青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎兔软骨和滑膜组织形态学及基质金属蛋白酶-13和软骨寡聚基质蛋白的影响

目的观察青藤碱关节腔注射对膝骨关节炎模型兔关节软骨和滑膜组织形态学及血清和关节液中基质金属蛋白酶(MMP)-13和软骨寡聚基质蛋白(COMP)含量的影响,探讨青藤碱治疗膝骨关节炎的部分作用机制。方法 38只新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、透明质酸钠组和青藤碱组。空白组不予任何处理,模型组、透明质酸钠组和青藤碱组通过木瓜蛋白酶关节腔注射法诱导膝骨关节炎模型后,分别用生理盐水、透明质酸钠和青藤碱干预。5周后取关节软骨及滑膜HE染色并进行组织学评分,ELISA检测血清及关节液中MMP-13和COMP的含量。结果模型组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著高于空白组,青藤碱组软骨Mankin's评分和滑膜组织病理学评分显著低于模型组(P0.01);模型组血清及关节液中MMP-13和COMP含量较空白组显著升高(P0.01);青藤碱组血清、关节液中MMP-13含量较模型组显著降低,关节液中COMP含量较模型组降低(P0.05,P0.01)。结论青藤碱具有改善滑膜炎症、延缓关节软骨退变进程的作用。     

青藤碱对兔膝骨关节炎模型软骨Toll样受体2、4及髓样分化因子88表达的影响

目的观察不同剂量青藤碱对兔膝骨关节炎模型关节软骨中Toll样受体(TLR)2、4和髓样分化因子88(My D88)表达的影响,探讨其相关作用机制。方法采用Hulth法建立膝骨关节炎模型。实验兔随机分为空白组、模型组和青藤碱低、中、高剂量组,空白组不予任何处理,模型组和青藤碱低、中、高剂量组膝关节腔分别注射生理盐水和0.2 mL(5 mg)、0.35 mL(8.75 mg)、0.5 mL(12.5 mg)青藤碱,共干预10次。实时荧光定量PCR和Western blot检测关节软骨TLR2、TLR4和My D88的mRNA和蛋白表达。结果模型组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达较空白组均显著升高(P0.01);与模型组比较,青藤碱中、高剂量组TLR2、TLR4、My D88的mRNA和蛋白表达均显著下调(P0.05,P0.01)。结论青藤碱可通过下调TLR/My D88通路中关键分子的表达抑制兔膝骨性关节炎软骨免疫反应。     

青藤碱对骨关节炎软骨细胞增殖和炎症的影响*

目的：明确青藤碱对OA软骨细胞增殖和炎症的影响并探究其作用机制。方法：采用10ng/mL白介素1β（IL-1β）诱导软骨细胞建立骨关节炎软骨细胞损伤模型,加入不同浓度的青藤碱处理细胞;采用CCK-8 检测细胞增殖能力;采用ELISA检测IL-6、TNF-α 的水平;采用Western blot 检测IL-6、TNF-α、Wnt 和β-catenin 蛋白的表达量;采用qRT-PCR 检测IL-6、TNF-α、Wnt 和β-catenin表达量。结果：不同浓度青藤碱均可逆转IL-1β诱导导致的软骨细胞增殖活性下降（P＜0.05）,但组间比较无明显差异（P＞0.05）;不同浓度青藤碱还可下调IL-6、TNF-α 炎症因子水平,低、高浓度青藤碱下调更显著（P＜0.05）,但低、高浓度组间比较无明显差异（P＞0.05）;低浓度青藤碱可降低软骨细胞中IL-6、TNF-α 的蛋白和基因表达水平,还可下调Wnt 和β-catenin 蛋白和基因表达,差异有统计学意义（P＜0.05）;但中、高浓度青藤碱无明显降低IL-6、TNF-α、Wnt 和β-catenin 的蛋白和基因表达,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：低浓度青藤碱可促进软骨细胞增殖并抑制OA软骨细胞的炎症,部分可能与调控Wnt / β-catenin 信号通路有关。     

马钱子总碱对兔膝骨关节炎模型软骨损伤修复作用及机制

目的探讨马钱子总碱对兔膝骨Hulth-Telhag关节炎模型的作用及机制。方法新西兰兔随机分为正常对照组,模型组,假手术组,马钱子总碱高、中、低剂量组,玻璃酸钠组,每组8只。除正常对照组外,其余各组均以Hulth-Telhag方法造模。造模8周后,马钱子总碱高、中、低剂量组分别给予兔每个膝关节腔注射0.3、0.2、0.1mL马钱子总碱注射液,玻璃酸钠组给予兔每个膝关节腔注射0.2mL玻璃酸钠,每周2次,连续用药5周。正常对照组、模型组及假手术组常规饲养,无其他特殊处理。停药1周后光镜观察关节软骨病理改变和Mankin′s评分,血液流变仪检测全血黏度(低切、中切、高切)及血浆黏度,ELISA检测关节液NO、SOD、过氧化脂质(LPO)及尿液吡啶酚(PYD)含量。结果与正常对照组比较,模型组Mankin′s评分、全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD升高(P0.05),SOD降低(P0.05)。与模型组比较,马钱子总碱高、中剂量组及玻璃酸钠组Mankin′s评分降低(P0.05);各给药组全血黏度、血浆黏度、NO、LPO及PYD降低(P0.05),SOD升高(P0.05)。马钱子总碱中剂量组较低剂量组中、高切变率全血黏度、SOD升高(P0.05),NO、LPO及PYD降低(P0.05);马钱子总碱高剂量组较中剂量组全血黏度、血浆黏度升高(P0.05),NO、LPO及PYD降低(P0.05),SOD升高(P0.05)。与玻璃酸钠组比较,马钱子总碱低剂量组Mankin′s评分、NO、LPO及PYD升高(P0.05),SOD降低(P0.05);马钱子总碱中剂量组Mankin′s评分、SOD降低(P0.05),NO、LPO及PYD升高(P0.05);马钱子总碱高剂量组Mankin′s评分、全血黏度及血浆黏度升高(P0.05)。结论马钱子总碱对骨关节炎的软骨损伤具有修复作用,其机制主要与通过SOD途径抑制NO介导的软骨细胞凋亡有关,还与改善软骨代谢有关。     

止痛健骨方对兔膝骨关节炎模型滑膜显微结构的影响

目的观察止痛健骨方对兔膝骨关节炎模型滑膜显微结构的影响。方法将72只白兔随机分为正常对照组、模型对照组、止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组,每组各18只。除正常对照组外,采用木瓜蛋白酶制备兔膝骨关节炎模型。止痛健骨低剂量、高剂量组分别给与止痛健骨方低剂量、高剂量药物灌胃,正常对照组和模型对照组则给与生理盐水灌胃。在模型验证、实验灌胃第4周、第8周三个时间点,各组随机选择6只白兔,观察膝关节滑膜显微结构变化,进行评分。结果在实验干预前、实验干预第4周、第8周,与正常对照组比较,模型对照组、止痛健骨低剂量组、止痛健骨高剂量组滑膜病理评分均上升,差异有统计学意义(P 0. 05)。与模型对照组比较,止痛健骨低剂量组、高剂量组在第4周、第8周滑膜病理评分均下降,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论止痛健骨方能改善兔KOA模型滑膜显微结构,减少滑膜病理评分。     

龙鳖胶囊对膝骨关节炎大鼠软骨和滑膜病理的影响

目的观察龙鳖胶囊对膝骨关节炎大鼠软骨和滑膜病理的影响。方法建立膝骨关节炎大鼠模型,于造模后开始每天给予低、中、高剂量的龙鳖胶囊灌胃(0.03125、0.06250、0.09375 g/kg),连续4周,取膝关节制成组织切片,HE染色观察光镜下关节软骨、滑膜的一般形态,并对滑膜组织的病理学进行评分,Masson染色观察光镜下关节软骨的一般形态,并对关节软骨进行Mankin's评分。结果给药2、4周后,龙鳖低、中、高剂量组的软骨结构破坏程度和滑膜炎症程度均较造模组轻;龙鳖低、中、高剂量组的膝关节滑膜组织病理评分值均低于造模组(P0.01)。给药4周后,龙鳖中剂量组的膝关节滑膜组织病理评分值与龙鳖高剂量组比较,差异无统计学意义(P0.05)。给药2、4周后,龙鳖低、中、高剂量组的膝关节软骨Mankin's评分值均低于造模组(P0.01),同期龙鳖低、中、高剂量组的膝关节软骨Mankin's评分值组间两两比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论龙鳖胶囊可改善膝骨关节炎大鼠膝关节软骨和滑膜形态,具有减轻滑膜炎症、改善软骨退变、保护软骨的作用。     

针刀干预对膝骨关节炎兔关节腔内压和滑膜血管增生的影响

目的：探讨针刀对于膝骨关节炎(KOA)兔关节腔内压和滑膜血管增生的作用。方法：新西兰雄兔随机分为正常组、模型组、针刀组和电针组,各7只。左后肢膝关节制动6周制备退行性膝骨关节炎模型。正常组、模型组不予干预,针刀组、电针组各干预3周。测量兔关节腔内压,用HE染色法观察兔滑膜形态学,并用Western Blot技术观测兔滑膜中HIF-1α、VEGF蛋白含量。结果：与正常组相比,模型组关节腔内压显著升高（P<0.01）,滑膜HE染色出现血管增生改变,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著升高（P<0.01）;干预结果表明,与模型组相比,针刀组、电针组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减轻,滑膜HIF-1α、VEGF蛋白含量显著降低（P<0.01或P<0.05）;与电针组相比,针刀组关节腔内压显著降低（P<0.01）,滑膜HE染色血管增生减少明显,滑膜VEGF蛋白含量明显降低（P<0.05）,HIF-1α蛋白含量有下降趋势,无统计学差异（P>0.05）。结论：针刀通过降低关节腔内压,进而减少滑膜血管增生,发挥对KOA治疗作用。     

针刀干预对膝骨关节炎兔滑膜纤维化的影响

目的：探讨针刀干预对膝骨关节炎(KOA)兔滑膜纤维化的影响。方法：新西兰兔随机分为空白组、模型组、针刀组、电针组,各8只。采用改良Videman左后肢伸直位固定法制动4周,制备模型。空白、模型组不干预,针刀、电针组各干预3周。测量被动活动范围(PROM);天狼猩红染色观察滑膜胶原沉积的情况;Western Blot法检测膝关节滑膜组织TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达情况。结果：与模型组比较,针刀、电针组PROM明显增大(P＜0.01),针刀组大于电针组(P＜0.05)。与模型组比较,针刀、电针组滑膜组织胶原沉积减轻。模型组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达显著高于正常组(P＜0.01);针刀、电针组可明显抑制TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ的表达(P＜0.01);与电针组比较,针刀组TGF-β1、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白表达明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。结论：针刀通过调控TGF-β1的表达,从而下调α-SMA和COL-Ⅰ的表达,减轻滑膜纤维化达到治疗KOA的目的。     

龙芨消肿膏外敷对兔膝骨关节炎模型滑膜组织的影响

目的研究"广派"伤科名中医余子贞经验方龙芨消肿膏外敷对兔膝骨关节炎模型滑膜组织病理及相关炎性因子表达的影响。方法将60只雄性新西兰大白兔随机分为空白组、模型组、龙芨消肿软膏组(治疗组)和双氯芬酸二乙胺组(对照组),后两组造模成功后分别给予龙芨消肿软膏及双氯芬酸二乙胺外敷2周,进行动物行动评分后处死取材,取膝关节滑膜组织进行组织病理学观察,并用ELISA法测定IL-1、IL-6、LT、TNF-α、MMP-3的表达。结果 (1)与模型组比较,治疗组与对照组均能改善木瓜蛋白酶诱导的膝骨关节炎模型活动情况(P0.05)。(2)与模型组比较,治疗组及对照组均能降低膝骨关节炎模型动物滑膜组织MMP-3、IL-1表达(P0.05,P0.01),且治疗组及对照组两组之间差异无统计学意义(P0.05)。(3)组织病理学方面,与模型组比较,治疗组与对照组均能够改善局部滑膜炎情况(P0.05)。结论龙芨消肿软膏能够改善膝骨关节炎动物活动及疼痛情况,可能通过抑制滑膜增生、减少滑液生成,并通过调控局部相关炎性细胞因子表达发挥作用。     

艾灸对膝骨关节炎模型兔软骨病理学改变及行为学改变的影响

目的:观察艾灸"犊鼻""足三里"穴对膝骨关节炎(KOA)模型兔膝关节软骨病理学及行为学的影响,为艾灸的局部抗炎、镇痛作用提供依据.方法:将40只健康新西兰大耳白兔按随机数字表法分为对照组、模型组、艾灸组、抑制剂组,每组10只.模型组、艾灸组、抑制剂组兔采用注射木瓜蛋白酶法造模,造模成功后,艾灸组、抑制剂组实施干预治疗....     

以改良Hulth法建立兔膝骨性关节炎关节软骨的病理变化

目的：观察以改良Hulth法建立的兔膝骨性关节炎关节软骨的病理变化,以探讨其病变机制。方法：采用改良Hulth法建立兔膝骨性关节炎模型,利用＂测定双足平衡设备＂检测和评价兔膝关节功能变化,肉眼观察兔膝关节大体结构。组织切片苏木精-伊红染色,光镜下观察关节软骨组织结构,应用显微电脑测量软件测量关节软骨厚度。运用TUNEL法检测软骨细胞的凋亡,并应用透射电镜观察关节软骨超微结构的变化。结果：模型组右侧（患侧）膝关节蜷缩、无力,检测显示以左侧后足承重为主。模型组兔膝关节软骨出现退变的表现,软骨细胞过度凋亡,其凋亡指数明显高于正常组（P〈0.05）。模型组膝关节软骨厚度较正常组有明显减小（P〈0.05）。模型组关节软骨超微结构明显受损,软骨细胞出现核固缩,线粒体肿胀,粗面内质网扩张、脱颗粒;软骨基质内胶原纤维断裂溶解,结构模糊。结论：采用改良Hulth法可以成功复制膝骨性关节炎模型,模拟临床膝骨性关节炎的病理变化。     

痹祺胶囊对兔骨关节炎软骨代谢的作用研究

目的：观察痹祺胶囊对骨关节炎软骨代谢的作用。方法：以Hulth法复制兔膝骨关节炎模型,对软骨组织行Mankin标准评分,设置空白组、假手术组,观测各组兔血清及尿液的羟脯氨酸含量,并设痹祺胶囊低、中、高浓度组及西药组以了解其疗效。结果：各治疗组间Mankin标准评分水平无差异,痹祺胶囊各剂量组血清、尿羟脯氨酸含量与模型组比较差异均有显著意义（P〈0.05）。结论：痹祺胶囊可通过促进骨修复或抑制软骨破坏而减低兔骨关节炎模型体内羟脯氨酸含量,对骨关节炎软骨代谢有明确的改善作用。     

山药多糖关节腔注射对兔膝关节骨性关节炎炎症因子及关节软骨代谢的影响

目的:探讨山药多糖关节腔注射对兔膝关节骨性关节炎模型软骨退变的保护机制及抑制炎症因子表达水平的影响,为山药多糖的开发及研究提供相关证据,同时为进一步研究奠定基础.方法:将55只新西兰白兔,用随机数字表法分为5组,每组11只,采用改良Hulth法制备膝关节骨性关节炎兔模型,分别为模型组、山药多糖低、中、高剂量(0.7,1...     

骨刺消巴布剂对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的观察骨刺消巴布剂对兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡和凋亡调控基因bcl-2、bax的影响,并探讨其作用机理。方法选用健康日本大耳白兔40只,随机分为骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组、空白对照组、正常组。Videman固定法进行改良制备兔膝关节骨性关节炎模型,骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组外敷相应药物,空白对照组、正常组不做任何处理,给药5周后处死动物,TUNEL法检测软骨细胞凋亡,免疫组化法检测关节软骨中bcl-2、bax的水平。结果骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组细胞凋亡率明显低于空白对照组（P〈0.05）;bcl-2在骨刺消巴布剂组、奇正消痛贴组中的表达高于空白对照组（P〈0.05）,bax的表达低于空白对照组（P〈0.05）,骨刺消巴布剂组与奇正消痛贴组比较差异无统计学意义。结论骨刺消巴布剂可能是通过上调bcl-2的表达、下调bax的表达来抑制兔膝关节骨性关节炎软骨细胞的过度凋亡,这可能是该药治疗骨性关节炎的机制之一。     

青藤碱对家兔 C-BSA 肾炎模型影响的实验研究

目的：研究青藤碱对慢性肾炎的药理作用。方法：采用C－BSA复制家兔膜性肾小球炎模型,用青藤碱进行实验性治疗。结果：青藤碱能使模型动物尿蛋白、血Cr与BUN、徨环免疫复合物（CIC）、及血与尿中的β2微球蛋白（β2－MG）均明显降低。用青藤碱治疗的动物,肾小球平均直径和肾小球内细胞数低于模型组。结论：青藤碱在减轻肾小球免疫性炎症、改善肾功能方面有较好的作用。     

青藤碱注射液对兔膝骨性关节炎关节液及血清IL-6水平的影响

目的:探讨青藤碱注射液对骨关节炎模型动物的白介素6(IL-6)水平的影响。方法:建立骨关节炎动物模型,将40只模型兔分为4组:青藤碱关节腔注射治疗组(A组)、透明质酸组即关节腔注射组(B组)、模型组(C组)、空白对照组(D组)。A、B组分别注射青藤碱和透明质酸钠,C组注射生理盐水,另取同龄正常兔为正常对照D组,按设计分批处死动物,检测关节液及血清中IL-6的水平。IL-6水平检测采用ELISE(双抗体夹心法)检测。结果:青藤碱注射液能够降低骨关节炎模型动物关节液与血清中IL-6的水平。结论:青藤碱可以通过抑制IL-6的水平对骨关节炎起防治作用。     

丹参加玻璃酸钠对兔膝关节软骨保护的效应与机制研究

目的 通过观察丹参加玻璃酸钠关节内注射,探讨其对兔膝关节软骨的保护效应与机制.方法 通过切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带造成膝OA模型,将80只日本大耳白兔随机分为A组、B组、C组、D组.给药4、8周后处死实验兔,行软骨细胞凋亡率检测.结果 模后第4周、8周,B、C、D三组软骨细胞凋亡率著低于A组(P＜0.01),A、B、C、D组组间软骨细胞凋亡率比较,有显著性差异(P＜0.01);B、C、D组组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05),但D组凋亡率明显小于B、C组.结论 丹参加玻璃酸钠关节内注射,能明显降低兔膝关节软骨的细胞凋亡率,减缓膝关节软骨的退变,对软骨起保护效应.     

海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:探讨海桐皮汤熏蒸对实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法:取45只新西兰大白兔,随机取10只作为正常对照组(A组),其余35只采用Hulth方法造模,1周后取30只元膝关节感染实验兔,随机分为3组(每组10只):并随机分为模型组(B组)、水蒸气熏蒸组(C组)和海桐皮汤熏蒸组(D组)。分别采取相应的处理方法4周后处死取材,采用流式细胞术检测软骨细胞凋亡状况。结果:正常组兔关节软骨细胞凋亡率为18.57%,模型组29.41%,水治疗组和药物治疗组分别为28.26%、21.09%。与正常组相比,模型组、水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与模型组相比水蒸气熏蒸组、海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05);与水蒸气熏蒸组相比海桐皮汤熏蒸组有显著差异(P<0.05)。结论:海桐皮汤熏蒸可显著减少实验性兔膝关节骨性关节炎软骨细胞凋亡,从而延缓关节软骨的退变,促进软骨修复的作用。     

独活寄生汤治疗大鼠膝骨性关节炎软骨病理学分析

目的:通过对大鼠膝骨关节炎模型的关节软骨病理学形态观察,研究独活寄生汤对骨关节炎的治疗效果,探讨其可能的病理学机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组10只,实验组50只,行碘乙酸药物诱导法造模,2周后完成造模,随机选5只处死,以确定造模效果;将其余45只分为模型组15只、西药组10只、中药中剂量组10只、中药高剂量组10只,中药两组予独活寄生汤灌胃,西药组予托珠单抗注射液治疗,模型组分别于第4周、8周时各处死5只,8周后全部处死,在体肉眼观察各组动物关节软骨表面情况,制作病理切片,采用骨性关节炎软骨病理变化Mankin评分标准,评价各组关节软骨病理改变。结果:碘乙酸诱导造模,第2周、4周、8周分别处死,取关节软骨并制作切片,通过肉眼观察及光镜下观察,表现出膝骨关节炎早、中期病理改变。统计分析示:与造模第2周相比,第4、8周评分升高,软骨退行性病变进一步加重。造模第8周,中药中剂量组、中药高剂量组、西药组与模型组相比,评分均显著降低,疗效明显,差别均有统计学意义(P0.01),三组同空白组相比,评分差异明显,差别有统计学意义(P0.01),中药高剂量组较中药中剂量组相比,评分降低,疗效明显,差异有统计学意义(P0.01),但中药组与西药组相比,疗效差异不明显,差别无统计学意义(P0.05)。结论:独活寄生汤能延缓关节软骨的退行性病变,高剂量与托珠单抗注射液作用接近。     

“双固一通”温针灸对实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的:研究"双固一通"温针灸在预防兔膝关节骨性关节炎过程中对兔膝关节软骨细胞凋亡的影响。方法:24只日本大耳白兔随机分为"双固一通"温针灸组、模型组和正常组,每组8只。采用结扎股静脉法建立兔膝骨性关节炎模型,"双固一通"温针灸组在造模开始时采用"双固一通"温针灸法,对关元(CV 4)、足三里(ST 36)、内膝眼(EX-LE4)、犊鼻(ST 35)和阳陵泉(GB 34)等穴进行预防性治疗;正常组不做任何处理,正常喂养。在造模8周后,各组分别通过透射电镜观察兔膝关节软骨细胞的超微结构,TUNEL染色光镜下观察软骨细胞凋亡情况。结果:"双固一通"温针灸组兔膝关节软骨细胞超微结构接近正常组,模型组软骨细胞轮廓不清楚,胞膜坏死崩解,胞浆内细胞器消失,细胞裂解为致密颗粒样物质,细胞固缩、变形,甚至出现核分裂,染色质浓聚;"双固一通"温针灸组和模型组软骨细胞凋亡指数高于正常组(P<0.01),"双固一通"温针灸组软骨细胞凋亡指数低于模型组(P<0.01)。结论:"双固一通"温针灸可抑制实验性兔膝骨性关节炎软骨细胞过度凋亡,从而对兔膝骨性关节炎起防治作用。