氧化砷对白血病细胞内 PML/PML-RARα 蛋白的影响

目的：探讨急性早幼粒细胞白血病细胞的分子标志ＰＭＬ－ＲＡＲα在氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）诱导的细胞凋亡中的可能作用。方法：观察Ａｓ２Ｏ３对ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白在亚细胞定位的影响。结果：①在１μｍｏｌ／Ｌ的Ａｓ２Ｏ３作用下，ＨＬ－６０细胞核内ＰＭＬ抗血清染色明显减少，而在胞浆的近核膜区出现弥散分布的荧光染色；②Ａｓ２Ｏ３诱导ＮＢ４细胞内散在分布的ＰＭＬ抗血清染色颗粒明显减少；③通常情况下，少数ＮＢ４细胞的胞浆中存在ＰＭＬ抗血清染色颗粒的聚集，这类细胞在Ａｓ２Ｏ３作用后明显增多，凋亡细胞中ＰＭＬ抗血清染色聚集现象也存在；④全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）预处理２４或４８小时并不改变Ａｓ２Ｏ３对ＮＢ４细胞的凋亡诱导效应。结论：Ａｓ２Ｏ３诱导细胞凋亡的过程不依赖维甲酸信号途径，可能通过ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα及其它相关基因或蛋白的调控来实现。     

氧化砷诱导维甲酸耐药早幼粒细胞白血病细胞（MR—2）凋亡的体外 …

目的：深入了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的机制。方法：以对全反式维甲酸耐药的ＡＰＬ细胞株ＭＲ－２为模型，用细胞生长，活力测定，形态学观察和流式细胞仪分析，四氮唑蓝还原反应及免疫荧光等指标观察Ａｓ２Ｏ３治疗ＡＰＬ的效应途径。结果：１．０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３可诱导ＭＲ－２细胞凋亡，并能降解ＡＰＬ特异蛋白ＰＭＬ－ＲＡＲα融合蛋白。结论：Ａｓ２Ｏ３治疗ＡＰＬ的效应途径可能不同     

氧化砷诱导维甲酸耐药早幼粒细胞白血病细胞(MR-2)凋亡的体外研究

目的：深入了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的机制。方法：以对全反式维甲酸耐药的ＡＰＬ细胞株ＭＲ２为模型，用细胞生长、活力测定、形态学观察和流式细胞仪分析、四氮唑蓝还原反应及免疫荧光等指标观察Ａｓ２Ｏ３治疗ＡＰＬ的效应途径。结果：１．０μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３可诱导ＭＲ２细胞凋亡，并能降解ＡＰＬ特异蛋白ＰＭＬＲＡＲα融合蛋白。结论：Ａｓ２Ｏ３治疗ＡＰＬ的效应途径可能不同于ＡＴＲＡ，但ＰＭＬＲＡＲα可能是二者的共同作用靶点     

As2O3诱导K562细胞凋亡过程中酪氨酸蛋白激酶活性的变化

目的：阐明Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡的可能机制，为Ａｓ２Ｏ３治疗白血病的推广应用提供一定的理论基础。方法：采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及生物化学等方法，观察在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白酪氨酸激酶（ＰＴＫ）活性及某些内源性蛋白酪氨酸磷酸化的变化。结果：在Ａｓ２Ｏ３诱导Ｋ５６２细胞凋亡过程中，细胞胞浆和胞膜蛋白及ＡＢＬ蛋白ＰＴＫ活性降低，分子量为１８万和１２．５万的蛋白酪氨酸磷酸化减少。结论：Ａｓ２Ｏ３可能通过降低细胞内某些蛋白，尤其ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白的ＰＴＫ活性，减少蛋白酪氨酸磷酸化，从而阻断ＢＣＲ／ＡＢＬ抗凋亡信号的传导，诱导Ｋ５６２细胞凋亡     

As2O3对K562细胞BCR/ABL蛋白酪氨酸磷酸化的影响

目的　进一步阐明Ａｓ２Ｏ３ 诱导Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长的可能机制,为Ａｓ２Ｏ３ 在临床上的应用提供理论依据。方法　采用免疫沉淀、Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ、生物化学及免疫荧光等方法研究了Ａｓ２Ｏ３对ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化及其所介导的信号途径和某些凋亡相关蛋白表达的影响。结果　１μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 使细胞内多种蛋白酪氨酸磷酸化减少,而且ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白自身酪氨酸磷酸化亦减少,但０ ．１ μｍｏｌ／ＬＡｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸化的影响不明显;Ａｓ２Ｏ３ 对蛋白酪氨酸磷酸酶（ＰＴＰ） 活性未见明显影响;Ａｓ２Ｏ３ 下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达,但对ＳＴＡＴ１ 和ＳＴＡＴ２ 蛋白的表达以及ＳＴＡＴ１ 蛋白酪氨酸磷酸化无影响;Ａｓ２Ｏ３ 亦不影响凋亡相关蛋白Ｂｃｌ２、ＢｃｌｘＬ／Ｓ、Ｂａｘ、ＩＣＨ１Ｌ、ｐ５３、ＰＡＲＰ的表达,Ａｓ２Ｏ３ 亦使Ｋ５６２ 细胞的ＰＭＬ蛋白降解。结论　Ａｓ２Ｏ３ 可能通过减少细胞内某些蛋白,尤其是ＢＣＲ／ＡＢＬ蛋白酪氨酸磷酸化和（ 或）下调ＪＡＫ２ 蛋白的表达而干扰ＢＣＲ／ＡＢＬ致癌信号的传导,引起Ｋ５６２ 细胞凋亡和抑制其生长。     

抗PML—RARα反义核酸对NB4细胞形态,PML—RARα mRNA及蛋白质？…

目的 探讨抗ＰＭＬ－ＲＡＲα反义核酸（ＦＵＡＳ）对ＮＢ４细胞的分化、ＰＭＬ－ＲＡＲα ｍＲＮＡ表达及ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位的影响。方法 以ＮＢ４细胞为研究对象,细胞形态观察采用Ｗｒｉｇｈｔ染以法;ＰＭＬ－ＲＡＲαｍＲＮＡ表达采用ＲＴ－ＰＣＲ法;ＰＭＬ／ＰＭＬ－ＲＡＲα蛋白细胞内定位采用免疫荧光技术。结果 ＦＵＡＳ处理后第５天,细胞出现部分分化。处理后２４,７２,１２０小时,ＰＭＬ－     

PML—RARα转基因小鼠发生急性早幼粒细胞白血病

为了从整体水平上研究ＰＭＬ－ＲＡＲα融合蛋白的致白血病作用,建立了仅在髓系细胞中表达ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的转基因小鼠。通过表型分析发现一个单系的３只ｈＣＧ－ＰＭＬ－ＲＡＲα转基因小鼠在１－５个月时发生急性早幼粒细胞白血病,从而说明ＭＰＬ－ＲＡＲα融合基因的表达在白血病的发生中起着极为重要的作用。     

细胞凋亡相关基因与白血病

细胞凋亡是当前生命科学研究的热点之一，凋亡相关基因ｂｃｌ－２，Ｐ５３，ｃ－ｍｙｃ，ＩＣＥ家族，ＡＰＯ＝－１／Ｆａｓ，ｂｃｒ－ａｂｌ，ＰＭＬ－ＲＡＲα等涉及白血病发病机制，治疗和耐药，通过调控凋亡相关基因促进白血病细胞凋亡，可能是治疗白血病的新途径。     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的：了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的细胞和分子机制。方法：以早幼粒细胞白血病细胞株ＮＢ４细胞等为研究对象，利用流式细胞仪，ＤＮＡ电泳，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹，免疫组化等手段，观察Ａｓ２Ｏ３对ＡＰＬ的作用。结果：Ａｓ２Ｏ３能显著诱导ＮＢ４细胞凋亡，而不影响ＨＬ－６０和Ｕ９３７的生长和存活。氧化砷能有效降低ＮＢ４细胞中ｂｃｌ－２基因的表达，而对其它几种凋亡相关基因（包括ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂａｘ和ｂｃｌ－ＸＬ）的ｍＲＮＡ水平无影响。结论：这可能是Ａｓ２Ｏ３诱导ＮＢ４细胞凋亡的分子机制之一。     

儿童急性早幼粒细胞白血病PML－RARa基因的检测及意义

作者应用筑巢式逆转录／多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对３４例儿童急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ，Ｍ３）患者进行ＰＭＬ－ＲＡＲａ融合基因的检测，发现１８例初发患者标本中均有融合基因转录本；１３例经全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）诱导缓解（ＣＲ）后的患者中，１２例仍可检测到融合基因的表达；同时对１６例巩固化疗后的患者进行微量残留病（ＭＲＤ）的检测：８例融合基因持续阴性或未次阴性的患者，除ｌ例不久复发外，余均处于良好的ＣＲ状态；而８例融合基因持续阳性或未次阳性的患者，７例已复发，其中３例分别是在ＰＣＲ阳性结果后３，３及４个月复发的。以上结果表明ＰＭＬ－ＲＡＲａ基因检测在儿童ＡＰＬ的诊断，疗效评价及ＭＲＤ监测中同样是一个快速、准确且灵敏的方法。     

Role of promyelocytic leukemia (PML) sumolation in nuclear body formation, 11S proteasome recruitment, and As2O3-induced PML or PML/retinoic acid receptor alpha degradation.

Promyelocytic leukemia (PML) is the organizer of nuclear matrix domains, PML nuclear bodies (NBs), with a proposed role in apoptosis control. In acute promyelocytic leukemia, PML/retinoic acid receptor (RAR) alpha expression disrupts NBs, but therapies such as retinoic acid or arsenic trioxide (As2O3) restore them. PML is conjugated by the ubiquitin-related peptide SUMO-1, a process enhanced by As2O3 and proposed to target PML to the nuclear matrix. We demonstrate that As2O3 triggers the proteasome-dependent degradation of PML and PML/RARalpha and that this process requires a specific sumolation site in PML, K160. PML sumolation is dispensable for its As2O3-induced matrix targeting and formation of primary nuclear aggregates, but is required for the formation of secondary shell-like NBs. Interestingly, only these mature NBs harbor 11S proteasome components, which are further recruited upon As2O3 exposure. Proteasome recruitment by sumolated PML only likely accounts for the failure of PML-K160R to be degraded. Therefore, studying the basis of As2O3-induced PML/RARalpha degradation we show that PML sumolation directly or indirectly promotes its catabolism, suggesting that mature NBs could be sites of intranuclear proteolysis and opening new insights into NB alterations found in viral infections or transformation.     

全反式维甲酸与三氧化二砷对NB4细胞CD44v6表达的调节

黏附分子CD44v6与急性髓系白血病(AML)疾病进展密切相关。本研究探讨全反式维甲酸(ATRA)及三氧化二砷(As2O3)对急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞CD44v6及其相关的PI3K/Akt信号通路的影响。应用显微镜观察检查和流式细胞术检测NB4细胞的分化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染色流式细胞术检测NB4细胞凋亡;实时RT-PCR检测NB4细胞CD44v6 mRNA的表达;Western blot检测NB4细胞CD44v6蛋白的表达及PI3K/Akt信号通路的变化。结果显示:在ATRA诱导NB4细胞分化过程中,CD44v6的转录明显受抑制,但CD44v6蛋白表达无明显增减,PI3K/Akt信号通路被激活。在As2O3诱导NB4细胞凋亡过程中,CD44v6的转录水平及蛋白表达均明显下调,PI3K/Akt信号通路受抑。结论:ATRA与As2O3对NB4细胞CD44v6表达的影响不同。此研究结果为从干预白血病细胞和造血微环境相互关联角度进一步揭示ATRA和As2O3的作用机制奠定了实验基础。     

维甲酸和三氧化二砷下调NB4细胞组织因子表达的作用机制

目的 研究全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）下调ＮＢ４细胞组织因子（ＴＦ）表达的作用机制。方法 用放线菌酮抑制蛋白合成和用放线菌素Ｄ阻断ＲＮＡ合成后,用逆转录－降合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＴＲＡ对ＮＢ４细胞ＴＦｍＲＮＡ转录的影响。将含有ＰＭＬ－ＲＡＲα融合蛋白全部编码序列的重组逆转录病毒质粒转染Ｕ９３７细胞,以转染空载体的Ｕ９３７细胞为对照,用ＥＬＩＳＡ方法检测ＡＴＲＡ和Ａｓ     

槲皮素对白血病细胞中PML基因及蛋白表达的影响和定位的研究

目的 探讨PML基因及蛋白在白血病细胞中的表达和细胞内分布定位。方法 经全反式维甲酸（ATRA）、槲皮素处理后的NB4、HL-60、K562细胞为研究对象，细胞形态学观察采用Wright染色法及荧光染色法；PML蛋白细胞分内分布定位采用免疫荧光技术；PML mRNA表达的检测采用RT-PCR法。结果 （1）ATRA处理后，NB4和HL-60细胞形态学上出现分化表现，K562细胞无变化；经槲皮素处理后，各组细胞形态学上均出现凋亡特征性改变。（2）ATRA处理后，NB4细胞内融合蛋白降解，PML蛋白恢复定位，HL-60、K562细胞内PML蛋白定位分布无变化；槲皮素处理后NB4细胞内融合蛋白降解，PML蛋白聚积于POD结构，随后降解，在HL-60及K562细胞，PML蛋白发生相似改变。（3）ATRA、槲皮素对各组细胞PMLmRNA表达均无显著影响。结论 在不同诱导剂刺激下，PML在蛋白水平参与细胞终末分化及诱导白血病细胞凋亡机制；PML蛋白在POD中发挥诱导凋亡、控制细胞生长的作用。     

二甲基酰胺及环孢菌素A加强砷剂诱导早幼粒细胞白血病细胞系NB4凋亡

目的 观察线粒体膜通透性转运孔（MPT）的开放剂二甲基酰胺（diamide)和抑制剂环孢菌素A对三氧化二砷（As2O3)诱导的NB4细胞凋亡的影响。方法 用不同浓度的二甲基酰胺、环孢菌素A和As2O3单独或联合处理急性早幼粒细胞白血病（APL）细胞系NB4细胞。通过细胞形态学观察、基因且DNA电泳、Annexin-V含量及细胞DNA含量分布等鉴定细胞凋亡。应用流式细胞仪检测罗丹明123（Rh123)的染色强度测定线粒体跨膜电位（ΔΨm)。结果 二甲基酰胺和环孢菌素A均明显增加As2O3诱导的NB4细胞凋亡。同时，As2O3诱导的NB4细胞ΔΨm下降也因二甲基酰胺和环孢菌素A的联合处理而加强。在1μmol/L As2O3处理72h的NB4细胞，27．9％的细胞ΔΨm下降，而两者共同处理时，ΔΨm下降的细胞达59．7％和42．2％。结论 As2O3诱导的ΔΨm破坏可能涉及到组成MPT的重要分子，尤其是腺嘌呤转动蛋白相关分子的巯基氧化。     

PML-RARα及RARα融合蛋白在三硫化二砷诱导的NB4细胞凋亡中的作用研究

为研究PML-RARα及RARα融合蛋白在三硫化二砷（As2S3)诱导的人早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞凋亡中的作用，本研究应用细胞形态观察、流式细胞术测定及DNA电泳等方法观察三硫化二砷对NB4细胞的诱导凋亡作用，用染色体G显带技术、反转录PCR及Western印迹测定这一过程中PML－RARα融合基因及其表达产物、野生型RARα蛋白的变化。结果表明，三硫化二砷在0．5－2μmol/L之间能诱导NB4细胞凋亡，在此过程中PML－RARα融合基因无明显变化，但PML－RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白明显减少。结论提示PML－RARα融合蛋白和野生型RARα蛋白的降解在三硫化二砷诱导的NB4细胞凋亡过程中可能起了重要作用。     

三氧化二砷诱导细胞凋亡的调节

目的探讨细胞内巯基、维甲酸、Ｃａｓｐａｓｅ酶与三氧化二砷诱导细胞凋亡之间的关系。方法采用ＮＢ４、ＨＬ６０细胞为体外模型,观察不同巯基化合物、维甲酸及Ｃａｓｐａｓｅ酶抑制物对三氧化二砷诱导细胞凋亡的影响。结果①乙酰半胱氨酸能阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡,二巯基硫氨（ＢＳＯ）则增强三氧化二砷诱导的细胞凋亡,单巯基甘油,二巯基丙醇对三氧化二砷诱导的细胞凋亡无影响;②Ｃａｓｐａｓｅ抑制剂ＺＶＡＤ．ｆｍｋ可阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡,而ＹＶＡＤ．ｆｍｋ不能阻断三氧化二砷诱导的细胞凋亡;③在ＮＢ４细胞,维甲酸与三氧化二砷有拮抗作用,但在ＨＬ６０细胞中可产生协同作用。结论①三氧化二砷通过与细胞内游离巯基结合,进而改变细胞内信号传导,选择性激活Ｃａｓｐａｓｅ酶,导致细胞凋亡;②维甲酸对三氧化二砷诱导细胞凋亡的调节作用呈细胞特异性。     

维甲酸、砷剂及柔红霉素对NB4细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸（ Ａ Ｔ Ｒ Ａ） 、三氧化二砷（ Ａｓ２ Ｏ３） 及柔红霉素（ Ｄ Ｎ Ｒ） 对急性早幼粒细胞白血病（ Ａ Ｐ Ｌ） 细胞株 Ｎ Ｂ４ 细胞组织因子（ Ｔ Ｆ） 表达的影响。方法　用复钙时间检测 Ｎ Ｂ４ 细胞的促凝活性（ Ｐ Ｃ Ａ） ;用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法检测其 Ｔ Ｆ 抗原;用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｔ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录水平。结果　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均呈时间依赖的方式下调 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ、 Ｔ Ｆ 抗原水平以及 Ｔ Ｆ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录;而 Ｄ Ｎ Ｒ 处理 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ及 Ｔ Ｆ 抗原在早期上调,至２４ ～４８ 小时达到最大值。对 Ｐ Ｃ Ｒ 产物测序,发现 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ 第５ 个外显子缺失的转录本。结论　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均可下调 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ的表达并降低其 Ｐ Ｃ Ａ,改善 Ａ Ｐ Ｌ患者的弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ） 出血症状; Ａｓ２ Ｏ３ 和 Ｄ Ｎ Ｒ 对 Ａ Ｐ Ｌ凝血障碍不同效应的作用机制至少部分与药物对 Ａ Ｐ Ｌ细胞 Ｔ Ｆ 表达和 Ｐ Ｃ Ａ 的不同调节作用有关。     

两种早幼粒细胞白血病融合维甲酸受体α的比较研究

目的：就配基－受体、受体－ＤＮＡ和蛋白质－蛋白质相互作用，以及蛋白质的亚细胞定位等方面，对早幼粒细胞白血病－维甲酸受体α（ＰＭＬ－ＲＡＲα）与早幼粒细胞白血病锌指－维甲酸受体α（ＰＬＺＦ－ＲＡＲα）融合蛋白的生物学功能进行比较。方法：采用受体放射配基结合分析、受体－ＤＮＡ结合分析及免疫荧光技术。结果和结论：ＰＭＬ－ＲＡＲα与ＰＬＺＦ－ＲＡＲα融合蛋白有相似的配基结合亲和力；两者都能以同二聚体形式结合维甲酸反应元件（ＲＡＲＥｓ）；都能与维甲类Ｘ受体（ＲＸＲ）结合，提示ＰＭＬ－ＲＡＲα和ＰＬＺＦ－ＲＡＲα在急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的发病中有共同的分子基础。但是，两者在某些特性方面又有所不同，如：ＰＭＬ－ＲＡＲα和ＰＬＺＦ－ＲＡＲα结合ＲＡＲＥｓ的相对强度有所差异；两者在与ＲＸＲ形成复合物的行为以及亚细胞定位方面亦不尽相同；尤为重要的是，两者可分别通过与ＰＭＬ和ＰＬＺＦ形成异源复合物而阻断ＰＭＬ和ＰＬＺＦ蛋白质所介导的不同调节途径。因此，ＰＭＬ－ＲＡＲα与ＰＬＺＦ－ＲＡＲα之间的这些差异，可能部分解释伴ｔ（１１；１７）的ＡＰＬ患者对全反式维甲酸诱导分化治疗耐药的原因。     

As2O3和／或TGF-β1诱导NB4细胞凋亡中P27^Kip1、cyclin E、内源性TGF-β1的变化及其意义

本研究探讨三氧化二砷（As2O3）和／或转化生长因子-β1（TGF-β1）作用于NB4细胞后的细胞凋亡情况、P27^Kip1、cyclin E及内源性TGF—β1 mRNA水平的变化及其意义。用MTT法检测As2O3对NB4细胞的细胞毒性及IC50用瑞氏-姬姆萨染色观察凋亡细胞形态学的变化,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,半定量RT—PCR检测P27^Kip1、cyclin E以及内源性TGF-β1的mRNA水平。结果表明：As2O3、TGF-β1均能明显抑制NB4细胞的生长,促进NB4细胞的凋亡;As2O3对NB4细胞的抑制及促凋亡作用均呈剂量-时间依赖关系,24小时的IC50约为12μmol／L,48小时的IC50约为5μmol／L,72小时的IC50约为3μmol／L。As2O3和／或TGF—β1均可使NB4细胞出现细胞周期阻滞,5μmol／L As2O3使NB4细胞阻滞在G2／M期,5ng／ml TGF-β1使NB4细胞阻滞在G1期,两者联合处理组主要使S期阻滞。As2O3、TGF-β1分别作用于NB4细胞时均可见P27^Kip1及内源性TGF-β1的mRNA表达上调,而cyclin E的mRNA表达下调;联合处理组结果显示TGF—β1可增强As2O3上述作用。结论：As2O3及TGF-β1均可诱导NB4细胞凋亡,引起细胞周期分布异常;As2O3及外源性TGF—β1可能通过上调内源性TGF-β1使P27^Kip1高表达以诱导细胞凋亡;TGF-β1可能直接抑制了cyclin E的表达,或者通过上调P27^Kip1的表达而反馈抑制cyclin E的活性,从而导致NB4细胞周期阻滞。