IL-24对非小细胞肺癌患者CD8+T细胞体外功能的影响

目的观察IL-24在体外对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者CD8⁺T细胞功能的影响。方法本研究入组28例NSCLC患者和17例健康对照者,收集外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),分选CD8⁺T细胞,反转录实时定量PCR检测CD8⁺T细胞中IL-24受体(IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1)mRNA的相对表达量。不同浓度重组人IL-24(10 ng/ml和100 ng/ml)刺激纯化CD8⁺T细胞后,流式细胞术检测穿孔素和颗粒酶B的表达变化。建立CD8⁺T细胞和NSCLC细胞系NCI-H1882细胞的直接接触和间接接触体外共培养系统,观察IL-24刺激后CD8⁺T细胞诱导靶细胞死亡比例,以及IFN-γ和TNF-α的表达变化。组间比较采用t检验或LSD-t检验。结果CD8⁺T细胞中未检测到IL-22R1 mRNA表达,CD8⁺T细胞中IL-20R1和IL-20R2 mRNA相对表达量在健康对照者和NSCLC患者之间以及在非肿瘤部位和肿瘤部位之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC患者外周血和肿瘤部位CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平显著低于健康对照者和非肿瘤部位(P<0.05),低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激不影响CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P>0.05),而高浓度IL-24(100 ng/ml)则显著提升NSCLC患者CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P<0.05)。直接接触共培养系统中,高浓度IL-24(100 ng/ml)刺激NSCLC患者肿瘤部位CD8⁺T细胞后可诱导靶细胞死亡比例升高,以及IFN-γ和TNF-α表达升高,而低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌无显著影响。间接接触共培养系统中,IL-24刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌均无显著影响。结论高浓度IL-24在体外可增强NSCLC患者CD8⁺T细胞的直接细胞杀伤功能,但在体内IL-24可能并不影响CD8⁺T细胞的功能。     

肿瘤特异性CD8+T细胞研究现状

CD8⁺ T细胞是介导抗原特异性免疫应答的主要细胞,其功能状态受到分子机制的精密调控,在肿瘤免疫中发挥关键作用。近年来,基于CD8⁺ T细胞杀伤功能的过继性细胞疗法 （例如TCR-T和CAR-T细胞治疗） 和阻断PD-1抑制性信号的免疫检测点疗法在肿瘤临床治疗中取得了前所未有的效果。但是这些免疫疗法对患者的治疗效果仍然有限,主要表现为免疫治疗抵抗,其中重要的机制是肿瘤抗原特异性CD8⁺ T细胞功能耗竭。因此,免疫治疗研究的热点和难点是探究肿瘤抗原特异性CD8⁺ T细胞功能耗竭的调控机制,并探索干预策略和靶点以增强CD8⁺ T细胞的效应功能,抵抗功能耗竭。本文分别从耗竭 CD8⁺ T 细胞的异质性、对 PD-1 ICB 的响应及表观遗传特征三个方面综述 CD8⁺ T 细胞抗肿瘤免疫应答的研究进展。     

IL-15/NKG2D轴参与CD8+T细胞旁路激活在病毒感染性疾病中的作用研究进展

近年来研究发现机体免疫系统中CD8⁺T细胞可在细胞因子诱导下,通过T细胞受体(TCR)非依赖的方式被活化,这种活化方式被称为旁路激活。参与CD8⁺T细胞旁路激活的可能途径之一是由白细胞介素15(IL-15)介导并通过自然杀伤细胞2组成员D(NKG2D)激活记忆性CD8⁺T细胞发挥杀伤功能,被称为“固有样细胞毒作用”。目前发现IL-15/NKG2D轴可通过旁路激活CD8⁺T细胞参与急性甲型肝炎、丙型肝炎和获得性免疫缺陷综合征等多种病毒感染性疾病的发病过程,研究IL-15/NKG2D轴参与介导CD8⁺T细胞旁路激活的作用及分子机制是阐明多种感染性疾病免疫发病机制的重要方向之一。     

IL-7通过调节CD127表达调控脓毒症患者CD8 +T细胞的体外活性

目的:观察脓毒症患者中膜型CD127(membrane-bound CD127,mCD127)和可溶型CD127(soluble CD127,sCD127)的表达,探讨IL-7调控脓毒症患者CD8 +T细胞活性的机制。 方法:采用前瞻性研究队列,入组47例脓毒症患者和18例健康对照者,分离血清和外...     

circRNA-1565抑制CD8+T细胞对宫颈癌细胞的杀伤功能研究

目的：探究circRNA-1565对CD8⁺T细胞的作用及其对宫颈癌细胞杀伤能力的影响。方法：磁珠分选并用流式细胞术鉴定CD8⁺T细胞。所得CD8⁺T细胞分为Control组(转染空白质粒)和circRNA-1565组(转染circRNA-1565质粒)。CCK-8和流式细胞术检测Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞增殖能力和凋亡水平,Western blot检测Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3表达。将HeLa和SiHa细胞分别与Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞共孵育(HeLa+CD8⁺T+Vector组、HeLa+CD8⁺T+circRNA-1565组、SiHa+CD8⁺T+Vector组、SiHa+CD8⁺T+circRNA-1565组),...     

CD4+T辅助细胞分化的信号转导

外周幼稚型CD4+T辅助细胞前体(Thp)特异性活化至少需要两个信号,即Ag/MHCⅡ-TCR和CD28/B7、LFA-1/ICAM等受体-配体相互作用.对于CD4+T辅助细胞(Th)分化,其影响因素是多方面的,细胞的分化是TCR信号和/或相对特异的分化信号作用的结果.本文主要从信号转导的角度对CD4+Th细胞分化的机制作一说明.     

IL-37通过作用树突状细胞调节CD8~+T细胞功能

将小鼠骨髓细胞诱导分化为DC,用IL-37处理后,流式细胞术检测细胞表面共刺激分子(CD86、CD80),RT-PCR法检测TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-12和TGF-βmRNA的表达,多重液相蛋白定量CBA试剂盒及ELISA试剂盒检测细胞上清中TNF-α、IL-6、IL-12、IFN-γ、MCP-1和TGF-β蛋白的表达。Western blotting方法检测DC中磷酸化蛋白的表达。将DC与T细胞共培养,流式细胞术检测CD8+T细胞增殖及活化程度(CFSE、CD69)。结果显示,IL-37能够降低表达CD80+/CD86+的DC数量。促炎因子TNF-α、IL-12和IL-6的表达被明显抑制,而T淋巴细胞抑制因子TGF-β明显增高。IL-37预处理的DC明显降低T淋巴细胞的增殖和活化能力。IL-37能够降低DC中磷酸化ERK和NF-κB的表达。IL-37处理的DC对CD8+T细胞产生明显抑制作用。结果表明,IL-37能够通过影响ERK和NF-κB依赖的信号通路抑制DC的成熟和免疫反应,从而抑制CD8+T细胞的活化及增殖。     

IL-2、IL-4和IL-7体外诱导人外周血淋巴因子激活的杀伤细胞效应的比较

比较了淋巴因子ＩＬ－２、ＩＬ－４和ＩＬ－７在体外诱导健康人外周血淋巴因子激活的杀伤 （ＬＡＫ）细胞活性的效应。结果表明，ＩＬ－７可单独，亦可与ＩＬ－２、ＩＬ－４协同诱导ＬＡＫ细胞，而且ＩＬ－７ 诱导ＬＡＫ细胞的效应不被抗ＩＬ－２、抗ＩＬ－４所抑制。ＩＬ－７单独诱导的ＬＡＫ细胞活性高峰迟于ＩＬ－ ２或ＩＬ－４所诱导的活性高峰，且与增殖反应曲线一致。抗ＣＤ８抗体明显抑制ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞 的效应，而ＩＬ－７诱导ＬＡＫ细胞的效应不能被抗ＮＫＨ－１所抑制。提示：ＩＬ－７ 激活ＬＡＫ细胞的效应 机制不依赖ＩＬ－２和ＩＬ－４，并很可能成为肿瘤过继治疗中的重要淋巴因子。     

Th17细胞联合CD3+CD8-IL-21+T细胞升高与宫颈癌发生发展的关系

目的: Th17细胞在免疫调节中起重要作用,而IL-21与Th17在分化调节和功能行使上密切相关。本研究旨在探讨Th17在宫颈癌发生发展中的作用。方法: 选取37例宫颈癌患者、25例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和18例健康志愿者作为研究对象,用流式细胞分析术检测外周血中Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺T细胞的比例。分析两者与临床病理指标之间的关系。结果: 与健康对照组相比,Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞比例(占淋巴细胞百分比)在CIN组(P<0.01,P<0.05)及宫颈癌组(P<0.01,P<0.05)均明显升高。此外,2种细胞的比例都与临床分期有关,在晚期宫颈癌组明显升高(均P<0.05),并且有淋巴结转移组或脉管浸润组都明显高于相对应的无转移组(P<0.01, P<0.05)或无浸润组(均P<0.01)。此外,在健康对照组和宫颈癌组,Th17与CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞呈正相关,CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞的比例还与肿瘤大小有关(P<0.01)。结论: Th17和CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞在宫颈癌患者外周血中的比例上调,在宫颈癌的发生发展中可能起着重要作用。     

溶瘤流感病毒联合PD-1抗体增强对肝癌的抗肿瘤活性研究北大核心CSCD

目的探讨重组溶瘤流感病毒联合免疫检查点抑制剂PD-1抗体治疗肝癌的效果。方法全面鉴定重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF,通过血凝实验、TCID50测定重组溶瘤流感病毒滴度;电镜观察病毒形态和病毒粒子大小及分布;利用H22肝癌荷瘤Balb/c小鼠模型,研究delNS1-GM-CSF联合PD-1抗体对肿瘤杀伤和T细胞浸润的影响。结果重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF的血凝效价2^(8)~2^(9)。肝癌荷瘤Balb/c小鼠模型表明,重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF联合PD-1治疗组抑制肿瘤生长的能力显著强于单病毒组或单抗体组(P<0.01)。重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF和PD-1联合治疗组具有较强的杀伤肿瘤效果(P<0.01)。免疫组化和H&E染色结果表明,联合治疗组小鼠肿瘤中T淋巴细胞较丰富,肿瘤坏死严重。结论重组溶瘤流感病毒delNS1-GM-CSF联合PD-1抗体治疗可显著抑制肝癌细胞生长,增强体内抗肿瘤免疫应答。     

CD8+T细胞应答在慢性乙肝肝损伤中的作用和机制

CD8⁺T细胞应答在慢性乙肝感染中具有至关重要的地位。有缺陷的HBV特异性CD8⁺T细胞应答常常导致感染控制不力,而旁观者CD8⁺T细胞应答和肝内浸润则可能通过抗原不依赖的方式促进肝细胞发生损伤。肝血窦内的血小板聚集促进CD8⁺T细胞锚定于肝内,使CD8⁺T细胞在肝内缓慢爬行,识别抗原,导致肝细胞特异性或非特异性损伤。本文综述了近来肝内HBV特异性和旁观者CD8⁺T细胞应答在慢性乙肝相关肝损伤发生中的研究进展。     

肿瘤微环境中CD8+T细胞分化与免疫治疗的研究进展

CD8⁺ T细胞与机体抗肿瘤免疫反应以及免疫治疗效果密切相关,目前的研究认为该群细胞在肿瘤微环境中的免疫应答受到抑制。CD8⁺ T细胞迁移进入肿瘤微环境后,在进行分化产生效应T细胞的过程中,微环境能通过多种机制削弱CD8⁺ T细胞对肿瘤的杀伤效应,导致肿瘤生长并影响抗肿瘤治疗的效果。我们从肿瘤微环境对CD8⁺ T细胞分化和功能效应的影响因素出发,重点描述以CD8⁺ T细胞分化调节过程为核心的抗肿瘤免疫反应新进展。     

CD4+T细胞的记忆形成与维持机制

在全球新冠疫情愈发严重的当下,记忆细胞在抗病毒感染中的优势使其受到了广泛的关注。最新的研究发现,CD4⁺记忆T细胞(memory T cell, T_M)的分化与效应应答需要特定抗原提呈细胞与微环境中细胞因子的辅助。它们严密地调控着胞内的转录因子及能量代谢。该文总结并讨论了调控CD4⁺ T_M生成、维持及再次应答的关键机制。在不同疾病背景下精准调控CD4⁺ T_M的数量与功能将会是未来的一个巨大挑战。     

DNA-PK抑制剂联合溶瘤病毒增强对肝癌的抗肿瘤活性研究

目的:寻找协同增强VSVΔ51溶瘤病毒(OV)对肝癌杀伤作用的小分子化合物并探索其协同机制.方法:通过将不同机制的抗肿瘤活性的小分子化合物与VSVΔ51联合,筛选对肝癌细胞裂解能力最强的药物组合;通过体内抑瘤能力实验检测联合疗法的体内抗肿瘤活性;通过电镜观测联合疗法处理后内质网的肿胀程度及Western blot检测肿...     

CD4+T细胞极化在炎症性疾病中作用的研究进展

CD4⁺T细胞具有极强的可塑性,其可极化为Th1、Th2、Th17和Treg细胞等各种效应细胞,进而参与多种炎症性疾病的调控,其极化既可促进疾病发生发展,亦可抑制疾病进展。在不同疾病或同一疾病的不同阶段,其极化方向也可能不同。因此,本综述旨在总结并探讨CD4⁺T细胞极化在不同炎症性疾病中的调控作用及其对疾病防治的意义。     

032 CD4+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中，人们往往关注肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤效应，并由此鉴定出许多CD8+T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入，CD4+T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4+T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。     

肺结核患者外周血CD4~+和CD8~+记忆性T细胞亚群、IL-17、IL-27表达的初步探讨

目的:探讨肺结核患者外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞亚群及白细胞介素17(Interleukin-17,IL-17),IL-27的表达。方法:采用流式细胞术检测肺结核患者组外周血CD4+和CD8+记忆性T细胞,患者组按治疗史分为初治组,复治组;按痰涂片抗酸染色分为痰涂阳性组,痰涂阴性组。初治组8例为凡既往未用过抗结核药物治疗或用药时间少于一个月的新发病例;复治组22例为凡既往应用抗结核药物一个月以上的新发病例、复发病例、初治治疗失败病例等;痰涂阳组9例为痰涂片抗酸染色阳性;痰涂阴组21例为痰涂片抗酸染色阴性。ELISA法检测IL-17,IL-27。结果:①与健康对照组比较:患者组CD4+效应型记忆性T细胞均显著增高(P<0.05),初治组与涂阴组CD8+效应型记忆性T细胞均显著降低(P<0.05),复治组IL-17显著降低(P<0.05),而IL-27显著增高(P<0.05)。②与初治组比较:复治组CD4+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05),而CD8+效应型记忆性T细胞显著增高(P<0.05),IL-17显著降低(P<0.05),IL-27显著增高(P<0.05)。③与涂阴组比较:涂阳组CD4+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05),CD8+效应型记忆性T细胞显著增高(P<0.05),CD8+中央型记忆性T细胞显著降低(P<0.05)。④Spearman相关性分析显示:IL-17与IL-27呈正相关(P<0.05),记忆性T细胞亚群与IL-17,IL-27水平无显著相关性(P>0.05)。结论:肺结核患者外周血CD4+效应型记忆性T细胞的表达可望作为TB初步诊断的观察指标,CD4+中央型记忆性T细胞和CD8+效应型记忆性T细胞的表达均可望作为TB患者的临床分组依据,TB外周血IL-17、IL-27水平可望用于判断TB的炎症程度。     

GCV和CTL对HSV-TK/B7基因转染的大鼠乳腺癌细胞杀伤的体外实验

目的　观察羟甲基无环鸟苷 (GCV)、CTL对逆转录病毒介导的转染单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)和共刺激分子 (B7)双基因的大鼠乳腺癌细胞的体外杀伤作用。方法应用基因重组技术 ,构建逆转录病毒载体GcTKpSN、GcpB7SN和GcTKpB7SN。以重组逆转录病毒感染细胞的培养上清液 ,感染大鼠乳腺癌细胞SHZ 88。经G4 18筛选阳性克隆并扩增后 ,给予GCV进行敏感性实验。将从正常SD大鼠脾细胞悬液中分离的T细胞 (CTL) ,与转染重组基因的乳腺癌细胞按不同比例共育后 ,进行细胞杀伤实验。结果　转染与未转染GcTKpB7SN基因的乳腺癌细胞相比较 ,前者对GCV的敏感性明显增强 (P <0 .0 1)。T细胞对经GcTKpB7SN基因修饰的乳腺癌细胞的杀伤作用 ,明显强于未转染Gc TKpB7SN基因的乳腺癌细胞 (P <0 .0 1)。结论　GCV对转染GcTKpB7SN基因的大鼠乳腺癌细胞具有体外杀伤作用。经GcTKpB7SN基因修饰的乳腺癌细胞 ,在体外能被T细胞杀伤。     

IL-7对中国HIV/AIDS患者病程的影响

目的 了解IL-7对中国HIV／AIDS患者病程的影响。方法应用超敏感酶免法对66例中国HIV／AIDS感染者及8例健康对照者血浆IL-7水平进行定量检测，分析其与CD^＋T细胞绝对值、血浆病毒载量及HIV表型的相关性；并且在体外研究rhIL-7对人PBMC中T淋巴细胞增殖及CXCR4表达的影响。结果中国HIV／AIDS患者血浆IL-7水平高于健康对照（P〈0．05），与CD4^＋T细胞绝对值负相关（P〈0．01），与血浆病毒载量正相关（P〈0．05）。rhIL-7可在体外促进T淋巴细胞增殖反应及CXCR4表达。结论中国HIV／AIDS患者血浆IL-7水平升高，且与疾病进展密切相关，可作为疾病进展的相关标志之一。     

IL-2联合银耳多糖激活的同种脾细胞对肝癌实验性治疗的研究

目的 :研究淋巴因子IL 2联合银耳多糖 (TremellaPolysaccharideTP)共同激活的小鼠腺细胞对体外肿瘤细胞的杀伤作用及小鼠移植性肝癌的治疗作用。方法 :将IL 2激活的小鼠脾细胞 (即LAK细胞 )和IL 2与银耳多糖协同激活的小鼠脾细胞 (即TP LAK细胞 )分别作用于体外培养的3H TdR标记的肿瘤细胞P815、H2 2和B16 ,2小时后用γ 闪烁计数仪进行检测 ,并记算杀伤程度。将上述激活的小鼠脾细胞在小鼠荷肝癌局部皮下注射 ,隔日 1次 ,共 5次。检测肿瘤重量、体积、组织学改变和主要脏器的形态学改变。结果 :IL 2与银耳多糖激活的小鼠脾细胞对体外培养的肿瘤细胞有明显的杀伤作用 ,两种效应细胞对B16杀伤作用最强 ,H2 2次之 ,P815最弱 ,TP LAK细胞的作用较之LAK细胞更强 (P <0 0 5 )。治疗组肝肿瘤重量、体积均低于对照组。组织学上肿瘤坏死程度重且范围广 ,淋巴细胞、单核细胞浸润明显 ,纤维组织增生明显。银耳多糖协同IL 2实验组织较单纯的IL 2实验组表现的更为明显。除脾脏外 ,其它主要脏器无明显形态学变化。结论 :IL 2激活脾LAK细胞是有效的抗肝癌细胞 ,IL 2与银耳多糖在活化脾细胞提高抗肿瘤方面具有协同作用 ,对体内主要脏器无明显影响