较,B组较A组NF-kB升高,TF增加;C、D组较B组NF-kB水平下降,TF减少;较A组NF-kB升高,TF增加。E组较A组NF-kB、TF水平没有变化。结论TF水平的升高与NF-kB含量的增加有一定相关性,TF可能至少有部分通过NF-kB途径介导合成,PHC可以有效抑制NF-kB活化,TF表达。     

利多卡因对脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白表达的影响

目的 观察利多卡因对盲肠结扎穿孔(CLP)脓毒症大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响,探讨利多卡因脓毒症急性肾损伤的保护机制。方法 雄性 Wistar大鼠随机分5组：假手术组(S组,n=15)、生理盐水组(NS组,n=20)、利多卡因5mg/kg组(n=15)、利多卡因10mg/kg组(n=15)、利多卡因20mg/kg组(n=15)。CLP术后0、1、2h S组和NS组分别腹腔内注射生理盐水0.5mL,利多卡因各组分别注射利多卡因5、10和20mg/kg。24h后留取血液和器官标本。实时PCR测定肾组织HMGB1 mRNA表达,生化分析测定血肌酐(Cr)浓度,光镜检查组织病理变化,免疫组化测定器官核转录因子(NF κB)活化。结果 ① 与S组比较,其他4组肾脏HMGB1 mRNA表达增加(P<0.05)。利多卡因各组HMGB1 mRNA水平较NS组降低(P<0.05),呈明显剂量依赖性;② 利多卡因5、10、20mg/kg组大鼠血Cr水平［(44.80±3.70)μmol/L, (34.80±4.44)μmol/L, (27.40±2.30)μmol/L］较NS组［(51.00±5.00)μmol/L］降低(P<0.05);③ 利多卡因处理可明显减轻组织损伤和炎症细胞浸润;④ 利多卡因可抑制CLP诱导的肾组织NF κB活化。结论 利多卡因脓毒症急性肾损伤保护作用可能与其抑制组织HMGB1的过表达有关。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对呼吸机所致肺损伤大鼠水通道蛋白5表达的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚对呼吸机所致肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响.方法 32只SD大鼠随机分为4组(n=8):对照组(C组)、大潮气量通气所致肺损伤组(ALI组)、盐酸戊乙奎醚低剂量组(P1组)和高剂量组(P2组),P1和P2组分别于机械通气前30 min经股静脉注射盐酸戊乙奎醚0.3和1.0 mg/kg,随后进行机械通气,通气参数设定同ALI组.模型成功后取动脉血样行血气分析;取肺组织,光镜观察肺病理变化,免疫组化检测AQP5的表达;检测肺组织湿/干重比(W/D比),考马斯亮蓝法测支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,双缩脲法测血浆蛋白含量,并计算肺通透性指数(LPI).结果 与C组比较,ALI组、P1组和P2组pH值、PaO2和AQP5表达下降,PaCO2、肺W/D比及LPI升高(P＜0.05);与ALI组比较,P1组和P2组pH值、PaO2和AQP5表达升高,PaCO2、肺W/D比及LPI下降(P＜0.05);P1组和P2组各指标组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 盐酸戊乙奎醚0.3、1.0 mg/kg预先给药能够减轻大潮气量机械通气所致的大鼠肺损伤,其机制可能部分与通过上调AQP5的表达,减轻肺组织通透性和肺水肿有关.     

高迁移率族蛋白B1在脓毒症大鼠心肌损害中的表达和作用

目的:探讨脓毒症大鼠心肌高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在脓毒症心肌损害中的表达和作用。方法:48只清洁级健康雄性Wistar大鼠随机分成正常对照组(Normal组)、假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组),各16只。于手术后24 h、48 h分别检测HMGB1、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、肌钙蛋白(Tn)I浓度,光镜观察心肌病理变化。结果:与Normal及Sham组比较,CLP组在24 h、48 h HMGB1、TNF-α、IL-6及Tn I水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);CLP组术后48 h较24 h HMGB1增加值与TNF-α、IL-6及Tn I增加值间分别呈显著正相关(r=0.886,P<0.05;r=0.943,P<0.05;r=0.829,P<0.05)。光镜下CLP组可见心肌损伤。结论:HMGB1与脓毒症心肌损害密切相关,其介导的炎性反应在心肌损害的发生发展过程中起着重要的作用。     

盐酸戊乙奎醚对急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠HMGBI、SP-A表达的影响

目的:观察盐酸戊乙奎醚(PHCD)对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤高迁移率族蛋白B1(HMGBl)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)表达的影响,探讨PHCD对急性坏死性胰腺炎肺损伤大鼠的治疗价值。方法:随机将100只SD大鼠分成模型组(急性坏死性胰腺炎组)和PHCD组。两组分别制模后随机再分为6h、12h、24h、36h、48h亚组,每组10只。采用酶联免疫吸附法测定血清HMGB1、SP-A浓度和肺泡灌洗液(BALF)中SP-A浓度。结果:PHCD组各时间点血清HMGB-1、SP-A浓度均较ANP组相同时间点明显降低(P均<0.01),同时PHCD组BALF中SP-A浓度显著增高(均P<0.01)。结论:PHCD通过抑制血清HMGB1、SP-A的表达,增加BALF中SP-A的表达,对大鼠急性坏死性胰腺炎肺损伤具有疗效。     

高迁移率族蛋白B1与脓毒症关系的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)是一种非常丰富的,进化高度保守的DNA捆绑蛋白,主要稳定核小体的结构和促进基因转录。近年研究发现,HMGB1在内毒素、细胞因子或其他如烧伤、休克、感染等因素的刺激下可过度表达分泌到细胞外,作为一种重要"晚期"炎性因子参与脓毒症。由于晚期释放的特点,使其可能成为脓毒症治疗的新靶点,以及相对于早期炎性因子更广的治疗"时间窗"。本文就HMGB1与脓毒症关系的研究进展进行综述。     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白1水平的影响

目的 研究δ阿片受体激动剂DADLE（D—Ala2-D—Leu5-enkephalin）对脓毒症大鼠肺组织高迁移率族蛋白l（HMGBl）的水平的影响。方法 将96只sD大鼠分为假手术组（sO）、脓毒症组（SEP）、DADLE组[制模后立即给药DADLE（5mg／kg,腹腔内注）],每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法（CLP）建立大鼠脓毒症模型,于制模后6h、12h、18h和24h每组各取8只处死取材,WesternBlot法检测肺组织HMGBI水平。结果12h时SEP组和DADLE组HMGBl水平与SO组相比均明显升高（P〈O．05）,且DADLE组明显低于SEP组（P〈O．05）;18h时,SEP组和DADLE组HMGBl水平达到最高,同样,DADLE组明显低于SEP组（P〈0．05）;24h时SEP组和DADLE组HMGBI水平较18h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组（P〈0．05）。结论DADLE能明显降低脓毒症大鼠肺组织HMGBl水平。     

神经外科手术前盐酸戊乙奎醚黏膜给药临床研究

目的：在神经外科手术中观察对比不同剂量盐酸戊乙奎醚麻醉前黏膜给药对肌松、镇静、血流动力学及术中和术后腺体分泌的影响。方法：选择45例择期神经外科手术患者（ASAⅠ~Ⅱ级）,采用随机分组的方式,将其分为三组,C组通过口鼻腔黏膜于麻醉前30 min注射用水1 mL,P1组给予盐酸戊乙奎醚0.5 mg,P2组给予盐酸戊乙奎醚1 mg。采用阻抗法通过在双盲的条件下观察给药前、后不同时段血流动力学改变,从而量化判断每组患者的口干程度,同时注重观察不同手术时段其对腺体分泌的影响。结果：盐酸戊乙奎醚在麻醉前黏膜给予对抑制腺体分泌影响明显,对心搏量、心输出量、心率无明显影响（P〉0.05）,盐酸戊乙奎醚可延长肌松剂的维持时间。结论：盐酸戊乙奎醚与抑制腺体分泌在麻醉前黏膜给予条件下呈剂量相关性,其对心血管无明显兴奋作用,可能延长肌松药的作用时间。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠体外循环转流期间微循环的影响

目的:探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)对大鼠体外循环期间微循环的影响。方法:选择健康成年SD大鼠20只,随机分为对照组(C组)、盐酸戊乙奎醚组(P组)。P组在预充液中加入PHC0.05mg/kg,C组加入等容量生理盐水;两组大鼠在体外循环建立后开始转流,转流时间为2h。观察时间点为:T0:转流前;T1:体外循环转流开始后1h;T2:体外循环转流开始后2h。分别在3个时间点观察两组大鼠的血压、心率、动静脉血氧分压差(Pa-vO2)、乳酸含量、转流2h总尿量。结果:T2、T3时刻P组大鼠乳酸含量低于C组,动静脉血氧分压差、转流2h总尿量高于C组(P<0.05)。结论:盐酸戊乙奎醚可有效改善大鼠体外循环期间微循环,增加组织灌注。     

切痂植皮对创面脓毒症大鼠内脏高迁移率族蛋白 B1表达的影响

目的：通过观察大鼠高迁移率族蛋白B1（ HMGB1）在肺内mRNA表达及在肝肾肺组织内蛋白表达,判定切痂植皮对创面脓毒症的治疗效果并探讨其机制。方法以30％总体表面积（ TBSA ）烧伤大鼠创面外涂绿脓杆菌制作创面脓毒症模型,于感染后3d切除感染焦痂,对比创面脓毒症组,抗生素治疗组及切痂植皮＋抗生素治疗组大鼠HMGB1在肺内mRNA表达及在肝肾肺内蛋白表达的变化。结果切痂植皮治疗可降低脓毒症大鼠HMGB1在肺内mRNA表达及在肝、肾、肺组织内蛋白表达。结论切痂植皮,针对创面脓毒症病因治疗可获得满意疗效,这为临床上创面脓毒症的治疗提供了理论依据。     

盐酸戊乙奎醚对内毒素血症大鼠紧密连接蛋白表达的影响

目的 观察盐酸戊乙奎醚(PHC)对脂多糖(LPS)致大鼠急性肾损伤的作用,并探讨其对内毒素血症大鼠紧密连接闭锁小带蛋白(ZO-1)和紧密连接闭锁蛋白(Occludin protein)表达的影响.方法 成年雄性SD大鼠随机分为对照组(C组)、LPS组(LPS组)、PHC低剂量组(L-PHC)和PHC高剂量组(H-PHC),每组10只,后3组注入LPS (5.0 mg/kg),30min后,L-PHC和H-PHC组分别注入PHC 0.3、0.9 mg/kg,24h后取外周血和肾组织,检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、TNF-α和IL-1β含量;蛋白免疫印迹法检测ZO-1和occludin蛋白的表达.结果 LPS组肾脏炎症明显,而L-PHC和H-PHC组肾脏炎症较弱;与C组比较,各组血浆TNF-α、IL-1β、Scr和BUN含量均显著升高(P＜0.05),而L-PHC和H-PHC组其含量比LPC组明显降低(P＜0.05);ZO-1和occludin蛋白表达水平LPS组升高,L-PHC和H-PHC组比LPS组下降(P＜0.05).结论 PHC可减轻脓毒症诱发的AKI,调控ZO-1和occludin蛋白的表达可能是其发挥保护作用的机制之一.     

脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4基因的表达及相关性

目的 探讨脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达变化及其相互关系.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制成脓毒症大鼠模型.将50只Wistar大鼠分成正常对照组(10只)和CLP组(40只),CLP组分别于CLP术后6、12、18、24 h各处死10只大鼠,应用实时聚合酶链反应检测肝脏组织HMGB1和TLR4 mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肝脏组织存在微量的HMGB1、TLR4 mRNA表达.脓毒症组大鼠CLP术后各时间点的HMGB1、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(P值均<0.01),CPL术后6 h HMGB1、TLR4 mRNA表达开始升高,至12 h达峰值,18 h后开始下降,各时间点间HMGB1、TLR4 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05).直线相关分析表明,脓毒症大鼠肝脏组织HMGB1 mRNA与TLR4 mRNA的表达呈正相关(r=0.90,P=0.04).结论 HMGB1可能通过TLR4进一步激活炎性细胞,引起下游炎性因子释放的瀑布效应.     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白1水平的影响

目的 研究δ阿片受体激动剂DADLE（D—Ala^2-D-Leu^5-enkephalin）对脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白1（HMGBl）水平的影响。方法将96只Sprague-Dawley（SD）大鼠分为假手术组（SO）、脓毒症组（SEP）、DADLE组[制模后立即给药DADLE（5mg／kg,腹腔内注）],每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法（CLP）建立大鼠脓毒症模型,于制模后6h,12h,18h,24h每组各取8只处死取材,Western Blot法检测肝组织HMGBl水平。结果 12h时SEP组和DADLE组HMGBl水平与SO组相比均明显升高（P〈0．05）,且DADLE组明显低于SEP组（P〈0．05）; 18h时SEP组和DADLE组HMGB1水平达到最高。同样DADLE组明显低于SEP组（P〈0．05）;24h时SEP组和DADLE组HMGBl水平较18h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组（P〈0．05）。结论 DADLE能明显降低脓毒症大鼠肝组织HMGB1水平。     

脓毒症时高迁移率族蛋白B1干预策略的研究进展

高迁移率族蛋白B1(HMGB1)作为新的潜在"晚期"炎性介质参与脓毒症的发病过程,在揭示HMGB1作用的分子机制、HMGB1表达、释放规律及药物抑制方面已经取得了一定进展,给临床医师提供了对脓毒症和失控炎性反应实施早期干预的可能。同时,检测血清HMGB1水平也可能成为预测和判断脓毒症患者病情的一种新手段。     

盐酸戊乙奎醚不同给药途径对腹腔镜手术患者呼吸力学的影响

目的：探讨妇科腹腔镜手术时盐酸戊乙奎醚(penehyclidine hydrochloride,PCHE)在静脉滴注与雾化吸入不同给药途径时对患者呼吸力学的影响。方法：选取四川省人民医院行妇科腹腔镜手术的患者 150 例,随机分为静脉滴注组、雾化吸入组、空白对照组,每组各 50 例。3 组患者分别在麻醉诱导前 15 min 给予静脉滴注 PCHE 1 mL、雾化吸入 PCHE 1 mL 和静脉滴注生理盐水 1 m L。收集人工气腹前(T₁)、气腹后 30 min(T₂)、气腹后 60 min(T₃)、拔管后 10 min(T₄)呼吸力学指标[气道峰压、气道阻力、气道平台压、呼气末二氧化碳分压(partial pressure of end-tidal carbon dioxide,PetCO₂)]、循环力学指标[心率(heart rate,HR)、血压(blood pressure,BP)]及血气分析指标[氧分压(partial pressure of oxygen,PaO     

δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白1水平的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE（D—Ala2-D—Leu5-enkephalin）对脓毒症大鼠血浆高迁移率族蛋白1（HMGBl）水平的影响。方法将96只Sprague—Dawley（SD）大鼠分为假手术组（SO）、脓毒症组（SEP）、DADLE组[制模后立即给药DADLE（5mg／kg,腹腔内注）1,每组32只。采用改良盲肠结扎穿孔方法（CLP）建立大鼠脓毒症模型,于制模后6h,12h,18h,24h每组各取8只处死取材。ELISA法检测血浆HMGB1水平。结果12h时SEP组和DADLE组HMGB1水平与SO组相比均明显升高（P〈0．05）,且DADLE组明显低于SEP组（P〈0．05）;18h时,SEP组和DADLE组HMGB1水平达到最高。同样DADLE组明显低于SEP组（P〈0．05）;24h时SEP组和DADLE组HMGB1水平较18h有所降低,但DADLE组仍明显低于SEP组（P〈0．05）.结论DADLE能明显降低脓毒症大鼠血浆HMGB1水平。     

高迁移率族蛋白B1在香烟诱导的慢性阻塞性肺疾病模型大鼠肺部的表达

目的观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠及断烟后大鼠肺部的表达。方法雄性SD大鼠随机分为正常对照组、COPD组及断烟组,每组10只。采用烟熏法建立COPD大鼠模型,HE染色观察支气管肺组织病理形态学改变,免疫组化法检测HMGB1的表达。结果 COPD组和断烟组肺平均内衬间隔显著高于正常对照组(P<0.05),而COPD组和断烟组比较差异无统计学意义;免疫组化染色可见HMGB1主要分布于支气管及肺泡上皮细胞,3组间平均积分光密度(AIOD)比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论单纯被动吸烟可复制COPD模型,HMGB1可能与COPD的发病有关。     

丙酮酸乙酯对烫伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达和肺损伤的影响

目的 观察丙酮酸乙酯(ethyl pyruvate,EP)对烫伤大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1)表达水平及急性肺损伤的影响.方法 采用大鼠30%总体表面积Ⅲ度烫伤延迟复苏模型,78只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为假烫伤组(n=18)、烫伤组(n=30)、EP治疗组(n=30),每组分别在假伤或伤后第8、24、72小时活杀留取肺组织.HMGB1基因/蛋白表达分别采用逆转录聚合酶链反应及蛋白免疫印记法、免疫组化方法检测;髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性采用酶学分光光度法测定;并采用HE染色、光镜下观察肺组织病理改变.结果 与假烫伤组比较,烫伤组肺组织HMGB1基因/蛋白表达于伤后8～72 h显著增强(P＜0.05,P＜0.01),同时肺组织MPO活性在8 h及24 h明显升高(P＜0.01),病理学观察见肺组织炎细胞浸润,正常结构破坏,其中以24 h改变最重.与烫伤组比较,EP治疗组大鼠肺组织8～72 h时间点HMGB1表达显著下调(P＜0.05),肺组织MPO活性在8、24 h时间点显著下降(P＜0.01),EP治疗组8～72 h肺组织病理形态损害明显减轻.结论 HMGB1作为晚期炎症因子参与了烫伤后肺组织炎症反应的病理过程,EP治疗可明显下调肺组织HMGB1表达,并有助于降低肺组织MPO活性,从而减轻烫伤延迟复苏所致急性肺损伤.     

盐酸戊乙奎醚用于胸腰椎手术麻醉前给药的临床观察

盐酸戊乙奎醚（长托宁）是一类新型选择性抗胆碱药，对中枢和外周均有较强的抗胆碱作用，而且对心肌M2受体无明显作用。胸腰椎手术由于俯卧位，通过气管导管吸引分泌物相当困难，甚至气道阻塞导致患者缺氧、二氧化碳蓄积，不利于对患者呼吸道的管理，影响手术的顺利进行。我们利用盐酸戊乙奎醚强力抑制腺体分泌，作用时间长，     

牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1表达的影响

目的：观察牛珀至宝微丸对内毒素休克大鼠肺组织高迁移率族蛋白B1（high-mobility group box-1 protein,HMGB1）表达的影响。 方法：30只SPF级Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组、内毒素组和牛珀至宝微丸组。牛珀至宝微丸组大鼠每天以含生药量3mg的牛珀至宝微丸生理盐水悬液3mL灌胃,连续7d,正常组予生理盐水。模型组和牛珀至宝微丸组大鼠用静脉注射内毒素（1.5mg/kg）联合腹腔注射D-氨基半乳糖（100mg/kg）方法建立内毒素休克模型。采用二氨基联苯胺（diaminobenzidine,DAB）显色和异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）荧光标记的免疫组织化学染色以及蛋白印迹等方法检测大鼠肺组织内HMGB1的表达。 结果：正常组HMGB1表达较弱,仅有少量细胞呈阳性,阳性部位多在细胞核;内毒素组HMGB1表达增加,阳性部位主要在细胞质;牛珀至宝微丸组HMGB1表达更高,阳性部位主要在细胞核。 结论：牛珀至宝微丸能使HMGB1定位于细胞核内,从而可能避免被分泌出胞,产生毒性,这可能是其治疗感染性休克的作用机制之一。