旋毛虫肌幼虫体外生存状况实验研究

目的观察旋毛虫肌幼虫在干燥和生理盐水环境中的生存状况。方法90只昆明小鼠被随机分为正常对照组、生理盐水组和干燥组,生理盐水组和干燥组分别再分为4组,共9组,每组10只。正常对照组每鼠经口感染200条收集的肌幼虫。生理盐水组分为4组：①肌幼虫0℃放置10 d,②肌幼虫20℃放置10 d,③肌幼虫0℃放置20 d,④肌幼虫20℃放置20 d;干燥组分组与生理盐水组相同。然后将8组小鼠每鼠经口感染200条处理的肌幼虫。感染后30 d处死小鼠,取膈肌压片镜检,并将全部肌肉人工消化后计数幼虫数。结果在生理盐水和干燥环境中放置10 d的肌幼虫分别感染小鼠后,压片法和人工消化法镜检,感染小鼠的幼虫检出率均为100%;在生理盐水和干燥环境中放置20 d的肌幼虫分别感染小鼠后,两种方法镜检,感染小鼠均未检出幼虫。结论在生理盐水和干燥环境中,肌幼虫能生存较长时间,但不超过20 d。     

旋毛虫肌幼虫在实验感染兔横纹肌内的分布

观察了旋毛虫肌幼虫在实验感染兔横纹肌内的分布 ,在舌肌中荷虫密度最高 ,顺次是咬肌、膈肌、肱三头肌、肩胛肌、肱二头肌、腓肠肌、胸大肌、肋间肌、腰肌 ,心肌中未发现幼虫 ,提示检查兔的舌肌、咬肌或膈肌发现肌幼虫的阳性率高。     

旋毛虫成虫、新生幼虫和肌幼虫抗原的保护性免疫研究

目的：比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原接种小鼠诱导产生的保护性免疫。方法:检查肠道成虫、肌幼虫和血液中嗜酸性细胞数;用ELISA测血清中抗旋毛虫肌幼虫IgG抗体滴度。结果：成虫、新生幼虫和肌幼虫抗 免疫组的成虫减虫率分别为82.19％、72.31％和42.88％;肌幼虫减虫率分别为68.83％、78.19％和51.96％。血清IgG抗体滴度明显升高,成虫、新生幼虫和肌幼虫抗原免疫组的GMRT分别为对照组的7.46倍、5.28倍和4.92倍。血液嗜酸性粒细胞明显增多。结论：旋毛虫成虫抗原、新生幼虫抗原均为激发特异性液免疫和细胞免疫,诱导小鼠对攻击感染产生保护性。其中,成虫抗原和新生幼虫抗原显示出更好的免疫原性,而成虫抗原有可能成为较理想的免疫疫苗来源。     

旋毛虫肌幼虫在感染小鼠体内的分布

目的观察旋毛虫肌幼虫在感染小鼠体内不同部位横纹肌内的分布和密度。方法分别取感染旋毛虫小鼠的舌肌、咬肌、胸肌、腹肌、前肢肌、后肢肌、膈肌和背肌各50mg,肌肉压片镜检。结果膈肌幼虫密度最高,其次为舌肌、胸肌;前肢肌、后肢肌、咬肌、背肌幼虫密度无明显差异,均低于胸肌,腹肌幼虫密度最低。结论感染旋毛虫的小鼠从膈肌取材,检出肌幼虫的阳性率较其他部位高。     

旋毛虫肌幼虫囊包不染色标本的制作

在医学寄生虫学实验教学中,制作旋毛虫肌幼虫囊包标本通常采用染色封制法,梭形囊包明显,但如果分色过程掌握不好,虫体轮廓不清。作者尝试制作旋毛虫肌幼虫囊包不染色封制标本,用于教学实践取得良好效果。介绍如下。 旋毛虫肌幼虫囊包取自感染旋毛虫幼虫的猪横纹肌。操作工具:眼科剪,眼科镊,载玻片,大瓶皿,显微镜,吸管,玻片标本盘等。试剂:甲醛,蒸馏水,乙醇,水杨酸甲酯,中性树胶。 将感染旋毛虫幼虫的肌肉剪成碎块,夹在两张载玻片之间,轻轻加压、捆扎,置于10％甲醛固定12～24 h。解开载玻片后再浸泡1～2h,充分固定。倾去甲醛,用蒸馏水洗3次,每     

旋毛虫幼虫的组织化学观察

本文对感染河南株旋毛虫６１０１０条后７．５个月的昆明品系小白鼠膈肌内幼虫的组织化学进行了较为全面的观察。结果显示旋毛早 糖原，ＤＮＡ、ＲＡＮ、蛋白质结合的α－氨基、酪氨酸、色氨酸及组氨酸、碱性蛋白质、、酸性粘多糖、淀粉样物质下班样物质胶原及网状纤维、ＡＫＰ、ＡＣＰ及ＡＴＰ酶等物质对上述物质的定位、含量或活力作了较为详细的描述，并对其生理意义进行了讨论。     

旋毛虫肌幼虫囊包标本的复染制作方法

本研究采用单染和复染两种方法对旋毛虫肌幼虫囊包标本进行染色。单染方法:制片经甲醛、乙醇和冰醋酸溶液固定,用乙醇硼砂卡红染色液(4%硼砂水溶液100 ml,卡红1 g,70%乙醇100 ml)染色。复染方法:制片经甲醛、乙醇和冰醋酸溶液固定,用乙醇硼砂卡红染色液和固绿染色液(固绿0.1 g,95%乙醇100 ml)染色。结果显示,单染标本,囊包与周围肌细胞着色无明显差别,结构不清晰,不易观察,囊内幼虫可辨认。复染标本,囊包结构清晰;囊内幼虫、囊包和肌细胞呈不同的颜色,囊包梭形显著,囊内幼虫特征典型。与单染标本相比,复染标本着色适度,染色效果好,易于观察。     

人工消化法检验旋毛虫效果及其对肌幼虫的影响

目的观察人工消化法检验旋毛虫的效果及对肌幼虫活性、感染性的影响。方法将小鼠感染100条肌幼虫后30 d剖杀,分别应用3组消化法检验,即：消化2 h组（磁力搅拌法）、消化12 h组、消化20 h组,每组取肉样10份,每份含300个囊包,消化后分别计数每份肉样的幼虫数;同时对幼虫活性进行观察。40只昆明小鼠随机分为对照组和3个消化组（消化2、12、20 h组）,共4组,每组10只。对照组：每鼠感染100个囊包;消化组：将3组方法收集的幼虫分别感染小鼠,每鼠经口感染100条幼虫。感染后30 d剖杀,取膈肌压片镜检,并用磁力搅拌法收集幼虫、计数。结果消化2、12、20 h组的幼虫检出率分别为78.47%、76.73%、68.63%,死亡率分别为0.59%、4.60%、7.43%。3组收集的幼虫分别感染小鼠,30 d后剖杀,与对照组相比,消化2、12、20 h组的减虫率分别为60.56%、61.94%、73.07%。结论磁力搅拌法（消化2 h）在幼虫检出率、幼虫活性、幼虫感染性等方面均优于消化12、20 h实验组,为进行旋毛虫检验和动物实验,优先选择的方法。     

旋毛虫幼虫发育过程中的细胞凋亡及坏死

细胞凋亡 (apoptosis)又称程序性细胞死亡(programmedcelldeath)。在动物发育过程中普遍存在细胞凋亡现象。秀丽新杆线虫 (Caenorhabditiselegans)在发育过程中产生1 090个细胞 ,有131个细胞经凋亡方式被清除。可见在寄生虫发育过程中细胞凋亡是必需的 ,与寄生虫的生长、发育、感染和转归等密切相关。研究寄生虫细胞凋亡及其规律 ,对于抗寄生虫药物的设计具有重要意义。作者对发育过程中的旋毛虫幼虫细胞凋亡进行了研究 ,报告如下。     

一种旋毛虫肌幼虫囊包标本的单染制作方法

本研究采用醋酸明矾卡红染色液对旋毛虫肌幼虫囊包标本进行染色。为观察不同染色时间对制片效果的影响,分别采用4种染色方法:①染色20 h后,分色;②染色2.5 h,不分色;③染色20 h,不分色;④染色40 h后,分色。结果显示,染色方法 1制作的标本效果最佳。囊包、囊内幼虫和周围肌纤维色泽差别较大,易于观察。囊壁内外两层结构可清晰辨别,囊内幼虫典型。     

亚硝基铁氰化钠来源的外源性NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫作用研究

目的探讨亚硝基铁氰化钠(SNP)来源的NO体外杀伤旋毛虫肌幼虫的作用及其相关机制。方法制作浓度为1 000条/ml的旋毛虫肌幼虫悬液。培养板每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,再加入SNP,使其终浓度分别为0.02、0.05、0.10、0.20、0.50 mmol/L和1.00 mmol/L,并设空白对照组,37℃5%CO2培养箱中孵育4 d后收集各孔肌幼虫,镜检计数,计算并比较各组肌幼虫死亡率。另于培养板中每孔加入0.1 ml肌幼虫悬液,分别设A组(对照组,1.00 mmol/L SNP)、B组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00 mmol/L SNP)、C组(1.00 mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、D组(0.15 mmol/L Fe SO4+1.00mmol/L L-半胱氨酸+1.00 mmol/L SNP)、E组(0.15 mmol/L Hb+1.00 mmol/L SNP),培养、检测方法同前,计算并比较各组肌幼虫死亡率。结果 0.02 mmol/L SNP组与空白对照组的旋毛虫肌幼虫死亡率分别为(5.50±1.80)%和(4.93±0.25)%(P0.05)。0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mmol/L SNP组虫体死亡率分别为(20.19±2.71)%、(29.21±2.12)%、(41.81±2.03)%、(47.85±3.79)%和(60.98±5.19)%,与空白对照组比较差异均有统计学意义(P均0.05)。旋毛虫肌幼虫死亡率与SNP浓度呈正相关(rs=0.875,P0.05)。B、C、D、E组肌幼虫死亡率分别为(49.48±1.34)%、(47.29±2.79)%、(26.28±1.37)%和(17.93±3.49)%,均较A组(60.98±5.19)%有所下降(P均0.05)。结论 SNP来源NO对体外培养的旋毛虫肌幼虫具有杀伤作用,而血红蛋白、硫酸亚铁、L-半胱氨酸对该杀伤具有抑制作用,以血红蛋白抑制效果最显著。     

不同时龄旋毛虫新生幼虫的体外培养和收集方法研究

目的研究不同时龄旋毛虫新生幼虫(NBL)在宿主体外培养和收集的方法。方法收集旋毛虫感染大鼠小肠内的成虫,体外培养产生NBL,将NBL置于含双抗和20%小牛血清的RPMI-1640培养基中,在37℃5%CO_2培养箱中培养24、36、48和72 h,经过滤、离心及清洗收集不同时龄NBL,观察其活力及生长情况。结果不同时龄NBL能在体外适合培养基中存活72 h以上,虫体随培养时间的延长而增大。结论在37℃5%CO_2条件下用含双抗和20%小牛血清的RPMI-1640培养NBL效果好,可培养和收集不同时龄的NBL。     

旋毛虫肌幼虫囊包染色标本制作方法的改进

目的探讨旋毛虫肌幼虫囊包染色标本的制作方法。方法采用醋酸卡红染色法制作旋毛虫肌幼虫囊包标本。结果醋酸卡红染色的标本,囊包轮廓清晰,囊内幼虫透明度及清晰度高,体态自然,立体感较强。结论醋酸卡红染色可用于旋毛虫肌幼虫囊包永久标本的制作。     

The measurement of antigens released by radiation-attenuated Trichinella spiralis larvae

Summary A radioimmunoassay has been developed that uses antisera raised to different excretory-secretory antigens of infective larvae of Trichinella spiralis (LESA) to measure accurately the output of these antigens following gamma irradiation at doses from 10 to 120 Krads. In the lower range (up to 20 Krads) irradiation results in the increased export of antigens to the culture supernatant in a subsequent 3 h period, without obvious or gross damage to the worms. Higher doses (> 40 Krads) suppress antigen release over the same period compared with the activity of untreated (control) cultures. This work makes two contributions. It describes a sensitive assay system which detects and measures parasite antigens that may be important both in protection and in serodiagnosis, and it offers for the first time an explanation for the special properties of the lower dose range larval irradiation-attenuated vaccine in inducing a high degree of reinfection resistance, as reported in older literature and recently confirmed by us.     

Effects of immune serum and cells on newborn larvae of Trichinella spiralis

Serum and cells, collected from mice immunized by infection either with newborn larvae (NBL) or per os with infective larvae of Trichinella spiralis, were passively transferred to mice which were challenged with NBL. Serum always gave very strong protection if given before challenge but not if given within 2 h after challenge. Cells from mice immunized with NBL also gave good protection, whereas those from mice immunized per os did not. If NBL were incubated in serum from immunized mice their infectivity was reduced, but if the serum was pre-absorbed with NBL this effect was lost. Such absorbed serum did not confer immunity on recipient mice.     

白酒对鼠体旋毛虫幼虫的杀伤作用

目的观察白酒对鼠体旋毛虫幼虫的杀伤作用。方法80只昆明小鼠,各喂食含500条旋毛虫幼虫的肌肉后随机分成8组(10只/组),实验组分别灌饲0.2ml或0.4ml乙醇体积分数为0.62、0.54和0.46的白酒,对照组灌饲相同体积的生理盐水。7d与40d后各剖杀5只,检查肠道旋毛虫成虫和肌幼虫数。结果灌饲0.2ml乙醇体积分数为0.62、0.54和0.46的白酒的小鼠肠道成虫数分别为(80.00±11.25)条、(208.00±22.89)条及(256.00±69.37)条,肌幼虫数分别为(37993.60±296.50)条、(54166.60±2951.98)条和(63808.40±2442.81)条,灌饲0.4ml乙醇体积分数为0.62、0.54和0.46的白酒的小鼠肠道成虫数分别为(21.00±11.83)条、(87.00±27.66)条及(112.00±25.38)条,肌幼虫数分别为(24691.20±4628.14)条、(47266.60±1955.49)条及(50833.40±2211.50)条,生理盐水对照组分别为(312.00±76.93)条和(81050.00±13157.74)条,差异有统计学意义(P均0.05)。灌饲白酒的感染鼠肠道成虫与肌幼虫数均随乙醇灌胃量的增大而减少(P均0.05)。结论白酒对鼠体内旋毛虫的杀伤作用与乙醇含量有关,小鼠灌饲白酒可降低旋毛虫感染程度。     

一种快速、简便制作旋毛虫幼虫永久标本的方法

经甲醛、乙醇、冰醋酸溶液固定,固绿染色液染色制作旋毛虫肌幼虫标本,方法简单,制作快速,幼虫虫体清晰可见,整体色调柔和,易于观察,可长期保存。