柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞Bcl-2及Fas表达的影响

目的观察柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞Bcl-2及Fas蛋白的表达影响,进一步明确柴胡三参胶囊治疗缺血性心律失常的作用及机制。方法将实验大鼠随机分为假手术组、模型组、柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组、空白组,每组各10只。给予相应药物干预2周后观察各组的心律失常积分和Bcl-2、Fas表达的变化。结果柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组与模型组进行比较,心律失常评分下降(P 0.05),Bcl-2蛋白表达升高(P 0.01),Fas蛋白表达有一定程度降低(P 0.05)。结论柴胡三参胶囊能上调抑制凋亡因子Bcl-2表达,下调促进凋亡因子Fas表达,说明其可减轻细胞凋亡,缓解心肌损伤,为柴胡三参胶囊改善缺血性心律失常提供了实验依据。     

柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞RyR2mRNA表达的影响

目的:探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌细胞兰尼碱受体(ryanodine receptors,RyR2 mRNA表达的影响,为柴胡三参胶囊的临床应用提供实验依据。方法:60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、空白组、柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组,每组10只。相应干预10 d后,空白组不作任何处理,假手术组只开胸不结扎,其余各组采取大鼠左冠状动脉前降支高位结扎法制作心肌缺血性心律失常模型,再用PCR法检测RyR2 mRNA在各组大鼠心肌中的表达水平情况。结果:柴胡三参胶囊组大鼠心律失常评分低于模型组(P0.05);柴胡三参胶囊组大鼠死亡率低于模型组;柴胡三参胶囊组大鼠RyR2 mRNA CT值的相对表达量低于模型组(P0.05)。结论:柴胡三参胶囊可通过抑制RyR2 mRNA的过度表达,减少缺血性心律失常的发生,从而降低大鼠的死亡率。     

柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

目的研究柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用。方法 60只健康Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性药物组(消心痛组)及柴胡三参胶囊小、中、大剂量组,采用开胸结扎冠状动脉左前降支,缺血30min、再灌注40min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注模型,以心电图ST点抬高值作为心肌缺血的指标。测定血清心肌酶学指标乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)以及超氧化物歧化酶(SOD)和血清丙二醛(MDA)含量。结果与假手术组和模型组相比,柴胡三参胶囊小、中、大剂量组和消心痛组均能使血清心肌酶(LDH、CK)的含量和MDA水平显著降低(P0.05),SOD水平升高(P0.05),柴胡三参胶囊中、大剂量组和消心痛组与柴胡三参胶囊小剂量组比较差异有统计学意义(P0.05),柴胡三参胶囊中、大剂量组与消心痛组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,且中、大剂量组优于小剂量组。     

柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠模型心肌PKA与PKC表达水平影响的研究

目的:探讨柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌中PKA、PKC的表达,进一步探讨其抗心律失常的作用机制。方法:大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组以及各给药组,每组各10只,观察大鼠结扎后心电图改变及缺血区PKA、PKC的表达。结果:柴胡三参胶囊能够降低缺血性心律失常的发生率(P0.05)、降低缺血区PKA(P0.01)、PKC蛋白(P0.05)的表达。结论:柴胡三参胶囊抗缺血性心律失常的效果明显,PKA、PKC作为柴胡三参胶囊抗心律失常的作用靶点,其抗心律失常的机制是通过β-AR信号通路转导起作用。     

柴胡三参胶囊对缺血性心律失常大鼠心肌组织CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡ-mRNA表达的影响

目的探讨柴胡三参胶囊抗缺血性心律失常的作用及分子学作用机制。方法将60只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组、假手术组、模型组和空白组,每组10只。柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组预防性给予相应药物灌胃,假手术组、模型组和空白组灌胃等量的生理盐水,连续灌胃2周后,柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组大鼠均复制缺血性心律失常模型,假手术组大鼠只穿线不结扎,观察各组大鼠ECG变化, Western blot法检测心肌组织中CaMKⅡ蛋白表达水平,定量PCR法检测心肌组织中CaMKⅡmRNA表达水平。结果模型组大鼠房性早搏、室早、室速、室颤发生率及心律失常积分、心肌组织中CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著高于空白组(P均0.05);柴胡三参胶囊组、参松养心胶囊组、维拉帕米组室速、室颤发生率及心律失常积分、心肌组织中CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著低于模型组(P均0.05);柴胡三参胶囊组及参松养心胶囊组室速、室颤发生率心律失常积分、心肌组织CaMKⅡ蛋白及CaMKⅡmRNA表达水平均显著低于维拉帕米组(P均0.05)。结论柴胡三参胶囊能有效降低室速、室颤发生率,并可减轻心肌缺血性心律失常造成的心肌组织损伤,其可能通过抑制CaMKⅡ蛋白和CaMKⅡmRNA的表达而发挥心肌保护作用。     

柴胡三参胶囊对实验性心律失常保护作用的研究

目的观察柴胡三参胶囊对氯仿、氯化钙、乌头碱致实验性心律失常模型的保护作用。方法将小鼠和大鼠分别随机分为生理盐水组和柴胡三参胶囊小、中、大剂量组,按造模药物的不同予以普萘洛尔、维拉帕米和普罗帕酮作为对照药物。小鼠每组20只,大鼠每组10只,各组预防性给药7 d,末次给药后30 min,分别吸入氯仿、注射氯化钙及乌头碱,记录每组出现室性早搏、室性心动过速、室颤时间及死亡的时间。结果柴胡三参胶囊对氯仿、乌头碱、氯化钙致实验性心律失常模型有很好的保护作用。结论柴胡三参胶囊具有较好的抗实验性心律失常的作用,且有一定的量效关系。     

柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠心肌细胞Ca~(2+)及SERCA2a mRNA表达的影响

目的:研究柴胡三参胶囊对心肌缺血心律失常模型大鼠的防治作用,通过检查指标探讨其可能的作用机制。方法:以结扎大鼠冠状动脉前降支为模型,将60只大鼠分为模型组、假手术组、柴胡三参胶囊小、中、大剂量组和普罗帕酮组,观察大鼠结扎后心电图、心肌细胞Ca2+浓度及SERCA2amRNA表达。结果:柴胡三参胶囊可减少大鼠心肌缺血心律失常的发生,减少心肌细胞内Ca2+超载,增强SERCA2amRNA的表达。结论:柴胡三参胶囊对大鼠心肌缺血心律失常具有明显的保护作用,可能是通过增加SERCA2amRNA活性,从而减少心肌细胞内Ca2+超载。     

参松养心胶囊对糖尿病大鼠心房重构及心律失常的影响

目的探讨参松养心胶囊(人参、麦冬、山茱萸、丹参、酸枣仁、桑寄生等)对糖尿病(DM)大鼠心房重构及心律失常的影响。方法雄性SD大鼠60只,随机均分为正常对照组、糖尿病组和参松养心胶囊组。腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病模型。参松养心胶囊组给予连续6周参松养心胶囊灌胃治疗,糖尿病组和正常对照组则给予等体积生理盐水灌胃。药物干预后,在整体心脏Langendorff灌流条件下行离体电生理研究,记录和测量高位右心房(HRA)、右心耳(RAA)、低位右心房(LRA)及右心房游离壁(RAFW)的单相动作电位(MAP)、有效不应期(ERP),同时给予Burst快速电刺激诱发房性心律失常;Masson染色评价心房纤维化程度;检测血清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平;ELISA法检测血清肿瘤坏因子-α(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平;Western blot检测右心房L型钙电流蛋白(Cav1.2)表达。结果与正常对照组相比,糖尿病组心房各记录位点测量百分之90动作电位时程(APD90%)和ERP均延长,APD90%及ERP离散度、房性心律失常诱发率、Cav1.2表达量、心肌纤维化程度、血清TNF-α、IL-6和MDA水平均增加,而血清SOD和GSH-Px水平降低(P均0.01);与糖尿病组相比,参松养心胶囊组各记录位点APD90%和ERP均缩短、APD90%及ERP离散度、房性心律失常诱发率、Cav1.2表达量、心肌纤维化程度、血清TNF-α、IL-6和MDA水平均降低,而血清SOD和GSH-Px水平升高(P均0.01)。结论参松养心胶囊降低糖尿病大鼠房性心律失常诱发率,其机制可能与参松养心胶囊减轻糖尿病大鼠心房电重构及纤维化程度有关。     

基于网络药理学探讨柴胡三参汤治疗缺血性心律失常的作用机制

目的:探讨柴胡三参汤治疗缺血性心律失常多靶点、多通路的作用机制。方法:在TCMSP平台筛选柴胡三参汤活性成分,在PubChem和Swiss Target Prediction数据库进行靶标预测;在GeneCards数据库检索缺血性心律失常的靶点;构建韦恩图得到药物与疾病共同靶点;在STRING构建蛋白互作网络图(PPI);在Cytoscape软件得到各靶点的degree值,建立簇状条形图;进行GO生物功能注释和KEGG通路富集分析。结果:本研究共挖掘到柴胡三参汤215种活性成分及1319个作用靶点、疾病靶点120个、药物-疾病共同靶点43个,共同靶点主要富集在221个生物过程、14条信号通路上。结论:柴胡三参汤可能主要是通过调节白蛋白(ALB)、白细胞介素-6(IL-6)、AKT丝氨酸/苏氨酸激酶1(AKT1)、一氧化氮合成酶3(NOS3)、肿瘤坏死因子(TNF)、血管紧张素I转化酶(ACE)、Serpin家族E成员1(SERPINE1)、激肽原1(KNG1)等靶点,调控钙、Toll样受体、细胞凋亡、mTOR、VEGF等信号通路,发挥调控细胞凋亡、抑制炎症反应、免疫调节、恢复心肌血流、清除自由基等作用治疗缺血性心律失常。     

参龙宁心胶囊对大鼠心肌缺血再灌注心律失常的影响

目的探索参龙宁心胶囊对心肌缺血再灌注损伤所致大鼠心律失常模型的作用。方法将大鼠分为假手术组、模型组、普罗帕酮组及参龙宁心颗粒高、中、低剂量6组,每组10只,除假手术组和模型组外,其余各组分别灌胃给予相应药物。末次给药1 h后采用结扎大鼠冠状动脉前降支引起心肌缺血再灌注致心律失常,记录各组大鼠Ⅱ导联心电图。实验结束后,取心肌组织行HE染色,并测定心肌组织中Na+,K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶,Mg2+-ATP酶的活性,观察各组心律失常发生率及病死率。结果参龙宁心胶囊有稳定QRS间期、PR间期的作用,对抬高的ST段有降低作用;还能显著提高线粒体膜Na+,K+-ATP酶、Ca2+,Mg2+-ATP酶活性,显著降低缺血再灌注心律失常的发生率及病死率,减轻心肌缺血水肿。结论参龙宁心胶囊可能是通过保持缺血-再灌注心肌细胞膜稳定性,改善缺血心肌能量代谢障碍以发挥其抗心律失常作用。     

甘草三参合剂对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞NOS和NO的影响

目的探讨甘草三参合剂抗心律失常的作用机制。方法采用心肌缺血再灌注损伤大鼠模型，连续给药7d后，测定体表ECG，取心肌组织匀浆测试NOS，取心房血测定NO。结果甘草三参合剂能提高总NOS和cNOS活性，降低iNOS活性，使血浆NO的含量提高，与空白对照组和模型组比较有非常显著差异或显著差异（P〈0．01，P〈0．05），与阳性对照组心律平比较无显著差异（P〉0．05）。结论甘草三参合剂可能通过调节心肌细胞NOS活性和NO含量，影响细胞内的代谢活动，稳定心律。     

抗骨增生胶囊对大鼠骨性关节炎的实验研究

目的:探讨抗骨增生胶囊(KGZSJN)对实验性大鼠骨关节炎(OA)的影响.方法:大鼠膝关节腔注射4％木瓜蛋白酶建立0A模型,50只大鼠分为5组,即正常组,模型组,KGZSJN 3个剂量ig给予(0.24,0.48,0.96 g·kg-1).末次注射木瓜蛋白酶1周后,开始给药.6周后处死动物,切取膝关节,进行组织学观察,并检测关节滑膜超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)活性以及血清一氧化氮(N0),一氧化氮合酶(NOS),白介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.结果:KGZSJN可以明显改善OA的膝关节病变;KGZSJN提高关节滑膜SOD的活性,降低关节滑膜MDA水平;KGZSJN降低血清NO,NOS,IL-1β,TNF-α的水平.结论:KGZSJN能有效防治大鼠实验性OA,其效应在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能为提高关节滑膜SOD的活性,降低关节滑膜MDA,抑制血清NO,NOS,IL-1β,TNF-α水平.     

定心方对缺血再灌注心律失常大鼠心肌细胞凋亡的影响

定心方(Dingxin Recipe,DXR)是我校附属南方医院心律失常专科经验方,临床研究表明其对多种心律失常有显著疗效[1]。心肌缺血再灌注损伤(Ischemia reperfusion injury,IRI)后发生的严重心律失常是阻碍缺血心肌从再灌注疗法中获得最佳疗效的主要原因,心肌细胞的凋亡参与了心肌IRI     

柴胡疏肝散对免疫损伤性肝纤维化的防治作用

目的: 探讨柴胡疏肝散对肝纤维化的防治作用. 方法: 70只Wistar大鼠随机分为7组:正常组、病理模型组、秋水仙碱治疗组、柴胡疏肝散低、中、高剂量组、柴胡疏肝散预防组.除正常组外,其余各组均采用猪血清腹腔注射诱发肝纤维化,0.5 mL/只,2次/周,连续10周,5周后即可形成肝纤维化.预防组于造模同时给药(以柴胡疏肝散6.3 g·kg^-1),各治疗组于造模第6周给药,持续至第10周.秋水仙碱治疗组剂量0.5 mL·kg^-1·d^-1,柴胡疏肝散低、中、高剂量组(3.5,6.3,12.6 g·kg^-1·d^-1).用全自动分析法测定各组血清肝功能、放射免疫法测定肝纤维化指标,采用酸性水解法检测肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,并观察病理变化. 结果: 与模型组比较,柴胡疏肝散中剂量组血清丙氨酸转氨酶(ALT),(156.5±3.2) U·L^-1 VS (78.4±4.6) U·L^-1(P<0.01);天冬氨酸转氨酶(AST),(387.4±12.7) U·L^-1 VS (232.5±13.5) U·L^-1(P<0.01);r-谷氨酰转肽酶(GGT),(128.2±4.0) U·L^-1 VS (78.5±4.2) U·L^-1(P<0.01);碱性磷酸酶(ALP),(152.75±5.01) U·L^-1 VS(42.51±4.67) U·L^-1(P<0.01);透明质酸(HA),(337.2±22.1)VS(140.6±21.2) μg·L^-1(P<0.01);PCⅢ(145.31±17.14) μg·L^-1VS(85.5±19.7)μg·L^-1(P<0.05);Ⅳ型胶原(135.1±22.4)VS(88.37±21.09)(P<0.05);层黏连蛋白(LN),(317.5±21.3)VS(148.4±18.4),(P<0.05)含量均显著下降, 肝组织(HYP)(527.2±34.2)VS(346.2±43.1)(P<0.01)含量显著降低. 结论: 柴胡疏肝散有明显的抗肝纤维化作用.     

甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响

目的 研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜钠通道的影响,探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制.方法 用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳记录技术,观察不同浓度的甘松挥发油对钠通道的影响.结果 ①浓度为1,3,5,10,20,100 μg /g甘松挥发油可浓度依赖性地抑制钠电流;②可使心肌细胞钠电流-电压曲线上移,但激活电位、峰电位及反转电位无改变;③使激活曲线向正电位方向变化,V_(1/2)从(-43.65±0.98)mV右移至(-40.25±1.01)mV(n=6,P<0.05);④使失活曲线向负电位方向变化, V_(1/2)从(-100.92±0.68)mV左移至(-111.20±0.86)mV(n=6,P<0.05).结论 甘松挥发油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜钠通道电流,在不同膜电位水平对钠通道电流具有均匀一致的抑制作用;使激活曲线右移,使失活曲线左移.     

针刺预治疗改善缺血性心律失常的机制——抑制心肌细胞内钙振荡的发生

目的:观察电针预治疗对心肌缺血性心律失常以及单个心肌细胞内钙振荡的影响。方法:60只雄性大鼠随机分为假手术组(NC)、缺血再灌组(MIR)、缺血再灌+电针组(EA),每组10只。于造模前连续3 d给予双侧"内关"电针预治疗,电流强度5 mA,频率2/15 Hz,持续电刺激30 min。第3次电针结束后,结扎大鼠冠状动脉左前降支复制在体心肌缺血模型,用低灌流的方法制备离体全心缺血模型,观察各组大鼠心律失常评分,采用InCytPm 2 High Speed细胞内离子检测系统观察单个心肌细胞钙振荡情况。结果:MIR组于再灌注10 min内心律失常发生率较NC组明显升高(P<0.05);EA组心律失常发生率较MIR组明显降低(P<0.05)。NC组心肌细胞很少发生细胞内钙振荡,MIR组的心肌细胞可见频发的钙振荡,两组间比较差异有显著性意义(P<0.01);EA组的心肌细胞发生钙振荡的次数则明显低于MIR组(P<0.01)。结论:电针预治疗具有抗心律失常的作用,其效应可能是通过减少缺血心肌细胞钙振荡的发生来实现的。     

茶黄素对大鼠缺血性脑损伤的预防作用

目的:观察茶黄素对大鼠缺血性脑损伤的预防作用。方法:64只健康成年SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组与茶黄素低、高剂量组。茶黄素低、高剂量组分别ig 20,40 mg·kg-1茶黄素,假手术组和模型组分别ig等体积生理盐水。连续给药7 d后,采用大脑中动脉线栓法(MCAO)复制大鼠实验性脑缺血模型。缺血24 h后,观察大鼠行为并用Longa法进行神经行为学评分。从每组中随机取6只计算大鼠的脑组织含水量,其余10只测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),一氧化氮(NO)水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠出现明显的行为学障碍,脑组织含水量,MDA,NO含量升高,SOD活性降低。与模型组相比,茶黄素低、高剂量组大鼠行为学评分显著提高,脑组织含水量和MDA含量显著降低,SOD活性显著提高,高剂量组NO含量显著降低。结论:茶黄素对大鼠缺血性脑损伤有一定的预防作用。     

柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫大鼠海马Kv4.2及KChIP1通道蛋白表达的影响

目的:观察柴胡疏肝汤对匹罗卡品导致的慢性颞叶癫痫大鼠海马A型钾离子通道电压门控型钾通道4.2(Kv4.2)及钾离子通道相互作用蛋白1(KCh IP1)表达的影响。方法:SPF级Wistar大鼠80只,ip匹罗卡品,经过潜伏期后有自发发作即为成功模型,将成功模型随机分为模型组、钾通道开放剂瑞替加滨组、柴胡疏肝汤低、中、高剂量组,每组10只,另设正常组10只,分别给予瑞替加滨12.5 mg·kg~(~(-1))·d~(~(-1)),柴胡疏肝汤低、中、高剂量2.5,5,10 g·kg~(~(-1))·d~(~(-1)),正常组与模型组对应给予等体积生理盐水,连续干预8周,2次/d。通过视频录像监测系统观察各组癫痫发作次数的变化;通过免疫组化法、蛋白质免疫印迹(Western blot)检测各组大鼠海马Kv4.2通道蛋白和KCh IP1蛋白表达。结果:连续干预8周后,与模型组比较,瑞替加滨、柴胡疏肝汤低中、高剂量组大鼠癫痫发作次数均有不同程度的减少(P0.05,P0.01),而F组发作次数最少(P0.01);与正常组比较,模型组海马区两蛋白的表达均明显降低(P0.05),瑞替加滨、柴胡疏肝汤低中、高剂量组Kv4.2表达较模型组升高(P0.05),其中瑞替加滨组与柴胡疏肝汤低高剂量组表达量相近。瑞替加滨、柴胡疏肝汤低高剂量组海马KCh IP1的表达也较模型组升高(P0.05)。结论:柴胡疏肝汤中、高剂量能减少癫痫发作次数,其可能的机制是上调Kv4.2通道蛋白和KCh IP1蛋白表达。     

加减柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠急性应激反应的影响

目的：观察加减柴胡加龙骨牡蛎汤对急性束缚应激大鼠旷场行为和血浆促肾上腺皮质激素的影响。方法：采用大鼠急性束缚应激动物模型，在应激前用两种不同浓度的加减柴胡加龙骨牡蛎汤胃饲1周，观察大鼠应激后旷场行为和血浆促肾上腺皮质激素含量的改变，并与对照组比较。结果：与正常对照组相比，应激大鼠在旷场中的穿行格数和直立次数明显增加，血浆促肾上腺皮质激素浓度显著升高，而高浓度加减柴胡加龙骨牡蛎汤，对此反应有抑制作用。结论：加减柴胡加龙骨牡蛎汤对急性束缚应激大鼠的心理行为反应和生理反应具有调节作用。