高效液相色谱法测定褪黑激素合成标准品及其在缓释植入块中的含量

采用紫外检测器高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）代替文献中荧光和电化学检测器ＨＰＬＣ法检测Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ（褪黑激素）合成标准品及其在缓释植入块中的含量。该法简便、快速、准确，可用于生物中Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ的定量测定     

用高效液相色谱法测定褪黑激素

本首次用高效液相色谱（紫外检测器）测定褪黑激素。检测波长２６０ｎｍ，流动相为甲醇：Ｈ２Ｏ＝１：１（Ｖ／Ｖ），（ｐＨ４．０），流速１ｍｌ／ｍｉｎ。研究结果，样品重复性（峰面积）为ｘ↑－±δｘ＝４８７３２．２０±２５７．６８，ＣＶ％为０．５３％。结果表明，利用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）测定褪黑激素远比目前应用的放射免疫试验、免疫组织化学法和气谱－质谱法简便、快速。     

高效液相色谱法测定褪黑激素合成标准及其在缓释植入块中的 …

采用紫外检测器高效液相色谱法代替文献中荧光和电化学检测器ＨＰＬＣ法检测Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ合成标准品及其在缓释植入块中的含量。该法简单，快速，准确，可用于生物中Ｍｅｌａｔｏｎｉｎ的定量测定。     

高效液相色谱法对褪黑激素片含量的测定

目的　采用高效液相色谱 (HPLC)法 ,测定褪黑激素片中褪黑激素的含量。方法　HPLC法 ,采用C18柱 ,甲醇∶KH2 PO4溶液 (0 .0 2mol/L) =4 0∶6 0为流动相 ,检测波长 2 5 4nm。结果　褪黑激素在 10～ 5 0 μg/ml范围内线性关系好 ,r =0 9995 ,回收率高。结论　该方法简便 ,快速 ,准确 ,重现性好。     

高效液相色谱法测定苦参碱含量

采用高效液相色谱法测定苦参碱原料药的含量 ,用氨基硅烷键合硅胶柱 (4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,以乙腈 :无水乙醇 :1%磷酸水溶液 (80 :8:12 )为流动相 ,用紫外检测器于 2 2 0nm波长处检测。结果 ,线性范围为 4 4 6 4～ 2 2 3 2mg/L(r =0 9998) ,检测限为 10ng。提示本法操作简便 ,分析准确快速 ,干扰小     

高效液相色谱法测定心肌腺苷酸含量

目的 :用改良高效液相色谱法测定小鼠心肌腺苷酸含量。方法 :ODSC18柱 ,检测波长 2 5 4nm。甲醇 - 5 0mmol/L磷酸盐 (1∶99)缓冲液 (pH6 .0 7)为流动相。 结果 :心肌ATP、ADP和AMP平均回收率分别为 10 1.1%± 9.3%、94 .8%± 10 .6 %及 98.3%± 5 .7% ;日内RSD分别为 3.5 %、6 .9%和 4 .8% ;日间RSD分别为 6 .4 %、8.6 %及 8.2 %。结论 :该方法简便、快速、灵敏。采用该法发现病毒性心肌炎小鼠心肌ATP、ADP和AMP含量降低。     

高效液相色谱电化学法测定血清褪黑激素水平

目的 :建立测定血清褪黑激素水平的高效液相色谱方法。方法 :血清褪黑激素用氯仿反复萃取 ,氯仿层经真空干燥、氮气吹干 ,最后残流物溶解进样。用C18反相柱进行色谱分析 ,电化学检测器测定结果。结果 :测定线性范围达 1.72nmol·L-1 ,最低检测限为 0 .0 84nmol·L-1 ,日内变异 4.2 %～ 4.8%,日间变异 4.4%～ 5 .0 %,方法回收率 5 5 .3 %～ 76.5 %。结论 :本方法可用于临床实验室测定血清褪黑激素水平。     

高效液相色谱法测定诺氟沙星含量

诺氟沙星(Norfloxacin)系氟喹诺酮类抗菌药物,其制剂有胶囊、软膏、眼膏、注射液等,《中国药典》95年版规定非水滴定法和紫外分光光度法分别测定原料和胶囊的含量[1],由于其方法局限性较大,1998年国家药品监督管理局修订了其质量标准,采用高效液相色谱(HPLC)法测定诺氟沙星胶囊含量(外标法)[2],笔者采用内标法测定诺氟沙星的含量,较外标法更为准确,获得了较满意的结果,报道如下。1　材料、方法和结果1.1　仪器与试药　日本岛津LC-6A高效液相色谱仪、SPD-6AV紫外检测器、SCL-6B系统控制器、C-R6A数据处理机、LC-6A输液泵。诺氟沙星…     

HPLC柱前衍生法测定谷丙甘氨酸咀嚼片含量

目的建立谷丙甘氨酸中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸的高效液相分析方法,并用该方法测定咀嚼片中3种氨基酸的含量,为该制剂的质量标准制定提供依据.方法谷丙甘氨酸咀嚼片中3种氨基酸含量测定采用异硫氰酸基苯酯柱前衍生化高效液相色谱法.色谱条件:色谱柱为Inertsil ODS-3V(4.6mm×250mm,5μm);流动相A为0.1mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH6.5)/乙腈(93:7),流动相B为蒸馏水/乙腈(20:80)二元梯度洗脱分离;检测波长为254nm;流速为1ml/min;柱温为40℃.外标法计算3种氨基酸的含量.结果谷丙甘氨酸咀嚼片中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸分离度良好,在所考查的浓度范围内浓度对峰面积线性回归r》0.99,平均回收率为98.7%,日内及日间RSD＜1.3%,三批样品中3种氨基酸的含量均在95%～105%之间.结论用HPLC柱前衍生方法可测定谷丙甘氨酸制剂中谷氨酸、丙氨酸及甘氨酸含量.     

老年大鼠松果体中褪黑素含量的测定

目的: 采用高效液相色谱法(HPLC)测定老年大鼠松果体中褪黑素(MT)含量.方法: ≥24月龄16只健康SD大鼠,雌雄各半,随机分为2组.采用Hypersil ODS2色谱柱,甲醇与水的混合液为流动相,应用HPLC法测定松果体上清液中MT含量.结果: 松果体MT含量50～1 000 pg之间时,线性关系良好,MT的检测下限为10 pg,回归方程为Y=36.917X 838.36 (r=0.999 8,P＜0.05).结论: HPLC法测定大鼠松果体MT含量简便、快速、灵敏度高,准确度与精密度较好,是一种理想的检测方法.     

HPLC法测定血必净注射液中丹参素含量

目的建立血必净注射液中丹参素含量的HPLC测定方法,以此作为血必净注射液质量控制方法。方法采用Agilent1100高效液相色谱仪、Agilent1100-DAD检测器、Agilent1100色谱工作站数据处理系统等测定血必净注射液中丹参素的含量。结果丹参素进样量在0．03856～0．38560肛g,线性关系良好（r=0．99998）,精密度RSD为0．81％（n=5）,重复性RSD为1．25％（n=5）,加样平均回收率为98．95％,RSD为1．60％（n=9）。结论本方法操作简便,结果准确、可靠,可用于血必净注射液中丹参素的含量测定。     

抗癫痫药物的血浆浓度测定

作者采用高效液相色谱法同时测定多种抗癞痫药物在人血浆中的浓度。测定药物有朴痫酮、苯巴比妥、苯妥英、卡马西平和10.11一环氧化卡马西平。用于研究抗癫痫药物配伍用药后体内各药物动力学的变化及临床治疗药物的监测工作。色谱条件:ODS-C18柱,紫外检测波长210nm,流动相为甲醇和水的等体积混合溶液,流速为1.0ml/min,内标为苯乙酮。本文采用相对校正因子来控制多批样本测定质量,用t检验判断药物测定的稳定性,证明本法稳定,重复性好,灵敏度高等优点。     

高效液相 (HPLC) 荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度

 目的  建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。方法  血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2-羧乙基)膦盐酸盐［tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride,TCEP］还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(7-fluorobenzofurazan-4-sulfonic acid ammonium salt,SBD-F)进行衍生化反应,荧光检测器检测。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温29 ℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5∶96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱。激发波长385 nm,发射波长515 nm。采用外标法定量。结果  Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50~800 μmol/L、4~64 μmol/L、10~160 μmol/L和2.5~40 μmol/L。Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L。各组分日内、日间精密度RSD均<12 %。平均回收率为95.01 %~116.17 %。结论  该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测。     

成年大鼠脑透析液和血清中褪黑素含量的测定

目的采用高效液相色谱（HPLC）-荧光法和酶联免疫（ELISA）法测定成年大鼠脑微透析液及血清中的褪黑素（MLT）含量，比较2种检测方法的灵敏性、准确性及可靠性。方法将微透析引导管置入正常成年大鼠纹状体内1周后，采用脑微透析技术动态收集2：00，6：00，10：00，14：00，18：00和22：00的透析液，并于次日22：00行尾静脉取血；用HPLC-荧光法和ELISA法分别测定透析液及血清样本中的MLT水平。结果HPLC-荧光法测定MLT检出限为0.1 pg/mL，在1.0～500 pg/mL之间呈线性关系，回归方程y=10 446 x+8 603.5（r=0.998 7，P<0.001），日间、日内精密度均<6%；ELISA法检出限为5.92 pg/mL，检测线性范围为12.35～1 000 pg/mL。用HPLC-荧光法测定2:00，6:00，10:00，14:00，18:00和22:00大鼠脑透析液中的MLT含量分别为（32.99±2.22），（18.25±2.27），（4.03±1.70），（2.92±1.08），（12.08±1.77）和（21.83±2.04）pg/mL，具有明显的昼夜节律性，探针回收率为12%～13%；22：00血清中的MLT含量为（82.62±8.09）pg/mL，提取回收率>90%，且血清与透析液中的MLT水平呈高度正相关（r=0.987，P<0.001）；用ELISA法测定血清中的MLT含量为（81.31±9.62）pg/mL，且用2种方法测定血清中MLT差别无统计学意义（P=0.115）。 结论用HPLC-荧光法测定大鼠脑微透析液和血清中的MLT含量具有灵敏、快速、准确、重复性好等特点，且HPLC-荧光法和ELISA法测定血清中的MLT具有较好的一致性。     

HPLC法测定新疆鼠尾草三萜有效部位中熊果酸的含量

目的:建立新疆鼠尾草以三萜为有效部位的熊果酸含量的高效液相色谱检测方法。方法:采用高效液相色谱法(HPLC法)检测浸膏中熊果酸的含量,色谱柱为Waters Symmetry C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇—水—冰乙酸—三乙胺(85:15:0.03:0.06):甲醇=70:30,流速0.8ml/min,检测波长210nm,柱温30℃。结果:HPLC法测得熊果酸的线性范围为Y=447684X-7680(r=0.9999),平均回收率为98.84%,RSD=1.69%(n=6)。结论:HPLC法测定熊果酸含量,操作简便,灵敏度高,重现性好,可为新疆鼠尾草以三萜为有效部位的质量控制提供一定的依据。     

高效液相色谱法定量检测大肠癌组织中核黄素实验研究

目的 定量测定大肠癌组织和正常组织中核黄素.方法 采集40例大肠癌手术切除的大肠组织,对其中的癌组织和边缘正常组织采用高效液相色谱仪定量检测核黄素含量.结果 正常组织和癌组织中核黄素含量分别为(786±91)ng/g和(609±57)ng/g,癌组织中核黄素含量均低于边缘正常组织含量,P<0.001,差异有显著性.结论 本方法 简便,取样少、灵敏度高、精密度好、结果 准确可靠,可以用于癌组织内核黄素含量的测定,对肿瘤自体荧光机制研究有重要意义.     

高效液相色谱法快速测定脑梗塞模型大鼠脑组织中多胺的含量

目的:建立一种简便、灵敏和快速分离测定大鼠脑组织中腐胺、精脒和精胺等多胺含量的高效液相色谱法。方法:采用苯甲酰氯作为衍生化试剂,以1,6-己二胺为内标,采用polygocyl(250×4.6 mm 5μm)C18色谱柱,流动相为甲醇-水(62:38 V/V),流速1.0 mL/min,检测波长229 nm。结果:本法线性范围是1～2 000/mL,回收率大于90%。日内和日间变异系数为1.5%～4.2%。最低定量浓度为1 nmol/mL。结论:该方法符合生物样品分析要求,为脑组织中多胺的含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。