TFPI-2对胰腺癌细胞增殖及血管新生的抑制作用

目的 探讨胰腺癌中组织因子途径抑制物2(TFPI-2)的表达及作用。方法 采用免疫组织化学方法检测41例胰腺癌组织中TFPI-2，Ki67和VEGF的表达及CD34单克隆抗体标记的微血管密度（MVD）。结果 Ⅰ，Ⅱ期胰腺癌TFPI-2阳性表达率（17/26）高于Ⅲ，Ⅳ期（2/15），高分化癌（12/19）高于中、低分化（7/22）（均P<0.05）；Ⅰ，Ⅱ期癌细胞增殖指数（PI）（24.45±6.19）低于Ⅲ，Ⅳ期癌（30.84±6.70），高分化癌（24.42±6.29）低于中、低分化癌（28.84±7.12），（均为P< 0.05）；Ⅰ，Ⅱ期癌VEGF的阳性表达率（16/26）低于Ⅲ，Ⅳ期癌（14/15），高分化癌（11/19）低于中、低分化癌（19/22）（均P<0.05）；Ⅰ，Ⅱ期癌MVD值（26.92±1.06）低于Ⅲ，Ⅳ期癌（28.47±2.23），高分化癌（19.00±2.58）低于中、低分化癌（16.68±1.79）（均P< 0.05）。胰腺癌组织中TFPI-2的表达与Ki67和VEGF的表达呈负相关（r=－0.62，P<0.05；r=－0.54，P<0.05），MVD与TFPI-2表达亦有相关。结论 TFPI-2表达能够抑制胰腺癌细胞增殖，并通过下调VEGF的表达抑制肿瘤新生血管的形成，这可能是其抑制胰腺癌的生长、转移的重要机制。     

组织因子途径抑制物2基因对Panc-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响

目的观察组织因子途径抑制物2（TFPI-2）对胰腺癌细胞系Pane-1细胞裸鼠成瘤及转移的影响。方法将Pane-1-TFPI-2细胞接种到裸鼠皮下作为实验组，观察肿瘤生长情况并测量其大小；取皮下新生肿瘤组织进行原位胰腺接种，观察其对周围组织浸润及远处转移能力的影响。同时以Pane-1-V和Pane-1-P细胞作为对照组。结果实验组和对照组裸鼠皮下均成瘤，但实验组肿瘤体积小于对照组，分别为（438．0±69．8）、（852．0±102．9）和（831．0±78．1）mm’，差异有统计学意义（P〈0．05）。原位胰腺接种，对照组移植瘤浸润胰腺组织，有肝、肺、淋巴结及腹膜转移灶形成，免疫染色显示转移灶CEA阳性，证实其为胰腺肿瘤转移而来。实验组移植瘤包膜完整，无明显浸润及转移现象。结论TFPI-2能抑制肿瘤细胞生长、周围组织浸润及远处转移，为胰腺癌的基因治疗奠定了实验基础。     

TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨TFPI-2基因在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:收集临床胃癌患者术后大体标本64例,采用免疫组织化学方法检测TFPI-2蛋白在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,采用RT-PCR法检测TFPI-2 mRNA在胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达。结果:TFPI-2蛋白在正常胃黏膜组织中的表达高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2蛋白表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。TFPI-2 mRNA在正常胃黏膜组织中的表达明显高于胃癌组织(P0.05),无淋巴结转移胃癌组织的TFPI-2 mRNA表达高于有淋巴结转移的胃癌组织(P0.05)。结论:TPFI-2基因是胃癌发生、侵袭和转移的重要调节因子,其低表达与胃癌淋巴结转移的生物学行为密切相关。     

粪便TFPI-2甲基化联合外周血内糖类抗原199在老年直肠癌筛查中的应用价值

目的:分析粪便组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)甲基化联合外周血内糖类抗原199(CA199)在老年直肠癌筛查中的应用价值。方法:选择我院2020-2021年诊治的老年直肠癌患者72例,将其纳入观察组;另在同期保证性别和年龄资料均衡情况下选择疑似直肠癌但证实为健康受试者72名,将其纳入对照组。检查粪便TFPI-2甲基化、外周血内CA199阳性情况,分析联合诊断价值。结果:观察组患者粪便TFPI-2甲基化、CA199阳性率分别高于对照组(P<0.05)。粪便TFPI-2甲基化联合CA199检测直肠癌诊断效能分别为灵敏度94.57%、特异度77.26%、约登指数0.721、AUC0.863,灵敏度、约登指数及AUC最大。结论:粪便TFPI-2甲基化、外周血内CA199联合检测可以做到优势互补,提高直肠癌诊断效能,建议推广应用。     

组织因子途径抑制物2抑制胰腺癌血管生成的研究

目的研究组织因子途径抑制物2（TFPI-2）对胰腺癌血管生成的影响，探讨其抑制胰腺癌生长及侵袭、转移的机制。方法建立裸鼠角膜微囊移植模型，将3组细胞Pane-1TFPI-2、Pane-1-P和Pane-1-V分别接种裸鼠角膜微囊，观察角膜新生血管的形成；再将上述3组细胞接种于裸鼠皮下，观察裸鼠皮下肿瘤生长及转移情况，并采用抗CD34抗体进行血管免疫组织化学染色检测皮下肿瘤的微血管密度（MVD）。Pane-1-TFPI-2组为实验组，Panc-1-P和Pane-1-V组作为对照组。结果实验组角膜新生血管积分比对照组明显减少（P〈0．05），实验组和对照组裸鼠皮下均成瘤，实验组肿瘤体积（438．0±69．8）mm^3，对照组分别为（852．0±102．9）mm^3和（831．0±78．1）mm^3（P〈0．05）；同对照组比较，实验组未见明显远处转移，其肿瘤微血管密度（9．68±1．12），对照组分别为（18．69±2．51）和（20．32±2．08），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论组织因子途径抑制物2能抑制肿瘤血管的形成，抑制胰腺癌生长。     

Grb2在胰腺癌中的表达及其意义

目的：探讨生长因子受体结合蛋白2（Grb2）在胰腺癌中的表达及其意义。 方法：分别采用real-time PCR和Western blot方法检测6种胰腺癌细胞株中Grb2基因和蛋白表达水平;采用组织芯片检测80例胰腺癌组织及癌旁胰腺组织中Grb2的表达情况,并分析Grb2表达状态与胰腺癌患者临床病理特征的关系。 结果：Grb2的mRNA与蛋白在高侵袭力、低分化细胞株PANC-1、MIA-PaCa-2、AsPC-1中呈相对高表达,而在低侵袭力、高分化细胞株BxPC-3、SW1990、capan-2中呈相对低表达;Grb2在胰腺癌组织中均有表达,而在癌旁胰腺组织中不表达或低表达,统计分析显示,Grb2的高表达与肿瘤低分化以及淋巴结或者远处转移有关（均P<0.05）。 结论：Grb2的表达与胰腺癌的分化程度和侵袭转移力密切相关,高表达者肿瘤恶性程度高,预后差。     

5-Aza-dC和TSA对胰腺癌Panc-1细胞TFPI-2基因甲基化水平及表达的影响

目的探讨甲基化酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-dC)及组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)对胰腺癌Panc-1细胞系中TFPI-2基因甲基化水平及基因表达的影响。方法 Panc-1细胞经5-Aza-dC和TSA单独或联合处理后,应用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP),逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),蛋白印迹法(Western Blot)检测细胞TFPI-2基因启动子区甲基化状态和mRNA及蛋白表达情况。结果 Panc-1细胞经5-Aza-dC单独处理或与TSA联合处理后,TFPI-2基因启动子区高甲基化状态产生逆转,表现为非甲基化,原本不表达TFPI-2 mRNA及蛋白的Panc-1细胞重新表达,TFPI-2mRNA相对表达量为0.821±0.050和0.887±0.042,蛋白表达量为0.613±0.092和0.712±0.059,两者作用效果相似。经TSA单独处理的Panc-1细胞TFPI-2基因启动子区仍为异常高甲基化状态,原本不表达的TFPI-2基因未见重新表达。结论 Panc-1细胞中TFPI-2基因启动子区高甲基化可能是导致该基因失活的主要原因;5-Aza-dC单独作用或与...     

胰腺癌细胞转染hSSTR2基因对下游波形蛋白表达的影响及其意义

目的 探讨生长抑素2型受体(Hsstr2)基因转染胰腺癌细胞对下游蛋白表达的影响及其意义.方法 利用腺病毒载体Ad.CMV.Hsstr2.GFP将Hsstr2全长Cdna导入胰腺癌细胞Panc-1;采用荧光差异双向凝胶电泳技术分离并筛选Hsstr2基因转染胰腺癌细胞前后差异表达蛋白;用反射式基质辅助激光解吸附电离串联飞行时间质谱鉴定差异蛋白.利用免疫印迹验证差异表达的波形蛋白;采用免疫组化检测波形蛋白在胰腺癌组织中的表达,并分析其临床意义.结果 有统计学意义的差异蛋白质点21个;选择1.3倍以上的差异点18个,经质谱鉴定得到13个蛋白质,包括翻译调节蛋白、代谢酶类、与细胞通讯信号传导相关蛋白、细胞结构蛋白、分子伴侣、具有GTPase活性的蛋白及动力蛋白等.波形蛋白在胰腺癌细胞转染Hsstr2基因后表达降低,免疫组化显示波形蛋白主要在低分化的胰腺癌细胞中高表达.结论 筛选的波形蛋白等差异蛋白可能成为新的胰腺癌敏感治疗靶点.波形蛋白也可能成为预测肿瘤恶性程度的一个指标.     

粪便隐血与TFPI-2基因甲基化联合检测在结直肠癌中的应用价值

目的:研究粪便隐血与组织因子途径抑制物-2(tissuefactor pathway inhibitor-2,TFPI-2)基因甲基化联合检测在结直肠癌中的应用价值.方法:将我院收治的100例结直肠癌患者作为观察组,另选同期健康体检志愿者48名作为对照组,收集2组人员的粪便作为检测标本,检测2组人员粪便标本T FPI-...     

Mdm2基因在胰腺癌中的表达及其意义

为探讨mdm2基因在胰腺癌中的表达及其意义，笔者采用流式细胞仪检测mdm2蛋白的表达。包括胰腺癌组的癌组织68例和对照组的癌旁非肿瘤胰腺组织20例。结果示胰腺癌组mdm2蛋白阳性反应率为（19.57±0.297）%，对照组为（2.332±0.358）%，两组差异有显著性（ P<0.01）。胰腺癌中mdm2基因表达明显增高，提示其在胰腺癌的发病中起作用。     

PSTAT3与VEGF在胰腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨PSTAT3和VEGF蛋白在胰腺癌组织中的表达情况及其与胰腺癌临床病理特征、胰腺癌组织中血管新生的关系.方法用免疫组织化学检测了41例手术切除的胰腺癌组织和10例正常胰腺组织中PSTAT3、VEGF的蛋白表达和微血管密度.结果在41例胰腺癌标本中有29（70.7%）例PSTAT3和31（75.6%）例VEGF蛋白的表达阳性,明显高于正常胰腺组织.PSTAT3和VEGF蛋白的阳性表达呈正相关（r=0.758,P＜0.01）.PSTAT3在临床分期较晚和有淋巴结转移的胰腺癌中呈高表达（P=0.003,0.033）,VEGF的表达与临床分期有关（P=0.025）.41例胰腺癌组织中的微血管密度MVD与PSTAT3、VEGF蛋白的阳性表达有关（P=0.003,0.001）.结论胰腺癌组织中存在PSTAT3和VEGF的过表达,PSTAT3与临床病理分期和淋巴结转移有关,PSTAT3可能通过上调VEGF的表达,促进胰腺癌组织中新生血管的形成,可能在胰腺癌的发生发展中起到重要作用.     

TFPI-2对胰腺癌细胞体内和体外侵袭能力的影响

目的 研究组织因子途径抑制物-2(TFPI-2)基因对人胰腺癌细胞系Panc-1细胞侵袭能力的影响.方法 通过脂质体法将TFPI-2基因转染到Panc-1细胞, 用RT-PCR和Western blot分别检测转染前、后TFPI-2 mRNA和相应蛋白的表达.Boyden小室法测定Panc-1-TFPI-2、Panc-1-V和Panc-1-P 3组细胞的体外侵袭能力的变化,同时将3组细胞分别接种裸鼠,观察其体内肿瘤生长及转移情况.结果 转染成功的Panc-1细胞有TFPI-2 mRNA及相应蛋白的表达; Panc-1-TFPI-2组、Panc-1-V组和Panc-1-P组细胞穿膜细胞数分别为(24.4±3.5)个、(61.3±4.1)个和(60.2±3.9)个,前者明显少于后两者(P＜0.05),提示Panc-1-TFPI-2组细胞的体外侵袭能力下降.3组细胞分别接种裸鼠,Panc-1-TFPI-2组肿瘤体积为(438.0±69.8) mm3,与Panc-1-V组的(852.0±102.9) mm3和Panc-1-P组的(831.0±78.1) mm3相比明显缩小,差异有统计学意义(P＜0.05); 镜下见Panc-1-V组和Panc-1-P组肿瘤组织浸润到肌层,有肝、肺转移灶,而Panc-1-TFPI-2组未见肌层浸润及肝、肺转移.结论 TFPI-2基因表达可抑制胰腺癌细胞系Panc-1的侵袭转移能力,为胰腺癌的基因治疗提供了实验依据.     

胰腺癌神经浸润途径的探讨和临床意义研究

目的 探讨胰腺内外神经分布特点和胰腺癌神经浸润的途径。方法 用大体解剖、S－100免疫组化学染色和电镜观察的方法对8例正常胰腺和35例胰腺癌组织的神经分布及改变进行研究。结果 胰头神经丛多来自右腹腔神经结、肝丛及腹腔丛右侧半，丰富的胰内神经走行于小时间质内；胰腺内、外神经浸润的阳性率为73．3％和60．0％；胰腺癌对神经的主要通过直接破坏神经周膜浸入、经进入神经周膜血管的浸入和经破坏神经末梢突触膜的浸入，并且浸润是连续的。结论 在胰头癌根治术时有必要进行腹腔神经丛右侧半的清扫。     

硫氧化还原蛋白在胰腺癌中的表达及意义

目的 探讨硫氧化还原蛋白在胰腺癌及癌旁组织中的表达情况及其临床意义.方法 分别采用RT-PCR和Western印迹检测胰腺癌及癌旁组织中硫氧化还原蛋白的mRNA和蛋白表达量.结果 RT-PCR结果 显示硫氧化还原蛋白mRNA在胰腺癌组织中过表达(RI=0.80±0.08),在癌旁组织中低表达(RI=0.39±0.15);Western印迹结果 同样提示硫氧化还原蛋白在胰腺癌组织中的表达(PrI=0.81±0.10)明显高于癌旁组织(PrI=0.30±0.11),两者相比差异具有统计学意义(P<0.05).进一步结合临床资料分析,发现胰腺癌组织中硫氧化还原蛋白表达量与性别、病变部位和组织分化程度无关(P>0.05),而与肿瘤TNM分期密切相关,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 硫氧化还原蛋白在缺氧和氧化应激环境下促进肿瘤细胞存活和胰腺癌的进展,在胰腺癌的发生发展过程中起到重要的介导作用.     

胰腺癌组织中类肝素酶的表达及其临床意义

目的 探讨类肝素酶1(heparanasel,Hpal)在胰腺癌中的表达及其与胰腺癌发生、发展的关系.方法 采用real-time PCR、Western blot法检测37例胰腺癌组织中Hpal基因和蛋白的表达情况,并分析其与胰腺癌临床病理参数之间的关系.结果 real-time PCR检测结果 显示,Hpal mRNA在胰腺癌中相对表达量为23.53±4.13、在正常胰腺组织中为4.08±2.14、在癌旁组织中为16.93±3.06(P<0.01).Western blot检测结果 显示,Hpal蛋白在正常胰腺组织中的相对表达量为0.36±0.14、在胰腺癌旁组织中为1.21±0.37、在胰腺癌组织中为1.76±0.28(P<0.05).胰腺癌组织中Hpal mRNA与Hpal蛋白表达均高于癌旁组织和正常胰腺组织.胰腺癌组织中Hpal mRNA表达与胰腺癌TNM分期、浸润神经和血管以及淋巴转移有关(P<0.05),但是与组织学分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05).结论 胰腺癌组织中Hpal蛋白呈高表达,Hpal蛋白的高表达可能与胰腺癌的发生及发展有关.     

细胞分裂周期蛋白CDC25家族在人胰腺导管腺癌中的表达及意义

目的 探讨CDC25在胰腺导管腺癌（PDAC）中的表达及意义。方法 分别收集8例手术切除的人胰腺癌、慢性胰腺炎、正常胰腺以及肝和（／或）淋巴结转移组织，采用Affymetrix公司的GeneChip HG-U95Av2 eDNA芯片初步筛查CDC25家族三个成员（CDC25A、B和C）在这些组织中的表达情况，然后通过定量PCR方法对基因芯片结果进行再验证分析。结果 基因芯片结果显示与慢性胰腺炎或正常胰腺组织比较，胰腺癌组织中CDC25B／mRNA的表达水平分别增加了1．4倍和1．9倍，而CDC25A和CDC25C mRNA水平在胰腺癌、慢性胰腺炎和正常胰腺组织中差异无统计学意义；定量PCR检测结果表明在胰腺癌组织中CDC25B／mRNA的平均表达水平分别比正常胰腺和慢性胰腺炎高7．5倍和3．9倍。结论CDC25B在胰腺癌细胞周期调控中起着重要作用，可能参与了胰腺癌的发生、发展和演进过程，CDC25B有可能成为胰腺癌早期诊断和治疗的一个靶点。     

胰腺癌淋巴管生成与血管内皮生长因子C的关系

目的探讨人胰腺癌组织中血管内皮生长因子C（VEGF-C）和其受体3（VEGFR-3）的表达与胰腺癌微淋巴管密度（LVD）、区域淋巴结转移的关系。方法免疫组织化学SP法检测67例人胰腺癌组织VEGF-C的表达情况，VEGFR-3结合Ⅳ型胶原（collagen type Ⅳ）进行LVD计数并结合临床和病理资料进行分析。结果VEGF-C的表达和胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、远处转移均呈显著相关（P〈0．05），LVD与胰腺癌分化程度、区域淋巴结转移、VEGF-C的表达程度呈明显相关（P〈0．01）。VEGFR-3不仅在肿瘤淋巴管内皮细胞上表达还在部分肿瘤血管内皮细胞上表达。结论VEGF-C通过其受体VEGFR-3促进胰腺癌淋巴管生成、区域淋巴结转移。