非甲～戊型肝炎病原学研究现状

非甲-戊型病毒性肝炎病原学一直是肝病研究的热点之一,近年来相继报道了GBV、TTV、SENV等新型病毒,并对其病原学、流行病学特点及致病性等进行了相关研究。本文就非甲一戊型肝炎病原学研究现状作一综述。     

非甲～非戊型病毒性肝炎中TT病毒感染的初步报告

用套式ＰＣＲ方法检测了３２例非甲～非戊型肝炎的血清ＴＴＶＤＮＡ。结果：１１例ＴＴＶＤＮＡ阳性。急性、慢性、重症肝炎的ＴＴＶＤＮＡ检出率分别为３１．８％（７／２２）、２８．６％（２／７）、６６．７％（２／３）。结合目前国内外的研究认为：ＴＴＶ感染可能是非甲     

非甲至非戊型肝炎患者TTV检测和部分基因序列分析

目的：研究新近报道的一种与输血后肝炎有关的病毒在中国郑州地区正常人群、HBsAg阳性者、非甲至非戊型肝炎患者中的感染和基因序列变异情况。方法：采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应(nested-PCR)方法对血清标本进行检测,并对非甲至非戊型肝炎患者中的TTV分离株进行序列测定。结果：TTV DNA在非甲至非戊型肝炎患者中检出率为45％(18／40);在正常体检者中检出率为17．7％(17／96);在HBsAg阳性者(ALT≤34 IU／L)中检出率22．7％(10／44)。TTV分离株序列与日本株(CLON22)相对应位置的核苷酸同源性为．1％。结论：TTV在非甲至非戊型肝炎患者TTV的感染率明显高于其他人群,可能是非甲至非戊型肝炎的主要致病因子。     

非甲～非庚型肝炎病人中TTV感染和自身免疫性疾病

筛选非甲～非庚型肝炎患者血清 4 8例 ,采用冰冻组织切片间接免疫荧光法检测 4种自身抗体 :抗核抗体(ANA)、抗线粒体抗体 (AMA)、抗平滑肌抗体 (SMA)和抗肝肾微粒体抗体 (LKM) ,采用巢式PCR法检测输血传播病毒 (TTV)核酸。结果显示 ,4 8例病人中 4种自身抗体阳性总人数 2 2例 ( 45.8% ) ,其中抗 ANA阳性 1 5例 ( 31 .3% ) ,抗 AMA阳性 5例 ( 1 0 .4 % ) ,抗 SMA阳性 4例 ( 8.3% ) ,而抗 LKM未检出阳性。有 7例患者最终诊断为自身免疫性疾病 ( 3例自身免疫性肝炎 ,2例原发性胆汁性肝硬化 ,2例原发性干燥综合征 )。TTV阳性者 1 4例 ( 1 4 / 36,38.9% ) ,男女比例 2∶1 ,3例TTV感染者伴有自身抗体阳性。提示非甲～非庚型肝炎中存在自身免疫性疾病和TTV感染者 ,TTV感染导致肝损伤的过程中可以伴有自身免疫反应     

非甲—戊型肝炎中自身免疫性肝病的临床研究

目的 通过对非甲-戊型肝炎中自身抗体的检测和临床特征的研究,提高对自身免疫性肝病的认识.方法 对住院的143例非甲-戊型肝炎患者的临床及实验室检查资料进行回顾性分析.结果 确诊的31例自身免疫性肝病患者,自身抗体以抗核抗体(ANA)、抗平滑肌抗体(SMA)、抗线粒体抗体(AMA)为主;除原发性硬化性胆管炎(PSC)外,大多为中年女性,多表现黄疽、乏力、食欲不振、腹胀、肝脾肿大,谷丙转氨酶和谷草转氨酶、免疫球蛋白明显升高.其他病因不明的非甲到戊肝炎患者以中青年男性、急性黄疸多见,肝功能受损轻.结论 自身免疫性肝病具有高滴度自身抗体、肝功能等生化指标明显异常.     

TTV在非甲至非庚型肝炎中感染的检测和分析

目的 研究新近报导的1种与输血后肝炎有关的病毒（TTV）在中国郑州地区非甲至非庚型肝炎患中的感染和基因序列变异情况。方法 采用TTV基因组ORF1区的套式聚合酶链反应（nested-PCR)方法对非甲至非庚型肝炎患和正常人血清标本进行检测，并对非甲至非庚型肝炎患中的TTV分离株进行序列测定。结果 TTV DNA在40例非甲至非庚型肝炎患中检出18例，阳性率为45％，在96例正常人中检出17例，阳性率为17.7%，两组阳性率相比差异有统计学意义。TTV分离株序列与日本株（CLON22）相对应位置的核苷酸同源性为99.1%。结论 TTV在非甲至非庚型肝炎患中的感染率较高，可能是非甲至非庚型肝炎的主要致病因子。TTV分离株与日本株可能属同一基因型。     

戊型肝炎患者肝组织中HEV抗原的检测研究

目的：用抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２单克隆抗体和抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２单链可变区抗体研究急性戊型肝炎的免疫病理学,探讨二者在临床病理诊断中的应用价值。方法：（１）以杂交瘤技术制备的抗－ＨＥＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ,ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｙ）作为第一抗体,用免疫组化ＬＳＡＢ法检测急性戊型肝炎患者肝组织中的ＨＥＶ抗原。（２）用抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２单链可变区抗体以间接酶标法检测肝组织内的ＨＥＶ抗原。结果：用抗－ＨＥＶ单克隆抗体从１４例急性戊型肝炎肝标本中检出９例ＨＥＶ抗原阳性者（６４．２８％）,其中８例阳性标本用抗－ＨＥＶ ＯＲＦ２单链可变区抗体检测ＨＥＶＡｇ均为阳性。ＨＥＶ抗原在肝细胞浆表达以胞浆弥漫型为主,尚可见膜型表达。ＨＥＶ抗原阳性细胞集中分布有病变明显区,伴淋巴细胞浸润,病变较轻区也可见随机散在分布,部分     

上海地区急性散发性戊型肝炎的特异性诊断和调查──应用抗人μF（ab’）_2—HRP检测抗HEVIgM

以Ｇｅｎｅｌａｂｓ的ＨＥＶＩｇＧＥＬＩＳＡ试剂盒和抗人μＦ（ａｂ’）＿２—ＨＲＰ检测抗ＨＥＶＩｇＧ和ＩｇＭ，从上海地区４６７例急性病毒性肝炎病人和８４例健康人血清中分别检出抗ＨＥＶＩｇＧ阳性１０５例（２２％）和１１例（１３％）（Ｐ＞０．０５）。从上述病人共检出抗ＨＥＶＩｇＭ阳性６４例（１４％），其中３６例抗ＨＥＶＩｇＭ阳性出自１１１例急性非甲非乙非丙型肝炎，２８例抗ＨＥＶＩｇＭ阳性出自３３３例急性甲型肝炎病人，而２３例急性乙型和丙型肝炎病人，８４例健康人以及另外的２４例非病毒性肝炎（内４例类风湿因子阳性）病人血清均为抗ＨＥＶｌｇＭ阴性。结果表明：在检测抗ＨＥＶＩｇＭ的ＥＬＩＳＡ系统中，应用抗人μＦ（ａｂ’）＿２—ＨＲＰ作为酶标第二抗体，取得了满意的结果；上海地区急性非甲非乙非丙型肝炎中，３２％为戊型肝炎，急性甲型肝炎病人中８％同时感染了ＨＡＶ和ＨＢＶ。     

血清抗-HEV IgG、IgM和HEV RNA在诊断急性戊型肝炎中的意义

目的探讨抗-HEV IgG、IgM和HEV RNA在诊断急性戊型肝炎中的意义.方法 23例患者用ELI-SA法检测抗-HEV IgG、IgM;用RT-PCR法检测HEV-RNA.结果 23例患者中抗-HEV IgG阳性19例,抗-HVE IgM阳性8例,HEV RNA阳性2例.8例抗-HEV IgM阳性中4例单独抗-HEV IgM阳性,4例同时抗-HEV IgM、IgG阳性.2例HEV RNA阳性者同时有抗-HEV IgG阳性.结论目前诊断急性戊型肝炎以检测血清抗HEV IgG意义最大.     

戊型肝炎病人血清及粪便中HEV RNA消长规律的研究及临床意义

目的：为提高戊型肝炎的临床确诊率及研究ＨＥＶ在血清及粪便中消长规律。方法：应用ＨＥＶＲＮＡＲＴ－ＮＰＣＲ试剂对ＨＥ病人血清及粪便中ＨＥＶ进行检测。结果：在病后４ｄ血清中ＨＥＶＲＮＡ阳性，最长持续９０ｄ，在４０ｄ时７５％仍阳性，５０ｄ时仍有１６％阳性。粪便中最短检出时间病后６ｄ，最长为病后３３ｄ，并发现在病后１０２０ｄ便中ＨＥＶＲＮＡ检出率最高，传染性最强，而且在新鲜便中电镜下看到３２ｎｍ球形病毒颗粒。结论：应用此方法临床确诊率提高了１２５％。     

输血后肝炎患者、血透患者及非甲～戊型肝炎患者中庚型肝炎病毒感染的调查

目的：确定广州地区输血后肝炎患者、血透患者、急性非甲～戊型肝炎患者及对照组中庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）的感染状况。方法：根据ＨＧＶ感染者５’－非编码区的核苷酸序列设计引物,应用逆转录套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）对庚型肝炎病毒核糖核酸（ＨＧＶ－ＲＮＡ）进行检测。结果：共检测３６０价标本,上述各组中ＨＧＶ感染率分别为２２．６％、１４．８％、４．０％及２．５％。结论：输血后肝炎患者、血透患者及急性非甲～戊肝炎患者中ＨＧＶ感染率显著高于对照（Ｐ值均＜０．００５）;有血液接触史者高于无血液接触史者（ Ｐ值＜０、 ００５）;ＨＧＶ－ＲＮＡ与抗－ＨＧＶ无平行关系。     

用合成肽为抗原检测戊型肝炎病毒IgG和IgM抗体

选择并合成戊型肝炎病毒（ＨＥＶ），ＯＲＦ（阅读框架）－１、ＯＲＦ－２及ＯＲＦ－３中的４个肽段。其中合成肽（ＳＰＢ３６）可用于酶联免疫吸附法检测戊型肝炎病毒的ＩｇＧ及ＩｇＭ抗体。对１３４份肝炎患者血清分别以重组抗原及ＳＰＢ３６抗原检测戊肝抗体ＩｇＧ，相对符合率为８５．１％。对比检测戊肝抗体ＩｇＭ（４４份），相对符合率为８８．６％。合成肽因结构组成明确，不需要特殊纯化，特异性较高，用于检测抗体有其优点。     

戊型病毒性型炎患者血清白细胞介素—8的检测及意义

应用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法动态检测了４５例戊型病毒性肝炎患者血清ＩＬ－８含量，研究发现：戊型病毒性肝炎急性期ＩＬ－８水平明显升高，与正常对照，恢复期相比处于高活性状态；ＩＬ－８水平与ＡＬＴ呈明显相关（γ＝０．５７６２，Ｐ〈０．０５）。ＩＬ－８水平与ＢＩＬ呈明显下相关（γ＝０．５０６４，Ｐ〈０．０１），提示：ＩＬ－８与戊型肝炎的肝细胞损伤及炎症程度相一致；重症型较黄疸患者血清ＩＬ－８升高更明显，有显     

老年戊型病毒肝炎患者血清一氧化氮等自由基及sIL—2R的检测

为检测４５例老年戊型病毒性肝炎血清ＮＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ和ｓＩＬ－２Ｒ的水平，探讨其在老年肝炎中的临床意义。采用分光光度比色分析法检测ＮＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ同时用ＥＬＩＳＡ法检测ｓＩＬ－２Ｒ的水平。结果提示老年戊型肝炎患者血清ＳＯＤ降低、ＮＯ、ＭＤＡ和ｓＩＬ－２Ｒ升高。     

急性戊型肝炎患者血清性激素、β_2-M等检测及临床意义

本文对15例急性戊型病毒性肝炎患者血清中β2－M、性激素和血清生化指标进行了检测并与健康人进行比较,检测结果表明：戊型肝炎患者血清中β2－M、LH、E2的含量显著高于健康人（P＜0.01）;T的含量与健康人比较无显著差异（P＞0.05）。肝功检测TBIL、DBIL、ALP、GGT、LCDH、AST、ALT均显著高于健康人（P＜0．01）,而CHE显著低于健康人（P＜0．05）。实验证明,戊型肝炎病毒不但损害肝功亦影响β2－M和性激素的代谢。