子宫内膜异位症中子宫内膜间质细胞血管生成能力的研究

目的:研究子宫内膜异位症(EMs)患者子宫内膜间质细胞环氧化酶2(COX-2)、前列腺素E2(PGE2)、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白分泌及m RNA表达。方法:收集EMs患者的在位及异位病灶子宫内膜组织和子宫肌瘤患者在位内膜组织,原代消化培养子宫内膜细胞,取纯化的子宫内膜间质细胞进行研究,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白的分泌,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测COX-2、PGE2和VEGF的m RNA的表达。结果:EMs和子宫肌瘤患者分泌期在位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达与增殖期比较差异均无统计学意义(P0.05);EMs患者在位及异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比子宫肌瘤患者在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);EMs患者异位的子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF蛋白分泌及m RNA表达比其在位细胞均升高,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞COX-2、PGE2、VEGF的蛋白分泌及m RNA表达均升高,且异位病灶间质细胞升高更明显,提示在EMs发病中异位病灶子宫内膜间质细胞血管生成能力更强。     

囊性纤维化跨膜转导调节因子在子宫内膜中表达的变化及其意义

目的　探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子 (CFTR)在人月经周期子宫内膜中表达的变化及其意义。方法　采用免疫组化、免疫印迹、原位杂交方法检测人月经周期子宫内膜中CFTR的蛋白及mRNA的分布与含量变化。结果　 (1)CFTR仅在子宫内膜腺上皮细胞中表达 ,增生期晚期、分泌期、月经期内膜腺上皮细胞中均富含CFTR ,与增生期早期相比 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;免疫印迹法证实 ,增生期晚期、分泌期内膜存在特异性的、相对分子质量为 170 0 0 0的CFTR条带 ;(2 )CFTRmRNA在增生期晚期和分泌期早期子宫内膜中含量最高 ,与增生期早期、分泌期晚期相比 ,差异有显著性 (P<0 0 5 )。结论　人月经周期子宫内膜腺上皮细胞中存在CFTRmRNA和蛋白的表达 ,含量均随月经周期而变化 ;增生期晚期CFTR表达的增强。分泌期CFTR的表达及局部调节可能参与人类胚泡着床的调控。     

PTEN与bcl-2、FasL在异位子宫内膜的表达及临床意义

目的:研究PTEN与bcl-2、FasL的表达与异位子宫内膜的关系。方法:用免疫组化法检测PTEN与bcl-2、FasL在正常子宫内膜,异位内膜及在位内膜的表达。结果:(1)正常子宫内膜组:bcl-2在增生期的表达显著高于分泌期(P0.05),FasL及PTEN在增生期的表达显著低于分泌期(P0.05),即三者在正常子宫内膜细胞的表达均有明显周期性;(2)异位内膜组(OEM及AM):bcl-2、FasL及PTEN的表达在增生期和分泌期的表达均无统计学差异(P0.05)。即在异位子宫内膜中的bcl-2、FasL及PTEN呈持续表达且失去周期性;(3)在位内膜组(OEM及AM):与正常子宫内膜组相似,三者在增生期和分泌期的表达均有差异,其中,FasL与PTEN在分泌期的表达高于增生期,bcl-2在增生期的表达则高于分泌期,差异均有统计学意义(P0.05);(4)3组内膜中的表达比较:FasL及bcl-2在异位内膜组的表达均高于在位内膜组及正常子宫内膜(P0.05),PTEN在异位内膜组的表达均低于在位内膜组及正常子宫内膜(P0.05);FasL、bcl-2及PTEN在正常内膜组的表达与在位内膜组无统计学差异(P0.05)。结论:bcl-2、FasL及PTEN的表达变化在子宫内膜异位症的发生发展过程中起着重要作用。     

白细胞介素-1β及C-反应蛋白与子宫内膜异位症的相关性

目的 探讨参与子宫内膜异位症发生、发展有关的细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β)和C-反应蛋白(CRP)在其内膜组织和血清中的表达变化及在子宫内膜异位症发生过程中的作用.方法 选取2005年11月至2006年8月在解放军昆明总医院妇产科就诊的Ⅲ～Ⅳ期卵巢子宫内膜异位症囊肿患者(子宫内膜异位症组)20例及对照组17例(同龄、因其它原因需行子宫内膜诊刮或子宫切除的患者),获取异位和在位子宫内膜组织及患者空腹血,用RT-PCR检测IL-1β mRNA在内膜组织中的表达,用ELISA法检测血清中CRP值.结果 子宫内膜异位症组和对照组子宫内膜IL-1βmRNA表达比较差异具有显著性意义(增生期1.21±0.33和分泌期1.43±0.34对0.54±0.12,P＜0.05);子宫内膜异位症组分泌期内膜组织IL-1β mRNA表达与增生期相比,差异有显著性意义(1.43±0.34对1.21±0.33,P＜0.05);子宫内膜异位症组CRP高于对照组,差异有显著性意义[增生期(5.23±1.72)mg/L和分泌期(6.76±2.23)mg/L对(1.58±0.74)mg/L,P＜0.05].结论 IL-1作为前炎性因子可能参与了内膜组织的局部免疫调控,减低腹膜清除异位内膜细胞的能力,促进子宫内膜细胞的黏附和转移;IL-1β和雌二醇有协同上调作用,促使形成异位内膜的趋化因子增加,参与子宫内膜异位症的发生、发展;CRP的检测对子宫内膜异位症患者的辅助诊断可能有意义.     

P和E_2对妊娠大鼠离体子宫产生PG的作用

多种动物研究表明分娩时子宫前列腺索(PG)产生增加。有研究表明雌二醇(E_2) 和孕酮(P)有助于调节子宫 PG 的产生。实验研究用 SD(SpragueDawley)大鼠,将离体子宫组织置于含有 P 或 E_2(0. 1,1,10,100和1000ng/ml)的 Ham 氏 F-10,37℃培养液中孵育48小时,然后直接分析培养液中 PGE、PGF 以及用放免法测定培养液中P 含量。实验分四组。第一组研究妊娠19天和21天的子宫,观察增加 P 和 E_2浓度时,PG 产生和剂量依赖方式。     

前列腺素E2与引产

目前认为,分娩动因主要与内分泌激素有关,缩宫素、皮质醇、雌激素、前列腺素在分娩发动中都可能起作用,其中前列腺素起关键作用。前列腺素E2是目前最有效的促宫颈成熟和引产的药物。1　作用机制前列腺素(PG)为二十碳不饱和脂肪酸,它与一般激素不同,不是由一个专一的内分泌腺分泌。一旦需要时通过神经和激素的影响,在局部合成和释放并发挥作用,因而有“局部激素”之称。人类羊水和母血浆中前列腺素E2(PGE2)浓度在妊娠最后阶段和分娩期明显增加。PGE2对各期妊娠子宫均有收缩作用,以孕晚期子宫最为敏感,局部应用PGE2,可以在不影响子宫活…     

子宫内膜息肉雌孕激素受体及Bax Bcl-2的表达及意义

目的通过检测子宫内膜息肉中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)及Bax、Bcl-2的表达,探索子宫内膜息肉形成的原因及机制.方法标本取自2004-01-09温州医学院第二附属医院妇科就诊患者.子宫内膜息肉72例为观察组,正常子宫内膜90例为对照组,采用免疫组化SP法,检测ER、PR的表达,用原位核酸分子杂交法检测息肉及内膜组织中Bax mRNA、Bcl-2 mRNA的表达,采用半定量分析.结果(1)在增生期,观察组PR的表达低于对照组(P＜0.05);在分泌期,观察组ER的表达高于对照组(P＜0.05).(2)在增生期,观察组Bcl-2 mRNA的表达高于对照组(P＜0.05);在分泌期,观察组Bax mRNA的表达低于对照组(P＜0.05).结论增生期PR的表达降低、Bcl-2 mRNA的表达增高及分泌期ER表达增高、Bax mRNA的表达降低可能参与了子宫内膜息肉的形成及发展.     

COX-2基因在子宫内膜异位症组织的表达及作用机制探讨

目的:观察环氧合酶 2 (COX 2 )基因在子宫内膜异位症(EM)组织中的表达,探讨COX 2在子宫内膜异位症发病中的作用。方法:应用原位杂交的方法,检测38例子宫内膜异位症组织及35例正常子宫内膜COX 2mRNA的组织定位和表达强度。结果:COX 2mRNA均以腺体细胞胞质表达为主,细胞核少量阳性。子宫内膜异位症子宫内膜增生期、分泌期中COX 2mRNA表达增高明显,高于正常对照组子宫内膜增殖期、分泌期(P <0 .0 1 ) ;EM组COX 2mRNA在增殖期和分泌期表达差异无显著性(P >0 .0 5 )。结论:COX 2mRNA的高表达可能是导致子宫内膜异位症的发病机制之一,对COX 2的深入研究将为子宫内膜异位症的治疗提供新的靶点。     

子宫内膜异位症局部雌激素代谢酶的表达及意义

目的:研究子宫内膜异位症的异位内膜雌激素产生、代谢与在位内膜及正常内膜存在的差异及其意义.方法:采用RT-PCR及免疫组化方法检测67例卵巢子宫内膜异位囊肿患者的异位子宫内膜、在位内膜组织P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白质、17β羟基类固醇脱氢酶Ⅱ(17β-HSD Ⅱ)mRNA的表达,并与35例对照组正常子宫内膜比较.结果:①35例正常子宫内膜不表达P450AmRNA,但自增生晚期始有1713-HSD Ⅱ mRNA的微量表达,分泌期逐渐增高并于分泌晚期达到高峰;②患者在位内膜可有P450AmRNA微弱表达;而17β-HSD Ⅱ mRNA表达趋势与正常子宫内膜一致,但强度低于正常内膜;③67例卵巢异位内膜均有P450AmRNA的表达,但缺乏17β-HSD Ⅱ mRNA表达.结论:子宫内膜异位症患者的异位内膜能够自合成雌激素,但局部雌激素代谢缺陷,其导致持续的雌激素微环境是异位内膜生长的主要因素.     

细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax在多囊卵巢综合征患者子宫内膜中的表达

目的探讨多囊卵巢综合征（PCOS）患者子宫内膜中细胞凋亡调控蛋白bcl-2和bax的表达及其在PCOS患者子宫内膜病变中的意义。方法应用免疫组织化学SP方法,测定18例PCOS患者子宫内膜和27例月经周期正常、因输卵管不通或男性不育就诊的对照者子宫内膜（10例增殖期、17例分泌期）bcl-2和bax蛋白的表达。结果PCOS患者子宫内膜bcl-2表达较对照者增殖期和分泌期高（P＜0．05和P＜0．01）,但bax表达相似（p＞0．05）。结论PCOS患者子宫内膜bcl-2蛋白表达增高,与bax形成更多的异源二聚体,从而抑制PCOS子宫内膜凋亡,对其子宫内膜的异常增生改变起一定作用。     

整合素β3及骨桥蛋白在子宫腺肌病患者子宫内膜中的表达及其意义

目的 探讨整合素β3及骨桥蛋白(OPN)在子宫腺肌病患者在位及异位子宫内膜中的表达及意义.方法 选择2007年1月-2008年7月于北京大学第一医院妇产科因子宫腺肌病行子宫全切除术的子宫腺肌病患者43例,收集其在位子宫内膜(在位内膜组),其中增殖期内膜11例,分泌期内膜32例(其中18例为分泌期中期);同时收集其异位子宫内膜(异位内膜组).选择同期因宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ～Ⅲ级或单纯浆膜下子宫肌瘤行子宫全切除术的患者41例为对照组,收集其子宫内膜,其中增殖期内膜12例,分泌期内膜29例(其中19例为分泌期中期).采用免疫组化法和实时荧光定量PCR技术检测各组患者子宫内膜中整合素β3和OPN的蛋白及mRNA表达.结果 (1)整合素β3和OPN蛋白主要表达于在位和异位子宫内膜的腺体.子宫内膜中整合素β3和OPN蛋白的表达水平,在位内膜组、异位内膜组、对照组分别为1.6±0.8和1.7±0.7、1.7±0.7和1.8±0.9、2.1±0.9和2.0±0.9,各组之间分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).在位内膜组增殖期子宫内膜中整合素β3和OPN蛋白的表达水平分别为0.8±0.4和0.7±0.3,均低于分泌期(分别为1.8±0.8和1.9±0.8),差异均有统计学意义(P<0.01);对照组增殖期子宫内膜中整合素β3和OPN蛋白的表达水平分别为1.0±0.4和1.0±0.4,也均低于分泌期(分别为2.5±0.7和2.5±0.7),差异也均有统计学意义(P=0.000).在位内膜组分泌期中期子宫内膜中整合素β3和OPN蛋白的表达水平分别为2.0±0.9和2.1±0.8,均低于对照组(分别为2.7±0.5和2.7±0.7),差异均有统计学意义(P<0.01).(2)子宫内膜中整合素β3和OPN mRNA的表达水平(以中位数表示),在位内膜组(分别为4.69和4.23)均低于异位内膜组(分别为7.96和14.84)和对照组(分别为13.47和17.40),差异均有统计学意义(P<0.05).在位内膜组增殖期子宫内膜中整合素β3和OPN mRNA的表达水平(分别为2.69和3.30)均低于分泌期(分别为5.54和11.40),差异均有统计学意义(P<0.01);对照组增殖期子宫内膜中整合素β3和OPN mRNA的表达水平(分别为3.12和4.75)也均低于分泌期(分别为19.94和21.00),差异也均有统计学意义(P=0.000);在位内膜组分泌期中期子宫内膜中整合素β3和OPN mRNA的表达水平(分别为10.10和14.34)均低于对照组(分别为21.50和24.18),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 整合素β3和OPN在子宫腺肌病患者异位内膜的侵袭和生长过程中起着一定的作用,可能影响子宫腺肌病患者的胚胎着床.     

Toll样受体与子宫内膜及子宫内膜异位症

子宫内膜异位症(EMs)发病机制尚未完全阐明.大量研究表明,免疫因素在EMs的发病机制中起重要作用.EMs免疫应答异常主要是巨噬细胞数量和活性增加及其分泌产物,如生长因子、细胞因子和血管生成因子的改变.Toll样受体(TLRs)识别特异性的病原体相关分子模式,启动和介导免疫应答,在固有免疫中发挥重要作用,并诱导产生适应性免疫反应.TLRs在正常子宫内膜中的生理作用以及在EMs中的相关研究已逐步开展,对其深人认识和研究将为EMs诊断、治疗和预后判断提供新思路和手段.     

人蜕膜中的抑制细胞

母亲免疫系统常对胎儿表达的父亲抗原产生应答,但胎儿不一定被排斥.胎儿的存活取决于胎母交界面组织的特性.例如孕鼠宫内的一个胎儿移植到其股肌中被排斥,而其余胎儿不受伤害.此外,同种基因的胚泡被置在预先免疫过的鼠肾包膜下被排斥,而放在有良好激素环境的子宫内会着床并发育.这些资料表明子宫内的局部因素在防止胚胎损坏方面起关键作用,蜕膜中存在局部非特异性抑制机理可促进胎儿存活而不影响母体全身免疫.近来已在鼠蜕膜中发现有非特异性抑制活性的细     

瘦素及瘦素长受体在多囊卵巢综合征患者子宫内膜的表达

目的　探讨瘦素 (leptin)和瘦素长受体 (Ob RL)mRNA及蛋白在多囊卵巢综合征(PCOS)患者着床期子宫内膜的表达及意义。方法　应用免疫组织化学技术及原位杂交技术 ,分别对15例正常妇女 (对照组 )、14例无排卵PCOS患者 (PCOS组 )促排卵治疗后着床期子宫内膜的leptin、Ob RL mRNA及蛋白进行测定。结果　对照组中 ,子宫内膜 10例呈分泌期中期改变 ,5例呈分泌期早期改变。PCOS组中 ,子宫内膜 3例呈分泌期中期改变 ,6例呈分泌期早期改变 ,1例呈增殖期改变 ,4例呈增殖期并分泌期早期改变 ;子宫内膜发育不良发生率 79% (11/ 14 ) ,与对照组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。Ob RL mRNA和蛋白在PCOS患者子宫内膜腺体呈阴性到强阳性表达 ,但多呈弱阳性和阳性表达 ,对照组则呈弱阳性到强阳性表达 ,两组比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;leptinmRNA和蛋白在PCOS患者子宫内膜的表达与对照组相似 ,两组比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论　促排卵周期中 ,Ob RL 在PCOS患者着床期子宫内膜腺体表达减弱 ,可能与PCOS患者妊娠率低有关     

VEGF、ENS、MVD在子宫腺肌病中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）、内皮抑素（ENS）及微血管密度（MVD）在子宫腺肌病（AM）中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学方法检测51例AM患者在位及异位子宫内膜和40例正常子宫内膜组织中VEGF、ENS的表达及MVD值。结果VEGF、ENS、VEGF／ENS、MVD在AM异位内膜中的表达均明显高于正常内膜及在位内膜（P〈O．05）;VEGF、ENS、VEGF／ENS、MVD在对照组中的表达均为分泌期高于增殖期（P〈0．05）,在位内膜中VEGF、Ⅵ1GF／ENs、MVD的表达仍为分泌期高于增殖期（P〈O．05）,但ENS在增殖期与分泌期的表达差异无统计学意义,失去周期性（P〉0．05）,异位内膜VEGF、ENS、vEGF／ENS、MVD在增殖期与分泌期的表达差异均无统计学意义,均失去周期性变化（P〉0．05）;VEGF、vEGF／ENS与MVD分别呈正相关（r=0．36、r=0．43,P〈0．05）,ENS与MVD的表述呈负相关（r=0．22,P％0．05）。结论VEGF、MVD、ENS在子宫腺肌病异位、在位内膜中呈高表达,提示局部血供丰富和新生血管形成可能与子宫腺肌病的发病有关。     

孕酮可抑制淋巴细胞的凝聚作用

甾类激素可通过与淋巴细胞的相互作用而影响免疫应答。性甾类激素可通过与细胞膜直接相互作用显示免疫抑制作用,其中孕酮(P)特别受到重视,以往研究证实它在体外主要抑制免疫应答的增殖和识别相,并有明显的“局部”免疫抑制作用。作者也曾发现一种分泌P的细胞,即小鼠滋养层细胞和卵巢细胞培养物及其上清液和P一样可抑制识别相和增殖相及细胞毒性T细胞在体外的发生。免疫识别和增殖过程中的一个重要表现是淋巴细胞能形成凝聚物,这种特性可通过提呈抗原、分泌淋巴因子、甚或二者而发生免疫信息的局部交换。因为     

不明原因复发性自然流产患者分泌期子宫内膜树突状细胞数量分析

目的研究子宫内膜树突状细胞(DC)在不明原因复发性自然流产(uRSA)患者分泌期子宫内膜的表达情况。方法根据子宫内膜形态学Noyes标准,对在本中心就诊的uRSA患者(uRSA组,n=113)与男性因素不孕患者(对照组,n=35)进行子宫内膜分期;以CD1_a与CD83分别作为子宫内膜未成熟树突状细胞(iDC)与成熟树突状细胞(m DC)的表面标志物,并利用免疫组织化学技术检测患者分泌期子宫内膜CD1_a与CD83阳性细胞的数量,并通过Vectra~?自动病理成像定量分析系统分别计算其阳性细胞率。结果 uRSA组分泌期子宫内膜CD1_a阳性细胞率无明显变化,而CD83阳性细胞率[(2.03±1.60)%]显著高于对照组[(0.81±1.11)%,P=0.000];两组患者子宫内膜CD1_a阳性细胞率从分泌早期到中期均呈递减趋势,而CD83阳性细胞率从分泌早期到中期均呈递增趋势;与对照组相比,uRSA组子宫内膜CD1_a阳性细胞率在分泌早期和中期均无明显变化,而uRSA组子宫内膜CD83阳性细胞率在分泌早期[(1.64±1.20)%]和中期[(2.20±1.60)%]均显著高于对照组[(0.17±0.11)%,P=0.000;(0.63±0.78)%,P=0.000]。结论 uRSA组患者子宫内膜分泌早期和中期CD83阳性细胞率异常升高,提示其可能影响子宫内膜容受性,从而导致妊娠失败。     

巨噬细胞移动抑制因子与子宫内膜异位症

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一种免疫炎性因子，可由多种细胞产生。子宫内膜异位症(EMs)患者腹水及体外培养的异位内膜细胞上清液中MIF值较正常值升高，一方面MIF能直接刺激血管内皮细胞生长，促使新血管形成；另一方面其可通过限制局部巨噬细胞移动，增加局部巨噬细胞浓度，并促使巨噬细胞分泌多种细胞因子及化学物质，而参与EMs的发病机制。     

子宫内膜组织膜联蛋白Ⅳ在月经周期中的变化

目的探讨膜联蛋白(annexin)Ⅳ在月经周期子宫内膜组织的表达规律。方法选择2006年10月至2007年8月在中山大学附属第一医院妇产科生殖医学中心因男方原因要求再生育的18名女性志愿者,采用免疫组化链菌生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法)和Western blot方法对月经周期子宫内膜组织进行膜联蛋白Ⅳ定位与半定量表达的实验研究。结果免疫组化实验显示增殖期和分泌早期子宫内膜上皮细胞均存在膜联蛋白Ⅳ蛋白表达,分泌中、晚期上皮和基质细胞中均有表达。分泌中、晚期的子宫内膜组织膜联蛋白Ⅳ的表达量较增殖中、晚期显著增高(膜联蛋白Ⅳ与β-actin条带平均灰度值比值结果分别为0.324、0.369对0.231、0.127),P<0.05;分泌早期膜联蛋白Ⅳ表达量(0.152)无明显增高;膜联蛋白Ⅳ表达量与LH峰值无显著相关性,分泌期子宫内膜膜联蛋白Ⅳ表达量与孕激素水平相关。结论膜联蛋白Ⅳ可能是参与月经周期子宫内膜形态与功能转化的重要蛋白质。     

17β-E_2和放线菌素D对人子宫内膜分离细胞PGF和PGE释放的效应

子宫内膜合成PGs的能力能够改变卵巢周期,提示子宫内类固醇通过PG合成酶或钙调节蛋白调节PG合成。但后来的研究证实此假说有问题。本研究目的是检测17β-E_2对子宫内膜细胞PG释放的影响以及放线菌素D在这些条件下的作用。由刮宫或因良性肿瘤子宫切除术的妇女中获得增殖期和分泌期子宫内膜。在无菌条件下经过切割、温育、分离、过滤、浓缩制成子宫内膜腺细胞和基底细胞两种标本。把标本离心、冲洗放入培养血孵育达约400ug/ml水平。然后按细胞(对照)、