肺癌组织 p53 基因突变的研究

目的：探讨肺癌发生的分子遗传学机理，了解肺癌中ｐ５３基因突变的情况。方法：采取聚合酶链反应（ＰＣＲ）及聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术，对２０例肺癌组织中ｐ５３基因外显子５～８进行了突变分析。结果：ｐ５３基因突变１２例，占总人数６０％（１２／２０），分布于外显子５～８。其中第７外显子６例，第８外显子４例，第５、６外显子各１例。鳞癌突变率５０％（３／６），腺癌突变率６０％（６／１０），小细胞肺癌突变率７５％（３／４）。结论：ｐ５３基因突变与肺癌的发生发展有关。     

小细胞肺癌中p53基因突变与临床研究

目的：探讨小细胞肺癌的发生、发展机理,提高临床早期对小细胞肺癌患者的诊断水平。方法：应用免疫组化和聚合酶链式反应——单链构象多态性分析的方法技术。对14例小细胞肺癌的石蜡包埋切片进行研究。结果：p53基因的5、6、7、8外显子突变率为57．1％(8／14)。在小细胞肺癌组织中存在着较高的p53基因突变率。结论：p53基因突变可能为人类肺癌发生的关键基因。     

云南个旧和宣威地区肺癌p53突变检测研究

目的 云南个旧与及宣威地区是云南省肺癌的两大点状高发区,个旧以 矿工为高发人群,宣威以农民为高发,该两地区肺癌发生的病因已初步阐明,本研究旨在深入探讨其发病的分子生物学基础。方法 对26例个旧矿工肺癌患者,15例宣威农民肺癌患者,应用聚合酶链反应－单链构象多态性法研究p53第5至第8外显子突变,并对有突变的个体进行测序。结果 发现云锡矿工肺癌患者中有13例、宣威农民肺癌患者中有4例发生p53突变,应用DNA测序,发现云锡矿工肺癌中有1例于第135位密码子发生突变,由GCC→GTC,导致氨基酸改变,由丙氨酸→缬氨酸（Ala-Val),宣威农民肺癌患者中有1例于247位密码子突变,由AAC→TTC,导致氨基酸发生改变,由天冬酰氨→苯丙氨酸（Asn-Phe)。结论 p53突变在云锡矿工肺癌和宣威农民肺癌中较常发生,并发现两例新的突变位点。p53突变与病人的年龄、性别、坑龄及组织学分类无明显联系。     

非小细胞肺癌p16基因突变与表达的研究

pl6蛋白最初是从各种肿瘤病毒转化的细胞中鉴定出的一种CDK4相关蛋白l’］。p］6基因被发现后,已有一些文献『‘－’］对其在肺癌中出现的基因缺失和突变进行了报道,但关于原发性肺癌中p16基因的突变和表达与患者的病理及临床资料相结合的研究目前还少见报道。本文采用?..     

外周血p53基因检测与大肠癌早期诊断关系

目的分析大肠癌发生过程中p53基因的突变作用,评估外周血p53基因突变分析作为大肠癌高危对象筛查指标的实际应用价值。方法 用聚合酶链反应-单链构象多态(PCR-SSCP)银染技术对50例大肠癌家系成员和20例健康人(对照组)的外周血p53基因第5～8外显子进行检测。结果 大肠癌家系成员和对照组的外周血p53基因突变率为24％和0,差异有显著性(P<0.05)。结论p53基因突变在大肠癌的发生过程中起重要作用,外周血p53基因突变分析可望成为大肠癌高危对象的早期诊断手段。     

应用PCR-SSCP银染法检测肺癌p53基因的突变

目的：探索并建立一套适用于临床检测的ｐ５３基因突变的分析方法，探讨肺癌发生发展与ｐ５３基因突变的关系，为临床诊断和治疗提供分子依据。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法对２２例肺癌患者ｐ５３基因的第６、第７外显子进行分析。结果：全部患者组织标本经ＰＣＲ扩增，均获得特异的ｐ５３基因扩增产物，进一步对第６第７外显子应用ＳＳＣＰ进行突变分析，不同组织类型肺癌的ｐ５３基因突变率各不相同，第７外显子的突变率（２７．３％）高于第６外显子（９．１％）。结论：ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法是适于肺癌患者ｐ５３基因突变分析的简捷、快速而可靠的检测方法，通过进一步研究，将为肺癌的早期诊断、鉴别诊断和预后判断提供有价值的分子指标。     

聚合酶链反应-单链构象多态性技术检测瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变

目的：分析瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变高发区第4～8外显子的突变及其意义。方法：取手术切除的瘢痕疙瘩和非增生瘢痕各12例，分别采用相应正常皮肤对照，体外培养成纤维细胞，采用聚合酶链反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)技术检测p53基因的突变情况。结果：12例瘢痕疙瘩成纤维细胞标本中有9例p53基因外显子4、5、6、7出现突变，非增生瘢痕标本和正常皮肤标本均未检出突变。结论：p53基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。     

p53基因突变与人食管癌转移的关系研究

目的：探讨ｐ５３基因突变与人食管癌淋巴结转移的关系。方法：采用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）结合银染技术,对４７例食管瘤组织中ｐ５３ 基因第５～８外显子进行了突变分析。结果：４７例食管癌标本中,ｐ５３基因第５～８外显子出现突变者２０例,其突变率为４２．６％;其中２２例伴有淋巴结转移的原发癌中１３例出现了突变（５９．１％）,其与无淋巴结转移组（２８．０％,７／２５）相比有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。结论：ｐ５３基因突变与人食管癌的转移可能关系密切。     

肺癌p53基因突变与蛋白表达关系的研究

目的 以测序结果为标准,探讨免疫组织化学和聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）两种方法用于检测肺癌ｐ５３基因突变的敏感性及优缺点。方法 用免疫组织化学,ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＰＣＲ产物直接测序检查３０例肺癌标本的Ｐ５３蛋白和基因改变,结果 ３０例肺癌标本经测序共检出２２例突变,突变位于第５外显子８例（３６％）,位于第６外显子２例（９％）,位于第７外显子７例（３２％）,位于第８外显子５例（２     

非小细胞肺癌P53基因突变的研究

采用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ对３５例非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）肿瘤切除组织的Ｐ５３基因５￣８号外显子进行突变检测，对８号外显子同时采用ＰＣＲ－ＤＧＧＥ进行突变检测。发现ＮＳＣＬＣ中Ｐ５３突变率为６５．７％。Ｐ５３率在肿瘤细胞不同分化程度间有显著差异，低分化ＮＳＣＬＣ的Ｐ５３突变率（８９．５％）明显大于高、中分化的ＮＳＣＬＣ（３７．４），虽然有纵膈淋巴结转移的Ｐ５３突变率（７１．４％）高于无给膈转移者（５７     

大肠癌患者粪便p53基因检测及其临床意义

目的: 研究大肠癌患者p53基因突变及蛋白表达之间关系,并探讨从粪便中检测p53基因突变在大肠癌早期诊断中的临床意义。方法: 采用聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)法,检测大肠癌患者癌组织和粪便标本中p53基因第5~8外显子突变情况;同时运用免疫组化法分析癌组织中p53表达情况。结果: 34例大肠癌患者癌组织标本中,p53基因第5~8外显子突变及蛋白表达阳性率分别为52.9%和55.9%,正常黏膜未见p53表达(P<0.01)。p53表达与基因突变呈正相关关系(P<0.05)。p53表达阳性率与肿瘤组织大小有关,肿瘤≤ 5cm者阳性率高于>5 cm者(P<0.05),但与其它临床病理因素无关。12例癌组织中有p53基因突变的患者其粪便中基因突变阳性率为41.7%,正常人未检测出突变。结论: p53基因突变是参与和影响p53表达和生物学功能的主要因素;大肠癌患者粪便中可检测出p53基因突变,粪便中p53基因检测可成为一种新的肿瘤标志物用于大肠癌的诊断及高危人群的筛检普查。     

Comparison of Nuclear Accumulation of p53 Protein with Mutations in the p53 Gene of Human Breast Cancer Tissues

Ｐ53 ｇｅｎｅｉｓａｄｏｍｉｎａｎｔｓｕｐｐｒｅｓｓｏｒｇｅｎｅ.Ｍｕｔａｔｉｏｎｓｏｆｐ53 ｇｅｎｅｅｘｉｓｔｉｎｓｅｖｅｒａｌｈｕｍａｎｎｅｏｐｌａｓｍｓ.Ｐ53 ｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎｓａｒｅｒｅｌａｔｅｄｔｏｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ,ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄａｐｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｌｓ.Ｉｎｔｈｉｓｐａｐｅｒ,ｗｅｆｏｃｕｓｏｎｔｈｅｒｅ ｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｎｕｃｌｅａｒａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｐ53ｐｒｏｔｅｉｎａｎｄｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｔｈｅ…     

肺增生病变p53基因突变的检测

目的：检测p53基因突变率在“肺癌性”增生病变和“肺炎性”增生病变是否存在差异，试图确定“发生真正癌变”的癌前病变，为肺癌前病变的风险性预测提供实验依据。方法：采用PCR—SSCP—DNA测序法，检测了80例“肺癌性”和5l例“肺炎性”增生病变的p53基因突变率。结果：“肺癌性”增生组的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级增生病变的p53突变率分别为7％(1／15)、33％(4／12)、38％(5／13)、30％(3／10)和“肺炎性”增生组相对应的Ⅰ--Ⅳ级增生病变的突变率7％(1／15)、25％(3／12)、36％(5／14)、40％(4／10)比较无显著性差异(P＞0．05)。结论：p53基因的突变率在两组增生病变没有差别，提示p53基因突变不能作为预测肺增生病变预后的检测指标。     

p53基因PCR-SSCP银染检查痰标本诊断肺癌

目的　了解痰标本检测肺癌患者p53基因突变的可行性及其对临床诊断的意义。方法　采用改良Saccomanno法浓缩及保存痰标本,部分涂片找癌细胞,其余标本进行痰细胞DNA提取及多聚酶链反应(PCR)单链构象多态性分析(SSCP)。共检测22例患者,其中确诊肺癌患者15例(涂片或活检找到癌细胞),临床高度怀疑肺癌患者5例(涂片或活检均阴性),2例非肿瘤患者(1例为结节病,另1为右中叶肺炎),同时采用正常肺组织标本作对照。结果　p53外显子6、7、8的PCRSSCP银染阳性率在肺癌组及癌疑组分别为6/15(40%)和2/5(40%)。非肿瘤患者痰标本及正常肺组织均未发现p53基因异常。结论　改良Saccomanno法不仅能贮存、浓缩痰细胞,而且方便痰标本DNA提取;PCRSSCP银染方法可用来检测肺癌患者痰细胞的p53基因突变。     

应用RT-PCR检测Ⅲ期非小细胞肺癌新辅助化疗中p53mRNA的表达

目的：初步探讨Ⅲ期非小细胞肺癌（NSCLC）患者中p53mRNA表达与新辅助化疗敏感性及预后的关系。方法：选取30例行新辅助化疗的Ⅲ期NSCLC患者，应用RT-PCR法分别检测肿瘤与同肺叶正常组织p53mRNA的表达，随访患者生存情况。结果：①肿瘤组织中p53mRNA表达阳性17例（56．7％），正常组织中3例（10％），二者有统计学差异（P〈0．05）；②所有患者中位生存时间为18．9个月。肿瘤组织中D53mRNA阳性者中位生存时间13．1个月，阴性者32．0个月，二者有统计学差男别（P〈0．05）。结论：Ⅲ期NSCLC患者正常组织中p53mRNA呈低表达，肿瘤组织中则呈高表达。p53mRNA表达可预测新辅助化疗的疗效，．     

应用RT-PCR检测III期非小细胞肺癌新辅助化疗中p53mRNA的表达

目的:初步探讨III期非小细胞肺癌(NSCLC)患者中p53mRNA表达与新辅助化疗敏感性及预后的关系。方法:选取30例行新辅助化疗的III期NSCLC患者,应用RTPCR法分别检测肿瘤与同肺叶正常组织p53mRNA的表达,随访患者生存情况。结果:①肿瘤组织中p53mRNA表达阳性17例(56.7%),正常组织中3例(10%),二者有统计学差异(P<0.05);②所有患者中位生存时间为18.9个月。肿瘤组织中p53mRNA阳性者中位生存时间13.1个月,阴性者32.0个月,二者有统计学差别(P<0.05)。结论:III期NSCLC患者正常组织中p53mRNA呈低表达,肿瘤组织中则呈高表达。p53mRNA表达可预测新辅助化疗的疗效。     

阳性对照PCR-SSCP法检测肝癌中特异性p53基因点突变

用人肝癌细胞系PLC/PRF/5 DNA作阳性对照,通过聚合酶链式反应—单链构象多态分析(PCR-SSCP分析),检测五种人肝癌细胞系及6例原发性肝癌组织中p53基因点突变。在被检标本中未检出PLC/PRF/5中存在的肝癌特异性p53基因点突变,即249位密码子第3碱基G→T颠换。因此,这种特异性p53基因点突变并不是肝癌中的普遍现象。     

细胞核相关抗原（Ki67）和p53 表达 对非小细胞肺癌患者预后的意义

目的 检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织中细胞核相关抗原Ki-67（Ki67）和p53 的表达水平,探 讨其对患者预后（生存率）判断的意义。方法 用免疫组织化学染色半定量检测非小细胞肺癌患者肿瘤组织 中的Ki67 和p53 表达水平。对患者进行随访,分析Ki67 和p53 表达水平与患者生存时间和生存率的关系。 结果 相关性分析结果表明,Ki67 阳性细胞率与非小细胞肺癌患者生存时间具有较弱的相关性（r =-0.200, P =0.030）,p53 阳性细胞率与非小细胞肺癌患者生存时间无相关性（r =0.003,P =0.050）。单因素分析结果提示, Ki67 和p53 共表达以及原发肿瘤局部淋巴结远处转移（TNM）分期对患者生存期有影响,差异有统计学意义 （P =0.000）。当Ki67 和p53 均低表达时,患者的中位生存时间及1 ～ 5 年生存率均高于平均水平。预后影响因 素Cox 回归分析表明,TNM 分期越低,患者中位生存时间越长,死亡风险越低。结论 TNM 分期是影响肺癌 预后的指标,TNM 分期越高,患者死亡风险越大。Ki67 和p53 均低表达时,中位生存时间及1 ～ 5 年生存率 均高于平均水平,提示Ki67 和p53 联合检测可为非小细胞肺癌早期诊断及预后判断提供辅助依据。     

p53基因在卵巢肿瘤中的改变

采用聚合酶链式反应——单链构象多态性溴乙锭染色法，分别检测４３例卵巢肿瘤ｐ５３基因外显子５－８。结果显示：卵巢癌ｐ５３基因改变率高于良性肿瘤（Ｐ＜０．０５），ｐ５３基因改变见于交界性瘤及Ⅰ－Ⅳ期卵巢癌。提示ｐ５３基因改变与卵巢癌的发生密切相关；它可能参与卵巢癌变的机制，同时可发生在卵巢癌的早期，并对其发展过程中起作用。