亲水性聚氨酯泡沫固定化青霉素酰化酶制备和应用的研究

应用亲水性聚氨酯泡沫塑料做载体,固定青霉素酰化酶,可用于水解青霉素制备6-氨基青霉烷酸。用冻融-溶媒法提取的大肠杆菌青霉素酰化酶,与聚氨酯预聚体发泡制成酶泡沫。酶泡沫作了三次使用寿命考察,第三次经65批水解活力未见下降,经121批水解活力开始下降。     

环氧化磁性羟基微球的制备及在固定化青霉素G酰化酶中的应用

采用悬浮聚合法合成了一系列磁性羟基微球,以环氧氯丙烷活化后用于固定化青霉素G酰化酶.交联度为30%的微球固定化酶效果最优,并得到最适固定化条件为:给酶量2000u/g,反应时间24h,反应温度35℃,pH 8.0.制得固定化酶酶活力为782.2u/g.水解青霉素G钾盐的最适pH 8.5,最适温度45℃.     

利用无机载体固定化青霉素酰化酶的研究

以无机材料６２０１型担体作载体,进行青霉素酰化酶固定化的研究。考察了ＡＰＴＳ和戊二醛浓度、给酶量以ｐＨ等因素对固定化酶酶活的影响。结果表明,以６２０１型担体为载体制备得到的固定化酶具有较高的酶活回收,达４２．８％;操作稳定性良好;用其连续水解３０批青霉素Ｇ的钾盐溶液,酶活未见明显下降;该固定化酶与游离酶相比,可在较宽的ｐＨ范围保持高酶活。     

青霉素G酰基转移酶固定于离子交换树脂和疏水吸附剂

6—氨基青霉烷酸(6—APA)由青霉素G酰基转移酶水解青霉素G而得。本文使用大肠杆菌酰基转移酶,酶活力7.5IU/g。研究了两类多孔聚合物阳离子树脂和疏水吸附剂用于青霉素G酰基转移酶的固定化。前者为酶联接到阳离子交换树脂上包括酶的吸附作用及随后用戊二醛使吸附的酶交链。后者为疏水树脂是先用戊二醛活化,然后再用酶以共     

固定化青霉素G酰化酶的初步研究

本文研究固定化青霉素G酰化酶的不同制备方法,比较了各种固定化青霉素G酰化酶的载体。实验表明:聚丙烯腈纤维和无机载体制成的固定化酶具有较高的酶比活力,而且表面积大,易于装柱,抗污染能力大,又能裂解高浓度青霉素 G 溶液生成6-APA。     

青霉素酰化酶基因的克隆与表达

青霉素酰化酶可永解青霉素为6-APA和相应的侧链,6-APA是半合成青霉素的关键中间物,目前工业生产中已用酶法取代化学法制备6-APA,用青霉素G酰化酶或青霉素V酰化酶水解相应的青霉素.青霉素酰化酶可由各种细菌和霉菌产生,其生理功能还不清楚.这些酸的底物专一性都取决于青霉素分子的侧链.青霉素G酰化酶除了作用于青霉素G之外,还可水解各种苯乙酰衍生物.用7-ACA代替6-APA作为底物,对青霉素G酰化酶活力无明显影响.大肠杆菌和雷氏变形杆菌的青霉素G酰化酶都由α、β两个亚基组成,亚基重组试验表明α亚基决定酶的底物专一性,而活性中     

应用固定化大肠杆菌谷氨酸脱羧酶试产γ-氨酪酸

固定化酶技术的研究和在医药工业中的应用近年来有很大进展。我们在酶法生产γ-氨酪酸的基础上,探索应用固定化大肠杆菌谷氨酸脱羧酶(以下简称固定化酶)的可能性。一、固定化大肠杆菌谷氨酸脱羧酶的制备 1.大肠杆菌细胞的制备:大肠杆菌(E.coli AS.1505)按酶法生产γ-氨酪酸的方法进行培养。培养好的菌液经4000转/分离心20分钟,收集沉降的菌体,即得湿的大肠杆菌细胞。     

具有青霉素酰化酶活性的大肠杆菌细胞固定化研究

国内曾报道的固定化青霉素酰化酶细胞是明胶包埋戊二醛交联、琼脂包埋戊二醛交联和聚氨酯泡沫塑料包埋等,本文报道用二醋酸纤维包埋戊二醛交联制备固定化大肠杆     

用离子交换树脂为载体固定化青霉素酰化酶制备6-氨基青霉烷酸的研究

6-氨基青霉烷酸(6-APA)是半合成抗生素的母核。在 6-APA的氨基上引入不同侧链,可获得高效、广谱、服用方便的各种半合成抗生素。目前6APA的制备方法有化学法和固定化酶法。固定化酶法是将青霉素酰化酶固定在水不溶性载体上,直接用于裂解青霉素G生成6-APA。1973年英、美、西欧等国已应用固定化酶生产6-APA。本研究以大孔离子交换树脂为载体使青霉素酰化酶固定化。大孔离子交换树脂具有大孔径、高比表面积、高交换率、耐磨性好等优点。本文报导初步研究结果。 材料与方法     

青霉素G钾盐水溶液有效期的预测

青霉素G 钾盐水溶液极不稳定,其β-内酰胺环极易水解,使失去生物活性。我们用化学动力学方法预测了本品pH 4溶液在室温(25℃)时能保持90%效价的时间t_(0.9)口和半衰期t_(0.5)。实验方法青霉素G 钾盐水溶液的加速实验:称取青霉素G 钾70～80mg,于100ml 干燥容量瓶中,加pH4的枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液(按中国药典1977年版附录128页配制)使溶,并稀释至刻度摇匀。立即用5ml 移液管吸取溶液二份,每份5ml。将容量瓶     

固定化大肠杆菌生产γ-氨基丁酸的新工艺

近几年来,将完整细胞的固定化技术用于各种药物生产,已日益被人们所重视。我们将AS 1.505大肠杆菌包埋于海藻酸钠中所制得的固定化细胞,在一定条件下,使L-谷氨酸脱羧生成γ-氨基丁酸,该工艺比原来使用的自然细胞法生产γ-氨基丁酸工艺具有显著的优越性。现简介如下: 材料和方法 1.大肠杆菌的培养和收集 AS 1.505大肠杆菌,37℃通气培养14小时,培养基含蛋白胨2％,玉米浆1％,麸皮水解液15％,NaCl 0.3％,MgSO_4 0.02％,pH6.4,离心收集菌体。 2.固定化细胞的制备     

以聚丙烯腈纤维为载体制备工业用固定化PGA的基本条件

以聚丙烯腈纤维为载体 ,共价结合制备工业生产应用的固定化青霉素酰化酶。经过测定 ,获得了制备固定化酶的基本条件 :对部分酸水解聚丙烯腈纤维进行霍夫曼重排反应溶液中的次氯酸钠浓度为 4%～ 16 % (v/v) ;用含戊二醛的溶液对经过霍夫曼重排反应的水解纤维进行活化反应溶液的pH为 6 5～ 8 5 ,最适 pH7 0 ;活化反应时间为 10min ;活化纤维中醛基含量为 12 5 0 μmol/g以上 ;酶与活化纤维连接反应溶液的最适pH值为 6 5～ 7 0 ;反应时间为 10min。在酶与活化纤维的连接反应溶液中加入竞争性抑制剂 苯乙酸 ,对酶活力具有保护作用 ,能提高酶活力的固定化效率。在酶与活化纤维的连接反应溶液中剩余的游离酶经吸附、洗涤和浓缩后 ,可以再用于制备固定化酶。变性固定化酶经再生活化后作为载体固定化新的酶液 ,也能制备出较好的固定化酶。     

青霉素G酰化酶在γ-氧化铝上的吸附交联固定化

以 γ-氧化铝为载体 ,利用戊二醛对巨大芽孢杆菌 (Bacillus megaterium) Bp931胞外青霉素 G酰化酶进行吸附交联固定化。酶活力回收为 31% ,在 37℃、p H8.0的条件下 ,固定化酶对青霉素 G的活力为30 4IU/ g;作用于青霉素 G的表观米氏常数 Km值为 3.2 3× 10 - 2 M。该固定化酶可耐高离子强度洗涤 ,连续合成头孢拉定 (cephradine) 10批次 ,酶活力剩余 82 %     

青霉素G酰化酶在γ—氧化铝上的吸附交联固定化

以γ-氧化铝为载体,利用戊二醛对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)Bp931胞外青霉素G酰化酶进行吸附交联固定化.酶活力回收为31%,在37 C、pH8.0的条件下,固定化酶对青霉素G的活力为304IU/g;作用于青霉素G的表观米氏常数Km值为3.23×10-2M.该固定化酶可耐高离子强度洗涤,连续合成头孢拉定(cephradine)10批次,酶活力剩余82%.     

固定化大肠杆菌细胞催化裂解苄青霉素动力学参数的测定

引言据报道大肠杆菌青霉素酰胺酶催化苄青霉素(简称BP)水解所生成的6-氨基青霉烷酸(简称6-APA)和苯乙酸(PAA)分别为反应的非竞争性和竞争性抑制剂;高浓度BP为反应的底物抑制剂。Warburton等曾报道过游离的和固定化的青霉素酰胺酶的有关动力学参数,提出了有关的动力学模型。作者以明胶戊二醛包埋法所固定的大肠杆菌细胞为实验材料,在pH 7.5和8.0、37℃条     

头孢克洛中间体7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-酸的合成工艺研究

目的 优化7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-酸的合成工艺.方法 以青霉素G钾盐为起始原料,经酯化氧化、开环重排、氧化、闭环、氯化脱酰基、酯水解共6步反应合成头孢克洛中间体7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-酸.结果 与结论目标产物的结构经1H-NMR谱确证,总收率为38％(以青霉素G钾盐计),纯度达99.4％(HPLC法...     

(口匹)呋氨苄青霉素——一种高效口服新型青霉素

1965年Jansen等合成了一系列青霉素的取代甲酯。其中青霉素 G 的乙酰氧甲基酯(Acetoxymethyl Benzylpenicllinate,简称Penamecillin,代号WY-20788)已用于临床,商品名Havapen。本品特点:对酸稳定,可口服,口服吸收后在体内可迅速水解,释放出具抗菌活性的青霉素G,因吸收缓慢故呈长效作用,如成人单次口服本品25毫克/公斤体重后,血中青霉素 G 的有效浓度(0.1微克/毫升)可维持8/小时。     

如何正确使用青霉素G静脉滴注

青霉素G静脉滴注已十分普遍,但由于使用方法欠妥,造成了药物的大量浪费,而且也有一定的危险性。青霉素G的副作用包括其毒性反应和各种过敏反应。临床医生一般只注意其治疗效果和过敏性休克,而对于其中所含钾钠离子的量和静脉滴注方法等则很少注意。一、关于青霉素G钾盐中含钾离子的问题: 以钟盐代替钠盐作静脉滴注,已用数年之久,未见不良反应,因此认为青霉索G钾盐可以安全地应用于静脉滴注,但不能静脉推注。青霉素G钾盐每1000万单位含钟离子670mg,相     

青霉素G酰化酶在异丁烯酸聚合物上的固定化

青霉素G(Pen G)酰化酶(EC 3.5.1.11)因具有水解Pen G分子上的侧链酰胺键而不影响β—内酰胺环上酰胺键之特性,故在生产6—氨基青霉烷酸(6—APA)上得到应用。固定化Pen G酰化酶制剂的发展对形成经济上富有活力的生产工艺作出重大贡献。PenG酰化酶可以固定在天然聚合物和各种不同的合成聚合物载体上,并由此提供了各种各     

青霉素溶媒中苯甲醇浓度的探讨

目前临床治疗上使用的青霉素多是苄青霉素(青霉素G)的钾盐,由于钾盐(k~ 的影响)的刺激性大,注射时常引起剧烈的疼痛.为此可在溶解青霉素的溶剂中加入局部麻醉剂苯甲醇,配制成青霉素溶媒(以下简称溶媒),以达到止痛目的.苯甲醇是芳香醇类,有局部麻醉作用,毒性低.目前一些医院自制或市售的溶媒多是含苯甲醇2%的水溶液.其处方为: