急性胰腺炎胰腺外器官损伤的实验研究

探求急性胰腺炎胰腺外器官损伤模型 ,并研究急性胰腺炎胰腺外器官损伤的扩展。方法 :用急性出血坏死性胰腺炎大鼠模型 ,分组观察其胰腺外重要器官的功能及组织结构变化。结果 :低位胰胆管结扎组出现急性出血坏死性胰腺炎 ,表现为高血淀粉酶活性、胰腺水肿、出血、腺细胞坏死和脂肪坏死 ;伴随血淀粉酶活性在 2 4h达到峰值 ,发现肾脏的功能及结构损伤 ,表现为尿量减少、血尿素氮和血肌酐增高 ,以及电镜下近曲小管损伤。没有发现胰腺炎有关的肺损伤。结论 :该模型具有一过性肾损害 ,可用于急性胰腺炎早期肾损害的病理学及治疗学研究。     

细胞粘附分子LFA-1,MAC-1在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型中白细胞表面表达的动态研究及其意义

目的检测整合素家族细胞粘附分子LFA-1,Mac-1在大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型血中白细胞表面表达的动态变化,探讨其在急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤中的作用.方法应用流式细胞仪,于多个时相点检测LFA-1,Mac-1在SD大鼠急性坏死性胰腺炎合并多器官损伤模型血中白细胞表面表达的变化.结果LFA-1,Mac-1在炎症组中各个时相点的表达均明显高于对照组(P＜0.05或P＜0.01).结论整合素家族细胞粘附分子LFA-1,Mac-1参与了急性坏死性胰腺炎继发多器官功能损伤的过程.     

内毒素在大鼠急性出血坏死性胰腺炎发病机制中的作用

采用牛磺胆酸钠复制大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型，动态观察血浆内毒素含量变化。结果发现：随着急性出血坏死性胰腺炎病程的延长，胰腺病理改变加剧，血浆内毒素逐渐升高。提示：内毒素是参与急性出血坏死性胰腺炎病理机制的重要炎性介质之一。     

姜黄素对重症急性胰腺炎COX-2表达的影响

目的 探讨姜黄素对急性出血坏死性胰腺炎环氧化酶-2(COX-2)表达的影响.方法 将SD大鼠随机分成3组:假手术(SO)组、急性出血坏死性胰腺炎模型组(AHNP)、姜黄素预处理(Cur)组.Cur组在造模前2 h经腹腔注射姜黄素溶液(200 mg/kg),SO组和AHNP组注射等剂量的二甲基亚砜(DMSO)溶液.AHNP组和Cur组用5%(50 g/L)牛磺黄胆酸钠0.1 mL/100 g胰胆管逆行注射建立急性出血坏死性胰腺炎模型,SO组大鼠开腹后翻动胰腺3次即关腹.3组大鼠分别于术后3、6、12 h处死大鼠,每时间点各6只大鼠,观察胰腺组织病理学改变、胰腺组织COX-2表达和血清淀粉酶的变化.结果 AHNP组胰腺组织 COX-2 表达和胰腺损伤评分进行性增加,Cur组在各时相点胰腺损伤的程度均显著减轻,COX-2 的表达水平下降(P<0.05).结论 COX-2 参与了急性胰腺炎的发生和发展,姜黄素可能通过抑制COX-2表达,发挥对急性出血坏死性胰腺炎的保护作用.     

大黄丹参对大鼠实验性SAP靶器官保护作用研究

目的：观察中药大黄、丹参注射液对重症急性胰腺炎大鼠治疗前后器官功能、胰腺组织的影响。方法：将实验大鼠分为正常组、模型组、大黄丹参组三组，以Aho’s胰胆管激活剂逆行注射法诱导大鼠重症急性胰腺炎模型。并于大黄、丹参注射液治疗后第24小时麻醉大鼠，抽血测血常规、肝肾功能，血清、腹水淀粉酶，进行大体解剖，观察胰腺病理组织学改变。结果：大黄丹参组血常规、肝肾功能，血清、腹水淀粉酶较模型组明显降低，胰腺间质水肿、充血和炎性细胞浸润较模型组减轻。结论：大黄、丹参联合应用可改善重症急性胰腺炎大鼠的胰腺组织和器官功能。     

表皮生长因子对胰腺炎相关蛋白基因表达及胰腺炎的影响

目的 研究表皮生长因子（ＥＧＦ）增强全胃肠外营养（ＴＰＮ）对急性坏死性胰腺炎大鼠胰腺炎相关蛋白（ＰＡＰ）基因表达的影响及其对损伤胰腺细胞的作用。方法 制作大鼠急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）模型,随机分为：对照组;ＡＮＰ组;ＡＮＰ＋ＴＰＮ组;ＡＮＰ＋ＴＰＮ＋ＥＧＦ组。２４ｈ后动物灌注固定,胰腺组织切片,采用原位杂交组织化学技术结合计算机图像分析,测定胰腺细胞ＰＡＰ－ｍＲＮＡ水平。结果 ＴＰＮ组ＰＡＰ－ｍ     

川芎嗪对急性坏死性胰腺炎大鼠胃粘膜的保护作用

目的探讨微循环障碍在急性坏死性胰腺炎大鼠中的作用,同时观察川芎嗪对急性坏死性胰腺炎胃粘膜损伤的干预效应.方法SD大鼠192只,随机分对照组(C)、胰腺炎组(P)、川芎嗪治疗组(T).经大鼠胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠(4m1·kg-1)制作急性坏死性胰腺炎模型,C组仅胰腺被膜下注射等量生理盐水,T组经股静脉注射0.6%川芎嗪(10mi·kg-1).采用放射性生物微球技术在制模后0.5、2、6及12h分别测定胃的血流量.另8只用于胰腺、胃的病理评分并观察胃组织的MPO活性.结果P组与C组相比,P组各时相胃的血流量均明显降低(P＜0.01),各时相病理改变明显加重,时间越长,损害越重;胃组织MPO活性明显增加(P＜0.01).T组与P组相比,T组2h起胃血流量较P组均明显降低(P＜0.01),各时相病理改变及白细胞浸润明显减轻,组织MPO活性明显下降(P＜0.05或P＜0.01).胃组织血流量与胃组织MPO活性间呈显著负相关,与胃组织损伤程度呈显著负相关.结论微循环障碍在急性坏死性胰腺炎时胃组织损伤中起着重要的作用.川芎嗪可以改善微循环,减轻胰腺及胃粘膜损害.     

生长抑素对大鼠坏死性胰腺炎腺泡细胞凋亡的影响

目的: 研究生长抑素对急性坏死性胰腺炎(ANP)胰腺腺泡细胞凋亡的影响.方法: 将90只SD大鼠随机分为3组:假手术组、坏死组和生长抑素治疗组,用改良十二指肠闭襻法诱导急性坏死性胰腺炎模型.分别切取3组大鼠的胰腺标本行病理组织学检查,荧光显微镜下观察细胞凋亡及流式细胞光度术定量观察凋亡情况.结果: 坏死组组凋亡少见,以细胞坏死为主;生长抑素治疗后可减轻胰腺腺泡细胞的坏死,增加其凋亡的发生.结论: 胰腺炎腺泡细胞中存在细胞凋亡现象,细胞凋亡与坏死呈负相关,生长抑素可减轻胰腺炎病理损害促进其凋亡发生.     

大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型制备方法的改进

目的 探讨大鼠急性出血坏死性胰腺炎模型制备方法的改进.方法 36只健康SD大鼠随机分为急性出血坏死性胰腺炎组(AHNP组)18只和假手术组18只.AHNP组应用硬膜外导管经十二指肠乳头逆行胰胆管穿刺注射5%牛磺胆酸钠诱导急性出血坏死性胰腺炎;使用创面封闭胶封闭穿刺孔.两组分别于术后3、6、12 h检测腹水量、血清淀粉酶活性,观察胰腺大体及光镜下病理改变并评分.结果 AHNP组胰腺呈出血坏死性改变,3、6、12 h腹水量,血清淀粉酶活性,大体及组织学评分均显著高于假手术组(P＜0.05).结论 联合应用硬膜外导管和创面封闭胶对逆行胰胆管穿刺注射法加以改进,具有创伤小,操作简单,诱导成功率高,模型稳定性好等优点,是一种较理想模型制备方法.     

PPARγ对实验性胰腺炎大鼠多器官功能的作用

目的 研究PPARγ对实验性胰腺炎大鼠多器官功能的作用.方法 SD雄性大鼠随机分为4组,每组10只.①正常对照组;②胰腺炎模型组采用胆胰管注射质量分数4%的牛磺胆酸钠,剂量为1.0 ml/kg,制成胰腺炎模型;③PPARγ配体罗格列酮处理组于造模成功后,静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg;④PPARγ/拮抗剂GW9662处理组于造模成功后,静脉注射GW9662 0.3 mg/kg,10min后再次静脉注射罗格列酮0.3 mg/kg.各组于实验6h后采集血样并处死大鼠,检测各组胰腺组织病理学评分及门静脉血内毒素含量,测定各组反应器官功能的生化指标.结果 胰腺炎模型组和GW9662处理组大鼠在胰腺组织病理学评分、门静脉内毒素含量方面及各器官功能生化指标均比对照组及罗格列酮处理组明显升高(P<0.05).结论 PPARγ的配体罗格列酮能减轻实验性胰腺炎大鼠器官功能损伤,对实验性胰腺炎大鼠多器官功能有保护作用.     

实验性胰腺炎小鼠小肠隐凹素-4 mRNA表达变化的研究

目的检测实验性胰腺炎时小鼠小肠隐凹素-4 mRNA表达的变化,从分子水平上探讨胰腺炎时肠粘膜屏障受损的机制.方法 36只ICR小鼠随机分成6组,每组6只.实验组(A～E组)腹腔注射雨蛙素,50 μg/(kg*h),共7次,于首次注射后第9、18、24、48和72 h处死;对照组(F组)注射相应体积的生理盐水,于第18 h处死.取血送淀粉酶检查,胰腺送病理检查.用UVI软件分析PCR产物凝胶图像以检测各组隐凹素-4 mRNA的表达变化.结果大剂量雨蛙素腹腔注射导致了ICR小鼠急性坏死性胰腺炎,胰腺病理损害以首次注射后第18 h最明显.第9 h隐凹素-4 mRNA表达轻微下调,18 h下调最明显(P<0.05),24 h后逐渐升高,72 h接近正常水平.结论隐凹素-4的获得性缺陷可能是胰腺炎时发生肠道细菌移位的重要原因之一.     

肿瘤坏死因子α抗体对大鼠胰性脑病保护作用的实验研究

目的探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)抗体在大鼠急性出血坏死性胰腺炎时对脑组织损害的保护作用,从而为胰性脑病的治疗提供实验依据.方法将60只SD大鼠随机分为正常对照组,急性出血坏死性胰腺炎诱导组和TNFα抗体处理组,经胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸建立大鼠ANP模型,测定血的TNFα水平,12 h后处死动物,检查胰腺组织形态学变化,并检测脑组织含水量、脑微血管内白细胞聚集及附壁现象.结果经TNFα抗体处理后,血清中TNFα水平、脑组织含水量、脑微血管内白细胞聚集及附壁现象显著降低(P＜0.05),胰腺组织病理损害程度减轻.结论TNFα抗体可以减轻急性出血坏死性胰腺炎时脑损害的发生和发展.     

低分子肝素对急性坏死性胰腺炎并肝损伤P-选择素和E-选择素表达的影响

目的研究低分子肝素（LWMH）对大鼠急性坏死性胰腺炎（ANP）并肝损伤中P-选择素和E-选择素表达的影响及其对急性坏死性胰腺炎的保护作用。方法将96只雄性SD大鼠随机分为三个组：对照组（C组,n=32）、急性坏死性胰腺炎组（A组,n=32）、低分子肝素干预组（G组,n=32）。A组以1．5％脱氧胆酸钠溶液逆行注入胰胆管建立急性坏死性胰腺炎模型（1ml／kg）,G组于造模后给予皮下注射低分子肝素（10U／100g）,C组仅翻动胰腺后关腹。各组分别于造模后6、12、24、48h四个时点分批处死大鼠,测定血清淀粉酶水平;ELISA检测血清TNF-α、IL-6水平,取胰腺及肝脏组织光镜下进行病理学评分;RT-PCR检测肝脏P-选择素和E-选择素mRNA表达。结果三组间和不同时点之间各项观察指标比较均有统计学意义（P〈0．01）,A组6、12、24、48h各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF-α、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较C组相应时点显著升高（P〈0．05）;G组各时点胰腺及肝脏病理评分、血清淀粉酶及TNF—α、IL-6水平,P-选择素和E-选择素mRNA表达均较A组对应时点显著降低（P〈0．05）。结论P-选择素和E-选择素在急性坏死性胰腺炎并肝损伤时的表达可能与病变严重程度有关;LWMH可能是通过下调P-选择素和E-选择素表达减轻急性坏死性胰腺炎的胰腺和肝脏病变。     

JAM-C单抗对实验性急性胰腺炎肾损伤的治疗作用

目的观察连接黏附分子-C(JAM-C)单克隆抗体对小鼠急性坏死性胰腺炎肾损伤的保护作用。方法采用雨蛙素和内毒素(LPS)联合腹部注射的方法建立小鼠重症急性胰腺炎(ANP)模型。(1)生理盐水对照组(NS组):小鼠给予腹部注射无菌生理盐水(10mL/kg)6次,每次间隔1h。(2)坏死性胰腺炎(ANP)模型组(ANP组):小鼠给予腹部注射雨蛙素(50μg/kg)6次,每次间隔1h,末次注射后立即给予腹部注射内毒素10mg/kg。(3)抗小鼠JAM-C单抗(anti-JAM-C mAb)处理组(anti-JAM-C mAb组):小鼠给予腹部注射雨蛙素(50μg/kg)6次,每次间隔1h,在首次注射30min时予每只小鼠腹部注射anti-JAM-C mAb0.3mL(300μg),末次雨蛙素注射后予腹部注射内毒素10mg/kg。在末次注射3h后,收集血液检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、淀粉酶(AMY)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,收集肾和胰腺组织进行病理评分。结果 anti-JAM-C mAb组胰腺和肾脏病理评分显示,BUN、Cr、AMY和TNF-α水平均明显低于ANP组。结论 anti-JAM-C mAb能有效缓解小鼠ANP模型的肾损伤。     

肾脏移植术后巨细胞病毒感染并发急性胰腺炎的临床分析

目的研究治疗肾脏移植术后巨细胞病毒感染并发急性胰腺炎的方法。方法顾性分析了5例肾脏移植术后急性胰腺炎病人的临床资料。结果移植术后急性胰腺炎的发病率为2．3％（5／217）。5例均合并活动性巨细胞病毒感染。其中3例同时伴有高脂血症，2例出现肝功能异常。5例患者中，治愈3例，死亡2例。在死亡的2例中，1例为巨细胞病毒性间质性肺炎呼吸衰竭合并出血坏死性胰腺炎，另1例为活动性人巨噬细胞病毒感染爆发性肝功能衰竭合并出血坏死性胰腺炎。结论脏移植术后急性胰腺炎可以由多种因素诱发．但与巨细胞病毒感染的关系更为密切，早期诊断和治疗是降低死亡率的关键。     

血必净注射液对烫伤大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1和急性肾损伤的干预效果

目的探讨烫伤大鼠肾组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的变化规律,并观察血必净注射液(简称血必净)对烫伤大鼠肾脏HMGB1及急性肾损伤的可能干预效果。方法采用大鼠30%总体表面积Ⅲ度烫伤模型,78只动物随机分为假伤组(n=18)、烫伤组(n=30)和血必净组(n=30),分别于伤后8、24、72h活杀取材。采用逆转录聚合酶链反应检测肾组织HMGB1mRNA表达、蛋白免疫印迹及免疫组织化学法检测肾组织HMGB1蛋白表达;同时用全自动生化分析仪测定血清肌酐(Cr)水平,采用苏木素-伊红(HE)染色、光镜下观察肾组织病理改变。结果与假伤组比较,烫伤组肾组织HMGB1基因和蛋白表达于伤后8、24、72h显著增强(P<0.05,P<0.01),血清Cr水平于伤后24、72h显著增高(P<0.05,P<0.01)。给予血必净治疗后24、72h动物肾组织HMGB1基因和蛋白表达均显著抑制(P<0.05,P<0.01),血清Cr水平亦显著降低(P<0.05)。光镜下观察烫伤组肾组织大量炎细胞浸润,其中以24h最重,血必净组24、72h病理形态改变则明显减轻。结论HMGB1作为晚期炎症因子参与严重烫伤后肾脏炎症反应及组织损害的病理生理过程,血必净治疗可显著下调肾组织HMGB1合成与释放,并减轻烫伤所致急性肾损伤。     

丹参对急性坏死性胰腺炎肾脏损害的干预作用

目的探讨丹参对急性坏死性胰腺炎(acutenecrotizingpancreatitis,ANP)肾损害的干预作用。方法SD大鼠96只,随机分为对照组(C)、胰腺炎组(P)和治疗组(T)。5%牛磺胆酸钠胰腺被膜下均匀注射,制作ANP模型[1]。观察制模后2h及12h各组肾组织中性粒细胞浸润情况及肾功能和肾组织学改变。结果与C组对比,P组在制模后2h及12h肾组织学损害及肾组织中白细胞浸润明显增加(P<0001)。与P组对比,制模后2hT组肾组织中中性粒细胞减少(P<0001),12h后肾组织中性粒细胞浸润明显减少(P<0001),2h及12h肾组织学损害均明显减轻(P<005)。结论丹参对ANP肾损害具有一定的干预作用。     

重组人促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用

目的探讨重组人促红细胞生成素（rhEPO）对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤的保护作用。方法 SD大鼠40只,随机分为空白对照组、实验对照组、模型组、rhEPO 1组[造模前3天注射rhEPO 3 000 IU/（kg.d）]、rhEPO 2组[造模前3天注射rhEPO 600 IU/（kg.d）],观察造模前、造模后48、72 h血清肌酐（Scr）及尿素氮（BUN）的变化,观察肾脏病理标本。结果模型组注射对比剂后48 h和72 h Scr均较注射前升高大于25%;与空白对照组比较,模型组、rhEPO1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均明显上升（P〈0.05）;与模型组比较,rhEPO 1组、rhEPO 2组造影后48、72 h Scr、BUN均有明显下降（P〈0.05）,肾组织损害较模型组明显减轻。与rhEPO 2组比较,rhEPO 1组Scr、BUN降低更明显（P〈0.05）。结论重组促红细胞生成素对对比剂诱导的大鼠急性肾损伤有保护作用,大剂量rhEPO保护作用优于小剂量。     

肾脏移植术后巨细胞病毒感染并发急性胰腺炎的临床分析

目的 研究治疗肾脏移植术后巨细胞病毒感染并发急性胰腺炎的方法。方法 顾性分析了5例肾脏移植术后急性胰腺炎病人的临床资料。结果 移植术后急性胰腺炎的发病率为2.3%(5/217)。5例均合并活动性巨细胞病毒感染。其中3例同时伴有高脂血症,2例出现肝功能异常。5例患者中,治愈3例,死亡2例。在死亡的2例中,1例为巨细胞病毒性间质性肺炎呼吸衰竭合并出血坏死性胰腺炎,另1例为活动性人巨噬细胞病毒感染爆发性肝功能衰竭合并出血坏死性胰腺炎。结论 脏移植术后急性胰腺炎可以由多种因素诱发,但与巨细胞病毒感染的关系更为密切,早期诊断和治疗是降低死亡率的关键。     

顺行穿刺注射牛磺胆酸钠制作大鼠重症胰腺炎模型

目的探讨制备大鼠重症胰腺炎模型方法的改进。方法将36只健康sD大鼠随机分为模型组（n=18）和假手术组（n=18）,在胰胆管的近端（肝总管）用细针顺行穿刺胰胆管,注入4％牛磺胆酸钠,诱导重症急性胰腺炎动物模型,创面封闭胶封闭穿刺孔;两组均在模型诱导3、6、12h后检测腹水量及血淀粉酶,观察胰腺组织形态变化,光镜下行胰腺病变程度评分。结果模型组在模型诱导后腹水量（8．52±1．05）ml、血淀粉酶（5247．17±547．07）u／L、胰腺组织学评分（13．60±3．92）较假手术组腹水量（1．21±0．32）ml、血淀粉酶（1289．5±176．67）u／L、胰腺组织学评分（0．83±0．58）在各时间点均明显升高（P〈0．05）。结论此法损伤小,实验器材易于获取,操作简单,不会损伤胰腺和发生胆漏,可重复性好,模型稳定,成功率高,是较理想的重症胰腺炎模型制备方法。