同源盒 A9和前 B细胞白血病同源盒基因在结肠癌中的表达及意义

目的观察同源盒 A9(HOXA9)和前 B细胞白血病同源盒基因(PBX3)在结肠癌组织及其癌旁组织中的表达，探讨二者与结肠癌临床病理参数的关系及其对结肠癌 3年预后的影响。方法选取 2014年 8月至 2016年 5月于南阳市第一人民医院进行手术治疗的结肠癌病人 77例，取其癌组织及相应癌旁组织，实时荧光定量 PCR(qRT?PCR)法检测结肠癌及其癌旁组织 HOXA9 mRNA、PBX3 mRNA表达情况，免疫组织化学法检测其癌组织及癌旁组织标本中 HOXA9P与 PBX3蛋白表达，分析 HOXA9P、PBX3表达与临床病理特征的关系，运用 Spearman法分析 HOXA9P与 PBX3表达相关性，通过 Kaplan?Meier法对结肠癌病人 3年内存活情况进行分析。结果与癌旁组相比，结肠癌组 HOXA9 mRNA［(3.09±0.55)比(1.02±0.15)］、 PBX3 mRNA表达水平［(2.51±0.47)比(0.98±0.11)］、 HOXA9、PBX3蛋白阳性表达率显著升高(P＜0.05)； HOXA9、PBX3表达均与结肠癌病人分化程度、 TNM分期有关(P＜0.05)； Spearman相关性分析结果显示结肠癌组织中 HOXA9与 PBX3 mRNA表达呈正相关(rs＝0.643，P＜0.05)； Kaplan?Meier法分析显示 HOXA9、PBX3阳性表达组 3年内总生存率(OS)显著低于阴性表达组(41.2% VS 84.6%，43.6% VS 86.4%)。结论结肠癌组织中 HOXA9、PBX3均高表达，二者呈正相关，均与结肠癌分化程度、 TNM分期及预后相关，可能共同参与结肠癌的发生发展。     

定量检测WT-1基因在急性髓细胞白血病的表达水平及其临床意义

目的 通过采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测急性髓细胞白血病(AML)患者WT-1基因的表达情况,分析其表达水平与AML患者亚型关系,及其在AML临床疗效的作用.方法 采用实时荧光定量PCR方法分别检测10例正常人及48例初诊急性髓细胞白血病患者骨髓细胞WT-1基因mRNA的表达水平(拷贝数),将ABL基因作为内参照基因,比较AML组与对照组WT-1基因表达水平的差异性,以WT-1基因表达水平的中位数作为界值,将48例初诊AML分为WT-1基因高表达组和低表达组,并通过高表达组和低表达组间CR1率(初次诱导化疗缓解率)的差异,从而分析WT-1基因表达水平与急性髓细胞白血病预后的关系.结果 对照组WT-1基因表达水平中位数为0.008(0～0.019),AML组WT-1基因表达水平中位数为0.679(0～1.680),WT-1基因在AML骨髓细胞表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.001).WT-1表达对AML患者治疗效果的影响:AML各亚型高表达组与低表达组初次诱导后完全缓解率(CR1率)差异有统计学意义(P＜0.05),WT-1高表达组缓解率低于低表达组,AML患者WT-1基因高表达组疗效比低表达组疗效差.结论 WT-1基因可作为AML微小残留病(MRD)的分子标志,也可作为AML预后分层的分子学指标.     

成人急性髓细胞白血病DNMT3A基因突变的检测和临床意义

目的研究急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia,AML)中DNA甲基转移酶3A基因(DNA methyltransferase 3 alpha,DNMT3A)突变的检出率和临床意义。方法收集70例恶性血液病病人骨髓标本,采用聚合酶链式反应技术(polymerase chainreaction,PCR)扩增目的片段,然后进行直接测序检测DNMT3A突变情况。结果 70例患者中有6例突变,全部为初发AML患者,54例初发AML患者的DNMT3A突变率为6例(突变率11.1%),其中1例为R882C突变,5例为R882H突变,在正常核型AML患者中的突变率为19.2%,在急性单核细胞白血病(acute monocytic leukemia,AML-M5)中突变率高达21.7%。DNMT3A突变组患者的年龄、性别、骨髓原始细胞数、初发时白细胞数、首次化疗缓解率等临床指标与DNMT3A野生型组相比均无统计学意义。结论 DNMT3A基因突变在AML中发生率较高,多见于正常染色体核型和AML-M5患者中,其与预后的关系有待进一步研究。     

老年急性髓细胞白血病患者FLT3表达的意义

目的研究老年急性髓细胞白血病（AML）患者Fms样的酪氨酸激酶3（FLT3）的表达水平,探讨其在老年AML中的作用机制及临床意义。方法采用半定量RT-PCR方法检测36例老年AML和11例良性血液病为对照组FLT3表达水平。结果36例老年AML组表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．001）;复发难治组最高,初治组居中,完全缓解组最低,三者表达水平具有显著性差异（P〈0．05）。结论FLT3在老年AML中存在过度表达,提示FLT3在老年AML的发病机制中有一定作用。FLT3表达水平与疾病进展及预后相关。在检测微小残留病,估计残留白血病细胞负荷量,也可能有一定价值。     

急性髓细胞白血病CD34抗原表达及其临床意义

目的检测CD34抗原在急性髓细胞白血病(AML)中的表达,探讨其与某些临床特征及疗效的关系.方法采用流式细胞术检测AML患者骨髓白血病细胞CD34抗原及髓系与淋系抗原的表达.结果53例初治AML中CD34阳性表达22例,占41.5%.CD34抗原表达与FAB分型无明显相关,但在M3亚型中表达明显低于其它亚型.其它各髓系抗原表达在CD34+组与CD34-组无显著性差异,淋系抗原表达CD34+组明显高于CD34-组.染色体核型异常两组间无显著性差异.CD34+组与CD34-组在年龄、性别、初诊时血红蛋白浓度、白细胞与血小板计数、肝脾淋巴结肿大等均无明显性差异.CD34+组完全缓解率为40.91%,明显低于CD34-组的67.75%.结论CD34+AML对常规化疗效果差,检测CDa4抗原对预测AML疗效具有重要价值.     

急性髓细胞性白血病病人测定白血病原始祖细胞自我复制能力测定方法探讨

急性髓细胞性白血病病人的预后与其临床及生物学特性有关。测定病人白血病祖细胞自我复制能力可预测病人的预后，并可根据检测结果制定治疗方案。本报告通过实验说明白血病祖细胞自我复制能力低者预后较白血病祖细胞自我复制能力高者好。     

PTEN、NF-κB基因在正常核型急性髓细胞白血病患者中的表达意义

目的探讨PTEN和NF-κB基因在正常核型急性髓细胞白血病(CN-AML)中的表达情况及其对预后的影响。方法应用逆转录聚合酶链式扩增反应(RT-PCR)技术检测40例初治CN-AML和10例对照(正常骨髓6例和非恶性血液病4例)骨髓单个核细胞中PTEN、NF-κB p65的表达,分析PTEN、NF-κB与患者年龄、性别、外周血白细胞数、骨髓原始细胞数及总生存时间(OS)的关系。结果对照组PTEN基因表达阳性率为90%,CN-AML组阳性率50%,明显低于对照组(P=0.031);PTEN基因表达与年龄、骨髓中原始细胞百分比有关,(P值分别为0.016、0.01),与性别、外周血白细胞计数、OS无关(P>0.05);对照组NF-κB P65基因表达均为阴性,CN-AML组阳性率为35%,差异有统计学意义(P=0.045),NF-κB p65基因阳性表达与较短OS有关(P=0.024),与性别、年龄、外周血白细胞计数及骨髓中原始细胞百分比均无关(P>0.05)。结论 CN-AML患者存在PTEN、NF-κB基因表达异常,NF-κB阳性者预后较差,是影响CN-AML患者预后的生物学指标之一。     

PTEN表达异常与急性髓性白血病患者预后的关系

目的 探讨PTEN在急性髓性白血病(AML)中的表达情况及其对预后的影响.方法 应用免疫组化(S-P)技术分别检测45例初治AML及40例对照(正常骨髓10例及非恶性血液病30例)骨髓单个核细胞中PTEN的表达,分析PTEN与外周血白细胞数及特异性融合基因的关系,追踪疾病的转归.结果 PTEN基因阳性表达在对照组中非恶...     

凝血酶调节素与急性髓细胞性白血病的实验研究

急性白血病是造血干细胞的克隆性恶性疾病.其克隆中的白血病细胞增殖失控、分化障碍、凋亡受阻,停滞在细胞发育的不同阶段.病情发展迅速,自然病程仅几个月.主要表现为贫血、出血、感染及浸润等征象.联合化疗仍然是白血病现代治疗最基本和主要的方法.近年来,由于多药联合、大剂量化疗方案的应用、造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)、免疫治疗、基因治疗及支持治疗的加强使急性白血病的病情缓解以至长期存活获得了显著提高,患者的预后有很大改善.但由于多药、耐药的出现,人们开始寻求新的用于治疗白血病的靶基因及其药物.如何从肿瘤发生、发展的机制入手,寻找新的分子作用(酶、受体、基因)靶点,从而选择高效、低毒、针对性强的抗肿瘤药物进一步提高化疗的疗效,已成为肿瘤工作者研究的新热点.     

WT1基因在急性白血病患者中的表达及其临床意义

目的:探讨WT1基因在急性白血病(AL)患者中的表达情况及其临床意义.方法:采用实时定量RT-PCR方法动态检测60例初治AL患者WT1基因的表达,评估AL患者的缓解率、复发率及完全缓解后微小残留病(MRD)检测.结果:初治AML各亚型中M3基因表达阳性率最高,为82.4%,其WT1基因中位表达水平最高,达1579.6,显著高于其他亚型,差异有统计学意义(P<0.05);AL患者中,WT1基因表达阳性组CR率显著低于阴性组,阳性组缓解后半年内复发率显著高于阴性组,差异均有统计学意义(均P<0.05),初治组、复发组及未缓解组AL患者WT1基因中位表达水平明显高于完全缓解组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:WT1基因在AL患者骨髓细胞中表达水平可作为临床评估疾病的发生、发展、判断预后及检测MRD的指标.     

急性白血病患者多药耐药基因表达的检测及意义

为研究急性白血病患者多药耐药基因（ＭＤＲ１）民临床耐药、预后判断等关系，应用逆转录酶／多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了３６例急性白血病及１０例正常人骨ＭＤＲ１基因的表达，并以ＭＤＲ１／β２ＭＧ≥０．２定为ＭＤＲ１ｍＲＮＡ阳性。结果显示，１０便正常人ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达均阴性。初治患者中ＭＤＲ１ｍＲＮＡ阳性率为２５％，而复发和未缓解患者则达８０％。化疗缓解率在ＭＤＲ１ｍＲＮＡ阴性及阳性的急性白血病     

结直肠癌中同源异型盒基因(HOX)A5和B6表达的研究

目的研究结直肠癌中HOX A5和B6 mRNA和蛋白表达,以探讨HOX A5和B6与结直肠癌关系。方法运用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应技术检测100例结直肠癌和100例结直肠良性病变中HOX A5和B6 mRNA表达,免疫组织化学SP法检测HOX A5和B6蛋白表达。统计分析HOX A5和B6表达与结直肠癌患者年龄、肿瘤大小、临床分期和淋巴结转移关系。结果①结直肠癌HOX A5和B6 mRNA表达明显低于良性结直肠病变(P<0.01);②结直肠癌中HOX A5和B6蛋白表达与良性结直肠病变相比明显减少或消失;③淋巴结转移阳性结直肠癌病例HOX A5和B6 mRNA表达和蛋白表达明显低于转移阴性组,两组间差异有统计学意义;④HOX A5和B6 mRNA和蛋白表达与结直肠癌患者临床分期有相关性(P<0.05);⑤HOX A5和B6 mRNA和蛋白表达与结直肠癌患者年龄、肿瘤大小无相关性(P>0.05)。结论对结直肠癌患者的肿瘤活检标本测定HOX A5和B6的mRNA和蛋白表达,既可以早期诊断结直肠癌,还可以在手术前对结直肠癌患者是否有淋巴结转移和Dukes分期进行判断。     

白血病抑制因子基因在急性白血病患者中的表达及意义

目的研究急性白血病(acute leukemia,AL)患者外周血白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)mRNA的表达水平及其与AL病情、疗效和预后的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测37例不同类型以及同一类型不同阶段AL患者[初治患者16例(初治亚组)、完全缓解患者12例(完全缓解亚组)、复发患者9例(复发亚组)]LIF的mRNA的表达水平,并与20例健康者(对照组)比较。结果初治亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于对照组和完全缓解亚组(P<0.05);复发亚组LIF基因mRNA阳性表达率低于完全缓解组(P<0.05);复发亚组与初治亚组比较及完全缓解亚组与对照组比较,LIF基因mRNA阳性表达率差异无统计学意义(P>0.05);LIF基因表达率在急性髓系白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者间无显著性差异(P>0.05)。结论 LIF基因表达水平与AL患者病情变化密切相关。检测AL患者LIF基因表达情况,为AL患者检测病情、疗效评价、指导临床用药和预后判断,提供了一定的理论依据。     

Attractin mRNA和Attractin蛋白在小鼠睾丸发育过程中的表达变化

目的:通过定量检测和比较Attractin(Atrn)mRNA和Atrn蛋白在小鼠睾丸发育过程中的动态变化,为进一步研究Atrn在睾丸的生理作用提供实验依据。方法:用相对定量法检测Atrn mRNA在生后1、5、10、15、21、28、35、42、56和120天龄小鼠睾丸发育过程中的表达变化,并用Western blot方法检测各天龄小鼠睾丸Atrn蛋白表达。结果:Atrn mRNA和Atrn蛋白在小鼠睾丸发育过程中的表达变化趋势相似,在生后第1天两者均有表达,但是处于相对较低水平,此后是一个逐渐增高的过程,在28天出现较明显上调。在这之后,两者表达变化出现差异。Atrn mRNA在生后28~35天表达最丰富,随后稳定于这一水平,Atrn蛋白表达则是继续增加直至成年。结论:Atrn参与精子发生的启动、精原干细胞的增殖分化、精母细胞的减数分裂和精子形成等过程,并有助于Leydig细胞进一步成熟。     

生存素在大肠癌中的表达及意义

目的检测生存素(survivin)在大肠癌组织中的表达情况及与临床病理之间的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法和用免疫组织化学方法检测50例大肠癌组织及20例癌旁组织survivinmRNA表达情况。结果60例大肠癌组织survivinmRNA阳性表达40例(66.6%)明显高于癌旁组织2例(6.6%)(χ2=6.85,P<0.01);survivin表达与病理分级、有无淋巴结转移有关(χ2=4.25,χ2=4.85,P<0.01;r=5.12,r=5.32,P<0.05)。结论survivin的高表达与大肠癌的恶性程度密切相关。     

RhoC在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的研究RhoC在人脑胶质瘤组织中的表达情况及其与病理分级的相关性,初步探讨RhoC在胶质瘤的诊断、恶性程度及预后判断中的临床意义。方法采用抗亲和素-生物素复合物法(SABC)免疫组织化学法、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法对62例不同病理级别的星形细胞瘤及11份正常脑组织标本进行RhoC蛋白和RhoCmRNA的检测。结果①免疫组织化学结果显示62例胶质瘤组织中RhoC蛋白表达全部呈阳性,对照组正常脑组织存在弱表达或不表达。②不同病理级别星形细胞瘤标本的RhoC阳性细胞率、RhoCmRNA与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)mRNA灰度比值均存在差异;Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ、Ⅳ级之间差异有统计学意义(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ级RhoCmRNA表达均高于Ⅰ级、Ⅱ级。③相关性分析:RhoC阳性细胞率和RhoCmRNA表达量与胶质瘤病理分级均呈正相关性(r=0.814,r=0.863,P均<0.01)。结论 RhoC可以作为星形细胞瘤Ⅰ~Ⅳ级新的有效的诊断标记物,同时作为常规组织病理学的分级标准的补充。     

急性髓性白血病肺耐药相关蛋白(LRP)的表达和临床意义

目的 :探讨肺耐药相关蛋白 (LRP)基因在急性髓性白血病细胞中的表达及其在临床耐药、预后判断方面的意义。方法 :应用半定量RT PCR技术 ,检测了 6 2例AML患者和 10例正常对照者LRP基因的表达 ,并随访了 10例患者治疗前后LRP基因的表达情况。结果 :M3的LRP基因表达水平和阳性率明显低于M4 、M5(P <0 .0 5 )。难治复发组LRP基因表达水平与正常对照组相比较明显增高 (P <0 .0 1)。初治组中LRP- 患者的完全缓解率明显高于LRP+患者(P <0 .0 5 )。 10例随访患者中LRP阴性者治疗效果和生存期均优于LRP阳性者。结论 :LRP过度表达与临床耐药及临床疗效相关     

急性白血病P16基因mRNA表达水平的研究

目的研究P16基因mRNA的表达水平与急性白血病发生发展及预后的相关性。方法采用荧光实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测50例急性白血病患者P16基因mRNA表达水平。结果急性白血病患者P16基因mRNA表达水平明显低于正常人mRNA表达水平（P〈0.001）。其中急性淋巴细胞白血病mRNA表达水平又低于急性髓细胞性白血病（P〈0.05）。初诊组、难治复发组、初诊组、完全缓解组与正常对照组mRNA表达水平依次升高（P〈0.05）。初诊组中完全缓解组mRNA表达水平高于未完全缓解组（P〈0.001）。结论P16基因表达缺陷在急性白血病的发生、发展中起重要作用,且与白血病患者的治疗和预后有一定关系。     

多药耐药基因与体外药敏检测在急性白血病中的临床意义

目的：研究急性白血病（ＡＬ）多药耐药－１（ＭＤＲ１）基因表达与临床疗效的关系，提高对肿瘤细胞耐药情况预测的准确性。方法：采用逆转录敏－多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了３０例ＡＬ患者骨髓中ＭＤＲ１基因的表达，同时对每例均进行体外化疗药物敏感性（ＴＭＭ）检测。结果：３０例ＡＬ ＭＤＲ１基因过度表达占４０％，ＭＴＴ检出耐药为３０％（１０／３０），即有ＭＤＲ１基因过量表达又显示耐药者２７％（８／３０）；