酶联免疫吸附法检测梅毒特异性免疫球蛋白G

酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）是新近用于诊断梅毒的血清学方法。我们试用国产ＥＬＩＳＡ试剂盒,对梅毒特异性抗体ＩｇＧ进行检测,并与密螺旋体吸收试验（ＦＴＡＡＢＳ）及梅毒螺旋体明胶凝集试验（ＴＰＰＡ）对照,现报告如下。一、材料和方法１标本来源：梅毒患...     

免疫印迹法在梅毒诊断中的临床应用和评价

我们利用免疫印迹法 ,对临床确诊为梅毒的患者血清标本 ,献血员正常血清标本及生物性假阳性标本等进行检测 ,并与梅毒特异性抗体检测的标准方法荧光梅毒螺旋体抗体吸附试验 (ＦＴＡ ＡＢＳ)及目前国内常用方法 ,如酶联免疫吸附试验 (ＥＬＩＳＡ)和梅毒螺旋体被动明胶颗粒凝集试验 (ＴＰＰＡ)相比较。现将结果报告如下。一、材料与方法1 血清来源 :非梅毒血清标本 5 1份 ,其中包括献血员正常血清标本 2 5份 ,男性 13份 ,女性 12份 ,年龄 2 2～ 36岁 ;抗核抗体 (ＡＮＡ)阳性血清标本 10份 ,类风湿因子 (ＲＦ)阳性血清标本 10份 ;其他螺旋体感…     

红细胞结合荧光标记抗人IgG值的测定及临床应用

近 40年来 ,对免疫性溶血性贫血的诊断 ,Ｃｏｏｍｂｓ试验是一种经典的检验方法。但Ｃｏｏｍｂｓ试验敏感度不高 ,相当部分患者因此被误诊。为寻找一种敏感性高、特异性强的定量检测红细胞抗体的方法 ,我们采用Ｃｈａｎｄｏｒ[1] 的定量检测方法 ,即荧光标记羊抗人ＩｇＧ (ＦＩＴＣ -ＳＡＨＩｇＧ)结合红细胞值 ,测定血液病患者的红细胞ＩｇＧ水平 ,将结果报道如下。1　材料与方法1 1　试剂与仪器　 (1)荧光标记羊抗人ＩｇＧ(ＦＩＴＣ -ＳＡＨＩｇＧ) ,上海生物制品研究所生产 ,效价 1∶16 ;(2 ) 0 8%乙二胺四乙酸二钠 (ＥＤＴＡ二钠 ) ;(3…     

一种快速、灵敏测定谷胱甘肽S-转移酶A免疫荧光法的建立

本文运用对人ＧＳＴＡ有高度特异的单克隆抗体建立一种灵敏、快速检测血清中ＧＳＴＡ总浓度的时间分辨免疫荧光测定(ＴＲ ＩＦＭＡ)一步法。在反应板的每孔中加入溶于 1 5 0 μｌ反应缓冲液 ( 0 0 5ｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣｌ,0 1 5ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ,0 0 2ｍｏｌ/Ｌ二乙烯三胺戊醋酸 ,0 5 ｇ/ＬＮａＮ3,0 1ｍｌ/ＬＴｗｅｅｎ2 0 ,2 0ｍｇ/Ｌ苋紫 ,0 5ｇ/ＬＢＳＡ ,0 5 ｇ/Ｌ牛ＩｇＧ及 1 5ｍｇ/ＬＭＡＫ33 ＩｇＧ ,ｐＨ7 8)的Ｅ3+Ｕ ＬＤ45抗体 2 0 0ｎｇ ,然后加入 2 5 μｌ的校准液或标本各 2孔 ,室温下不断振荡 30ｍｉｎ。用洗涤…     

HFRS患者血清特异性抗体及特异性循环免疫复合物同步测…

为进一步研究ＨＦＲＳ免疫损伤机制，用ＥＬＩＳＡ法同步测定了１０８例不同临床型，不同病日，病期ＨＦＲＳ患者血清中特异性ＩｇＡ，ＩｇＧ，ＩｇＭ抗体以及ＨＦＲＳ病毒特异性ＩｇＡ，ＩｇＧＩｇＭ型循环免疫复合物（ＣＩＣ）的水平及检出率，发现ＨＦＲＳ－ＩｇＡ型抗体水平在轻型病例高于中，重型病例，其差异在病程早期（发热，低血压休克期，或是３～８病日）尤为突出，而ＩｇＡ型ＣＩＣ则未见到上述差异，ＨＦＲＳ－ＩｇＧ，     

环孢菌素A治疗难治性Evans综合征的疗效观察

我们应用环孢菌素Ａ(ＣｓＡ)的综合治疗方案治疗 12例难治性Ｅｖａｎｓ综合征 ,取得了初步疗效 ,现报告如下。病例和方法1　病例　 12例均为 1998～ 2 0 0 0年我院住院的Ｅｖａｎｓ综合征患者 ,其中男性 4例 ,女性 8例 ,年龄 13～ 6 2岁 ,平均年龄39 2岁。其中原发 8例 ,继发 4例 ,继发于系统性红斑狼疮(ＳＬＥ)者 2例 ,继发于类风湿关节炎 (ＲＡ)者 2例。Ｃｏｏｍｂｓ试验均为阳性 ,温抗体型 10例 ,其中ＩｇＧ +Ｃ3 型 6例 ,Ｃ3 型 2例 ,ＩｇＧ型 1例 ,ＩｇＭ +Ｃ3 型 1例 ,无ＩｇＡ型患者 ;温、冷双抗体阳性 2例。 12例患者于应用ＣｓＡ治…     

PCR和ELISA对单纯疱疹病毒Ⅰ型脑炎的诊断价值

应用ＰＣＲ和ＡＢＣ－ＥＣＩＳＡ法同步检测１０４例临床拟诊病毒性脑炎患者配对脑脊液和血清１３６份。其中２１例患者的３４份配对标本特异性ＩｇＧ阳性及３１例患者的４１份脑脊液中ＨＳＶ－Ⅰ型ＤＮＡ阳性，判为单纯疱疹病毒性脑炎。ＰＣＲ在病早期阳性率较高，病中晚期ＩｇＧ阳性较集中，二法可在临床诊断中互补．     

抗心磷脂抗体与反复自然流产关系的探讨

应用间接ＥＬＩＳＡ法检测１０５例反复自然流产患者血清中的抗心磷脂抗体，同时对ＡＮＡ、扩ｄｓ－ＤＮＡ、抗－Ｓｍ，抗－ＲＮＰ、ＲＦ进行了测定。结果表明：ＲＳＡ组ＡＣＡ阳性率为２８．６％，明显高于其他自身抗体及对照组（Ｐ＜０．０１），ＡＣＡ与ＲＳＡ患者的孕龄及流产次数无相关性（Ｐ＞０．０５），三种类别Ｉｇ中，以ＩｇＧ、ＩｇＧ、ＩｇＭ型ＡＣＡ检出率较高，中等或高水平的阳性结果占３３．３％（１０／３０），其     

梅毒螺旋体特异性表面抗原的克隆表达与血清鉴定

梅毒病原体为苍白密螺旋体 (Ｔｐ) ,俗称梅毒螺旋体。对Ｔｐ的诊断目前主要依据病史与临床检查 ,辅助以一些血清学方法 ,如血球凝集试验 (ＴＰＨＡ)和荧光抗体吸收试验 (ＦＴＡ ＡＢＳ) [1] 。蛋白分子量 170 0 0与 4 70 0 0是Ｔｐ特异性表面抗原[2 ,3 ] ,患者感染Ｔｐ后能够产生相应的特异性抗体。我们利用基因工程的方法 ,通过大肠埃希菌表达Ｔｐ的 170 0 0与 4 70 0 0特异性抗原 ,以建立一种Ｔｐ血清学诊断方法。一、材料和方法1 分子量 170 0 0与 4 70 0 0基因的扩增 :用蛋白酶Ｋ消化的方法纯化ＴｐＤＮＡ。通过聚合酶链反应 (ＰＣＲ)扩…     

胆固醇酯转运蛋白的提纯和鉴定

目的建立一种新的分离纯化人血清胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ）的方法,为制备ＣＥＴＰ单克隆抗体和ＣＥＴＰ浓度测定提供物质基础。方法制备无脂血清,用ＢｕｔｙｌＳｅｐｈａｒｏｓｅ４ＦＦ、ＣＭＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ２００三步柱层析分离、纯化ＣＥＴＰ。结果纯化ＣＥＴＰ经ＳＤＳＰＡＧＥ电泳鉴定呈单一区带,分子量６５０００,蛋白质含量０３２５ｍｇ／ｍｌ,与国外和作者研制ＣＥＴＰ单抗的免疫斑点试验呈特异性反应,与纯化脂蛋白（ａ）、载脂蛋白（Ａｐｏ）Ａ１、ＡｐｏＢ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、Ｃ３、Ｃ４抗体无免疫反应。结论经三步柱层析获得了纯化ＣＥＴＰ,得率约２５％,活性每小时３０ｎｍｏｌ／μｇ。     

六项放免检测在NIDDM患者诊断早期肝损伤的临床应用

对３９例ＮＩＤＤＭ患者采用放射免疫法（ＲＩＡ）进行苦胆酸（ＣＧ）、透明质酸（ＨＡ）、分泌型免疫球蛋白Ａ（ｓＩｇＡ）、甲胎蛋白（ＡＦＰ）、铁蛋白（ＳＦ）、及癌胚抗原（ＣＥＡ）联合测定。以５１例健康人血清作对照。结果显示：ＮＩＤＤＭ患者血清ＳＦ、ＣＧ、ｓｌｇＡ与对照组比较有显著差异,血清ＨＡ与姐比较差异明显;血清ＡＦＰ、ＣＥＡ则无差异。检测结果说明对ＮＩＤＤＭ患者血清ＳＦ、ＣＧ、ｓＩｇＡ、ＨＡＩ地诊断     

捕获ELISA法用于肾综合征出血热早期诊断的研究

目的 探讨肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）早期诊断方法。方法 用ＭａｃＥＬＩＳＡ、ＩＦＡＴ二种方法同时检测ＨＦＲＳ病人血清４０份;非出血热血清２０份;正常人血清２０份进行对比研究。而且,阳性血清用２－巯基乙醇破坏特异性ＩｇＭ试验,阴性血清加类风湿因子阳性血清干扰试验。结果 用ＭａｃＥＬＩＳＡ法检测ＨＦＲＳ于病程第２日即可出现特异性ＩｇＭ阳性,３～４病日阳性率达８９％;５～７病日阳性率达１００％,而ＩＦＡ     

C-反应蛋白脂肪乳剂凝集试验与定量关系的探讨

为了进一步研究ＣＲＰ脂肪乳剂凝集试验 (ＦＡＴ) [1] 的价值 ,探讨不同阳性结果与ＣＲＰ定量测定的关系 ,我们对ＦＡＴ阳性血清标本同时做了α1 酸性糖蛋白 (ＡＧ )、触珠蛋白(ＨＰ)、转铁蛋白 (Ｔｆ)、α2 巨球蛋白 (α2 ＭＧ)、补体Ｃ3、Ｃ4、铜蓝蛋白 (ＣＰ)及ＣＲＰ定量测定 ,用进口ＣＲＰ纯品作了ＣＲＰ浓度与ＦＡＴ结果关系的对比试验 ,以期为指导ＦＡＴ的推广应用及临床分析结果提供更为全面的依据。1　材料与方法1 1　标本　 3 0例ＦＡＴ阳性血清为本院门诊及住院病人。招工体检健康者血清 2 0份 ,均 - 2 0℃保存 ,测定时取出室…     

高含量AFP用胶体金免疫层析法呈假阴性1例报告

胶体金免疫层析测定 (简称ＧＩＣＡ)ＡＦＰ作为初筛试验 ,具有快速、简便、特异性高、试剂稳定的优点。但如果标本的ＡＦＰ含量过高 ,有时会发生假阴性。本文用 3种不同品牌批号的ＧＩＣＡ试条测试 1份ＡＦＰ含量为 5 9× 10 4μｇ/Ｌ的标本 ,测定结果均为阴性。现报告如下。1　材料和方法1 1　ＡＦＰ含量为 5 9× 10 4μｇ/Ｌ的标本来源于本院肝癌患者 ,测定方法为ＥＬＩＳＡ。1 2　检测ＡＦＰ的ＧＩＣＡ试条　分别为试条 1(Ａｐｐｒｙｍｃ ＳａｎＤｉｅｇｏ ,ＣＡ93 65 4 ＵＳＡ) ;试条 2 (大卫公司 0 0 0 60 7) ;试条 3 (博赛研究所 0 0…     

两种血清型HFRS患者病程中及病后4种特异性抗体测定分析

为评价汉滩及汉城型肾综合征出血热患者免疫状况，用ＥＬＩＳＡ法检测了５４例病程中，４７例病后１－６年ＨＦＲＳ患者（汉滩２４例，汉城２３例）血清中特异性ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体。在病后血清中检出率及抗体滴度几何均数（ＧＭＴ）依次为ＨＦＲＳ－ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＥ、ＩｇＭ，各本间差异显著（Ｐ〈０．００５），其中ＨＦＲＳ－ＩｇＧ抗体水平在病后第４年仍达１：１００以上（ＧＭＴ值）；ＨＦＲＳ－ＩｇＡ     

HFRS-IgM抗体及HFRS病毒特异性循环免疫复合物诊断肾综合征出血热对比与评价

肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）的确诊依据是："经血或尿特异性抗原检测阳性,血清特异性ＩｇＭ抗体阳性或双份血清特异性ＩｇＧ抗体４倍增高者（间隔１周）"［'ｌ。但目前检测特异性抗原,一般方法检出率较低,而应用ＰＣＲ技术则需要一定的设备条件;检测ＨＦＲＳ－ＩｇＧ?..     

一种新的检测抗双链DNA抗体的斑点免疫结合试验

以纯化的不含单链ＤＮＡ的大肠杆菌质粒双链ＤＮＡ（ｄｓ一ＤＮＡ）作为抗原，经生物素化后，结合于包被了亲和素的硝酸纤维素膜上，建立了一种新的检测抗ｄｓ一ＤＮＡ抗体的斑点免疫结合试验（ＤＩＢＡ）。对１２０份临床血清标本的检测结果显示：４１例未经选择的系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者有２２例阳性，占５４％，其中活动性ＳＬＥ１９例，阳性１４例，占７４％；２９例其他自身免疫病患者仅１例阳性；５０例正常人全部阴性。与短膜虫免疫荧光法（ＣＬ，ＩＦＡ）和酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）试剂盒比较的结果为：ＤＩＢＡ的敏感性优于ＣＬ，ＩＦＡ，特异性优于ＥＬＩＳＡ试剂盒。ＤＩＢＡ快速、简便、可靠，可作为检测抗ｄｓ一ＤＮＡ抗体的常规方法。     

丙型肝炎患者抗HCV IgM、IgG及HCV RNA的检测

丙型肝炎患者抗ＨＣＶＩｇＭ、ＩｇＧ及ＨＣＶＲＮＡ的检测南通市传染病防治院（２２６００６）吴月平本文试用ＳＰＡ吸收结合免疫酶法检测丙肝患者血清中的ＩｇＭ抗体。经阻断试验和２－巯基乙醇耐性试验及与ＨＣＶＲＮＡ结果的相关性分析证明本法检出的抗体系丙肝特异性...     

孕早期特异性IgM抗体检测Torch感染的实际诊断价值

目的：探讨孕早期检测特异性ＩｇＭ抗体诊断Ｔｏｒｃｈ感染的实际诊断价值。方法：采用ＥＬＩＳＡ法和ＰＣＲ技术对照测定１０２例早孕妇女的特异ＩｇＭ抗体和Ｔｏｒｃｈ病原体。结果：以ＰＣＲ检测阳性作为金标准，弓形体ＩｇＭ的敏感性达１００％，特异性为７２４％，阳性预测值为１２９％，阴性预测值为１００％；风疹病毒ＩｇＭ和ＰＣＲ检测无阳性发现；巨细胞病毒ＩｇＭ的敏感性为９５７％。特异性为４４３％，阳性预测值为３３３％，阴性预测值为９７２％，疱疹病毒的敏感性为８８９％，特异性为５７０％，阳性预测值为１６７％，阴性预测值为９８１％。其中弓形体和巨细胞病毒的敏感性高，但阳性预测值低。结论：ＥＬＩＳＡ法检测Ｔｏｒｃｈ特异性ＩｇＭ抗体作为临床筛查是非常有用和必要的，但仅凭ＩｇＭ抗体阳性尚不能说明孕妇目前是否感染，应对ＩｇＭ抗体阳性者进一步做ＰＣＲ－ＤＮＡ测定。     

聚合酶链反应反向点杂交法鉴定人乳头瘤病毒型别

为了探讨人乳头瘤病毒 (ＨＰＶ)的分型方法 ,我们将聚合酶链反应 (ＰＣＲ)技术和Ｓａｉｋｉ等[1] 提出的反向点杂交 (ＲＤＢ)技术结合起来 ,对ＨＰＶ进行型别鉴定 ,现报告如下。一、材料及方法1.标本来源 :30份宫颈癌组织标本 ,选自贵阳医学院附属医院病理科 ,为 1995年 1月～ 1997年 12月部分存档活检及手术切除的蜡块标本。2 .菌种及试剂 :内含ＨＰＶ全基因组的 4种ＰＵＣ19质粒 :ＨＰＶ6Ｂ、11、16和 18及特异性寡核苷酸探针 (ＳＳＯ) ,通用引物序列为 :ＧＰ5 5′ ＴＴＴＧＴＴＡＣＴＧＧＴＡＧＡＴＡＣ 3′ ,ＧＰ6 5′ ＧＡＡＡＡＡＴＡ…